（急诊医学专业论文）高渗盐水对脑缺血所致脑水肿的干预研究.pdf

i y i l l i f r l l i i h i l 7 i n i l 9 69lllll994lllll攀 硕士学位论文 高渗盐水对脑缺血所致脑水肿的干预研究 硕士研究生：王桥生 指导老师：曾红科教授 摘要 目的： 同2 0 甘露醇相比，研究1 0 高渗盐水( h y p e r t o n i cs a l i n e ，h s ) 治疗脑缺血 所致脑水肿的效果和可能的并发症及其机制的初步探讨；并进一步探讨1 0 h s 对缺血灶周围脑组织血管周围星形胶质细胞上a q p 4 表达调节和对缺血灶周围 神经元凋亡的影响，以探索其治疗缺血性脑水肿的分子机制和对神经功能的影 响。 材料与方法： 第一章：1 0 高渗盐水和2 0 甘露醇减轻缺血性脑水肿的效果及其机制的初步 探讨 1 实验动物与分组健康成年s d 雄性大鼠随机分成4 组：假手术组、脑缺 血+ 生理盐水组( 简称生理盐水组) 、脑缺血+ 2 0 甘露醇组( 简称甘露醇组) 和 脑缺r f t l + 1 0 h s 组( 简称1 0 h s 组) 。以右侧永久性大脑中动脉阻塞( p e r m a n e n t m i d d l ec e r e b r a la r t e r yo c c l u s i o n ，p m c a o ) 后6 h 为治疗起点，各组根据治疗持续时 间随机分为4 个亚组：2 、6 、1 2 和1 8 h 组。p m c a o 后6 h 起，生理盐水组， 甘露醇组和i o h s 组用微量注射泵按o 3 m l h a 经尾静脉匀速注入生理盐水，2 0 甘露醇( 或2 0 氚标甘露醇) 或者1 0 h s ，而假手术组不予干预。 2 观察指标：各组相应治疗时间点缺血侧与非缺血侧脑含水量( b r a i n w a t e rc o n t e n t ，b w c ) ；非缺血侧与缺血侧脑组织钠离子含量；血清n a + 、c 1 和血浆晶体渗透压；放射性自显影观察甘露醇随治疗时间在脑组织的累积情 中文摘要 况；苏木素伊红( h e ) 染色观察治疗1 8 h 后各组缺血后脑组织病理改变。 第二章：1 0 高渗盐水减轻脑水肿的分子机制及其对神经功能的影响 1 健康成年s d 雄性大鼠随机分成3 组：假手术组、生理盐水组和1 0 h s 组。各组以缺血6 h 为治疗起点，根据治疗时间分为3 个亚组：0 、6 和1 8 h 治 疗组。 2 通过干湿比重法测量各组缺血侧大脑半球b w c ，用t u n e l 技术分别检 测治疗1 8 h 梗死灶周围脑组织的细胞凋亡情况，应用免疫双标法检测1 8 h 梗死 灶周围a q p 4 表达情况，蛋白免疫印迹技术( w e s t e r nb l o t ) 及实时荧光定量 r t - p c r ，检测1 8 h 梗死灶周围脑组织a q p 4 蛋白和m r n a 的表达情况。 数据分析和统计学处理所有数据经s p s s l 3 0 统计软件处理，根据资料不同类 型进行相应的统计处理。服从正态分布的计量资料以( 均数4 - 标准差) ( x - 4 - s ) 表示；两因素组间比较采用析因设计的方差分析，单因素组间比较采用o n e w a y a n o v a 方差分析。方差齐，组间多重比较采用l s d 分析，方差不齐，组间多 重比较采用d u n n e t t st 3 分析；双变量计量资料相关分析采用p e a r s o n 相关分析； 以p o 0 5 ) 。 3 血清n a + 、c l 。和血浆晶体渗透压：同假手术组、生理盐水组、甘露醇组 相比，1 0 h s 组血n a + 、c l 和血浆晶体渗透压增高有显著性( 尸均= o 0 0 0 ) 。 4 相关分析：各组非缺血和缺血侧b w c 与相应血钠浓度与脑钠含量差 值的相关性分析结果显示：治疗2 、6 、1 2 和1 8 h ，假手术组生理盐水组和甘露 醇组非缺血和缺血侧b w c 与相应各组血钠浓度和脑钠含量差值不存在显著相 关性( 尸均 0 0 5 ) ，而l o h s 组非缺血和缺血侧b w c 与相应各组血钠浓度和 脑钠含量差值均存在显著负相关( ，均 0 8 5 4 ，尸均 o 0 5 ) 。1 0 h s 组治疗2 、 6 、1 2 和1 8 h 缺血侧b w c 与相应血清n a + 、血浆晶体渗透压存在显著负相关( 血 清n a 十：厂2 h - 一o 81 1 、p 2 h = 0 0 5 ，r 6 h 一0 8 6 5 、p 6 h = 0 0 2 6 ，r 1 2 h 一0 8 6 3 、p 1 2 h = o 0 2 7 ， ，1 8 h 一0 9 11 ，p l s h = 0 0 1 2 ；血浆晶体渗透压，2 h - 0 8 1 3 、p 2 h = 0 4 9 ，r 6 h 一0 8 8 8 、 p 6 h = 0 0 1 8 ，r 1 2 h = - 0 8 8 7 、p 1 2 h = o 0 1 8 ，r 1 8 h = - 0 9 1 5 、p l s h = 0 0 1 ) 。 