中药新药.ppt

中药新药申报时对药理毒理研究的要求,新药的概念新药系指我国未生产过的药品，已生产的药品凡增加新的适应证，改变给药途径和改变剂型的亦属新药范围。,有效或高于有效是否有效吸收剂量对主要生理为何有效分布系统的影响（协同、相加）转化、排泄其它药理作用量效关系体内变化规律发现新用途时效关系优选给药方案毒理研究参考作用机理临床合理用药毒理研究参考药理毒理研究（组方的必要性）（指导与参考）,药理学,一般/安全药理学,主要药效学,药代动力学,-致癌性遗传毒性生殖毒性局部耐受性、过敏、依赖性、免疫毒性光敏和其它试验等了解毒性反应剂量、时间、强度、症状、靶器官及可逆性等，为临床方案提供参考、预测出现的毒性反应，制订临床防护措施、保证受试者用药安全,毒理学,局部用药毒性,全身用药毒性,急性毒性,长期毒性,特殊毒性,目的,药理毒理在新药研究中的地位药理毒理与其它研究的关系新药研究的特点,一、概述,为药学研究提供生物学支持为临床研究提供参考依据决定进入临床研究的重要依据之一,一、概述药理毒理在新药研究中的地位,用于或拟用于改变或探查生理系统或病理状态下，对使用者有利的物质或产品。其目的是为了开发具有治疗效益（有效性）和极少副作用（毒性）的新产品。,WHO的药物定义,药理、毒理、药学、临床之间的关系密切,药理毒理与药学建立在药学研究的基础上药学影响因素：纯度、理化特性、剂型等质量控制：工艺、质控和标准等药理与毒理药理通常先于毒理研究毒理试验设计必须依据药效剂量,一、概述药理毒理与其它研究的关系,药理毒理与临床药理毒理研究必须了解拟临床用药情况-为临床研究提供必不可少的依据-可依临床需要，随时配合进行研究评价新药的安全、有效最终在临床,一、概述药理毒理与其它研究的关系,风险大、周期长、投入大（药物、动物、人力等）,一、概述新药研究的特点,复杂性和多学科交叉性动物与人的种属差异动物研究的可参考性和局限性对临床疗效和安全的预测性涉及多学科的研究对药学、药理和临床的了解,一、概述新药研究的特点3,根据临床研究进程，可分阶段研究、申报I-II期临床：满足I期临床周期的急毒、亚急性、安全药理遗传毒性（部分生殖毒性）作用机制III期临床：支持III期临床研究周期的长期毒性继续II期开始的生殖毒性研究致癌研究（大、小鼠约3年的研究）作用机制,一、概述新药研究的特点3,二、申报资料的基本要求,注册分类1“未在国内上市销售的中药、天然药物中提取的有效成分及其制剂”药理毒理方面要求同化学一类药注册分类2“未在国内上市销售的来源于植物、动物、矿物等药用物质制成的制剂”和注册分类4“未在国内上市销售的中药材、新的药用部位制成的制剂”与第1项不同的是无需提供药代动力学注册分类3“中药材的代用品”未被法定标准收载的按2要求，应与被替代药材进行药效、毒理的对比试验；代用品为单一成份应提供药代药代动力学注册分类5“未在国内上市销售的从中药、天然药物中提取的有效部位制成的制剂”无法定标准，除常规药理毒理，另提供三致试验,中药药理毒理研究的基本技术要求,注册分类6“未在国内上市销售的由中药、天然药物制成的复方制剂”三种情况：传统中药复方制剂:工艺、处方、功能主治属传统，处方中药材具法定标准，且主治病证在国家中成药标准中未收载一般可免药理、毒理研究，但含法定毒性及现代毒理证明为有毒药材，或含有十八反、十九畏，应进行毒理试验。现代中药复方制剂：主要药效、急毒和长毒。含无法定标准的药用物质，按分类2要求。