（动物学专业论文）浸水应激对大鼠胆汁分泌和脑组织中氨基酸含量的影响.pdf

浸水应撒对大鼠胆汁分泌和脑组织中氪基酸含量的影响刖罱本实验室艾洪滨等在研究大鼠应激性胃溃疡的机制时发现：给大鼠束缚加浸水应激性刺激可引起胃运动机能亢进、胃酸分泌增多的现象。而给予应激性刺激之前预先注射阿托品( m 型胆碱能受体阻断剂，阻断支配胃的副交感神经的作用) ，或膈肌下切断迷走神经，结果既抑制了胃运动，也抑制了胃酸分泌机能。这提示支配胃运动和胃酸分泌的传出神经是迷走神经，这说明束缚浸水应激条件下，迷走神经中副交感神经传出冲动增多能加强胃运动和胃酸分泌，那么肝脏与胃同属消化器官，迷走神经也有神经纤维分布到肝脏，迷走神经是否也调控胆汁分泌呢? 是否在束缚浸水刺激下也同样使胆汁分泌增加昵? 另外，神经解剖学证实肝脏也有交感神经纤维分布，肝细胞的分泌活动也受交感神经支配，而且不同的受体支配不同的肝功能，那么在束缚浸水刺激下，交感神经是否对胆汁分泌进行调控呢? 这些问题未见文献报道，本文对此作了相应的研究。从现代医学的角度进行探讨，中医“怒伤肝”的机理，主要是激活交感神经系统，引起交感一肾上腺髓质系统兴奋，内分泌系统被激活，肾上腺皮质激素等分泌增加，同时肝内儿茶酚胺浓度增高。造成肝脏损伤。那么，束缚浸水刺激条件下大鼠同样被激怒，且剧烈挣扎，那么按照“怒伤肝”的说法肝脏分泌胆汁的功能又受到多大影响呢? 所以，本研究也为“怒伤肝”的理论提供了一个有力的支持。再者，肝胆功能异常是多发病、常见病研究应激条件下胆汁分泌的调控机制问题对治疗肝胆疾病有很重要的现实应用价值。应激条件下，肝脏机能的变化与神经中枢的调控密不可分的，那么此时神经中枢内有哪些变化呢? 近年来许多文献报道，不同应激方式可引起脑组织中游离氨基酸的代谢变化，有时还会导致兴奋性氨基酸( e x c i t a t o r ya m i n oa c i d ，e a a ) 毒性效应。在研究领域中不仅涉及神经递质的变化、而且还涉及到脑组织n a + k + a t p 酶活性、s o d 与m d a 含量改变、c 和s 基因及f o s 蛋白表达、h s p 表达等生物活性物质变化。但是在束缚浸水应激条件下，大鼠脑组织游离氨基酸代谢变化的有关研究未见报道，本文就束缚浸水应激后大鼠脑组织中游离氨基酸含量的变化进行了研究对兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸对中枢神经元的作用做了进一步的探讨。那么，应激对肝脏分泌胆汁功能的影响与神经中枢内生物活性物质的变化有无必然联系昵? 对此还仍需进一步研究证明。y6 8 44 3 9浸水应撇对大鼠胆汁分泌和脑组织中氨蚺酸含量的影响独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空) 或其他教育机构的学位或书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在文中作了明确的说明并表示谢意。立论文作者签名：挑桕以导师签字手日期：20 0 4 年10 月日签字日期：2 0 0 4 年1 0 月日浸水心激对人鼠删汁分泌和脑虬上织中氦蔡酸含量的蟛响文献综述综述一应激对胆汁分泌影响及其作用机制的研究进展摘要应激对人和动物的生长发育、行为和生理功能都可以产生不同的影响。应激状态下，不仅肝组织的形态、重量、氧化和抗氧化系统受到影响，而且肝脏的主要功能胆汁分泌也产生显著变化。众所周知，胆汁的分泌和排出受神经、体液以及其它因素的调控。应激影响了这几种因素对肝脏的调控作用，从而使胆汁的分泌和排出相应地出现不同的变化。本文为应激性肝胆疾病的预防、治疗和防治药物的研制提供一些参考。关键词：应激、胆汁分泌、作用机制、神经调节、体液调节分类号：q 4 2 6t h ed e v eio p m e n to fs t u die so f fe f f e c t sa n dm e o h a n i s mo fs t r e s so nb i es e c r e t i o f fa b s t r a c ts t r e s sh a dd i f f e r e n te f f e c t so nt h eg r o w t h ，b e h a v i o ra n dp h y s i o l o g i c a lf u n c t i o nt oh u m a na n da n i m a l s ，u n d e rs t r e s s ，i tw a si n f l u e n c e dn o to n l yt h ec o n f i g u r a t i o n ，w e i g h t ，o x y g e n a t i o na n da n t i o x y g e n a t i o ns y s t e mo f1 i v e r ，b u ta l s ot h es e c r e t i o no fb i l e t h em