（动物学专业论文）家蝇卵、幼虫和蛹的低温保存.pdf

上官松家蝇卵，幼虫和蛹的低温保存 家蝇卵、幼虫和蛹的低温保存 专业：动物学 硕士生：上官松 导师：张古忍教授 摘要 家蝇m u s c a d o m e s t i c a l i n n a e u s 幼虫( 蝇蛆) 营养丰富、养殖优势突出、利用价 值高，是国内外开发利用其蛋白资源较早和近年来研究较多的资源昆虫物种之 一。但在实际生产中，常常需要调节蝇卵的孵化时间和蝇蛹的羽化时间及延缓幼 虫的发育期，以满足生产过程中对蝇种的需求。因此，本文研究了蝇卵、幼虫和 蛹的低温冷藏，探讨了蝇卵、幼虫和蛹的低温冷藏条件，其结果将为家蝇集约化 养殖中种质资源的保存提供一定的理论依据。 蝇卵、幼虫的冷藏温度为5 0 c 、8 0 c 、1 0 0 ( 2 、1 5 0 c 和2 5 0 c ( 对照) ，四个日龄 蛹的冷藏温度为5 0 c 、1 0 0 ( 2 、1 5 。c 、2 0 0 c 和2 5 0 c ( 对照) 。分别比较了低温保存 后卵孵化率、幼虫化蛹率和羽化率、蛹的羽化率等参数。结果表明，在5 0 c 、8 0 c 、 l o o c 和1 5 0 c 条件下家蝇卵分别能保存9 d 、5 d 、3 d 和l d ，同一温度下卵孵化率 均随着处理时间的延长而降低，而同一处理时间下卵孵化率均随着处理温度的升 高而升高，同一温度下不同时问处理和相同处理时间的不同温度处理的卵孵化率 差异显著。 蝇蛆的低温保存结果表明，不同温度条件下，随贮存期的延长，化蛹率和羽化 率都呈下降趋势，但同一处理时间下化蛹率和羽化率均随着处理温度的升高而升 高。蛹畸形率在同一温度下则随着处理时间的延长而升高，相同处理时间下却均 随着处理温度的升高而降低。羽化畸形率的变化无规律性。 同一日龄蛹在相同温度条件下的羽化率均随着处理时间的延长而降低，而同 一处理时间下羽化率均随着处理温度的升高而升高。但相同处理条件下，2 日龄蛹 的羽化率显著高于1 、3 、4 同龄蛹的羽化率，而1 、2 日龄蛹的保存时间又长于 3 、4 日龄蛹。 经比较分析，8 0 c 是保存卵的最佳温度，能够保存5 d 且孵化率在5 0 左右； 1 0 0 c 是幼虫冷藏的最适温度，贮存7 d 左右时化蛹率和羽化率分别在8 0 和5 0 左右：2 同龄蛹是蛹期的最佳保存时期，在l o o c 条件下贮存2 0 d 后的羽化率仍在 5 0 左右。此条件组合下家蝇不同虫态的低温冷藏在生产中具有较大的应用价值。 关键词：家蝇：卵：幼虫；蛹；冷减 n 上官松家蝇卵、幼虫和蛹的低温保存 p r e s e r v a t i o no fh o u s e f l ye g g s 、l a r v a ea n dp u p a ea t l o wt e m p e r a t u r e m a j o r ：z o o l o g y n a m e ：s h a n gg u a n s o n g s u p e r v i s o r ：p r o f e s s o rz h a n g g u r e n a b s t r a c t h o u s e f l ym u s c a d o m e s t i c al ( d i p t e r a ：m u s c i d a e ) i so n eo fi n s e c ts p e c i e sw h i c h h a v eb e e ns t u d i e da n du s e di nr e c e n ty e a r sb e c a u s eo fi t sh i g h l yn u t r i t i o u sp r o t e i na n d e a s yt ob er e a r e df o rm a s sp r o d u c t i o n i no r d e rt om e e tt h en e e do fh o u s e f l ye g g s , l a r v a ea n dp u p a ei l ii n d u s t r i o u sp r o d u c t i o n , i ti sn e c e s s a r yt oa d j u s tt h eh a t c h i n gt i m e o fe g g sa n dd e l a yp u p a ea n dl a r v a eg r o w t h i ti sw o r t h w h i l et oi n v e s t i g a t eh o wt o p r e s e r v eh o u s e f l ye g g s 、l a r v a ea n dp u p a e a tl o w t e m p e r a t u r e t h er e s u l t sw i l lp r o v i d e t h e o r e t i c a lb a s i sf o r t h er e s e r v a t i o no f s e e dr e s o u r c e si nh o u s e f l ym a s sp r o d u c t i o n i nt h ep r e s e n tt h e s i s h o u s e f l ye g g sa n dl a r v a rw e r es t o r e da t5 0 c 、8 。