若方中含天然药物、有效成分或化学药品，则应研究其药理、毒理相互作用。天然药物制成的复方制剂：多组分药效、毒理相互影响，即拆方研究。若含无法定标准的药用物质，应按分类2要求。,中药药理毒理研究的基本技术要求,注册分类7“未在国内上市销售的由中药、天然药物制成的制剂”。除“中药注射剂”外，包括水针、粉针、大输液间相互改变。需提供药效、一般药理、急/长毒、制剂安全试验。含非法定标准的中药材、天然药物-三致试验注册分类8“改变国内已上市销售药品给药途径的制剂”新的给药途径的药理毒理。注册分类9和10“改变国内已上市销售药品剂型的制剂”；“改变国内已上市销售药品工艺的制剂”试验说明新制剂的特点。适应证原则上应同原制剂。改变剂型或工艺有不同要求，如引起质的改变，应比较新制剂和原制剂的药理毒理。否则可减免申报资料。,中药药理毒理研究的基本技术要求,注册分类11:已有国家标准的中成药和天然药物制剂。可不提供药理毒理资料其它-补充申请第6项改变生产工艺，不应导致药用物质基础的改变，必要时应比较药效、急毒-补充申请第20项完善说明书的安全内容，应提供毒理研究或文献资料。-增加新的适应证或功能主治，需延长用药周期或增加剂量，应提供药效学和一般毒性。,中药药理毒理研究的基本技术要求,药理试验设计要点毒理试验设计要点,申报资料的基本要求,药理毒理试验设计要点,申报资料的基本要求药理试验,药理试验设计要点,非临床药理学研究涉及的内容主要药效学（含作用机制）一般（安全）药理学药代动力学,申报资料的基本要求药理试验,主要药效学（含作用机制）,申报资料的基本要求药理-主要药效,来源：原料、制剂、批号配制：纯度、含量（效价）、溶媒、终浓度、储存基本情况：来源、种属、品系、合格证、饲养条件动物情况：体重、性别、数量、实验环境：饲养和居住条件、温度、光线基本情况：仪器设备和试剂来源、批号,申报资料的基本要求药理-主要药效,受试药物,试验动物,试验仪器,动物模型：选择依据（敏感、专家动物）给药途径：拟临床途径给药时间：反映最佳疗效给药体积：根据不同动物的限量要求剂量设计：体内：3个剂量-量效关系或测定ED50值体外：5个剂量-量效曲线或IC50值剂量单位的表示,申报资料的基本要求药理-主要药效,试验方案,观察指标：针对特点、定量或半定量指标观察时间：能反映发挥药效的基本过程试验对照：空白、模型、阳性药、溶媒试验结果：实测数据、统计方法试验结论：客观、真实、专家分析参考文献：原文、译文,申报资料的基本要求药理-主要药效,试验方案,作用机制的研究涉及范围与目的研究阶段研究的方法研究的结论,申报资料的基本要求药理-作用机制,目的：侧重观察心血管、呼吸、精神神经系统，根据药物特点增加有关系统的观察技术要求：基本同药效研究剂量设置：参考主要药效剂量，一般2-3个剂量给药途径：拟临床途径或在体研究动物：尽量使用清醒动物,申报资料的基本要求药理-一般药理,一般药理基本要求,可考虑免做安全性药理研究的药理作用较明确的局部用药，如皮肤、眼科（全身分布很少）细胞毒类的药物用于治疗晚期癌症病人生物技术产品，有高特异性结合受体靶点，评价安全性药理学终点往往作为毒理学或/和药效学的一部分，可减免。若为创新的治疗类型的生物技术产品和/或这些产品没有高特异性受体结合的靶点应考虑做。