a i n f u n c t i o no fl i v e r i ti sw e l lk n o w nt h a t t h es e c r e t i o na n dd i s c h a r g eo fb i l ew e r em o d u l a t e db yt h en e r v e ，h u m o u ra n do t h e rf a c t o r s t h em o d u l a t i o na c t i o nw a si n f l u e n c e db yt h es t r e s s ，s ot h a tt h es e c r e t i o na n dd i s c h a r g eo fb i l ea p p e a r e dd i f f e r e n tc h a n g e s w ep r o v i d e ds o m er e f e r e n c e sf o rt h ep r e v e n t i o na n dt h e r a p yo fh y p e r i r r i t a b l ed i s e a s eo fl i v e ra n dt h ed e v e l o p i n go fm e d i c a m e n tf o rc u r i n g k e yw o r d s ：s t r e s s ；s e c r e t i o no fb i l e ：t h em e c h a n i s mo fo p e r a t i o n ：n e r v a lm o d u l a t i o n ；h u m o r a lm o d u l a t i o nc a t e g o r yn u m b e r ：q 4 2 6任何躯体的或情绪的刺激，只要达到一定的强度，均属应激刺激，如创伤、烧伤、冻伤、感染、中毒、发热、出血、缺氧、过冷、过贰、疼痛、体力消耗、饥饿、疲劳、紧张、忧虑、恐惧、怒、束缚、浸水等。应激包含两层含义：应激性刺激和应激性反应。浸水麻激对人鼠飚汁分泌年兀肭组织中氨捧艘含量的i ； ；响应激性反应是一种全身适应性反应，在生理学和病理学中都有非常重要的意义；应激性刺激又可分为两类：良性应激( b e n i g ns t r e s s ) 和劣性应激( m a l i g n a n ts t r e s s ) ，对于应激性刺激不是过分强烈，时间短暂，有利于动员身心机能，对机体有利，称之为良性应激；如果应激性刺激过于强烈和持久，能引起病理变化，称之为劣性应激。应激性刺激对动物和人的生长、行为和生理功能都产生不同程度的影响，对生理功能的影响主要表现在心血管系统、免疫系统和消化系统。特别是对于消化系统的研究文献报道较多，如各种应激刺激对胃溃疡形成影响的研究“1 1 。在各种应激中，束缚浸水应激( w a t e ri m m e r s i o nr e s t r a i n ts t r e s s ) ，简称浸水应激，经常被使用。如本实验室艾洪滨等。”利用束缚浸水应激模型研究发现：应激可引起大鼠胃粘膜严重损伤，胃酸分泌增加，胃壁结合粘液分泌减少，出现不正常的胃的高强度收缩，体温下降等；万军利等”1 利用大鼠束缚浸水模型从胃酸分泌、胃运动、胃粘膜一氧化氮合成酶和一氧化氨几方面观察了川芎嗪对大鼠应激性胃溃疡的影响。在此应激过程中，应激动物的各种生理机能会发生不同程度的改变，甚至可能引起病理变化。肝脏作为消化系统的最大消化腺，也是消化系统的主要器官，在束缚浸水应激时，经神经、体液和其它因子的调节，在生理机能和代谢上均有不同程度的变化。在不同的应激形式下，肝脏的生理功能发生了较大的变化，应激不仅对肝脏的组织形态、重量和氧化抗氧化系统造成较大影响，而且对肝脏的重要功能胆汁分泌有显著影响，本文主要就应激条件下胆汁分泌及其作用机制作了如下综述。1 应激对肝组织形态、重量、氧化和抗氧化系统的影响大量的实验结果证实应激对肝脏功能影响非常显著，特别是劣性应激会直接造成肝脏的器质性的变化。郭蕾等“1 用“夹尾致怒”造成“怒伤肝”模型，发现暴怒大鼠的肝组织中l p o ( 脂质过氧化物) 含量明显高于对照组，而脑、肾组织中则变化不明显( l p o可使肝细胞发生脂肪变性和坏死，同时，造成肝功能障碍) 。吕志平“造成“郁怒”大鼠模型发现模型组过氧化作用增强，清除自由基能力下降，肝细胞受损。据推断，脂质过氧化作用增强，肝细胞结构或功能改变可能是“肝郁症”的重要病理基础之一。王朝勋”1 等电刺激豚鼠的方法进行“怒伤肝”实验研究，结果表明：激怒豚鼠血流量减少，胆汁的p h 值明显升高，愤怒情绪激活交感肾上腺髓质系统、肾上腺素、去甲肾上腺素、l 肾上腺皮质激素等应激激素释放增多，使肝脏微循环血管网发生强烈收缩，肝脏血流量减少，组织耗氧量显著增高，致肝微循环障碍，肝细胞缺血，缺氧加重，肝脏难以适应应激反应，甚至病变。