i i i 中文摘要 5 脑组织氚标甘露醇含量：从干预2 h 至1 8 h ，缺血侧梗死区灶周围氚标 甘露醇含量进行性增高；干预1 2 、1 8 h 同2 h 相比，差异有统计学意义( 尸1 2 h = 0 0 0 0 、 p 1 8 h = 0 0 0 0 ) ，提示氚标甘露醇在患侧梗死区不断累积。在非缺血侧相应脑组织区， 从干预2 h 至1 8 h ，氚标甘露醇含量亦不断增多，干预6 h 与干预2 h 相比，增高无差 别( p = - 0 0 6 4 ) ，而干预1 2 h 和1 8 h ，与干预6 h 相比，增高有显著性( 胸= o 0 0 0 ) 。 在干预1 2 h 和1 8 h ，缺血侧较非缺血侧氚标甘露醇量增高( p 2 h = 0 0 0 1 、p 1 2 h = 0 0 4 5 、 尸1 8 h = 0 0 0 1 ) 。脑组织放射性自显影：氚标甘露醇干预2 h 就可见缺血侧脑梗死灶 周围脑组织少量的黑色银颗粒分布，在干预6 、1 2 和1 8 h 缺血侧脑梗死灶周围脑 组织进行性增多；提示甘露醇在缺血侧脑梗死灶周围脑组织随甘露醇注入时间 延长明显增多。而在非缺血侧相应脑组织区域随氚标甘露醇干预时间延长亦可 见黑色银颗粒不断增多，以干预1 2 h 、1 8 h 明显，但黑色银颗粒量较缺血侧少。 6 治疗1 8 h 缺血侧脑组织病理改变：光镜下可见梗死区细胞稀少，广泛的 神经元坏死，细胞溶解伴软化灶形成；细胞结构模糊，细胞体缩小变形，染色 加深，核消失，血管可见粒细胞附壁及浸润。可见细胞及组织间隙水肿，水肿 以皮层下结构及梗死区向非梗死区的移行区为重。1 0 h s 组梗死区可见神经元 坏死，细胞数减少，细胞结构模糊，细胞体缩小变形，染色加深，核消失，血 管可见粒细胞附壁及浸润，梗死灶周围可见气球样改变和间质水肿，但程度比 生理盐水组和甘露醇组轻。 第二章：1 0 高渗盐水减轻脑水肿的分子机制及其对神经功能的影响 1 各组缺血侧半球b w c ：在治疗0 、6 和1 8 h ，各治疗组间缺血侧b w c 增高均有显著性( p o h - o 0 0 0 、p 6 h = 0 0 0 0 、p 1 8 h = 0 0 0 0 ) ，在假手术组，生理盐水 组和1 0 h s 组，分别在治疗0 、6 和1 8 h ，缺血侧b w c 亦均有显著性差异( 尸 均= 0 0 0 0 ) ；进一步采用l s d 法进行组间多重比较，在治疗0 、6 和1 8 h ，同假手 术组相比，生理盐水组缺血侧b w c 增高有显著性( p0 h = 0 0 0 1 、p6 h = 0 0 0 0 、p 1 8 h = o 0 0 0 ) ，而在治疗o h ，同生理盐水组比较，1 0 h s 组缺血侧b w c 差异无统 计学意义( p = o 9 7 8 ) ，但在治疗6 h 和1 8 h ，同生理盐水组相比，1 0 h s 组缺血 i v 硕士学位论文 侧b w c 降低有显著性( 尸均= 0 0 0 0 ) 。 2 各组缺血灶周围脑组织神经元调亡情况：假手术组神经元细胞凋亡甚少， 生理盐水组随着时间的进展，细胞凋亡增多。分别在治疗6 h 和1 8 h ，各治疗组 间比较均有显著性( 尸6 h = 0 0 0 0 、pl s h = 0 0 0 0 ) ；在假手术组和1 0 h s 组，治疗 6 h 和1 8 h 脑梗死灶周围神经元凋亡率差异均无显著性( 尸= o 7 1 l 、尸= o 0 6 4 ) ， 而生理盐水组治疗6 h 和1 8 h ，脑梗死灶周围神经元凋亡率增高有显著性( 尸 = o 0 0 0 ) ；进一步采用d u n n e t tt 3 进行组间多重比较，治疗6 h 和1 8 h ，同生理盐 水组比较，1 0 h s 组神经元凋亡率减少有统计学差异( p 6 h = 0 0 0 1 、p 1 8 h = o 0 0 4 ) 。 3 各组缺血灶周围脑组织a q p 4 的表达情况：免疫荧光双标染色发现生理 盐水组在治疗1 8 h 缺血灶周围脑组织a p q 4 表达均高于假手术组，而1 0 h s 组 则明显降低。在治疗1 8 h ，同假手术组相比，生理盐水组a q p 4 m r n a 表达增高 有显著性( 尸= o 0 0 9 ) ；而1 0 h s 组较生理盐水组a q p 4 m r n a 表达减低，两 者差异存在统计学意义( 仁0 0 3 3 ) ；在治疗1 8 h ，同假手术组相比，生理盐水 组a q p 4 蛋白表达明显增高( 卢0 o o o ) ；而1 0 h s 组较生理盐水组a q p 4 蛋 白表达减低( 尸= 0 0 0 0 ) 。 结论： 1 同2 0 甘露醇相比，持续静脉输注等量1 0 h s 可更持久更有效治疗缺血 性脑水肿，而没发现明显并发症。 2 血浆与脑组织之间钠离子浓度梯度较大可能是1 0 h s 效果优于2 0 甘 露醇的重要原因之一。 3 2 0 甘露醇随用药时间延长在脑组织不断累积，缺血侧较非缺血侧显著， 这可能是其治疗脑水肿作用减退的原因之一。 4 1 0 h s 可能通过下调血管周围星形胶质细胞a q p 4 的表达减轻脑水肿， 并通过减少缺血周围脑组织神经元凋亡发挥神经保护作用。 