c 、1 0 。c 、 1 5 。ca n d2 5 。ca n dp u p a ew c r er e s e r v e da t5 0 c 、1 0 。c 、1 5 。c 、2 0 0 ca n d2 5 。c t h e r e s u l t ss h o w e dt h a th o u s e f l ye g g sc o u l db ep r e s e r v e9 d ，5 d , 3 da n dl da t5 0 c 、8 0 c 、 1 0 0 ca n d1 5 。c ，r e s p e c t i v e l y h a t c h i n gr a t eo f e g g s ，w h i c hi ss i g n i f i c a n td i f f e r e n ti nt h e s a l t l et e m p e r a t u r ea n dw i t ht h es a m et i m e 。d e c r e a s e d 、 r i t l lt h ep r o c e s s i n gt i m ef o rt h e e x t e n s i o nw i t i lt h es a m et e m p e r a t u r e a n di n c r e a s e dw i t ht h er i s eo ft e m p e r a t u r eu n d e r t h es a m et i m e t h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c eb e t w e e nt h eh a t c h i n gr a t e so fe g g s s t o r e da tt h es a l l l et e m p r e t u r ea n dt h es a m et i m e t h er e s u l t so fl a r v es t o r a g ea tl o wt e m p r e t u r e sa l s os h o w e dt h a tt h ep u p a er a t e so f l a r v a ea n dt h ee m e r g e n c er a t e so fa d u l t sf r o mt h es t o r e dl a r v a eg r a d u a l l yd e c l i n e dw i t h s t o r a g et i m ea n di n c r e a s e dw i t ht h es a l t l es t o r e dt i m ea tat e m p r e t u r e 1 1 1 t h ee m e r g e n c er a t e so f a d u l t sf r o mt h eg o r e dp u p a ed e c r e a s e dw i t ht h ep r e s e r v i n g t i m ei nt h es a m et e m p e r a t u r e ，b u ti n c r e a s e dw i t ht h er i s eo f t e m p e r a t u r ei nt h es a m ed a y u n d e rt h es a m ep r e s e r v i n gc o n d i t i o n s ，t h ee m e r g e n c er a t e so ft h ea d u l t sf r o ms t o r e d2 d a y so l dp u p a ei ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h o s ef r o mt h es t o r e dld a y ，3d a y sa n d4 d a y so l dp u p a e t h i sm e a n tt h a t1d a ya n d2c l a y so l dp u p a ec o u l dh ek e p tm o r et i m e t h a n3a n d4d a y so l dp u p a e i ns u m m a r y ，t h et e m p e r a t u r eo f8 0 cw a st h eb e s tt e m p e r a t u r ef o rp r e s e r v i n ge g g s a n dt h eh a t c h i n gr a t eo fe g g ss t o r e df o r5d a y ss t i l lk e p t5 0 ：i o 。