,申报资料的基本要求药理-一般药理,了解药物在体内的代谢和转运过程了解不同种属动物之间的差异解释药效和毒性作用为毒性试验的设计与结果分析提供依据为临床研究设计提供参数评价有效、安全的重要组成部分之一,申报资料的基本要求药理-药代动力学,动物药代动力学研究的目的,创新药新制剂（速、缓、控释制剂）改变途径的制剂（可能明显影响安全性和有效性）改酸根或碱基,申报资料的基本要求药理-药代动力学,药代动力学涉及的新药范围,药代动力学的数学模型主要动力学参数：药-时曲线、药-时曲线下面积（AUC）、吸收速度（Ka）、最高血药浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）、半衰期（t1/2）、表观分布容积（V）、总清除率（CLs）、消除速度（Ke）等药物体内吸收、分布、代谢和排泄(ADME)特征蛋白结合或药物的相互影响口服制剂-生物利用度研究,申报资料的基本要求药理-药代动力学,药代动力学研究内容,动物：要求啮齿类和非啮齿类两种动物，至少一种动物与药效、毒性试验一致尽量在清醒状态下试验口服给药不宜用兔等食草动物有些情况可考虑使用一种动物,申报资料的基本要求药理-药代动力学,考虑要点,生物样品研究与分析的基本要求灵敏度：至少能检测出35个半衰期的血药浓度或能检测出Cmax的1/101/20浓度专一性：内源性物质和代谢物不应干扰样品测定能证明所测药物为原形药或其代谢产物精密度：日内和日间的变异系数（RSD10%）回收率：药物的生物样品回收率70%标准曲线：分别制备药物在血、尿、粪、胆汁及组织匀浆中的标准曲线，求出相关系数。生物样品的稳定性：样品的予处理、贮存、冻融影响等内源性的药物：注意内源性物质的干扰,申报资料的基本要求药理-药代动力学,血浆蛋白结合率-药物血浆蛋白结合程度和量-效关系体外或体内给药后取样的体外方法动物和人的血浆蛋白结合试验至少设置3个浓度，每一浓度至少3次试验药物代谢的相互影响探讨药物对药物代谢酶的影响，如对细胞色素P450同工酶的诱导或抑制多种药物同时使用的药物间相互作用,申报资料的基本要求药理-药代动力学,结果与分析：详述方法学提供数学模型和主要药代动力学参数、药代动力学试验中有关吸收,分布,代谢和排泄试验的研究结果对出现的矛盾结果，如出现高、中剂量的AUC重叠；不同动物或不同给药途径的参数相差较大的结果进行分析。对临床给药剂量、给药次数和间隔、给药途径等方案设计提出建议。,申报资料的基本要求药理-药代动力学,申报资料的基本要求毒理试验,毒理试验设计要点,急性（单次给药）毒性长期（重复给药）毒性致突变（遗传毒性）生殖毒性致癌性其它毒性（过敏性、溶血性、光毒性、免疫毒性、药物依赖性等试验）,申报资料的基本要求毒理研究,毒理研究范围,用药剂量大重视预试验：毒性范围较窄委托其它单位研究-学科之间的衔接-提供必要的相关资料GLP要求,申报资料的基本要求毒理研究-共性问题,毒理研究的共性,多大剂量/暴露量在动物上产生毒性作用？多大剂量/暴露量在动物上未产生毒性作用？所用的动物相关模型是否能预示人体毒性？毒性反应的表现和持续时间？单次和多次给药的作用是否不同？毒性反应是否可逆？毒性靶器官或靶系统？所表现出的毒性是否是该类化合物可预期的？是否产生毒性代谢物？是否对毒性产生适应性调节？以上答案构成了支持起始和后续临床研究的毒理学基础,申报资料的基本要求毒理研究-共性问题,根据临床医生的需要，毒理学研究需要回答以下问题,化学药品：原料、制剂生物制品：制剂中药：原料、制剂、浸膏一种动物同药效试验啮齿类和非啮齿类两种，如大鼠、犬或猴等。