关键词：高渗盐水甘露醇脑缺血脑水肿神经元凋亡水通道蛋f l - 4 v 硕士学位论文 t h ei n t e r v e n t i o ns t u d yo f h y p e r t o n i c s a l i n eo nb r a i ne d e m ai n d u c e db y o b j e c t i v e ： c e r e b r a li s c h e m i a n a m e ：w a n g q i a o s h e n g s u p e r v i s o r ：p r e f z e n gh o n g k e a b s t r c t t oe x p l o r et h ee f f e c ta n dp o s s i b l ec o m p l i c a t i o n so ft h e10 h y p e r t o n i cs a l i n e ( h y p e r t o n i cs a l i n e ，h s ) t r e a t i n gi s c h e m i cc e r e b r a le d e m aa n di t sc o r r e s p o n d i n g e l e m e n t a r yt h e r a p e u t i cm e c h a n i s mc o m p a r e dw i t h2 0 m a n n i t o l ；t of u r t h e re x p l o r e t h ee f f e c to f10 h so nr e g u l a t i n gt h ee x p r e s s i o no fa q p 4i nt h ep e r i v a s c u l a r a s t r o c y t e sa n dn e u r o n a la p o p t o s i si nt h ep e r i i s c h e m i cb r a i nt i s s u e ，a n dt oc l a r i f yi t s m o l e c u l a rm e c h a n i s m so ft r e a t i n gi s c h e m i cb r a i ne d e m aa n dt h ee f f c to f n e u r o l o g i c a l f u n c t i o n m e t h o d s ： p a r t1t h ee f f e c to f1 0 h y p e r t o n i cs a l i n ea n d2 0 m a n n i t o lo nc e r e b r a le d e m a a n dt oe l e m e n t a r i l ye x p l o r et h e i rm e c h a n i s m s 1 e x p e r i m e n t a la n i m a l sa n dg r o u p s ：h e a l t h ya d u l ts p r a g u e - d a w l e ym a l er a t s w e r er a n d o m l yd i v i d e di n t of o u rg r o u p s ：s h a mo p e r a t i o ng r o u p ，c e r e b r a li s c h e m i a + n o r m a ls a l i n e g r o u p ( s h o r t n a m e ：n o r m a l s a l i n e g r o u p ) ，c e r e b r a l i s c h e m i a + 2 0 m a n n i t o lg r o u p ( s h o r t n a m e ：m a n n i t o lg r o u p ) a n dc e r e b r a li s c h e m i a + 10 h s g r o u p ( s h o r t n a m e ：10 h sg r o u p ) t h et r e a t m e n ts t a r ta f t e r6 ht h er i g h to fp e r m a n e n t a b s t r a c t m i d d l ec e r e b r a l a r t e r yo c c l u s i o n ( p e r m a n e n tm i d d l ec e r e b r a la r t e r yo c c l u s i o n ， p m c a o ) ，i na d d i t i o n ，a c c o r d i n gt od u r a t i o no ft r e a t m e n t ，t h es dr a t sw e r er a n d o m l y s u b d i v i d e di n t of o u rg r o u p s ：2 , 6 ，12 ha n d18 hg r o u p a f t e r6 hp m c a o ，t h en o r m a l s a l i n eg r o u p 、m a n n i t o lg r o u pa n d10 h sg r o u p ，n o r m a