ci st h eo p t i m u m t e m p e r a t u r ef o rs t o r i n gl a r v a ea n dt h ep u p a t i n gr a t ea n de m e r g e n c er a t eo f a d u l t sf r o m t h el a r v a es t o r e df o r7d a y sw a s8 0 a n d5 0 ，r e s p e c t i v e l y ；1 0 0 cw a st h ep r o p e r t e m p r e t u r ef o rs t o r i n g2c l a y so l dp u p a ea n d t h ee m e r g e n c er a t eo ft h es t o r e dp u p a ew a s 5 0 a f t e rs t o r e df o r2 0d a y s t h ec o n d i t i o n sf o rr e s e r v i n gd i f f e r e td e v e l o p m e n t a ls t a g e s o f h o u s e f l ys h o w e da b o v e w e r ev e r yi m p o r t a n ti nt h em a s sp r o d u c t i o no f h o u s e f l y k e yw o r d s ：h o u s e f l y ；e g g ；l a r v a ；p u p a ；c o o ls t o r a g e 上官松家蝇卵、幼虫和蛹的低温保存 第1 章前言 家蝇( m u s c ad o m e s t i c al ) 属双翅 寻( d i p t e r a ) 、环裂亚 j ( c y c l o r r h a p h a ) 、蝇 科( m u s c i d a e ) 、家蝇属的医学昆虫，是绝大多数地区的优势种，与人类的关系极 为密切，能传播许多疾病，对人类危害严重( 赵慰先，1 9 8 3 ) 。人们很早就开始对 其饲养、细菌学、生物学、防治、利用等方面进行了大量而又卓有成效的研究。 家蝇幼虫体内营养物质含量十分丰富( 李广宏，1 9 9 7 ) 。蝇蛆含粗蛋白质5 9 一 6 5 ，脂肪2 6 一1 2 ，无论是原物质或是干粉，蝇蛆的粗蛋白质含量都和鲜鱼、 鱼粉及肉骨粉相近或略高。此外，蝇蛆的营养成分较为全面，含有动物所需要的 多种氨基酸，且每一种氨基酸含量都高于鱼粉，必需氨基酸总量是鱼粉的2 3 倍， 蛋氨酸含量是鱼粉的2 7 倍，赖氨酸含量是鱼粉的2 6 倍( 张廷军，1 9 9 9 ；李广宏， 1 9 9 7 ：王达瑞，1 9 9 1 ) 。常量元素和微量元素含量也非常丰富，常量元素以钾、钠、 钙、磷含量为高，微量元素以锌、镁、铁、铜、硒、锗、锰含量较高( 金恩汝，1 9 9 6 ) ； 维生素含量也十分丰富，以b 族维生素含量最高( 张廷军，1 9 9 9 ；任国栋，2 0 0 2 ； 吴青华，2 0 0 6 ) 。在当前世界鱼粉资源紧缺、价格暴涨的情形下，如此丰富的营 养成分使家蝇成为当今世界备受关注的资源昆虫之一( 雷朝亮，1 9 9 7 ，1 9 9 8 ：赖凡， 1 9 9 8 ；陈晓鸣，1 9 9 9 ) 。 自1 9 6 9 年以来，许多国家如美国、苏联、韩国、日本等先后进行了蝇蛆工厂 化生产的研究。1 9 7 9 年以来，我国许多地方进行了蝇蛆的小型实验和生产，但实 际生产的规模有限( 孙耘芹，1 9 5 6 ：b e n n e t o v a ，1 9 8 1 ；宋榆钧，1 9 9 6 ：李国明， 1 9 8 1 ；e l v i n , 1 9 8 4 ；胡广业和张文忠，1 9 8 8 ) ，近年来中型生产和工厂化生产虽然 也取得了成功，但实际生产中仍存在一些问题。如生产中头几批种蝇个体大、生 命力强、产卵率高。但随着生产的进行，种蝇不断从子代中留取，经过十几代后， 种群开始退化：具体表现为个体变小、飞行能力减弱、产卵率降低。又如规模化 生产下，在实际生产中，根据具体生产能力的需要和日产卵量的变化，常常需要 调节蝇卵的孵化时间来保持平衡的生产规模，有时还需调节蝇蛹的羽化时间及延 缓幼虫的发育期，以满足生产过程中对蝇种的需求。因此，本文以此为契机，研 究了蝇卵、蝇蛆和蝇蛹的低温冷藏，探讨了蝇卵、蝇蛆和蛹的低温冷藏条件，主 中山人学硕i 。学位论文 要研究的问题包括：( 1 ) 家蝇卵5 0 c 、8 0 c 、1 0 0 c1 5 0 c 及以上温度处理下卵孵化率 的变化；( 2 ) 家蝇幼虫5 0 c 、8 0 c 、1 0 0 c1 5 0 c 和2 0 温度处理下化蛹率、化畸形蛹 率、蛹羽化率、蛹羽化畸形率的变化；( 3 ) 四个日龄家蝇蛹分别在5 0 c 、8 0 c 、1 0 0 c 1 5 0 c 和2 0 0 c 温度处理下羽化率、羽化畸形率和总羽化率的变化。