理由充分，一种相关动物相关的、表达人受体的转基因动物或同种蛋白,申报资料的基本要求毒理研究-共性问题,受试药物,试验动物,急性（单次给药）毒性,申报资料的基本要求毒理研究-急毒,指动物单次给药后引起50动物死亡的剂量。LD50值的意义是：LD50越小表示药物的急性毒性越大。动物：小鼠、大鼠等动物与分组：一般5组；每组10只雌、雄各半。试验前禁食给药途径：临床给药途径观察14天，进行大体解剖观察，如有改变-病理检查,申报资料的基本要求毒理研究-急毒,LD50试验,指动物单次大剂量给药或在24小时内接受多次大剂量受试药物后，动物在短期内出现的与药物相关的毒性反应，但是又不引起动物死亡的最大剂量动物：小鼠、大鼠、犬等动物数：小动物20只；大动物4只雌、雄各半。试验前动物应注意禁食给药途径：临床给药途径观察14天，进行大体解剖观察，如有改变-病理检查,申报资料的基本要求毒理研究-急毒,最大耐受量试验,该试验多用于中药和毒性较小的其它药物研究指药物以最高浓度和最大容积的给药，剂量可能并未达到最大耐受的剂量，所以该剂量被称为最大给药量。具体要求可参照最大耐受量试验。低毒药物，口服给药：5g（或ml）/kg动物数一般5只，大鼠禁食一夜，小鼠禁食46小时，观察14天，如无死亡，则无必要进行更高剂量如动物在5g/kg出现死亡，可选择较低剂量,申报资料的基本要求毒理研究-急毒,最大给药量试验,限量试验,长期（重复给药）毒性,申报资料的基本要求毒理研究-长毒,观察动物在给予超过临床剂量（数倍或数十倍）和用药周期（3-4倍以上）的情况下所出现的毒性反应设法发现引起毒性反应的剂量、剂量与毒性之间的关系、中毒表现和程度、主要毒性靶器官或组织及可逆程度等预测临床研究阶段可能的安全范围和毒性，预先制定防治措施或避免某些有特殊疾病患者的使用，减少临床可能的风险为临床试验初始剂量和指标的选择等提供重要参数,申报资料的基本要求毒理研究-长毒,长期毒性研究目的,通常长毒始于主要药效、安全药理、单次给药毒性、初步药代动力学（如果已经可获得）等试验之后了解临床适应证和用药特点对合理设置给药方案也是不可缺少的治疗还是辅助治疗药物根据药物特点，考虑动物的选择有些药物侧重比较毒理学的研究，如新的剂型、改变酸根或碱基、改变给药途径等。,二、申报资料的基本要求毒理研究-长毒,试验方案设计-基本原则,l动物的种类常用大鼠和犬或敏感动物。创新药一般2种以上，雌雄各半。生物制品多用大鼠和猴（种属特异性可特殊）l动物的年龄与数量大鼠试验3月内：6-8周龄；3月：5-6周龄犬：一般选用性成熟的，6-10月；猴：3.5-4.5年根据试验周期长短确定每组动物数。原则：试验结束时小动物每组动物数应满足统计学要求；大动物的数应满足毒理学评价要求；一般大鼠为10-30只，雌雄各半；犬、猴至少雌、雄各3只；毒性大、周期长数量应增加，考虑恢复期数量。,申报资料的基本要求毒理研究-长毒,试验方案设计-试验动物,给药时间与频率-临床给药周期的3-4倍。反复、长期或植入的药，按最长给药时间，即啮齿6月；非啮齿9月-连续给药、周期短-每天给药；1个月-6天/周-每天给药时间应一致-保证动物摄入量的准确性中药如给药体积大，可将药物分成2次/日-不提倡采用掺食给药，除非有稳定性、均一性,申报资料的基本要求毒理研究-长毒,试验方案设计-给药方案,给药途经拟订的临床给药途径替代途径给药剂量与容积给药剂量应根据不同毒性的试验要求根据动物体重增长调整给药容积不宜过大，大鼠ip1ml/100g；iv3组原则：高剂量-动物应出现毒性和个别死亡（3月的，1/3动物检查中期主要指标；如发现异常可适当增加检查次数。