王坚等”1 用束缚浸水大鼠2 0 小时发现应激后大鼠肝脏重量显著减浸水成激对人鼠丹u 汁分泌和脯纰织中氨幂峨龠量的蟛响轻。李倬等”1 用冷冻加束缚应激大鼠3 小时后发现肝脏丙二醛( m d a ) 含量显著降低，肝脏谷胱干肽过氧化酶( g s h p x ) 和超氧化物歧化酶( s o d ) 均显著降低。t a k e u c h ih ，s u z u k i一“等发现在束缚浸水应激条件下橄榄油会加速大鼠肝脏糖元的合成，在此过程中还发现多次重复束缚浸水应激后大鼠的体重在进食并不减少的情况下与对照组相比明显降低，大鼠肝脏和脾脏的重量也下降。肝脏是机体重要器官之一，超氧化歧化酶( s o d ) 丙二醛( m d a ) 是组织细胞内重要的生物分子，是反映机体氧化、抗氧化状态的重要指标。各种应激可引起肝脏组织发生复杂的形态和机能改变，眭建等1 利用电刺激复制动物应激模型、图像计量分析的方法进行动物肝脏组织形态学观察，化学方法检测肝脏组织内s o d 和m d a 含量，结果发现：应激组肝细胞、肝血窦及门管区发生明显损伤：肝组织内s o d 和m d a 含量均明显增高( p 均 o 0 5 ) 。2 应激对胆汁分泌功能的影响杨朝晖“”等发现，井下阴暗、潮湿、噪音、毒气危险等应激作用引起胆汁返流量增加，加速、加重胃溃疡的发生和发展。贲卉、朱元根等“”以大鼠胆汁流量为指标，观察耳一体穴电针对胆汁分泌的影响，当用电针刺激耳穴“肝胆”区和体穴“肾俞”时，胆汁流量显著增加。张江红、金淑英等“”以狗的胆汁流量为指标，观察不同状态下针刺“日月”穴对胆汁分泌的影响，结果，当麻醉较浅时电针刺激后胆汁流量增加；而麻醉较深时则针刺效应不明显：进食能引起胆汁分泌增加，而电针刺激后不能加强食物的利胆作用，相反使胆汁分泌减少。黄欣、周玉宝“”以大白鼠的胆汁在单位时问内的分泌量为指标，通过电针刺激胆俞穴观察对胆汁分泌的影响，结果电针刺激组在单位时间内胆汁分泌量增加，尤其在电针刺激2 0 分钟内的量与对照组比较有显著的差异，持续电针刺激其量呈下降的趋势。综上所述可知：在应激过程中，不同应激刺激对胆汁分泌状况的影响不同，有的促进胆汁分泌增加，有的抑制胆汁分泌，为什么刺激不同就出现不同的分泌状况? 对这一问题还需进一步研究。3 应激状态下胆汁分泌与排出的调节机制胆汁的分泌和排泄受很多因素的影响，如：神经调控、肝细胞的水和状态、作用底物、细胞因子、趋化因子、炎性因子、毒素、激素、胞内外调节物和胆汁中的各种成分，其中转运蛋白的信号转导和基因转录的影响是现在研究的热点。3 1 胆汁成分对肝胆分泌与排出的影响胆汁的形成是一个复杂过程，近年来的研究指出，它是由肝细胞和肝微管不断分泌的，但是在非消化期间，胆汁即贮存在胆囊内，只有在消化期间，胆汁才直接由肝脏以浸水应激对人鼠n t # y 泌和肭纰织中氨壮艘量f i 勺蟛响及由胆囊内大量排出至十- - # f f 肠。其中，肝细胞主动分泌胆碱，胆微管分泌水分和一些无机盐。因此，就胆汁的总流量而占，可以分为两部分，一部分由肝细胞主动分泌胆汁所引起，称为胆碱依赖性胆汁流：另一部分出胆微管及胆管系统上皮细胞主动分泌水和电解质所形成，称为非胆碱依赖性胆汁流。后者指胆碱分泌率为零时的胆汁流量，在人类约占总胆汁流量的5 0 。胆碱分泌量取决于胆汁肠肝循环的速度和新胆赫的合成速度。肝细胞分泌胆碱的多少又影响胆微管胆汁的形成。但大鼠没有胆囊，胆汁分泌后直接通过胆总管流到十二指肠中。大鼠胆汁中的胆盐或胆汁酸排至小肠后，绝大部分( 约9 0 以上) 仍可由小肠( 主要为回肠末端) 粘膜吸入血液，通过门静脉回到肝，再组成胆汁而又分泌入肠，这一过程称为胆盐的肠肝循环。胆盐每循环一次约损失5 ，每次进餐后约有6 8 9 胆盐排出，每次进餐后可进行2 3 次肠肝循环，返回到肝的胆盐有刺激胆汁分泌的作用，实验证明，当胆盐通过胆瘘流失至体外后，胆汁的分泌将比正常时减少数倍，但胆盐对胆囊运动并无影响。另外，胃酸进入十二指肠也可引起胆汁的分泌和胆囊的收缩。胆汁酸是胆汁的主要成分，具有重要生理功能。正常人胆汁中的胆汁酸按结构可分为两大类：一类为游离型胆汁酸，包括胆酸、脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸和少量的石胆酸；另一类是上述游离胆汁酸与甘氨酸或牛磺酸结合的产物、称结合型胆汁酸。主要包括甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸及牛磺鹅脱氧胆酸等。一般结合型胆汁酸水溶性较游离型大，p k 值降低，这种结合使胆汁酸盐更稳定，在h + 或c a ”存在时不易沉淀出来。肠道中的各种胆汁酸平均有9 5 被肠壁重吸收，其余的随粪便排出。胆汁酸的重吸收主要有两种方式：结合型胆汁酸在回肠部位主动重吸收。游离型胆汁酸在小肠各部及大肠被动重吸收。胆汁酸的重吸收主要依靠主动重吸收方式。石胆酸主要以游离型存在，故大部分不被吸收而排出。正常人每e t 从粪便排出的胆汁酸约0 4 一o 6 克。由肠道重吸收的胆汁酸( 包括初级和次级胆汁酸；结合型和游离型胆汁酸) 均由门静脉进入肝脏，在肝脏中游离型胆汁酸再转变为结合型胆汁酸，再随胆汁排入肠腔，此过程称为“肝汁酸的肠肝循环”。