（植物病理学专业论文）杭州地区腐霉种及腐霉属分子系统学研究.pdf

杭州地区腐霉种及腐霉属分子系统学研究 摘要 腐霉属p y t h i u mp r i n g s h e i m 是卵菌纲中一类重要的植物病原菌。由于腐霉形态多 样，有些形态又难以形成，采用传统的方法，难以区分形态与习性相似的种，或者将 形态与习性相似但亲缘关系相距甚远的群体置于同一u 个种内，造成了不少混乱。以形 态学为基础并结合分子系统学研究，是解决上述问题的一个有效途径。 1 对采自杭州郊区的3 4 株腐霉，根据v a n d e r p l a a t s - n i t e r i n k ( 1 9 8 1 ) 的腐霉分类系 统，共鉴定到1 1 个种，分别是ps p i n o s u m s a w a d a 、户u l t i m u mv a t u l t i m u mt r o w 、 p d e b a r y a n u m h e s s e 、ps y l v a t i c u m c a m p b e l l h e n d r i x 、产i r r e g u l a r e b u i s r m a n 、 po l i g a n d r u md r e c h s l e r 、p m y r i o 叫“md r e c h s l e r 、pd i s s o t o c u md r e e h s l e r 、p g r a m i n i c o l as u b r a m a n i a n 、pa c a n t h i c u md r e c h s l e r 和pa p h a n i d e r m a t u m ( e d s o n ) f i t z 9 ，其中ps y l v a t i c u m 为国内腐霉新纪录秘，pm y r i o t y l u m 为浙江省新纪录种。 优势种为刺腐霉与终极腐霉，二者出现的频率分别为2 9 4 和1 7 6 。 2 对腐霉属中代表各种形态和性状的5 8 种计6 7 株腐霉和疫霉属中代表6 个组的6 种疫霉的r d n a i t s 进行了分析，以海生疫霉为外群，按邻接法构建系统发育树。 结果表明： ( 1 ) 被称为“中间属”或“独立属”或“边缘种”的5 种腐霉只o s 护a c o d e s ， p c h a m a e h y p h o n ，户c a r b o n i c u m ，pl w o n t a n u m 和p ! ) e x a n s ，在系统发育上介于其 它腐霉种与疫霉之间，但仍与腐霉聚成一大组，b o o t s t r a p 的支持率为6 7 。作者 认为把这一类群的腐霉称为腐霉“边缘种群”更妥，但不支持建立“独立属”的 提法。 ( 2 )已从腐霉属中划出归为疫霉属的pu n d u l a t u m 与腐霉的亲缘关系比疫霉 近，系统发育树中与5 2 种腐霉聚成一大组，支持率为1 0 0 ，说明该种归为腐霉 属比归为疫霉属更合适。 ( 3 ) 其余5 2 种腐霉分成i 、i i 两组：第1 组3 1 种腐霉，其中3 0 种腐霉的孢子 囊为球形，占9 6 ，8 ；第1 i 组2 1 种腐霉，其中1 9 种腐霉的孢子囊为丝状、瓣状 或裂片状，占9 0 5 。表明腐霉的系统发育与孢子囊的形态密切相关。在腐霉属 中孢子囊形态应是具有分类意义的第一重要性状。腐霉属的其它性状如藏卵器壁 是否光滑、卵孢子是否满器、雄器的着生方式和数量、异宗配合等呈多元演化。 ( 4 ) 从杭卅i 郊区分离到的腐霉种与各自的模式菌株或代表性菌株的相似性有 的很高，b o o t s t r a p 的支持率为1 0 0 ，如ps y l v a t i c u mb x s 9 、只s p i n o s u ms n p i o 、 户g r a m i n i c o l ap h p 6 6 、户m y r i o t y l u m p a l 、pd i s s o t o c u mb x s 4 2 和p a p h a n i d e r m a t u md c l 6 ；有的相似性较低，如po l i g a n d r u md r e c h s l e r 菌株r c u l 与新西兰菌株n z w m 0 7 聚在一起的支持率仅为7 8 。 3 基于r d n ai t s 序列，对产生与不产生游动孢子的终极腐霉各菌株之间的亲缘关 系进行研究，结果表明：产生游动孢子的终极腐霉变种pu l t i m u mt r o wm a r s p o r a n g i i f e r u m 的i t s 序列中g + c 含量比不产生游动孢子的终极腐霉原变种p u h i m u mt r o wv a r u h i m u m 低，前者平均为4 1 3 ，后者为4 2 5 ：i t s 序列的长度， 前者平均为8 2 9 b p ，后者为8 2 4 b p ，前者比后者多5 个碱基。2 4 株终极腐莓菌株明 显按是否产生游动孢子聚成二大组，b o o t s t r a p 支持率为1 0 0 。