（动物学专业论文）重金属镉铅对泥鳅转氨酶活性和dna甲基化水平的影响.pdf

原创性声明 本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立 进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的 成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内 容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对 本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式 标明。 本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：鱼鱼垫日 关于学位论文使用授权的声明 本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权 归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规 定，同意学校保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子 版，允许论文被查阅和借阅；本人授权兰州大学可以将本学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用任何复制手段保 存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直 接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为兰州大学。 保密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名：主鱼筵= 导师签名：! 遮垒擅日期：堡堕堇：! 兰州人学顺i 。学位论义 中文摘要 随着人类的进步和社会的发展，环境污染同益严重，重金属污染引起各国政 府和人们的高度重视，本实验就常见重金属污染物镉( c a d m i u m ，c d ) 、铅( l e a d ， p b ) 对泥鳅( m i s g u r n u sa n g u j j j c a u d ag u s ) 的肝胰脏、肾脏和鳃内转氨酶活性 以及d n a 总甲基化水平的影响进行了研究。实验室染毒3 5 d ，重金属对转氨酶活 性影响研究共设计9 个重金属离子处理组( c d 。；、c d “，、c d 一、p b m 、p b “，、p b 。、 ( c d p b ) 。、( c d + p b ) 。、( c d + p b ) 。) ：对d n a 甲基化水平影响实验设计6 个 处理组( c d 。、c d 。p b 。、p b 。、( c d + p b ) 。、( c d + p b ) i 。) ，研究结果如下： 组织转氦酶活性测定表明：对照组泥鳅的肝胰脏、肾脏和鳃三个器官中，肝 胰脏g p t 活性最高，其次是肾脏，鳃最低：g o t 活性为肝胰脏最高，肾脏最低。 转氨酶活性受c d ”、p b ”处理浓度和处理时间的影响十分显著( p o 0 1 或p 0 0 5 ) 。在本研究浓度范围和处理时间内，随着c 矿或p b ”处理浓度升高，肝胰脏、 鳃转氨酶活性先升高后下降，而肾脏转氨酶活性则随c 矿浓度升高而明显下降( p o 0 5 或p o 0 1 ) ，随p b ”浓度升高而极显著升高( p o 叭) 。c d ”+ p b 2 + 各浓度 处理均导致组织g p t 活性极显著下降( p o 0 1 ) ；而g o t 活性被低浓度c d 2 + + p b 2 诱导，处理浓度升高时其活性又被明显抑制( p o 0 5 ) 。o 0 5 m g l 的c 矿与v b 2 + 染毒 3 5 d 。鳃d n a 甲基化水平在第7 天时明显升高，而肝胰脏和肾脏d n a 甲基化水 平则在第1 4 天升高( p k i d n e y g i l l a n dg o tw i 也h e p a t o p a n c r e a s g i l l k i d n e y t h e e f f e c t so fc d 2 + a n dp b 2 + c o n c e n t r a t i o na n de x p o s u r et i m eo nt r a n s a l r l i n a s ea c t i v i t i e s w e r er e m a r k a b l ef p o 0 1o rp 0 0 5 ) t h eg p ta n dg o ta c t i v i t i e si nh e p a t o p a n c r e a sa n dg i l li n c r e a s e d 谢t l lt h el o w c o n c e n t r a t i o nt r e a m a e n to fc d 2 + o rp b 2 + h o w e v e rd e c e a s e dw i t ht h e h i g h e r c o n c e n t r a t i o nt r e a t m e n t s w h i l et r a n s a m i n a s e a c t i v i t i e s ，b o t h g p ta n dg o t , i n k i d n e yw e r ei n h i b i t e ds i g n i f i c a n t l ya l w a y si nc d 2 + t r