胆汁酸肠肝循环的生理意义在于使有限的胆汁酸重复利用，促进脂类的消化与吸收。正常人体肝脏内胆汁酸池不过3 - 5 克，而维持脂类物质消化吸收，需要肝脏每天合成1 6 3 2 克，依靠胆汁酸的肠肝循环可弥补胆汁酸的合成不足。每次饭后可以进行2 4 次肠肝循环，使有限的胆汁酸池能够发挥最大限度的乳化作用，以维持脂类食物消化吸收的正常进行。若肠肝循环被破坏，则胆汁酸不能重复利用。此时，一方面影响脂类的消化吸收，还使胆汁中胆固醇含量相对增高，处于饱和状态，极易形成胆固醇结石：另一方面胆汁分泌量会受到影响。浸水心激对人鼠i l u 3 t 分泌和腑组织中氯幕限肯量的影响3 2 神经调节3 2 1 神经支配肝脏的解剖学基础据王玢。”等分析：进食及食物对胃和小肠的刺激都反射性地增加胆汁分泌及胆囊收缩，此反射的传出神经为迷走神经，膈肌下切除两侧迷走神经此反射即消失，其直接作用为迷走神经释放乙酰胆碱到肝细胞使其分泌增加，间接作用是通过胃泌素作用，刺激支配肝的大内脏神经，可引起血管收缩，减少胆汁分泌：另据姚泰“”分析：在胆囊、胆管、o d d i 括约肌、平滑肌组织中含有丰富的交感神经、副交感神经及内在神经丛。刺激迷走神经可引起胆汁分泌少量增加及胆囊轻微收缩，切断迷走神经或阻断胆碱能受体的阻断剂可阻断此反应。迷走神经除直接作用肝细胞和胆囊外，还可通过引起促胃液素释放而间接引起胆汁分泌和胆囊收缩，这与王玢的分析大致相同：另外，交感神经可引起胆囊的舒张。已知胆囊平滑肌上有肾上腺素能n 和b 受体，应用a 受体激动剂如美速胺( m e t h o x a m i n e ) 可使胆囊收缩，而b 受体激动剂则使胆囊舒张，胆囊壁上的b 受体占优势，它在胆囊受充盈扩张时，可引起胆囊舒张，从而有利于胆汁的贮存；姚泰还报道：胆囊和o d d i 括约肌中均舍有丰富的内在神经丛，神经丛内存在肾上腺素能和胆碱能神经纤维，但以后者为主。朱长庚等“8 1 经研究指出肝接受交感神经和副交感神经的支配。人左迷走神经发出肝支经小网膜直接进入肝脏；右迷走神经发出腹腔支先进入腹腔神经丛，再分支到肝，构成肝前神经丛和肝后神经丛。肝前神经丛的神经纤维沿动脉分布，随之入肝内。肝后神经丛位于门静脉后方，其纤维沿门静脉入肝。支配肝的交感神经由腹腔神经节发出，经肝前及肝后神经丛进入肝脏。进入肝脏的内脏神经既支配肝内血管，也达到肝实质结构。宋鹤九于1 9 9 3 年经研究证实家兔肝的交感神经纤维来自腹腔神经节，迷走神经节前纤维来自迷走神经背核，但由于肝内未见副交感神经节，因此肝脏注射h r p 迷走神经背核逆行标记细胞数量相当稀少：另外，肝的传入纤维伴行于肝的交感及迷走神经纤维，肝的传入神经纤维伴交感神经行走，部分来自双侧胸2 1 2 背根节，但主要在胸5 8 节，伴迷走神经的传入纤维来自双侧迷走神经下节。近期第三军医大学西南医院肝胆外科中心在夏锋博士主持下，进行了一项有关交感神经对肝脏功能的调控及其机理的研究并获得成功。实际上肝脏内具有神经支配这一现象早已为研究人员所发现，但肝脏内神经的调控作用一直未被人们所认识。他们应用神经特染技术和透射电镜，发现人和大鼠肝脏内均具有丰富的神经分布，血管周围及胆管旁的神经纤维分椎相对较多，而肝小叶内的分布相对较少，尤以大鼠为甚，超微结构未见有典型的特化的神经突触存在，但神经末梢内可见明显的突触小泡存在：应用六羟多巴胺( 6 一o h d a ) 建立浸水应激对人鼠胆汁分泌和躺绁织中氨基竣仓量的影响了去交感神经大鼠动物模型，并观察在正常和肝损伤情况下去交感神经后对肝脏代谢、排泄、内分泌、肝再生以及肝脏血流量的影响，结果显示，正常情况下去交感神经对肝功能作用较小，但在肝损伤的情况下( 如长时问的劣性应激) 去交感神经则将对肝功能产生显著的影响，这一结果表明：交感神经在病理状态下肝功能的调控中具有重要的意义。在此基础上，他们建立了肝脏交感神经电生理学实验模型，并测定了正常情况下和肝损伤时肝脏交感神经的传出和传入放电情况。结果表明正常情况下肝脏交感神经存在紧张性。而当肝损伤时，传入和传出冲动明显增强。当去甲肾上腺素刺激肝细胞时，肝细胞内的荧光强度分布不均匀，存在钙分布的亚分区现象。n e 作用后肝细胞内产生了明显的钙振荡，并且其变化具有特征性；作用后肝细胞胞液和膜性成分中的t p k 、p k c 、p k a活性有明显改变；n f k b 在5 分钟时即已有活化，其后则进一步增加，这表明n f k b 参与了n e 的效应过程。综合本实验结果，提示交感神经在肝脏内有广泛的分布，对肝脏各项功能特别是肝脏的病理生理有着明显的影响，证明肝脏交感神经对肝脏的功能调控具有重要的意义。这将为临床肝脏疾病的诊治提供理论基础。3 2 2 迷走神经、交感神经对胆汁分泌和排出的调控在保持狗胆汁肠肝循环和阻止胃酸进入十二指肠的情况下，电刺激迷走神经胆汁流量无变化，切断迷走神经亦不影响胆汁的基础流量，但也有作者发现迷走神经降低胆管分泌和c a m p 水平，引起胆管细胞凋亡”。