其结果将为家蝇 集约化养殖中种质资源的保存提供一定的理论依据。 上官松家蝇卵、幼虫和蛹的低温保存 第2 章材料和方法 2 1 虫源 家蝇膨d o m e s t i c a 采自广东省清新县的农贸市场，前期在实验室内连续饲养 驯化八代以上，然后在2 5 4 - 1 0 c 、1 2 l ：1 2 d 和r h6 0 8 0 条件下饲养两代后备 用。 2 。2 家蝇的实验室饲养 2 2 1 幼虫和成虫饲料及产卵料的配制 主要参照雷朝亮( 2 0 0 2 ) 的配方和本实验室对饲料配方的改进。幼虫的饲料配方 为：麦麸9 5 0 9 ，酵母粉5 0 9 ，水1 3 0 0 m l 。混合均匀后装) k 6 0e r a x 4 0c m x 3 0e m 的塑 料盆中备用；成虫的饲料配方为：牛奶9 0 + 白糖1 0 混合；产卵料的配方为：麦 麸2 4 9 9 ，硫酸胺l g ，水2 5 0 m l 。在3 0c m x 2 0 c m x l 0e m 的塑料盆中混合均匀，然后再 分装于数个一次性塑料碗中。 2 2 2 饲养条件 室内饲养的条件为2 5 4 - 1 0 c ，1 2l ：1 2d ，r h7 0 4 - 1 0 ，如果光线不足，用4 0w 的日光灯补充光照至1 2l 。 2 2 3 饲养方法 在成虫的产卵高峰期，把装有产卵料的塑料碗在上午9 ：0 0 放入成蝇饲养笼中， 下午1 7 ：0 0 左右从饲养笼中取出。收集含有虫卵的产卵料倒入一托盘中用玻璃棒 轻轻搅拌均匀，并将其均分成若干等分。依上文的配方配制培养基，按照每塑料 盆( 3 0c m x 2 0 c m x l 0c m ) 一等份把产卵料均匀铺撒在培养基的表面。为保持卵孵化 期的湿度，在塑料盆表面蒙上湿润的毛巾，翌日卵孵化后即可以取走。每日定期 检查盆内幼虫的密度、食物的充足情况及培养基的温度等，每个塑料盆饲养幼虫 约3 0 0 0 5 0 0 0 头，根据需要进行加湿、分盆、补充培养基和翻动培养基等处理， 使幼虫能够健康的生长。 中山人学硕l ：学位论文 饲养到第五日待幼虫将要化蛹时，将饲料连同幼虫到入分离箱内分离。待幼 虫分离完全后，收集分离箱中的幼虫并转入化蛹盆中，等待化蛹。 将收集的蛹置于饲养笼内的瓷盘中，并在笼内放置食物和饮用水。食物放置 在瓷盘内，饮用水装在瓷碗内。成蝇羽化以后每天定期更换食物和饮用水。 2 3 家蝇卵的低温保存 收集家蝇室内种群卵块若干，置于内含海绵且上铺湿润滤纸的培养皿中，并 在培养皿内加入清水至海绵充分湿润。设5 个处理温度，5 0 c 、8 0 c 、1 0 0 c 、1 5 0 c 和2 5 0 c ( 对照) ，将5 个含有蝇卵的培养皿分别置于不同温度下保存。在第1 、2 、 3 、4 、5 、6 、7 、8 和9d 时分别从上述5f 培养皿中取出一定数量的卵并放在湿 润滤纸上，置于2 5 0 c 下孵化，于孵化后次日在双目体式显微镜下检查卵壳数和死 卵的数量。每处理三个重复。 2 4 家蝇幼虫的低温处理 分离收集饲养的第5 r 幼虫，置于5 个保鲜盒中。设5 个处理温度，5 0 c 、8 0 c 、 1 0 0 c 、1 5 0 c 和2 5 0 c ( 对照) ，将5 个含有蝇蛆的保鲜盒分别置于不同温度下保存。 在第l 、2 、3 、4 、5 、6 、7 、8 、9 和l o d 分别从上述5 5 保鲜盒中取出一定数量 的幼虫并放在一次性的大塑料杯中，盖上有孔的盖子置于室温化蛹。待化蛹完全 后取出记录蛹和畸形蛹的的数目。然后将蛹转入另一塑料杯中置于室温羽化，记 录羽化的时间和羽化率。每处理三个重复。 2 5 家蝇蛹的低温处理 分离收集1 只龄蛹、2 日龄蛹、3 日龄蛹和4 日龄蛹，置于内挚纸巾的大烧杯。 设5 个处理温度，5 0 c 、1 0 0 c 、1 5 0 c 、2 0 0 c 和2 5 0 c ( 对照) 。将收集的每一日龄蛹分 为5 份，分别放置在不同温度下保存。在第1 、5 、1 0 、1 5 、2 0 和2 5 d 时分别从每 一日龄蛹的每个处理温度中取出2 0 0 头放在内挚滤纸且上盖网盖的玻璃瓶中。一个 置入养虫笼内羽化饲养并使其产卵，另外两个置于室内羽化任其死亡。待羽化完 全后取出记录羽化数目、羽化畸形数目及未羽化蛹数目，并记录羽化的时间、产 卵时间和产卵历期。每处理三个重复。 上官松家蝇卵，幼虫和蛹的低温保存 2 6 数据分析 2 6 1 蝇卵低温处理数据分析 家蝇卵孵化率按下列公式计算： 孵化率= ( 孵化数总卵数) l o o 。 卵孵化率数据经a r c s i n 转换后进行方差分析和多重比较( s a s ，1 9 8 9 ) ，以阐明 各处理间的差异显著性。 2 6 2 幼虫低温处理数据分析 家蝇蛹的化蛹率、畸形蛹率、羽化畸形率和羽化率按下列公式计算： 化蛹率= ( 育蛹头数总幼虫数) l o o ； 蛹畸形率= ( 畸形蛹数总蛹数) x 1 0 0 ； 羽化率= ( 羽化数，总蛹数) 1 0 0 ： 成虫畸形率= ( 畸形成虫数总蛹数) 1 0 0 。 