这一研究结果与 d r e e h s l e r ( 1 9 6 0 ) 和p l a a t s n i t e r i n k ( 1 9 8 1 ) 按是否产生游动孢子建立终极腐霉二变 种户u h i m u mt r o wv a t s p o r a n g i i f e r u m 和pu h i m u mt r o wv a t u l t i m u m 的结果一致。 本研究结果还表明终极腐霉菌株与地理分布的相关性不明显。 4 从杭州采集的水稻、棉花和大豆猝倒苗中分离到国内新记录腐霉种p y t h i u m s y l v a t i c u m 。该腐霉为异宗配合种，藏卵器光滑，卵孢子不满器，雄器异丝生，每 个藏卵器有雄器1 - 3 个，多数为2 个，不产生孢子囊，形成球形或柠檬形的菌丝 膨大体。测定了该种4 个菌株的核糖体内转录间隔区( i t s ) 的序列。根据与5 9 种腐霉i t s 序列的比较，设计了p y t h i u ms y l v a t i c u m 种专一性引物p s f l 和p s r 2 。 实际结果表明：该引物能从1 1 种共1 4 株腐霉d n a 中特异性地扩增ps y l v a t i c u m ， 从而与其它l o 种腐霉区分。 关键词：腐霉，分子系统学，形态学，i t s 序列，种专一性p c r 引物 p y t h i u ms p e c i e s i n h a n g z h o ur e g i o i l a n dm o l e c u l a r p h y l o g e n y o ft h eg e n u s p y t h i u m a b s t r a c t p y t h i u m i sa l a r g eg e n u so f t h ec l a s so o m y c e t e si n c l u d i n gm o l e t h a n8 0s p e c i e s ，s o m e o fw h i c ha r ei m p o r t a n tp l a n tp a t h o g e n sw i t hw o r l d w i d ed i s t r i b u t i o n a so v e r l a p p i n g s i m i l a r i t i e si nt h em o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c so fp y t h i u ms p e c i e s a sw e l l8 si n t r a s p e c i f i c v a r i a t i o ni nt h e s ec h a r a c t e r i s t i c s ，i tc a nm a k ea c c u r a t ec l a s s i f i c a t i o nf o rp y t h i u mi s o l a t e s d i f f i c u l t a sa c o n s e q u e n c e ，c o m b i n i n g m o l e c u l a r p h y l o g e n y w i t h m o r p h o l o g i c a l c h a r a c t e r s ，i ti st h eb e t t e rv i e wo f t h et a x o n o m ya n dp h y l o g e n y o f t h e p y t h i u m 1 e l e v e ns p e c i e sw e r ei d e n t i f i e df r o m3 4p y t h i u ms l r a i n sw h i c hw e r ei s o l a t e df r o m h a n g 曲o us u b u r b t h e yw e r e p s p i n o s u m s a w a d a 、pu l t i m u mv a r u l t i m u mt r o w 、 p d e b a r y a n u mh e s s e 、ps y l v a t i c u mc a m p b e l l h e n & i x 、pi r r e g u l a r eb u i s m a n 、p o t i g a n d r u m d r e c h s l e r 、p m y r i o t y t u m d r e c h s l e r 、pd i s s o t o c u md r e c h s l e r 、p g r a m i n i c o l as u b r a m a n i a n 、只a c a n t h i c u md r e c h s l e ra n d 只a p h a n i d e r m a t u m ( e d s o n ) f i t z p t h eps y l v a t i c u mw a s an e wr e c o r do f p y t h