在家兔肝肠循环完整的情况下，电刺激迷走神经可抑制胆汁分泌，但认为这是迷走神经兴奋使胆管收缩和痊挛。导致胆汁暂停流出，并非影响肝细胞代谢使胆汁分泌减少。另一些研究发现，在胆盐分泌降低时，注入抗胆碱剂阿托品，胆流量无变化，而在胆盐分泌率高时，注入阿托品则增加胆汁流量。但是，离体灌流猫肝脏时，阿托品本身能引起胆汁分泌，胆汁流量增加似乎与迷走神经无关。总之，副交感神经系统对胆汁生成的影响尚不清楚。肝实质及血管、胆管都有交感神经支配。在用保持肝肠循环的清醒狗实验时，静脉注入去甲肾上腺素、异丙肾上腺素和多巴胺后，胆汁流量、胆汁中碳酸氢盐和氯化物排出量均增加，但胆盐排出量不增加。心得安可阻断上述拟交感神经药物的作用，说明利胆作用与b 受体有关，证明这种胆汁分泌的增加是刺激胆小管或胆微管引起的。另有研究发现，电刺激肝脏交感神经可引起胆流、胆酸分泌和门脉血流下降，还发现门脉血流下降与胆汁分泌无关。说明这种胆汁分泌的效应由a 受体调节，可见，肝细胞的分泌活动受交感神经支配。从以上情况还说明，不同的受体支配不同的肝胆功能，从而产生不同的效应。但现在尚无足够证据表明，交感神经活动是肝脏生成胆汁的主要控制因素o ”“。浸水应激对人鼠胆汁分泌和腑丑土织中氯皋陵仑量的蟛响3 3 体液调节3 3 1应激与神经内分泌活动的关系应激反应引起的生理变化包括自主神经活动改变( 如交感神经活动加强) 和神经内分泌活动的改变。应激条件下，下丘脑多个内分泌轴被激活，包括激活下丘脑垂体一甲状腺轴( h p t ) 、下丘脑一垂体一肾上腺轴( h p a ) 交感肾上腺髓质系统( s a m ) 。杨明，李庆芬等“”分析在 h i l l 动物冷应激中激活了交感神经系统，激活了h p t 、h p a 轴的激素合成和分泌，引起肾上腺儿茶酚胺分泌增加：同时抑制促生长素轴、促性腺轴、催乳激索轴的激素分泌。神经肽y 、瘦素、褪黑激素等多种神经肽和神经递质以及激素参与了冷应激反应。机体受到外界强烈应激之后，其激素分泌存在着2 个高峰：第一高峰发生在几秒钟之内，包括交感神经系统肾上腺素( e p i n e p h r i n e ，e ) 和去甲肾上腺素( n o r e p i n e p h r i n e ，n e ) 分泌增强，下丘脑释放促肾上腺皮质激素释放激素( c o r t i c o t r o p i n r e l e a s i n gh o r m o r e ，c r h ) 进入门脉循环，几秒钟后垂体促肾上腺皮质激素( a d r e n o c o r t i t r o p h i c ，a t c h ) 分泌加强：下丘脑促性腺激素释放激素的释放降低，随后垂体促性腺激素降低；垂体分泌催乳素和生长素、胰腺分泌胰高血糖素增强。另外，垂体分泌的精氨酸加压素以及肾脏分泌的肾素都大量增加。激素反应的第二高峰为慢峰，主要是类固醇类激素的变化，发生在几分钟后：包括糖皮质激素( g c ) 分泌受到刺激：性园醇激素分泌降低。由此可见，以神经递质为媒介的自主神经系统、以神经肽和激素为媒介的神经内分泌系统二者共同参与应激反应。当机体受到强烈应激时，就会出现以交感神经兴奋、儿茶酚胺分泌增多和下丘脑、垂体一肾上腺皮质分泌增多为主的一系列神经内分泌反应，以适应强烈刺激，提高机体抗病的能力。作为应激反应的最主要的特征就是h p a 轴的激活及由此引起糖皮质激素类固醇g c分泌的增加，h p a 轴激活是机体对应激的最主要的适应性反应，g c 的分泌有利于机体动员能量和保持内环境的稳定。应激时糖皮质激素的分泌加强是通过下丘脑一垂体前叶一肾上腺皮质相互作用而实现的。g c 分泌增多是应激最重要的一个反应，在机体对抗有害刺激时起蓑极为重要的作用。动物实验表明，去除肾上艨后，动物可以在适宜条件下生存，但受到强烈刺激，则容易衰竭、死亡。但如果给摘除肾上腺的动物注射糖皮质激素，则可使动物恢复抗损害的能力。大量的临床观察也证明，肾上腺皮质功能过低的病人，对应激刺激的抵抗力明显降低。应激时g c 分泌增高，提高机体对刺激的抵抗力的机制目前还不完全清楚。浸水成激对大鼠胆汁分泌和脯鲺l 织中氮綦帔量的 ：| ；响应激时由于交感神经兴奋，血浆中儿茶酚胺升高，胰高血糖素分泌增加，血浆胰岛素含量偏低。尽管应激性高血糖和胰高血糖素水平升高都可刺激胰岛素分泌，但应激时胰岛素分泌减少。应激时由于交感一肾上腺髓质系统兴奋使肾血管收缩，因而肾素一血管紧张素一醛固酮被激活，所以应激后血浆醛固酮水平常会升高。此外，a c t h 分泌的增多也可刺激醛固酮的分泌。a d h 主要由下丘脑视上核的神经元分泌，刺激中脑网状结构，可促进视上核合成和分泌a d h 。疼痛、情绪紧张等可能通过这些途径使a d h 分泌增加。应激刺激可引起抗利尿激素( a d h ) 分泌释放增加，使尿量减少。但是有些应激刺激如吸入乙醚或加速度运动未见a d h 分泌增加，也就是说，应激刺激在一定条件下，也可因抑制a d h 分泌而引起多尿。b 一内啡肽在应激中起重要的作用，应激还可引起机体血浆b 一内啡肽明显增多。