其中化蛹率为同一温度下处理相同天数的3 个重复的平均数，羽化率和羽化畸 形率为3 个重复的平均数。化蛹率、蛹畸形率、羽化率和成虫畸形率数据经a r c s i n 转换后进行方差分析和多重比较( s a s ，1 9 8 9 ) ，以阐明各处理间的差异显著性。 2 6 3 蛹低温处理数据分析 家蝇蛹的羽化率、羽化畸形率和总羽化率按下列公式计算： 羽化率= ( 羽化数总蛹数) 1 0 0 ； 羽化畸形率一( 羽化畸形数总蛹数) l o o ； 其中羽化数一正常羽化头数+ 畸形羽化头数，正常羽化数和畸形羽化数为同一 日龄家蝇蛹在同一温度下保存相同天数的3 个重复的平均数。羽化率和羽化畸形率 数据经a r c s i n 转换后进行方差分析和多重比较( s a s ，1 9 8 9 ) ，以阐明各处理间的差 异。 中山大学硕仁学位论文 第3 章结果与分析 3 1 家蝇卵的低温保存 家蝇卵在5 0 c 、8 0 c 、1 0 0 c 、1 5 0 c 等温度处理条件下于不同时间取出后的孵 化率见表3 1 ，其中正常孵化即低温处理o d 的结果为对照。 由表可知，家蝇卵在5 0 c 、8 0 c 、1 0 0 c 、1 5 0 c 下分别能保存9 d 、5 d 、3 d 和l d ， 同一温度下孵化率均随着处理时间的延长而降低，而同一处理时间下孵化率均随 着处理温度的升高而升高，即孵化率与处理时间成负相关，与处理温度成j 下相关。 5o c 温度下，卵孵化率随着处理时间的延长而降低，保存l 、2 、3 、4 、5 、6 、 7 、8 、9 d 的孵化率分别为8 6 9 4 5 、8 3 1 1 5 、7 6 6 3 7 、5 5 0 4 2 、3 4 9 8 5 、2 4 1 1 9 、 2 0 2 6 3 、5 7 0 3 和0 ，均显著低于对照。处理3 天后，卵的孵化率开始急剧降低， 至第9 天则完全不能孵化。以孵化率达5 0 为保存的极限温度和时间，在5o c 温度 下家蝇卵的最长保存期为4 天。 8 0 c 温度下，卵孵化率随着处理时自j 的延长而降低，保存l 、2 、3 、4 、5 d 的 孵化率分别为9 0 1 6 1 、8 6 2 7 7 、8 6 2 7 7 、6 3 0 2 2 和4 8 2 1 0 ，同样均显著低 于对照。处理3 天后，卵孵化率开始急剧降低，至第5 天在低温下开始孵化出幼虫。 因此，蝇卵在8 0 c 温度下经不同时间的保存，在保存相同天数的条件下，卵孵化 率要高于5 0 c 温度处理的孵化率，且保存5 天后的孵化率接近5 0 。 1 0 0 c 温度下，卵只能保存3d ，孵化率随着保存时间的延长而降低，保存1 、 2 、3d 的孵化率分别为9 0 0 9 6 、8 6 2 7 7 和8 4 8 3 0 ，均显著显著低于对照。 1 5 0 c 温度下，家蝇卵仅能保存ld ，于次日取出时都己孵化，说明1 5 0 c 及以 上温度不能延长家蝇卵的孵化期。 上官松家蝇卵，幼虫和蛹的低温保存 表3 , 1 低温保存对家蝇卵孵化率( ) 的影响 t a b l e3 , 1e f f e c t so fl o wt e m p r e t u r eo nt h eh a t c h i n gr a t e ( ) o fh o u s e f l ye g 擎 ( m e a n 士s d ) 注：表中同一行平均数后不同小写字母表示不同温度条件下保存相同天数后卵孵化率差异显著，其中。i d ： f = 6 6 4 , p 0 0 5 ；2 d ：f = 3 9 9 8 ，p 0 0 1 ；3 d ：f = 4 2 1 ，p 0 0 5 ；i d ：f = 2 7 1 4 , p 0 0 l , 5 d ：f ：1 6 7 8 p 00 1 ；同一列 中平均数后不同的大写字母表示相同温度下保存不同天数的卵孵化率差异显著，其中，5 0 c ：f = 3 8 8 s s , p 0 0 1 ；8o c ：f - - - 2 6 5 4 2 p 0 0 1 ；1 0 ：f = 6 2 吣i n o t e ：t h ed i f f e r e n tl i t t l el e t t e r si nal i n ei n d i c a t e dt h a th a t c h i n gr a t eo f e g g sp r e s c r v e r e dd i f f e r e n td a y s 越d i f f e r e n t t e m p e t m u r e sa g es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t i d ：f = 6 6 4 , p 0 0 5 ；2 0 zf = 3 9 9 8 , p 0 0 1 ；3 d ：胤2 1 p 0 0 5 ；l d ： f - u 2 7 14 ，p 0 0 1 ；5 d ：f = i 矗7 8 ，p 0 0 1 ；t h e d