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文档简介
实验目的,1了解相差显微镜观察活细胞的基本原理。2了解相差显微镜的特殊组件和位置。3掌握调节相差显微镜的基本步骤。,实验原理,人的眼睛能感知光强弱(振幅)和颜色(波长)的变化,但不能感知光相位的变化。活细胞大多数高度透明,光波通过时不被吸收,其振幅和波长基本不变,即光强弱和颜色改很少,人眼睛几乎感觉不到。相差显微镜可将光相位的变化转变为振幅的变化,从而使看不清的活细胞结构成为可见。,相差显微镜原理及结构,相差显微镜的部件,环状光阑,环状光阑是在玻璃片上喷涂金属薄膜借以挡光,只留下环形透光窄缝的光阑。它能使来自反光镜的直射光只能从环状部分通过,形成一个空心圆筒状的光柱,经聚光器并照射到标本以后,就产生两部分光,一部分是直射光,另一部分是经过标本后产生的衍射光,这两部分光经物镜内相板的作用而改变了光的相位和振幅。在相差聚光器下面装有一个转盘,盘上镶有宽狭不同的环状光阑,在不同光阑边上刻有10、20,40等字样,这表示当用不同放大倍数的物镜时,必须配合相应的环状光阑。,麦克奥迪BA200显微镜,相差显微镜的使用,相差显微镜实验方法和步骤,安放相差装置取下原有聚光器和物镜,分别安上相差聚光器和相差物镜,并将转盘转到“0”标记的位置。用10相差物镜调光。调节光源。合轴调节取下原有目镜,换上合轴调整望远镜。上下移动望远镜筒,至能看清物镜中的相板环为止。放回目镜取下合轴调整望远镜,放回目镜即可进行观察。更换不同放大倍数的相差物镜时,每次都要按上述方法重新调节。,材料与试剂,(一)仪器相差显微镜。(二)材料口腔上皮细胞,载玻片,盖玻片,牙签,滤纸条和指甲油。(三)试剂生理盐水。,实验步骤,1.样品制备在一张清洁无痕的载玻片上滴一小滴生理盐水,用牙签刮自己的口腔粘膜少许与生理盐水混匀,盖上清洁的盖玻片,用滤纸条吸掉盖片周围多余的水分。,相差显微镜观察,2.将10 x相差物镜旋入光路。3.将相应于10 x相差物镜的相差聚光器的环状光阑移入光路中,完全打开聚光孔径光阑。4.将样品置于载物台上,用聚焦螺旋聚焦样品。5.用柯勒照明法调节聚光器6.观察物镜后焦面,调节
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