b 一内啡肽和a c t h 是同一前体阿片肽，即黑素皮质激素原( p r o o p i o m e l a n o c o r t i n ) 的衍生物。p 一内啡肽和a c t h 都在、下丘脑c r f 的刺激下分泌，b 一内啡肽和a c t h 都受血浆糖皮质激素的反馈调节。1 3 一内啡肽能调节a c t h 的分泌，并且与a c t h 一起经过短反馈或长反馈回路来抑制下丘脑c r f 的分泌，b 一内啡肽有很强的镇痛作用。3 3 2 激素对胆汁分泌调节p 物质( s u b s t a n c e p ，s p ) ：给摘除胆囊并装有总胆管瘘的麻醉狗上腔静脉注入合成的s p ，可抑制胆汁分泌。s p 足在肝微管水平抑制电解质分泌，发挥抗利胆效应，而与胆酸依赖性分泌无关“。而有些实验发现s p 可提高游离或结合胆酸、胆红素、总蛋白和胆固醇等的浓度“。胰岛素( i n s u l i n ) ：给狗静脉注射剂量为0 0 3 u k g “的胰岛素，胆汁流量明显增加。剂量增大为1 _ o u k g ，胆汁分泌量达到最大值。起初认为胰岛素的利胆作用是通过刺激胆小管实现的，后来很多研究认为是刺激非胆酸依赖性胆流部分“”嘲实现的。促胰液索是胆汁分泌的生理性刺激物，实验证明促胰液索引起的胆汁分泌是刺激胆管和胆小管，对肝细胞无作用。它刺激的胆汁分泌表现为胆汁流量、碳酸氢盐的浓度和排出量增加，提高了非胆酸依赖性胆流。”。促胰液素引起的胆管碳酸氢盐的分泌与h +含量有关，而不是与h c 仉一有关，肝细胞内p h 也可能影响这种分泌活动“”1 。胰高血糖素在生理性胆汁分泌调节中可能是重要的。研究表明，胰高血糖素主要作用肝细胞，而促胰液素作用于胆管。胰高血糖素的利胆作用是由c a m p 介导的，并要有一个完整的微管系统。在注入胰r浸水戍激对人鼠胆汁分泌和脑组织中氨壮艘宙量的始响高血糖素后，胆汁排出量和胆汁中的c a m p 浓度显著增加。缩胆囊素( c h o l e c y s t o k i n i n ，c c k ) 能使胆汁流量增加，且胆汁中氯化物和碳酸氢黼的含量均增加。单独给予c c k 时，不影响胆盐排出量，说明c c k 似乎以促胰液素的作用方式刺激胆管分泌。促胃液素i i 、c c k 和雨蛙肽( c a e r u l e i n ) 也增加胆汁流量。雨蛙肽刺激提高c l 一h c o ，转运蛋白、c l 一和k + 通道的活性，使胆管内h c o j 、c l 一浓度升高。雨蛙肽对肝细胞内c a m p 、c a ”水平并没有影响”1 ，三者利胆效应强弱依次为雨蛙肽、c c k 和促胃液素i io “。前列腺素( p r o s t a g l a n d i n ，p g ) 是利胆剂，在胆囊切除或胆囊收缩不影响胆道胆汁流量的动物实验证明，它可增加胆汁流量。神经肽y ( n p y ) 在脑室注射n p y ，可引起富含碳酸氢盐的胆流增加，且呈剂量依赖性，对胆汁中胆酸、磷脂和胆囿醇分泌无影响，这种作用是通过迷走神经和m 型受体完成的。经研究发现在大鼠的脾、肝、胰腺、肺、肾等器官均有促甲状腺素释放激素( t r h )的免疫反应性，其中肝内能结合的t r h 受体最多“脚。该发现启示，在生理情况下，t r h很可能调节肝脏的功能。t r h 抑制胆汁分泌，并有剂量依赖关系。“。因t r h 是神经肽，也可通过刺激交感神经和副交感神经调节胆汁分泌晦1 。3 3 3 其他因素对胆汁分泌的调控和影响c a m p 可以不同程度的提高肝细胞膜的通透性，增加肝胆细胞的分泌胆汁功能。内源性c a m p 不但可增加胆流和胆酸的排出量，还可以提高胆小管的分泌。p k c 、c a 2 + 均为胞内信使，p k c 抑制胆小管分泌，降低胆流流量：有人认为c a 2 + 和i p 3信使降低胆汁分泌的作用可能是通过缝隙连接，使相邻的肝细胞功能发生变化引起的。低水平的肿瘤坏死因子( t u m o rn e c r o s i sf a c t o r - o ，t n f - a ) 是肝细胞生长分化与再生所必需的调节因子，但是t n p 一。含量水平升高时，肝细胞就会凋亡，是众多肝毒素造成肝细胞损伤的主要因子。t n f 一尚能诱导k u p f f e r 细胞产生自由基，对肝窦内中性粒细胞有超化氧化作用，可加重肝细胞的损伤。胰岛素样生长因子一1 ( i n s u l i ng r o w t hf a c t o r l ，i g f - i ) 能提高超氧化物歧化酶及过氧化氢酶的活性，提高肝细胞清除自由基的能力。热休克蛋白、n o 、前列腺素等属于内源性保护因子，可以调节肝细胞的功能发挥肝细胞保护因子的作用。热休克蛋白是应激时由肝细胞合成与分泌的一种具有细胞保护作用的应激蛋白。f u j i m o r i 等通过浸水应激大鼠的动物模型的研究发现，分子量为7 2 k d浸水应激对人鼠心汁分泌和脑组织中氯接酸含量的蟛响的热休克蛋白具有内源性肝细胞保护作用。在给大鼠注射内毒素前先给大鼠浸水应激，诱导大鼠热休克蛋白的合成，能明显减轻内毒素造成的肝细胞损伤程度。