i f l e t t n t c a p i t a l l e t t e r s w i t h i na c o l u m n i n d i c a t e d t h a th a t c h i n gr a t e s o f e g g sr c s e r v e r dd i f f e r e n td a y sa ts a m et e m p r e t u r ea g es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t 5 ：f = 3 8 8 站，p 0 0 1 ；8 0 c ：f = 2 6 5 4 2 p 0 0 1 ；i o ：f = 6 2 傩i 3 2 家蝇幼虫的低温保存 3 2 1 家蝇幼虫低温保存后的化蛹率 家蝇幼虫经不同时间低温保存后的化蛹率见表3 2 。结果表明，在5 。c 、8 0 c 和 1 0 0 c 温度下，幼虫均可保存1 0 d 以上，化蛹率均随着保存时间的延长而降低。在1 5 o c 条件下，幼虫保存2 d 后即已化蛹。 - - 中山大学硕 ：学位论文 表3 2 低温保存对家蝇幼虫化蛹率( ) 的影响 t a b l e3 2e f f e c t so fl o wt e m p r e t u r ao nt h ep u p a t i n gr a t e ( ) a f t e rh o u s e f l y l a r v a es t o r e da tl o wt e m p r e t u r e s ( m e a n s d ) 注：删一行、f 均数后小i 司小写7 - 母表尔不司温度象件下保存相天数后化蛹率差异姓善，其中，i d ：f = 4 1 2 ， p 0 0 5 ：2 d ：f = 3 9 6 ，p 0 0 5 3 i ；3 d ：f = 2 i 3 7 p 00 l ：4 d ：f = 1 4 1 3 ，p 0 0 l ；5 d ：f k 2 23 1 ，p 0 0 i ：6 d ：j p 之2 2 2 p 0 0 1 ；7 d ：f = 1 7 ，4 2 。p 00 1 ；8 d ：f = 2 0 2 ，p 0 2 1 3 4 ；9 d ：f = 5 03 5 ，p o 0 1 ；1 0 d ：f = 10 4 ，p 04 0 8 8 ；同一列中甲 均数后币旧的大写字母表示相同温度下保存不同天数后的化蛹率差异娃著，其中，5 ：f = 3 0 1 2 3 。p 0 0 0 0 1 ； 8 。c ：，_ 2 8 5 8 5 ，p 0 0 0 0 1 ；l o 。c ：户l ”，4 9 p 0 0 0 0 1 ：1 5 ：户o 3 0 , p o 7 5 4 2 n o t e ：t h ed i f f e r e n tl i t t l el e t t e r si nal i n ei n d i c a t e dt h a tt h ep u p a t i n gr a t ea 赍e rl a r v a ep r e s e r v e r e dd i f f e r e n td a y sa t d i f f e r e n tt e m p e r a t u r e sa r es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t 1 d ：f = 4 a 2 p 0 0 5 ；2 d ：辟3 9 6 , p 0 0 5 3 1 ；3 d ：f - 。2 1 3 7 , p 0 o i ； 4 d ：f = 1 41 3 ，p 0 0 l ；5 d ：f - - 2 2 3 l ，p 0 0 1 ：6 d ：f - - 2 2 2 2 ，p 0 0 1 ；7 d ：f _ 1 7 4 2 ，p 0 ，0 1 ；8 d ：f = 2 0 2 ，p 0 2 1 3 4 ；9 d ： f = 5 0 3 5 p 0 0 1 ：i o d ：f = i 0 4 p 04 0 8 8 ；t h ed i f f c r e n tc a p i t a ll e t t e r sw i t h i nac o l u m ni n d i c a t e dt h a tt h ep u p a t i n g r a t e sa f t e rl a r v a ep r e s e r v e r dd i 髓r e n td a y sa ts a m et e m p r e t u r ea l es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t5 。c ：f = 3 0 1 2 3 p 0 0 0 0 l ： 8 0 c ：户2 8 5 8 5 p 0 0 0 0 1 ：1 0 。c ：f - 1 7 54 9 ，p 0 0 0 0 1 ；1 5 ：，= o 3 0 ，p 0 7 5 4 2 3 2 2 家蝇幼虫低温保存后的蛹畸形率 家蝇幼虫经低温保存不同天数后的蛹畸形率如表3 3 。