i u mt oc h i n a t h ep m y r i o t y l u mw a s an e wr e c o r do fp y t h i u mt o z h e j i a n gp r o v i n c e 只s p i n o s u ma n d 产u h i m u mw e r e p r e d o m i n a n ts p e c i e s a s p a t h o g e n s i nt h es u b u r bo fh a n g z h o u ，a n dt h e i s o l a t i n g f r e q u e n c i e sw e r ea t2 9 4 a n d1 7 6 r e s p e c t i v e l y 2 t h es e q u e n c e so fn r d n ai t so f6 7i s o l a t e sr e p r e s e n t i n g5 8s p e c i e sp y t h i u ma n d6 s p e c i e sr e p r e s e n t i n g6g r o u p so fp h y t o p h t h o r t aw e r ea n a l y z e d , a n dt h e i rp h y l o g e n e t i c f r e ew a sr e c o n s t r u c t e dw i t hh a l o p h y t o p h t h o r ab a t e m a n e n s i sa sa l l o u t g r o u p ，u s i n g n e i g h b o r - j o i n i n gm e t h o d t h er e s u l t ss h o w e d a st h ef o l l o w i n g ： ( 1 ) t h ep r e s e n tr e s u l t ss h o w e d t h a tp y t h i u mo s t r a c o d e s ，尸c h a m a e h y p h o ng r o u p e di na c l a d e t o g e t h e r w i t hpm o n l a n u m ，pc a r b o n i c u ma n dpv e x a n s ，w h i c hw e r e b e t w e e no t h e rp y t h i u ms p e c i e sa n d6s p e c i e so f p h y t o p h t h o r t a t h ef i v es p e c i e so f p y t h i u ma l lp r o d u c e ds p h e r i c a l 瑚驰a i l g i a ，t h e ys t i l lw e r eg r o u p e di nac l a d e t o g e t h e rw i t ho t h e rp y t h i u ms p e c i e s ，t h eb o o t s t r a pv a l u e si s a t6 7 t h ea u t h o r s u g g e s ti t i sb e t t e rt oc o n s i d e rt h e ma s b o r d e rs p e c i e s ”，a n dn o ts u p p o r tt h e ma s “s e p a r a t e dg e n u s ” ( 2 ) p y t h i u mu n d u l a t u mt r a n s f e r r e d i n t ot h eg e n u s 脚t o p h t h o r t a ( a sp h y t o p h t h o r t a u n d u l a t u m ) f o r m e das i n g l eg r o u p i nt h ep h y l o g e n e f i ct r e e pu n d u l a t u mw a s g r o u p e di n t oo n e c l a d et o g e t h e rw i t ho t h e r5 2s p e c i e so f p y t h i u m ，a 8t h eb o o t s t r a p v a l u e si sa t1 0 0 ，i ts h o w e dt h a tt h er e l a t i o n s h i po f pu n d u l a t u mw a sc l o s e rt ot h e g e n u sp y t h i u mt h a np h y t o p h t h o r t a s oi tw a sm u c h b e t t e rt oc o n s i d e rpu n d u 坛m m a sa s p e c i e