ls a l i n e ，2 0 m a n n i t o lo r 10 h sw e r ep u m pv i at h et a i lv e i na c c o r d i n gt o0 3 m l hu n i f o r m ；w h i l et h e s h a m - o p e r a t e dg r o u pw a sn o ti n t e r f e r e dw i t ha n yd r u g s 2 m e a s u r e s ：( i ) t h eb r a i nw a t e rc o n t e n t ( b r a i nw a t e rc o n t e n t ，b w c ) o f n o n - i s c h e m i ch e m i s p h e r ea n di s c h e m i ch e m i s p h e r ea td i f f e r e n tt i m ep o i n t si ne a c h g r o u p ；i s c h e m i ca n db r a i ns o d i u mi o n sc o n t e n to fi s c h e m i ch e m i s p h e r e ；p l a s m a c o n c e n t r a t i o no fn a + 、c 1 。a n dp l a s m ao s m o l a l i t y ；t l l ea c c u m u l a t i o no fm a n n i t o l i nb r a i nt i s s u ea td i f f e r e n tt r e a t m e n tt i m e p o i n t st h r o u g ha u t o r a d i o g r a p h ； p a t h o l o g i c a lc h a n g e si ni s c h e m i cb r a i nt i s s u e18 ha f t e rt r e a t m e n ti ne a c hg r o u pb y h e m a t o x y l i n e o s i n ( h e ) s t a i n i n g p a r t2t h es t u d yo ft h em o l e c u l a rm e c h a n i s mf o r1 0 h y p e r t o n i cs a l i n et o a m e l i o r a t ec e r e b r a le d e m aa n di t se f f e c to nn e u r o l o g i c a lf u n c t i o n 1 h e a l t h ya d u l ts dm a l er a t sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t o 3g r o u p s ：s h a m o p e r a t e dg r o u p 、n o r m a ls a l i n eg r o u pa n d10 h sg r o u p t h er a t si nt h e10 h s g r o u pw e r ef u r t h e rs u b d i v i d e di n t o t h r e eg r o u p sa c c o r d i n gt od i f f e r e n tt r e a t m e n t t i m e s ：0 , 6a n d18hs u b g r o u p s l i k e w i s e ，a t6hf o l l o w i n gm c a o ，r a t si nc e r e b r a l i s c h e m i cg r o u pw e r ea l s os u b d i v i d e di n t ot h r e eg r o u p sc o r r e s p o n d i n g l y ：0 , 6a n d18 h s u b g r o u p sf o l l o w i n gt h eo n s e to ft r e a t m e n tw i t hn o r m a ls a l i n e r a t si ns h a m o p e r a t e d g r o u pw e r ea l s os u b d i v i d e dc o r r e s p o n d i n g l yi n t ot h r e eg r o u p s ：0 , 6a n d18 hs u b g r o u p s f o l l o w i n gt h eo n s e to ft r e a t m e n tw i t hn o r m a ls a l i n e a t6 hf o l l o w i n go p e r a t i o n ，r a t si n s h a m o p e r a t e dg r o u pw