结果表明，家蝇幼虫 5 。c 、8 0 c 、1 0o c 和1 5 。c 温度保存后置于室温化蛹，蛹畸形率均随着保存时间的延 长基本呈上升趋势。在5 0 c 和1 0o c 温度条件下，幼虫经l o d 保存后，蛹畸形率超过 4 0 。但在8 。c 条件下，蛹畸形率的增加趋势明显低于5 。c 和1 0 0 c 的处理。 在前4 d 的贮虫期内，5 0 c 、8 0 c 和1 0 d c 处理下的蛹畸形率差异不十分显著， 1 5 0 c 处理下的蛹畸形率则显著高于前三者；在4 7 d 的贮存期间，5 0 c 和8 0 c 处理 间差异不显著，而1 0 0 c 的蛹畸形率上升较快且显著低于前两者；贮存期超过7 d 后，三个处理温度间蛹畸形率差异极其显著。因此，家蝇幼虫在不同温度下贮 8 上官松家蝇卵、幼虫和蛹的低温保存 存不同时间后，同一温度下蛹畸形率随贮存时间的延长而升高，而同一贮存时 间下蛹畸形率基本随着处理温度的升高而升高。 表3 3 低温保存对家蝇幼虫蛹畸形率( ) 的影响 t a b l e3 3e f f e c 妇o fl o wt e m p r e t u r eo nt h ed e f o r m e dp u p ar a t ea f t e rh o u s e f l y l a r v a es t o r e da tl o wt e m p r e t u r e s ( m e f l n 士s d ) 注：同一行平均数后不同小写字母表示不同温度条件下保存相同天数后的蛹畸彤率差异显著，其中，l d ：，兰 2 1 0 , 肛0 1 7 8 1 ；2 d ；，- 5 7 4 , 氏0 0 2 1 5 ；3 d ：卢5 6 2 p n 0 4 2 1 ；4 0 ：卢1 1 0 , p 0 3 9 0 6 ；5 d ：辟2 8 0 , 肛o 1 3 8 2 ； 6 d ：p = 1 1 1 3 ，尸锄o l ；7 d ：f - 6 6 5 ，p o 0 3 0 l ；跚；，- 3 0 6 2 ，p 哪0 0 l ；9 d ：，_ 1 6 4 0 ，p 0 0 l ；1 0 d ：庐1 6 8 8 , p 0 0 1 ；同一列中平均数后不同的大写字母表示相同温度下保存不同天数后的蛹畸形率差异显著，其中，5 0 c ： f ；- 2 6 8 8 p 0 0 0 0 1 ；8 ：脚2 0 ，p 0 0 0 0 1 ；1 0 ：户7 3 17 ，p o o o o l ；1 5 ：，7 8 5 ，p 哪0 2 1 l n o t e - t h ed i f f e r e n tl i t t l el e t t e r si nal i n ei n d i c a t e dt h a tt h ed e f o r m e dp u p a er a t ea f i e rl a r v a ep r c s e r v c r e dd i f f e r e n t d a y sa td i f f c r m tt e m p e r a t u r m 撒s i g n i f i c a n t l yd i f f e f e n t i d ：户2 t o , 肛0 1 7 8 1 ：2 d ：f = - 5 7 4 , 肛0 0 2 1 5 ；3 d ，- 5 6 2 ，肛0 0 4 2 1 ；4 d ：卢1 1 0 。， o 3 9 0 6 ；5 d ：户2 s o , 凡0 ，1 3 8 2 ；6 d ：f - 1 1 1 3 ，p 0 0 1 ；7 d ：辟6 6 5 ，肛0 0 3 0 1 ； 8 d ：户3 0 6 2 p 0 0 0 1 ；9 d ：户1 6 4 0 , p 铘0 1 ；1 0 d ：卢1 6 8 8 。p 0 0 1 ；t h e d i f f e r e n tc a p i t a l l e t t e r s w i t h i n a c o l u m n i n d i c a t e dt h a tt h ed e f o r m e dp u l m er a t e sa t i c r a l v a t ! p r e v e r dd i f f c n td a y sa t mt c m 删f e n l ms i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t 5 ：f - - 2 6 鹅。p 哪0 0 0 1 ；8 0 c ：f = 9 2 0 p 0 0 0 0 1 ：t 0 ：，- 7 3 1 7 , p 如0 0 0 l ；t 5 ：仁7 8 5 ，p 0 0 2 1 l 3 , 2 3 家蝇幼虫低温保存对成虫羽化率的影响 家蝇幼虫经低温保存后的成虫羽化率见表3 4 。家蝇幼虫在5 0 c 、8 0 c 、1 0 。c 和 1 5 温度条件下贮存不同时间后，置于室温化蛹和羽化，成虫羽化率表现出下降 的趋势。在前3 个温度条件下，幼虫经1 0 d 的低温保存后，成虫羽化率下降n 2 0 左右。