so f p y t h i u m , r a t h e rt h a np b t o p h t h o r a ( 3 ) t h e5 2o f 5 8s p e c i e sb y t h i u ma r ef u r t h e rd i v i d e di n t ot w oc l a d e sw h o s eb r a n c h i n g p a t t e m sw e r es 订o n g l ys u p p o s e db yh i g hb o o t s t r a pv a l u e s c l a d e1w a sc o m p r i s e d o f31 s p e c i e s ，3 0 o fw h i c hp r o d u c e d s p h e r i c a l z o o s p o r a n g i a c l a d e i iw a s c o m p r i s e d o f2 1 s p e c i e s ，1 9 o fw h i c h p r o d u c e d f i l a m e n t o u st ol o b u l a t e z o o s p o r a n g i a t h er e s u l t ss h o w e d t h a tt h em l a f i o n s h i pb e t w e e np y t h i u m p h ) l o g e n y a n di t s z o o s p o r a n g i am o r p h o l o g yw a sv e r yc l o s e t h ez o o s p o r a n g i ai st h em o s t i m p o r t a n tm o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c sw i t ht a x o n o m i cs e n s e ，a n do t h e r ss u c ha s o o g o n i ao r n a m e n t a t i o n ，a n t h e r i d i aa t t a c h m e n t ，n u m b e ro f a n t h e r i d i a ，h e t e r o t h a l l i s m w e r e p o l y p h y l e t i ci n f e r r e df r o m i t s s e q u e n c ea n a l y s i s ( 4 ) t h es i m i l a r i t i e so ft h ei t ss e q u e n c e so fp y t h i u ms p e c i e si s o l a t e df r o mh a n g z h o u s u b u r bw i t ht h e i rt y p ei s o l a t e so rr e p r e s e n t a t i v ei s o l a t e sw e r ec o m p a r e d s o m eo f w h i c ha r eh i g h e r b o o t s 虹a pv a l u e sa r ea t1 0 0 s u c ha s 户s y l v a t i c u mb x s 9 、p s p i n o s u ms n p l 0 、pg r a m i n i c o l ap h p 6 6 、尸m y r i o t y l u mp a l 、pd i s s o t o c u m b x s 4 2a n dp a p h a n i d e r m a t u md c l 6 s o m eo f w h i c ha r cl o w e r , b o o t s t t a pv a l u e s a r eo n l y7 8 ，s u c ha sp o l i g a n d r u mr c u la n dpo l i g a n d r u mn z w m 0 7 f r o m n e wz e a l a n d 3 t h er e l a t i o n s h i pb e t w e e npu l t i m u mt r o wv a r s p o r a n g i 析e r u ma n d 户u l t i m u mt r o w v a r u h i m u mb a s e do ni t ss e q u e n c ew a ss t u d i e d t h er e s u l t ss h o w e d ：t h ea v e r a g eo f g + cc o n t e n t si ni t so f pu l t i m u mt r o w v a r , s p o r a n g i i f e r u mw a s l o w e rt h a nt h a to f p