e r e n o tt r e a t e dw i t ha n yd r u g s r a t si nt h en o r m a ls a l i n eg r o u p w e r et r e a t e dw i t hn o r m a ls a l i n e ( 0 3m l h ) a t6 hf o l l o w i n gp m c a o ，r a t si nt h e10 h st r e a t m e n tg r o u pw e r et r e a t e dw i t hac o n t i n u o u si v i n f u s i o n ( 0 3m l h ) o f10 h s 硕士学位论文 v i at h et a i lv e i nu n t i lt h ee n do ft h ee x p e r i m e n t 2 t h eb w co ft h ei p s i l a t e r a li s c h e m i cc e r e b r a lh e m i s p h e r ew a sa n a l y z e db y w e t - t o d r yr a t i oa t0 , 6a n d l8 hi ne a c hg r o u p ，a n dn e u r o na p o p t o s i sw e r ed e t e c t e db y t h et u n e lt e c h n i q u e , a q p 4 ( a q u a p o r i n 一4 ，a q p 4 ) m r n aw e r ed e t e c t e db yr e a l t i m e f l u o r e s c e n c e q u a n t i t a t i v ep c r ，a q p 4p r o t e i nw e r ed e t e c t e db yi m m u n o b l o t t i n g ( w e s t e r nb l o t ) i np e r i i s c h e m i cb r a i nt i s s u eo fr a t sa t18 hi ne a c hg r o u p d a t aa n a l y s i sa n ds t a t i s t i c s ：a l ld a t aw e r eh a n d l e db yt h es p s s13 0s t a t i s t i c a l s o f t w a r e ，d i f f e r e n ts t a t i s t i c a lm e t h o d sw e r ea p p l i e da c c o r d i n gt od i f f e r e n tt y p e so f d a t a n o r m a ld i s t r i b u t i o nm e a s u r e m e n td a t aw a se x p r e s s e dw i t hm e a n4 - s t a n d a r d d e v i a t i o n ( x4 - s ) u n i v a r i a t e - f a c t o rm e a s u r e m e n td a t aw a sa n a l y z e db yo n e - w a y a n o v a ，b u tt w o f a c t o rm e a s u r e m e n td a t aw a sa n a l y z e db yt w o w a yc l a s s i f i c a t i o n a n o v a m u l t i p l ec o m p a r i s o n sw e r ea n a l y z e db yl s dm e t h o di ft h ed a t aw a s h o m o g e n e i t yo fv a r i a n c e ，o t h e r w i s ea n a l y z e db yd u n n e t t st 3m o t h o d b i v a r i a t e c o r r e l a t i o na n a l y s i so fm e a s u r e m e n td a t aa n a l y z e db yp e a r s o nc o r r e l a t i o na n a l y s i s t h ed i f f e r e n c ew a ss i g n i f i c a n tw i t h 尸 o 0 5 r e s u l t s ： p a r tit h ee f f e c to f10 h y p e r t o n i cs a l i n ea n d2 0 m a n n i t o lo nc e r e b r a le d e m a a n dt oe x p l o r ee l e m e n t a r i l yt h e i rm e c h a