,申报资料的基本要求毒理研究-长毒,试验方案设计-给药方案,毒物代谢动力学（TK）试验考虑要点药物代谢动力学研究在毒理学研究中的延伸。评价药物的全身暴露（Exposure）状态结合于长期毒性试验，测定AUC、Cmax和Ct通过了解药物暴露时与毒性剂量和时间的关系：评价毒理学的发现和这些发现与临床安全的相关性；结合毒性发现，为进一步的临床前毒性试验设计提供信息；评价动物的耐受量，有助于解释不同动物种类、剂量和性别之间毒性的差异。,申报资料的基本要求毒理研究-毒代,试验方案设计-给药方案,申报资料的基本要求毒理研究-致突变,致突变（遗传毒性）,致突变（遗传毒性）目前建立的遗传毒性试验是研究机体遗传物质受外源性化学物质或其它环境因素作用时对有机体产生的遗传毒性作用。该研究方法不适用于生物制品。这些物质不会直接与DNA或其它染色体发生相互作用。遗传毒性试验包括体外和体内检测系统。两者应结合进行研究。体外检测系统包括细菌回复突变、微核试验、哺乳动物细胞染色体畸变等；体内试验包括骨髓微核试验、显性致死试验等。,申报资料的基本要求毒理-致突变,申报资料的基本要求毒理研究-生殖毒性,生殖毒性试验,生殖毒性试验评价药物对哺乳动物生殖的影响，推测对人可能的生殖毒性研究分为三段I段（一般生殖毒性）：是评价对成年动物生育力和早期胚胎发育影响，评价药物对配子成熟，交配行为、受孕、胚胎着床前和着床的影响II段（致畸敏感期毒性）：即妊娠动物在胚胎器官形成期给药，评价药物对亲体、胚胎、胎仔发育影响III段（围产期毒性）：在妊娠动物分娩前后给药，评价胎仔出生前后的发育和孕鼠从妊娠后期至断奶期间给药对妊娠、分娩、哺乳、胚胎、胎仔发育的影响。根据临床用药次数、适应证和拟用人群决定是否进行该试验创新药，一般可在申报临床研究前先提供II段试验对于可能只给一次或终身一次（如诊断或外科手术）的药，重复给药研究也许是不必要的。在较高剂量下，缩短处理期似乎更合适。,申报资料的基本要求毒理-生殖毒性,申报资料的基本要求毒理研究-致癌性,致癌性试验,致癌试验检测受试药物对动物的潜在致瘤性药物是否进行该试验应在获得一定的相关信息后才能确定人群最长用药的时间及遗传毒理学、重复给药毒性等相关结果重复给药毒性试验可能显示受试药物具有免疫抑制特性、激素活性或考虑对人类是一种危险因子时，都应慎重考虑进行有关的致癌试验。如：-药物拟用于非肿瘤病人的辅助治疗或非癌症疾病的重复给药使用-临床连续给药时间大于6个月应进行该试验-治疗慢性和复发性疾病而经常间断使用药物-有明确遗传毒性的化合物；-其构效关系提示有潜在的致癌性的药物-在连续重复给药的毒性试验中有癌前期病变的证据-重复给药滞留的母体化合物或其代谢产物导致局部组织或病生理改变-较长时间接触的药物，如缓慢释放药物也应考虑进行该试验-内源性肽类、蛋白质是否需要进行该研究需作特殊考虑-超生理水平,申报资料的基本要求毒理-致癌性,以下情况进行致癌试验尤为重要：1）产生的生物学作用与天然产物明显不同；2）由于修饰导致产品结构与天然产物相比有明显不同；3）在人体局部或全身的浓度（即药理学水平）明显增加。