u h i m u mt r o wv a r u l t i m u m ，t h ef o r m e rw a sa t4 1 3 ，t h el a t t e rw a sa t4 2 5 ；t h em e a n l e n g t ho ft h ei t sf r a g m e n to f t h ef o r m e rw a s8 2 9 b p ，a n dt h a to ft h el a t t e rw a s 8 2 4 b p ， t h ef o r m e rw a sm o r e5 b pt h a nt h el a t t e r t w e n t y f o u ri s o l a t e so f pu l t i m u mw a s c l e a r l y d i v i d e di n t ot w oc l u s t e r sb a s e do nw h e t h e ri t s c a p a c i t yt or e l e a s ez o o s p o r e sa tr o o m t e m p e r a t u r eo rn o t ，i t sb o o t s t r a pv a l u ew a sa t 1 0 0 t h er e s u l t sa l s os h o w e dt h e r e l a t i o n s h i pb e t w e e nt h ep u l t i m u mi s o l a t e sa n di t s g e o g r a p h i cd i s t r i b u t i o nw a sn o t s i g n i f i c a n t 一 4 p y t h i u ms y l v a t i c u m ，an e w r e c o r do f p f l h i u mi nc h i n a ，w a si s o l a t e df r o md a m p i n g o f f s e e d l i n g so fc o , o n ，s o y b e a r la n d r i c es e e d l i n gb l i g h ti nh a n g z h o ur e g i o n t h ef u n g a l p a t h o g e n i st h eh e t e r o t h a l l i cs p e c i e so f p y t h i u m o o g o n i as m o o t h o o s p o r e sa p l e r o t i c a n t h e r i d i a1 - 3p e ro o g o n i u m , m o s t l y2p e ro o g o n i u m s p o r a n g i aa n dz o o s p o r e sn o t p r o d u c e d h y p h a ls w e l l i n g sg l o b o s e o rl i m o n i f o r m t h es t u d yw a sc o n d u c t e dt o s e q u e n c e t h er d n ai n t e r n a lt r a n s c r i b e ds p a c e r ( i t s ) r e g i o no f4i s o l a t e so f 户 s y l v a t i c u m 。a n d t od e s i g n s p e c i e s s p e c i f i cp r i m e r s f o rp o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n ( p c r ) ， b a s e do nc o m p a r i s o no ft h es e q u e n c eo ft h ei t sr e g i o na m o n g 5 9s p e c i e so f p y t h i u m u s i n gp c r , t h ep r i m e rp a i rp s f l + p s r 2 ，a m p h f i e d i s o l a t e so fp s y l v a t i c u m f r o m1 4i s o l a t e so f11p y t h i u ms p e c i e s ，b u tn o ta m p l i f i e df o ro t h e r1 0b y t h i u ms p e c i e s k e yw o r d s ：p y t h i u m ，m o l e c u l a rp h y l o g e n y , m o r p h o l o g y , i n t e m a lt r a n s c r i b e ds p a c e r s p e c i e s s p e c i f i cp c r p r i m e r 。