n i s m s 1 b w c ：t h ed i f f e r e n c eo ft h eb w co fi s c h e m i ch e m i s p h e r ew a ss i g n i f i c a n t a m o n gt h es h a mo p e r a t e dg r o u p ，t h en o r m a ls a l i n eg r o u p ，t h e2 0 m a n n i t o lg r o u p a n dt h e10 h sg r o u pa f t e rt r e a t m e n t2 , 6 12a n d18 hi n c r e a s e ds i g n i f i c a n t l y ( p 2 h = 0 0 0 0 、p 6 h - o 0 0 0 、p1 2 h = 0 0 0 0 、j pl s h = o 0 0 0 ) a tt h es a m et i m e ，t h ed i f f e r e n c eo f t h eb w co fi s c h e m i cc e r e b r a lh e m i s p h e r ew a ss i g n i f i c a n ta tt r e a t m e n t2 , 6 ，12a n d18 h i nt h es h a mo p e r a t e dg r o u p 、t h en o r m a ls a l i n eg r o u p 、t h em a n n i t o lg r o u pa n dt h e 10 h sg r o u pr e s p e c t i v e l y ；h o w e v e r , s ow a sn o ti nt h es h a mo p e r a t e dg r o u p ( 尸 = 0 2 71 ) c o m p a r e dw i t ht h es h a mo p e r a t e dg r o u p t h eb w co fi s c h e m i cc e r e b r a l a b s t r a c t h e m i s p h e r ei n c r e a s e di nt h e n o r m a ls a l i n eg r o u p 、t h em a n n i t o lg r o u pa n dt h e10 h sg r o u pa tt h ed i f f e r e n tt r e a t m e n tt i m ea n a l y z e db yl s dm e t h o d ( p o 0 5 5 ) ( 至) t h e r ew e r en e g a t i v ec o r r e l a t i o nb e t w e e nt h eb w ca n dt h ed i f f e r e n c ev a l u eo f p l a s m as o d i u mc o n c e n t r a t i o na n db r a i ns o d i u mc o n t e n to ft h e i s c h e m i cc e r e b r a l h e m i s p h e r ea n dt h en o n i s c h e m i c c e r e b r a lh e m i s p h e r ei nio h sg r o u pa tt h e t r e a t m e n to f2 , 6 ，12a n d18 h ( p a l l 0 0 5 ) t h e r ew e r es i g n i f i c a n tn e g a t i v ec o r r e l a t i o nt h eb w co fi s c h e m i cc e r e b r a l h e m i s p h e r e a n dt h ec o r r e s p o n d i n gp l a s m ac o n c e n t r a t i o no fn a + ，p l a s m ac r y s t a l o s m o l a l i t yp r e s si n10 h sg r o u pa tt h et r e a t m e n to f2 , 6 ，12a n d18 h ( p l a s m an d ： r 2 h = = 0 8 1 1 ，p 2 h = o 0 5 ，r 6 h = 一0 8 6 5 ，p 6 h = o 0 2 6 ，r 1 2 h = 一0 8 6 3 ，p 1 2 h = 0 0 2 7 ，r 1 8 h = - 0 9 11 ， p l s h = o 0 1 2 ；p l a s m ac r y s t a lo s m o l a l i t yp r e s s ：圪h = 一0 8 1 ，p 2 h = 0 4 9 ，r 6 h2 0 8 8 8 ， p 6 h = o 0 1 8 ，r 1 2 h = - 0 8 8 7 ，p 1 2 h = 0 0 1 8 ，r 1 8 h = - 0 9 1 5 ，p 1 8 h = 0 0 1 ) 。 