热休克蛋白的肝细胞保护作用与其稳定蛋自的空涮结构，发挥“分子伴娘”的作用有关。n o 做为神经递质有广泛的生物作用。高浓度的n 0 对肝细胞有明显的毒性，n o 造成肝细胞损伤与其下调细胞色素p 4 5 0 、抑制肝细胞的d n a 及蛋白质的合成、诱导肝细胞凋亡有关。但n 0 也能抑制过氧化物酶的活性，抑制自由基的清除。参考文献：lc h och ，q u ibs v a g a lh y p e r a c t i v i t yi ns t r e s si n d u c e dg a s t r i cu l c e r a t i o ni nr a t s jg a s t r o e n t e r o lh e p a t o l ，t 9 9 6 ，u ( 2 ) ：1 2 5 一t 2 8 2 宗育杉，吴胜群等大鼠应激性溃疡发病机制及其防治方法的研究中国危重病急救医学，1 9 9 5 ，7 ( 5 ) ：2 6 5 - 2 6 7 3 万军利，王昌留等川芎嗪对大鼠浸水应激性胃溃疡的影响中草药，2 0 0 0 ，3 1 ( 2 ) ：1 1 5 - i 1 7 4 艾洪滨，张震东大鼠浸水应激性胃黏膜损伤机制的研究生理学报，1 9 9 0 ，4 2 ( 5 ) ：4 9 6 5 0 2 5 郭蕾，怒志的生理病理及实验研究。山东中医学院学报，1 9 9 5 ，1 9 ( 5 ) ：2 9 0 2 9 4 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ds e c r e t i o no fc h 0 1 a n g i o c y t e sf r o m b i l ed u c t l i g a t e dr a t s g a s t r o e n t e r o l o g y ，1 9 9 9 ，1 1 7 ：1 9 1 1 9 9 2 0b e c k hk ，a r n o l dr r e g u l a t i o no fb i l es e c r e t i o nb ys y m p a t h e t i cn e r v e si np e r f u s e dr a tl i v e r a mjp h y s i o l ，1 9 9 1 ，2 6 1 ( 5p t1 ) ：7 7 5 - 7 8 0 2 1 朱成贤，于吉人胆汁分泌的调节生理科学进展，1 9 8 5 ，1 6 ：1 2 6 - 1 2 9 2 2 杨明，李庆芬哺乳动物冷应激的主要神经内分泌反应动物学研究，2 0 0 2 ，2 3 ( 4 ) ：3 3 5 3 4 0 2 3v e s e ls k i is p ，k a r e v i n at g b i l es e c r e t i o ni n d u c e db yl - t h y r o x i n ea n ds u b s t a n c epi nd o g s r o s sf i z i o lz hi mlms e c h e n o v a ，1 9 9 8 ，8 4 ：4 0 6 4 1 2 2 4t h o m s e n0 m e c h a n i s ma n dr e g u l a t i o no fh e p a t i cb i l ep r o d u c t i o nw i t hs p e c i a lr e f e r e n c et ot h eb i l ea c i d i n d e p e n d e n tc a n a l i c u l a rb i l ef o r m a t i o n s c a n djg a s t r o e n t e r o l ，1 9 8 4 。9 7 ( 1 ) ：5 1 5 2 2 5n e r v if o ，s e v e rc h b il ea c i dp o o lc h a n g e sa n dr e g u l a t io no fc h e l a t es y n t h e s i si ne x p e r i m e n t a ld i a b e t e s b i o c h i mb i o p h y sa c t a ，1 9 7 8 ，5 2 9 ：2 1 2 2 2 3 2 6m e y e r sw c ，j o n e sr s g t u c a g o no ri n s u l i ns u p p r e s s e db i l i a r yl i p i d1 1e x c r e t i o ni nd o ga n dm a n s a e t r es s ，a n d e r s e nn j s e c r e t i n a c t ap h y s i o ls c a2 8v i l l a n g e r0 。