； 7 3 2 7 8 7 单位代码： 研究生学号 1 0 3 3 9 1 0 0 1 6 0 4 3 杭州地区腐霉种及腐霉属分子系统学研究 论文评阅人：嫠! 波教援直哀盛些太坐 盗志四熬援直瘟盛些太堂 医壶谊班究虽迤蒸省盛些登堂班豇陆 塑重数援蜇、江态堂盛些皇生物撞苤堂医 孙国昌班究县洒迤省壅些型堂班盔隧 答辩委员会主席：周雪垩教援浙江太堂壅些当生物撞苤堂医 答辩委员会委员：盆回熬援浙堑太堂壅些当生物拉丕堂瞳 因航熬援逝江盔生生佥整堂堂阮 处国昌班究虽塑选省壅些抖堂班宜瞳 张舾丘筮教援逝延态堂盛些妄生物拉丕堂瞳 论文答辩日期：2 q q 5 生2 臼2 目 致谢 本论文是在导师张炳欣敢授的悉m 指导下完成的，从奄文的选题，设 计方案的鹊定和实施到研究结果的分析整理、奄文的撰写无不凝结着 导师的心血与智慧。导师渊博的知识开拓创新的学者风范严谨执著 的治学作风、棒遗宽容的处事态度、时刻激励着我并将使我受益终生。 值此论文完成之际，我杯着派切的纛澈之情，谨向导师魏妈欣教授致以 最诚挚的敬意! 藏谢导师为本论文所微的一切无私奉献! 同时也虑谢导 师多年来给予的多方面关怀、支持鼓励和照顾! 麻谢植保系所有老师，特别是徐同、郑重、周雪平和谢关林教授等的 热情支持带助和鼓舒。 意谢分析测试中m 生物大分子实验空的高其康研究女毛伟华和徐幼 平博士提供试验便利、帮助测序和工作上的支持。 虑谢澳大利亚c s i r op a u lh a r v e y 博士惠赠p y t h i u m i r r e g u l a r e b h 4 0 菌株a 盛谢浙江省自然科学基金r 项目蝻号m 3 0 3 4 4 4 ) 和国家自煞科学基 金r 项目编号3 0 4 7 1 1 2 7 , 】对本项目的资助。 虐谢父母姐球、亲成朋友对我学业的一贯关m 、理解和支持! 巍 谢丈夫和儿子蛤予的理解和支持，是她们的爱使我有勇气和动力不断克 服困难，取得进步，完成学业。谨以此文献给我的父母丈夫和j - - 3 - 。 最后向参加本论文评鸿和答肆曲专家、教授致以最诚挚的谢意! _ 镳再干 2 0 0 5 年1 月 杭州华家池 第一章文献综述 1 1 腐霉属的形态和分类学研究 1 1 1 引言 腐霉属b y t h i u mp r i n g s h e i m 是藻物界c h r o m i s t a 卵菌纲o o m y c e t e s 中一个相当重 要的大属，遍布全世界，已被广泛承认的有1 2 0 多种( d i c k ，1 9 9 0 ) 。它既可腐生、寄 生或兼性寄生，又可水生、陆生或水陆两栖生。多数腐霉在各种土壤和水生环境中营 腐生生活，有些是重要的植物病原菌，引起种腐、根腐、果腐、苗期猝倒和蔬菜贮藏 期的腐烂，给农业生产造成严重损失：有些腐霉不仅对植物没有致病作用，还能诱导 植物产生系统抗性( b e n h a m o ue ta 1 ，1 9 9 7 ) ；还有些如寡雄腐霉p y t h i u mo l i g a n d r u m d r e c h s l e r 等对其它土壤瘸原真菌( 包括腐霉) 具有拮抗与生防作用；有些则是动物 如鱼、虾的病原菌( v a n d e r p l a a t s - n i t e r i n k ，1 9 8 1 ) ；而有些又是昆虫如蚊子幼虫上的 寄生菌( s a u n d e r se t 以，1 9 8 8 ) ；还有一种腐霉p y t h i u m i n s i d o s u m c o c k 是哺乳动物的病 原菌，能引起人类疾病( s c h u r k o e ta l ，2 0 0 3 ) 。 另外，有些腐霉还能合成生物素、叶酸、泛酸、核黄素和抗坏血酸等维生素，有 些可分泌果胶酶、纤维素酶等，还有些能转化甾族化合物，对医药制造业具有重要的 作用。腐霉还是研究生物由腐生到寄生、由水生到陆生的演化材料，因而受到生物学 家特别是生物系统学家和真菌学家的瞩目。所以说腐霉在理论上和实践上都拥有十分 重要的地位。 白1 8 5 8 年p r i n g s h e i m 建立腐霉属至今，在腐霉的分类、生态、生理、致病机理、 生物防治、诱导抗性及分子生物学技术在腐霉分类研究中的应用已有许多研究与报 导，但主要集中在分类方面，近几年来，无致病性腐霉的生防作用与诱导抗性也倍受 关注。本文就以上几个方面综述如下： 1 1 2 腐霉属分类历史、分类地位及属下分类单位 1 1 2 1 分类历史 腐霉属p y t h i u m 是p r i n g s h e i m ( 1 8 5 8 ) 根据pm o n o s p e r m u m 和pe n t o p h y t u m 两 个种建立的，并将它归属水霉科s a p r o l e g n i a c e a e 。z o p f ( 1 8 9 0 ) 将后者转移到链壶菌 属l a g e n i d i u m ，因而分离自水中死亡昆虫体上的pm o n o s p e r m u m 便成为本属的模式 种( 补选模式l e c t o t y p e ) ( v a n d e rp l a a t s n i t c r i n k ，1 9 8 1 ) 。 