5 ( 1 ) t h ea m o u n to fr a d i o a c t i v eo f3 h m a n n i t o li nt h eb r a i nt i s s u es u r r o u n d i n g i n f a r c ti nt h ei s c h e m i cc e r e b r a lh e m i s p h e r e ：t h ea m o u n to fr a d i o a c t i v eo f3 h - m a n n i t o l i nt h eb r a i nt i s s u es u r r o u n d i n gi s c h e m i ci n f a r c tc o n t i n u o u s l yi n c r e a s e df r o m2 ht o 18 ha f t e ri n t e r v e n e dw i t h3 h - m a n n i t 0 1 i ti n c r e a s e ds i g n i f i c a n t l ya t18 hi nc o m p a r e d w i t ht h eo t h e ri n t e r v e n t i o nt i m e ( p 0 0 5 ) i ti n d i c a t e dt h a tm a n n i t o lc o n t i n u e st o a c c u m u l a t ei n t h e i p s i l a t e r a l i n f a r c t e dr e g i o n t h ea m o u n to fr a d i o a c t i v eo f 3 h m a n n i t o li n c r e a s e di nt h ec o r r e s p o n d i n gn o n i s c h e m i cc e r e b r a lh e m i s p h e r ef r o m 2 ht o18 h ，a n dc o m p a r e dw i t h2 h ，t h ea m o u n to fr a d i o a c t i v eo f3 h m a n n i t o lsd i dn o t i n c r e a s e da t18 h ( p = - 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i s c h e m i cc e r e b r a lh e m i s p h e r ea t12 ha n d 1 8 h 6 p a t h o l o g i c a lf e a t u r e so fi s c h e m i cb r a i nt i s s u ea f t e r18 ht r e a t m e n t ：i tw a ss e e n t h a tc e l l sa r es c a r c ea n dt h e r ew e r em a n yn e u r o n a ln e c r o s i si nt h ei n f a r c ta r e a ， a c c o m p a n i e db yc e l ll y s i sa n ds o f t e n i n gf o c if o r m a t i o n ，c e l ls t r u c t u r ev a g u e ，c e l l d e f o r m a t i o n ，c o l o r i n gt oe n h a n c e ，t h ed i s a p p e a r e dn u c l e a r a tt h es a m et i m e ，i tc o u l d b es e e nt h a tg r a n u l o c y t e sw e r ea t t a c h e da n di n f i l t r a t e dt ob l o o dv e s s e l sw a l l s m o r e o v e r ，i tw a ss e e nt h a tt h e r ew e r ec e l l sa n di n t e r s t i t i a le d e m a , s i g n i f i c a n t l ya t i n s u b c o r t i c a ls t r u c t u r e sa n dt r a n s i t i o n a lz o n eo fi n f a r c ta r e at on o n i n f a r c tz o n ei nt h e n o r m a ls a l i n eg r o u p ，t h em a n n i t o lg r o u pa n d10 h sg r o u pi nl i g h tm i c r o s c o p e p a r t2t h es t u