经过2 d 的贮存后，各个温度的羽化率没有明显差异，均在8 0 左右；经3 9 中山大学硕 擘位论立 - - s d 的贮存后，8 0 c 条件下羽化率下降较快，甚至低于5 0 c 的处理：保存5 d n 后， 5 0 c 和1 0 0 c 条件下，成虫羽化率下降都加快；经过1 0 d 的保存后，3 个处理温度下 的成虫羽化率分别只有1 0 3 8 、1 6 5 5 和2 2 5 5 ，己不具备保存的价值。因此， 家蝇幼虫经过低温保存后，蛹的发育受到的影响较大，致使成蝇羽化率降低，但 比较3 个温度间羽化率的差异，1 0 0 c 是较好的贮存温度，幼虫贮存6 d 后的羽化率 为5 8 3 1 。 表3 4 家蝇幼虫低温保存对成虫羽化率的影响 t a b l e3 4e f f e c t so fl o wt e m p r e t u r eo nt h ee m e r g e n c er a t ea f t e rh o u s e f l yl a r v a e s t o r e da tl o wt e m p r e t u r e s ( m e a n s d ) 注：同一行、f 均数后水m d , 写字母表求4 i i 卅温度条件下保存相阿天数石的成虫制化宰差异显著，其中，l d ： f - 6 0 0 p o 0 1 9 1 ；2 d ：f - 0 j 8 6 p 0 4 9 8 3 ；3 d ；仁47 2 7 ，p 0 0 7 0 3 ；4 d ：f i1 3 8 4 p q 0 0 5 7 ；5 d ：f - 2 4 5 3 ， p 0 0 0 1 3 ；6 d ：户46 6 。肚0 0 6 0 1 ；7 d ：卢2 0 8 ，氏0 2 0 6 3 ：8 d ：户9 9 6 ，p 0 0 1 2 4 ；0 d ：卢2 23 8 尸( 0 0 0 1 7 ： 1 0 d ：，k7 6 4 ，p 0 0 2 2 4 ；同一列中平均数后不同的大写字母表示相i 司温度下保存不同天数后的成虫羽化率 差异娃著，其中，5 ：f = 1 0 2 6 6 ，p 0 0 0 1 ；8 ：f = 6 9 3 7 ，p 0 0 0 0 1 ；1 0 。c ：f 兰5 0 58 p 0 0 0 0 1 ；1 5 ：产9 2 2 ， p 0 0 1 4 8 n o t e ：t h ed i f f e r e n tl i r l el e t t e r si nal i n ei n d i c a t e dt h a tt h ee r t l e r g e n e er a t ea f t e rl a r v a ep r e s e r v c r e dd i f f e r e n td a y sa t d i f f e r e n tt e m p e r a t u r e sa t es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t i d ：户6 0 0 。p ( 0 0 1 9 1 ；2 d ：f - 0 8 6 , 尸 0 4 9 8 3 ；3 d ：p4 2 7 ， 0 0 7 0 3 ；4 d ：f - 1 3 8 4 尸 0 0 0 5 7 ；5 d ：户2 4 5 3 。p 0 0 0 1 3 ：6 d ：卢4 6 6 , 尸 0 0 6 0 1 ；7 d ：肛2 0 8 ，p o 2 0 6 3 ：8 d ：，= 9 9 6 , n 0 0 1 2 4 ；9 d ：户2 2 3 8 p 0 ，0 0 1 7 ；1 0 d ：仁7 6 4 , p o 0 2 2 4 ；t h ed i f f e r e n tc a p i t a ll e t t e r s w i t h i nac o l u m ni n d i c a t e dt h a tt h ee m e r g e n c er a t e sa f t e rl a r v a ep r e s e r v e r dd i f f e r e n td a y sa ts a m et c m p r e t u r em s i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n l5 ：f = 1 0 2 6 6 ，p 0 0 0 1 ；8 0 c ：f = 6 9 3 7 p 00 0 0 1 ；1 0 。c ：，- 5 05 8 ，p 00 0 0 1 ；1 5 ：卢 9 2 2 p 咖0 1 4 8 1 0 上官松家蝇卵，幼虫和蛹的低温保存 3 2 4 家蝇幼虫低温保存对羽化畸形率的影响 家蝇幼虫经不同时间的低温保存后，成虫的羽化畸形率见表3 5 。家蝇幼虫低 温保存不同时间后，成虫的羽化畸形率无明显规律性。家蝇幼虫在5 0 c 温度下保 存4 d 后的成虫畸形率由0 2 3 6 上升至3 1 8 8 ，保存7 d 后又降至0 2 6 5 ，然后就一 直维持在l 左右；8 0 c 温度下保存2 d 后的成虫畸形率上升至2