在1 8 5 8 年以前，n e e s 于1 8 2 3 年就已用了p y t h i u mn e e s 这一属名，只是未公开 发表，1 8 4 5 年m o n t a g n e 将腐霉属的一个种命名为a r t o t r o g u sh y d n o s p o r u s ，a r t o t r o g u s 属的描述既不完全又混乱，且只包括一个种。a t k i n s o n ( 1 8 9 5 ) 废弃了p y t h i u m p f i n g s h e i m ( 1 8 5 8 ) ，在a r t o t r o g u s 属内进行了9 个种的新组合。但是，后来a t k i n s o n ( 1 9 0 9 ) 又用了p y t h i u m 这个属名，而对a r t o t r o g u s 属则未加提及。b u t l e r ( 1 9 0 7 ) 将a r w t m g u s h y d n o s p o r u s 放入p y t h i u m 属内，名为pa r t o t r o g u s ( m o n t ) d eb a r y 。m a t t h e w s ( 1 9 3 1 ) 和m i d d l e t o n ( t 9 4 3 ) 以及后来的许多真菌分类学家均未考虑a r t o t r o g u s 属，w a t e r h o u s e ( 1 9 6 8 ) 废除了p y t h i u m n e e s ，p l a a t s n i t e r i n k ( 1 9 8 1 ) 废除了4 ，幻f 郴m o n t a g n e ，现 在p y t h i u mp r i n g s h e i m 已正式被作为保留名称( n o m i n ac o n s e r v a n d a ) 而被合法使用 ( w a t e r h o u s e ，1 9 6 8 ：p l a a t s - n i t e r i n k ，1 9 8 1 ) 。 1 1 2 2 分类地位 p r i n g s h e i m ( 18 5 8 ) 建立腐霉属p y t h i u m 时，将它放在水霉科s a p r o l e g n i a c e a e 内， 后来c o m u ( 1 8 7 2 ) 、b o r l e s e & d et o n i ( 1 8 8 8 ) 也支持这种处理，而d eb a r y ( 1 8 8 1 ) 和 f i s c h e r ( 1 8 9 2 ) 却将此属归入霜霉科p e r o n o s p o r a e e a e 。s c h r o e t e r ( 1 8 9 7 ) 以此属为模式建 立了腐霉科p y t h i a c e a e ，并将其归入水霉目s a p r o l e g n i a l e s 。w o l f & w o l f ( 1 9 4 7 ) 贝t 将它提 升为腐霉目p y t h i a l e s 。一般将腐霉科放在霜霉目p e r o n o s p o r a l e s 。 据真菌辞典第7 版的分类系统( h a w k s w o r t he ta 1 ，1 9 8 3 ) ，腐霉属的分类地位如 下： 真菌界k i n g d o mf u n g i 真菌门e u m y c o t a 鞭毛菌亚门m a s t i g o m y c o t i n a 卵菌纲o o m y c e t e s 霜霉目p e r o n o s p o r a l e s 腐霉科p y t h i a c e a e 腐霉属研t h i u m 根据近年来超微结构、生物化学及分子生物学的研究，已经明确真菌是多元起源 和演化的，尤其是卵菌，因其细胞壁的主要成分是纤维素，细胞为双倍体，具有鞭茸 的鞭毛，卵菌核d n a 的g c 僮高于接合菌，表明了卵菌是不属于真菌的另一个类群。 越来越多的研究表明，粘菌和卵菌在生物演化的早期都与真菌有所分化，在现代的生 物八界系统中它们均属于和真菌不同的界。1 9 9 5 年英国国际菌物研究所出版的菌 物辞典第八版，将卵菌放入藻物界c h r o m i s t a ，据真菌辞典第8 版( h a w k s w o r t h e ta 1 ， 1 9 9 5 ) 和第9 版的分类系统( k i r ke t a l ，2 0 0 1 ) ，腐霉属的分类地位如下： 2 藻物界k i n g d o m c h r o m i s t a 卵菌门o o m y c o t a 卵菌纲o o m y c e t e s 腐霉目p y t h i a t e s 腐霉科p y t h i a c e a e 腐霉属p y t h i u m 1 1 2 3 属下分类单位 有学者在毋t h i u m 属下再分亚属( s u b g e n u s ) ，亚属下又分组( s e c t i o n ) 。