e a t m e n tg r o u pr p o 0 5o rp o 0 1 ) ，b u tw e r ei n d u c e dn o t a b l y 、v i t i lp b ”t r e a t m e n t ( p o 0 1 ) t h eg p t a c t i v i t i e si n e a c ht i s s u ew e r ea l lr e d u c e dm a r k e d l yb yc d 2 + + p b 2 + b u tg o ta c t i v i t i e sw e r e p r o m o t e dw i t hl o wc o n c e n t r a t i o nt r e a t m e n t ，a n dw e r ed e c r e a s e dw h e nc o n c e n t r a t i o n r i s i n g w i t ht h ep r o l o n g i n go ft r e a t m e n t ，g p ta n dg o ta c t i v i t i e s f i r s tr o s et h e n d r o p p e di nl o w c o n c e n t r a t i o ng r o u p s a f t e r2 1d a y st r e a t m e n t ，t r a n s a m i n a s ea c t i v i t i e s w e r ei n h i b i t e dd i s t i n c t l y ( p p b 2 + ；t h e i n h i b i t i n ge f f e c t so f c d 2 + + p b 2 + w e r es t r o n g e rt h a nc d 2 + o rp b 2 + r e s p e c t i v e l y , w h i c h s u g g e s t e d t h a tc d 2 + a n dp b 2 + w e r es y n e r g e t i ci na c t i o n ；u n d e re x p o s i n gt ol o w c o n c e n t r a t i o n h e a v ym e t a li o n s ，t h et r a n s a m i n a s e a c t i v i t i e sw e r ei n h i b i t e dd i v e r s e l yi n d i f f e r e n tt i s s u e sw i t h k i d n e y h e p a t o p a n c r e a s g i l l ，w h e r e s ，a l o n g w i t ht h e c o n c e n t r a t i o n se n h a n c i n g 。t h et r a 通幽菇i 面i e 蠢爵矗速w e r ei n h i b i t e ds l m i t a f l yi nt h e t h r e et i s s u e s t h ei n f l u e n c eo fc d 2 + , p b 2 + o rc d 2 + + p b 2 + o nt h et o t a ld n a m e t h y l a t i o nl e v e lo f h e p a t o p a n c r e a s k i d n e y a n dg i l l o f 肛a n g u i l l i c a u d a t u sw a ss t u d i e d t h e r e s u l t s i n d i c a t e dt h a tt h e e x t r e m e l yh i g hd n am e t h y l a t i o nw a sd e t e c t e d a f t e r2d a y s e x p o s u r e a t h i g hc o n c e n t r a t i o n i nc d 2 + ，p b 2 十o rc d 2 十+ p b 2 + t r e a t m e n tg r o u p ；t h e t o x i c i t ye f f e c t so fc d 2 + a n dc d 2 + + p b 2 + w e r em o r es i g n i f i c a n tt h a np b 2 + r p o 0 5 为差异不显著，p o 0 5 为差异显著，p o 0 1 为差异极显著。 混合重金属之间的相互作用分为协同作用和拮抗作用，协同作用表示共同存 在使单一离子对指标的影响程度加深：一种离子的存在使另一种离子对指标的影 响程度减弱则为拮抗作用。p o 0 5 为作用显著，p o 0 1 为作用极显著。 兰州大学硕l 学位论文 3 、研究结果 3 。1c d ”、p b ”对g p t 活性的影响 对照组泥鳅的肝胰脏、肾脏和鳃三个器官中，肝胰脏g p t 活性最高，肾脏其 次，鳃最低。三种器官g p t 活性受c d ”、p b “处理浓度和处理时间的影响十分显 著( p o o l 或p o 0 5 ) 。g p t 活性变化的总体趋势是随着金属离子处理浓度的 升高而降低，即低浓度c r 、p b ”诱导g p t 活性，高浓度则抑制酶活性：随处理 时间的延长，g p t 活性趋势基本为先上升后下降，染毒2 1 d 后，大部分处理组中 酶活性被明显抑制( p o ，0 1 ) 。