v e e lt s e c r e t i浸水应激对人鼠胆汁分泌和脑 1 ：i 织中氨某限量的始响a n ns u r g ，1 9 7 9 ，1 9 0 ：7 0 9 7 1 8r e g u l a t i o no fp o r c i n eb i l i a r ys e c r e t i o nb yn d ，1 9 9 8 ，1 6 3 ：1 1 3 1ns t i m u l a t e sb i l e1 9d u c t u l e st os e c r e t eb o t hh +a n dh c 0 3 ( 一) 一i o n s a c t ap h y s i o ls c a n d ，1 9 9 2 ，1 4 6 ：3 6 9 3 7 6 2 9f r i z z e l lr a 。h e i n t z ek t r a n s p o r tf u n c t i o n so ft h eg a l l b l a d d e r i n tr e vp h y s i o l ，1 9 8 0 ，2 1 ：2 2 1 2 4 7 3 0b l o tc h a b a u dm d u m o n tm e f f e c to fa c i d - b a s eb a l a n c eo nb i l i a r yb i c a r b o n a t e3 23 33 43 5s e c r e t i o ni nt h ep h y s i o l ，1 9 9 0 ，2 5 8 ( 6p tc h o w k r o l eo ft h en e u ri s o l a t e dp e r f u s e dg u i n e ap i gl i v e r a mj1 ) ：g 8 6 3 8 7 2 o p e p t i d e ，b o m b e s i n ，i nb i l es e c r e t i o n y a l ejb i o lm e d1 9 9 7 7 0 ：4 0 9 4 1 6 c h ow k ，m e n n o n ea i n t r a c e l l u l a rp hr e g u l a t i o ni nb o m b e s i n s t i m u l a t e ds e c r e t i o ni ni s o l a t e db i l ed u c tu n i t sf r o mr a t1 i v e r a mjp h y s i 0 1 1 9 9 8 ，2 7 51 0 2 8 - 1 0 3 6 王国良t r h 的分布及生理作用生理科学进展，1 9 9 0 ，2 1 ：2 7 5 - 2 7 8 夏钦贵t r h 与胃肠道功能生理科学进展，1 9 9 3 ，2 4 ：1 6 8 - 1 7 0 y o k o h a m as y o n e d am e f f e c to fc e n t r a lc o r t i c o tr o p i n r e l e a s i n gf a c t o ro nc a r b o nt e t r a c h l o r i d e i n d u c e da c u t el i v e ri n j u r yi nr a t s a mjp h y s i o l ，1 9 9 9 ，2 7 6 ( 3p t1 ) ：6 2 2 6 2 8 1 2浸水成馓对大鼠且u 汁分泌和畸组织中氨摧陵台量的蟛响文献综述综述二应激条件下脑组织中生物活性物质变化的研究进展摘要应激反应的主要特征之一便是下丘脑垂体一肾上腺皮质轴被激活，同时，免疫系统通过分泌细胞因子作用于神经内分泌系统，启动并参与应激反应。有很多神经中枢参与了应激反应：如海马参与整合感知的信息、解释环境信息的意义及调控行为反应和神经内分泌反应；杏仁核是应激性行为反应以及自主神经和神经内分泌反应的执行部位；下丘脑室旁核则有直接激活h p a 轴的作用。在应激刺激下，脑组织中的生物活性物质发生了很大变化，主要是神经递质的分泌、n a + k + 一a t p 酶的活性、s o d 与m d a 含量、h s p 表达的变化情况等。关键词：应激、脑组织、神经内分泌、中枢、生物活性物质、变化分类号：q 4 2 6t h ep r o g r e s so fs t u d i e so nt h ec h a n g e so fb i o i o g i ca c t i v es u b s t a n c e sj nb r a i nt i s s u eu n d e rs t r e s aa b s t r a o to n eo ft h em a i nc h a r a c t e r i s t i c so fs t r e s sr e a c t i o ni st h ea c t i v a t i o no ft h eh y p o t h a l a m i c p i t u i t a