如 f i s c h e r ( 1 8 9 2 ) 将本属分为3 亚属：彳p h r a g m i u m 亚属、n e m a t o s p o r a n g i u m 亚属和 s p h a e r o s p o r a n g i u m 亚属，在后一亚属中再分为o r t h o s p o r a n g i u m 和m e t a s p o r a n g i u m 两个组。1 8 9 7 年s c h r s t e r 将产生球状孢子囊的归为p y t h i u m 属内，而产生菌丝状孢子 囊的类群另立为n e m a t o s p o r a g i u m 属，后者是根据f i s c h e r ( 1 8 9 2 ) 的n e m a t o s p o r a n g i u m 亚属提升为属的，并建立腐霉科p y t h i a c e a e ，归入水霉目s a p r o l e g n i a l e s 内，科下包括 上述二属，属下各设2 亚属。但据s c h r 6 t e r 的观点：t ，t h m mp r i n g s h e i m 的产 m o n o s p e r m u m 也须归入n e m a t o s p o r a n g i u m 属内，这有悖于国际植物命名法规，与 p r i n g s h e i m 最初建立的p y t h i u m 属相背离，因为p y t h i u m 属的模式种pm o n o s p e r m u m p r i n g s h e i m 孢子囊是线形的，在这种分属中它应归属于n e m a t o s p o r a n g i u m 属内，故 未被后人接受。b u t l e r ( 1 9 0 7 ) 废除了n e m a t o s p o r a n g i u m 属，将产生不同类型孢子囊的 所有腐霉种都归入p y t h i u mp r i n g s h e i m 内，但接受了s c h r o t e r 建立的腐霉科p y t h i a c e a e 。 e d s o n ( 1 9 1 5 ) 建立r h e o s p o r a n g i u m 属，此属仅包括r a p h a n i d e r m a t u m e d s o n 一种， 并将它归入水霉科s a g r o l e g n i a e e a e 。后来的学者对此有异议，终于由f i t z p a t r i c k ( 1 9 2 3 ) 将其转入p y t h i u m 属内，名为瓜果腐霉尸a p h a n i d e r m a t u m ( e d s o n ) f i t z p a t r i c k 。此后的 腐霉分类学者如m a t t h e w s ( 1 9 31 ) 、m i d d l e t o n ( 1 9 4 3 ) 、w a t e r h o u s e ( 1 9 6 7 ) 、 p l a a t s - n i t e r i n k ( 1 9 8 1 ) 、d i c k ( 1 9 9 0 ) 等均采用了在属下直接分种的办法，这一观点一宜 被沿用至今。 随着分子生物学技术的发展与应用，有的学者依据d n a 的亲缘关系的研究，提 出在腐霉属和疫霉属之间建立一“中间属”，并指出这一中间属包括pv e x a n s 和现已 从腐霉属中拉出归为疫霉属的波状腐霉pu n d u l a t u mh e p e t e r s e n ( b e l k h i r i & d i c k , 1 9 8 8 ) ：或认为应在腐霉科p y t b i a c e a e 中建立一独立的包括pv e x a n sd eb a r y 在 内的新属( b r i a r de ta l ，1 9 9 5 ) ；最近又有研究者提出把pc a r b o n i c u mp a u l 、只 m o n f d n u mn e c h w a t a lj 与pv e x a n 归为介于腐霉属和疫霉属之间或者说是联系腐霉 属和疫霉属之间的“边缘种”( b o r d e rs p e c i e s ) ( b e r n a r d ，2 0 0 3 ；n e c h w a t a le t a l ，2 0 0 3 ) 。 这些观点能否被其它学者接受有待进一步的研究与探讨。 1 1 3 腐霉形态特征 腐霉属p y t h i u m 是p r i n g s h e i m 于1 8 5 8 年建立的。模式种为简囊腐霉尸 m o n o s p e r m u mp r i n g s h e i m ( 图1 - 1 ) 。 图l 一1 简囊腐霉p y t h i u mm o n o s p e n n l d h lp r i n g s h e i m 的形态 ( 图引自余永年主编，中国真菌志1 9 9 8 ，p 1 0 5 ) 1 - 2 孢子囊和泡囊：3 游动孢子；4 - 5 体止孢子及其萌发：6 - 9 藏卵器、雄器和卵孢子 腐霉属的主要形态特征是：营养体为无隔菌丝体，有的种可形成菌丝膨大体 ( h y p h a ls w e l l i n g ) 和附着孢( a p p r e