对于抗肿瘤药物是否进行该试验，可考虑以下因素：-如果用药人群的生存期较短（23年），则不要求-如用于晚期全身治疗的抗肿瘤药物一般不需要进行，但当该药物疗效较好，能明显延长生命时，应考虑有关继发性肿瘤的问题，应进行致癌性研究,申报资料的基本要求毒理-致癌性,其它毒性试验-静脉给药：血管刺激性、全身过敏性、溶血性-肌肉、皮下、粘膜注射：局部注射刺激性、全身过敏性等试验-皮肤外用：皮肤刺激性、过敏性试验；有的还需光敏毒性试验或需考虑局部吸收试验,申报资料的基本要求毒理-其它毒性,刺激性试验刺激性是指动物经血管给予受试药物后，动物局部产生的可逆性的血管和周围组织损伤的改变。-单次或多次给药的刺激性试验-可结合在长毒性研究中观察，而不需要单独进行-模拟临床给药方式，如静脉点滴或静推，注意给药容积和速度-白色家兔为常用的动物。每一剂量组动物一般为3只-结果应详细记录局部反应，应取注射部位的血管、周围组织行病理组织检查。必要时行恢复期观察,申报资料的基本要求毒理-刺激性试验,过敏试验全身过敏：白色豚鼠阳性对照药：10人血白蛋白或新鲜蛋清皮肤过敏：白色豚鼠阳性对照药：2，4二硝基氯代苯1致敏浓度0.1激发浓度,申报资料的基本要求毒理-过敏试验,中药新药药理学研究的基本内容,新药的概念新药系指我国未生产过的药品，已生产的药品凡增加新的适应证，改变给药途径和改变剂型的亦属新药范围。中药新药的分类根据新药审批办法及有关中药新药的修定和补充规定，将中药新药分为五个大类13个方面。,第一类中药材的人工制成品；新发现的中药材及其制剂；中药材中提取的有效成分及其制剂。复方中提取的有效成分。第二类中药注射剂；中药材新的药用部位及其制剂；中药材、天然药物中提取的有效部位及其制剂；中药材以人工方法在体内的制取及其制剂；复方中提取的有效部位群。第三类新的中药制剂；以中药为主的中西药复方制剂；国外引种或引进养殖的习用进口药材及其制剂。第四类改变剂型或改变给药途径的药品；国内异地引种和野生变家养的动植物药材。第五类增加新主治病证的药品。,各类新药对药理、毒理研究的不同要求,中药新药药理学研究的基本内容,主要药效学试验(一)主要药效的研究1主要药效确定中药新药成分复杂，作用广泛。2实验设计要求根据新药主治（病或证），参照其功能，选择能够反映其疗效本质的药效进行重点研究；间接证实其药效的辅助试验可酌情选作。要分清主次。例：治疗支气管哮喘新药，要以平喘和抗过敏作为核心作用进行重点研究，而其它作用如止咳、祛痰、抗炎等有助于哮喘的治疗，也可酌情考虑。,主要药效的研究的实验设计要求,选择试验方法实验动物对受试药物的要求对照的要求和目的给药剂量与途径,药理试验方法体外实验（离体实验）优点条件可控、重复性好、用药量少、节省动物排除了体内神经、体液等各种因素的干扰。缺点不适于粗制剂的研究，受杂质、pH、渗透压等理化性质的干扰，故三、四类新药不适于体外实验。体内实验优点采用临床所用给药途径，给药剂量参考临床，实验结果接近于临床。缺点用药量大，实验条件不容易控制，有体内神经、体液等的干扰，影响因素大，所得结果不易分析。体外、体内试验在新药研究中很重要，两者可以相互补充，但新药研究一般更强调体内试验。,实验动物的选择,(1)选用与人的机能、代谢、结构、疾病特点和机能反应相近似的实验动物。(2)选用遗传背景明确，模型指标显著、稳定，解剖、生理特点符合实验目的的实验动物。(3)还应考虑实验动物是否易得，是否经济，是否容易饲养和管理。(4)原始记录和申报资料中均应注明动物的种类、品种、品系、年龄、体重、健康状况、来源，合格证号等。,（2）动物模型建立动物模型的必要性。有些药理作用在正常动物身上无法体现，如：镇痛作用，要在疼痛动物模型身上观察。病理模型，比正常机体更接近病人的机能状态。病理模型种类。制备中医临床病或证的病理模型，或接近的模型。一般药理实验常采用的病理模型。（3）观察指标要求特异性强、敏感性高、重现性好、客观、定量或半定量的指标进行观测。,对受试药物的要求,(1)药材须经生药学家鉴定，符合标准，并明确品种、产地、药用部位、炮制方法等。(2)三类中药制剂的处方必须固定。制剂的生产工艺及质量基本稳定，与临床用药的剂型和质量标准相同。(3)对注射给药或离体试验，应注意药物中杂质、不溶物质、电解质、酸碱度等因素对试验结果的干扰。(4)药效试验可选用不含赋形剂的中药制剂或提取物,对照的要求和目的,(1)正常对照组要求不加任何处理，指在正常条件下进行观察和对照，给药组如是灌胃给药，对照组应用灌胃溶剂。目的对比观察模型是否成功；观察被试药能否使病理改变恢复正常。,(2)阳性药对照组要求除所用药物是已知药后，其他一切条件与受试药组相同；所选药必须是药典所有的或国家批准的药，如用西药，则采用公认的，疗效可靠的。目的对比新药的特点；说明所用方法的可靠性。(3)模型对照组要求除不用药外，其他处理同给药组，模型要符合中医证或病的模型。目的对比观察受试药的药理作用。,给药剂量与途径,(1)给药剂量一般应设三个剂量组，大动物，操作特殊困难者可设两个剂量组，剂量选择要合理，中剂量可设等效剂量，剂量差按等比级数23倍。(2)给药途径一、二类药要选用两种给药途径，其中一种应与临床给药途径相同。三五类中药粗制剂可仅用一种与临床相同的给药途径。,(二)一般药理研究,1动物常用小鼠、大鼠、猫、犬类，最好采用清醒动物，也可用麻醉动物。,2观察指标精神神经系统小鼠或大鼠的自主活动，与中枢抑制药有无协同作用（延长巴比妥类的睡眠时间，和睡眠率）对中枢兴奋药有拮抗作用（对戊四唑和士的宁所致惊厥的影响）。心血管系统观察药物对麻醉猫或犬的血压、心率和心电图的影响。呼吸系统观察给药前、后呼吸频率、呼吸深度的变化。其他根据药物作用特点，观察相应的指标。,3药物给药途径给药途径应与临床一致。否则应申述理由。剂量选择主要药效作用的23个剂量。对照同时应设相应的溶剂对照组。,中药新药毒理学研究的基本内容,研究目的了解中药的毒性反应，毒性程度、毒性发展过程及毒性作用是否可逆。分类急性毒性试验、长期毒性试验、特殊毒性试验。,一、急性毒性试验,1.试验目的估测试品毒性程度LD50能准确反映药物的毒性，若无法求得LD50，则测定其最大耐受量（MTD）观察受试物毒性症状应注意观察并记录动物出现的各种症状，如神经系统症状；植物神经系统；呼吸系统；皮肤粘膜外观等计算治疗指数LD50/ED50,2.试验要求实验动物多用小鼠，也可用大鼠。品种明确，体重相近、雌雄各半、健康合格。给药分法注意选择与临床途径相同者，一、二类新药应选用两种以上的给药途径。观察时间依毒性反应快、慢而定，一般不少于3天。观察指标密切注意动物的各种反应，并详细记录。实验条件室温控制在20上下；给药前要禁食1夜,保证体重一致。,3.试验测定方法所用方法很多，如加权回归机率单位法、简化机率单位法、改良的冠氏法、机率单位对数剂量绘图法、序贯法等。,二、长期毒性试验,1.试验目的观察动物因连续给药所产生的毒性反应，中毒症状，停药后恢复情况，确定毒性反应的靶器管，明确毒性反应敏感的指标。提出较为确切的无毒性反