c d ”、p b 2 + 联合作用对g p t 活性的影晌不同于单独 处理，大部分浓度组在染毒2 d 后引起g p t 活性显著下降( p o 0 1 ) ，c d ”、p b 2 + 表现协同毒性效应。 3 1 1c 矿、p b ”处理浓度对o p t 活性的影响 研究中发现，对照组泥鳅，在肝胰脏、肾脏和鳃三种器官中存在组织差异， 肝胰脏g p t 活性最高( 5 5 2 9 7 5 ) u m gp r ，肾脏其次( 3 6 8 1 3 5 9 ) u m gp r ， 鳃g p t 活性最低( 2 7 7 _ + 5 0 8 ) u m gp r 。泥鳅暴露于重金属离子中。三种器官的 g p t 活性均发生不同程度的变化，染毒2 d 取样，肝胰脏、肾脏和鳃g p t 活性变 化与c d 2 t 、p b 2 及c d 2 + p b 2 + 处理浓度的关系如图1 。 图1 a 表明，低浓度( o 5 m g l ) c d ”和p b ”均显著激活肝胰脏( h e p a t o p a n c r e a s ) g p t 活性( p 0 0 1 ) ，而同浓度c d 2 + + p b ”则明显抑制其活性( p o 0 5 ) ： 而c d 2 + p b “组中酶活性极显著下降( p o 0 1 ) 。暴露浓度为2 0 o m g l 时，p b ”、 c d 2 及c d 2 + + p b 2 + 组中肝胰脏g p t 活性均受到抑制( p 分别为 0 0 5 ， 0 0 1 ) ，且 各离子组之间差异显著( p p b 9 ：而各浓度c d ”+ p b ”均明显抑 制酶活性，可见c r 、p b ”具有协同毒性效斑。 图l b 显示，c 矿、c d ”+ p b “对肾脏g p t 活性具有明显抑制作用( p o 。0 5 或p o 0 1 ) ，暴露浓度愈高，抑制作用愈强，且各浓度问以及c r 与c d ”+ p b ”阃差异 显著( p p b 2 + 。 如图l c 所示，鳃g p t 活性随着c r 、p b 2 + 暴露量增加而先升高后降低。即低 浓度c d 2 、p b “( 0 5 m g l ) 诱导酶活性( p o 0 1 ) ，而高浓度( 5 。o m g l 和2 0 o m g l ) 则抑制酶活性( p 分别为 0 0 5 ， 0 0 1 ) ，且c 矿对鳃g p t 活性的抑制作用明显 大于p b ”( p o 0 5 ) 。各浓度c d ”+ p b “均明显抑制鳃g p t 活性( p o 0 5 或p 0 0 1 ) ，浓度越高，抑制作用越强。 h t r 【n t ”，l op 4 n r i on ( _ “ 图1c d 2 1 、p b 2 1 及c d ”+ p b 2 + 对组织g p t 活性的影响 f i g u r e1e f f e c t so fc d “，p b 2 + a n dc d 2 + p b ”o ng p ta c t i v i t i e so fh e p a t o p a n c r e a s ，k i d n e y a n dg i l l 注：经t 检验分析与对照组相比， 表示差异显著， 表示差异极显著 园= 鎏 避一一 1j11j1j|1j4111j11 兰州大学碗上学位论文 3 。1 。2c d 2 + 、p b ”处理时间对g p t 活性的影响 g p t 活性变化受重金属处理时间的影响十分显著，染毒初期酶活性上升， 后下降，染毒2 8 d 后，各处理组中肝胰脏、肾脏及鳃g p t 活性均被明显抑制 ( p o 0 1 ) 。c d ”、p b 2 + 共存于污染水环境中时，他们之间的相互作用十分复杂， 在不同的时间具有不同的相互作用，对生物体表现复杂的联合毒性效应，对器官 g p t 活性主要为协同毒性效应。 3 1 2 1c d ”、p b 2 + 对肝胰脏g p t 活性的影响 各处理组中肝胰脏g p t 相对活性见表3 ，g p t 相对活性为0 4 5 7 1 5 7 4 ，处 理时间对肝胰脏g p t 活性的影响十分显著( p 0 0 1 ) 。c d ”处理时间对肝胰脏g p t 活性的影响如图2 a 。0 5 m g l 和5 o m g l 的c d ”单独处理时，肝胰脏g p t 活性随 染毒时间延长而先明显升高后显著降低( p o 0 5 ) ；0 5 m g l 浓度组在2 d 2 1 d 范围内极明显诱导g p t 活性( p 0 0 1 ) ，此后处理则抑制酶活性( p 0 0 1 ) ，酶活 性最高出现在第4 天，此时与对照组差异极显著( p o 0 1 ) ；5 o m g l 的c d 2 在 4 d 1 4 d 范围内显著激活g p t 活性，处理达2 1 d 时，酶活性被明显抑制( p o 0 1 ) ； 高浓度( 2 0 o m g l ) c d 2 + 作用下，g p t 活性随时间的延长而下降，第1 天酶活性 显著降低( p o 0 5 ) ，超过2 d 则极显著降低( p ( 0 0 1 ) ，与两低浓度处理组差异 极显著( p o 0 1 ) 。染毒2 8 d 后，各浓度处理组中肝胰脏g p t 活性均极显著低于 对照组( p o 0 5 ) 。 p b ”对肝胰脏g p t 活性的影响如图2 b ，p b ”处理时间对肝胰脏g p t 活性影响 显著( p o 0 5 ) 。低浓度( 0 5 m g l ) p b 2 + 处理泥鳅，肝胰脏g p t 活性变化与c 矿 组相似，活性总体是随时间的延长而先上升后下降：l d 4 d 内酶活性被明显诱 导( p o 0 5 ) ，活性最高出现在第2 天；染毒第7 天，酶活性开始被明显抑制 ( p o 0 5 ) ，时问越长受抑制越显著，但p b 2 + 的抑制作用并非无限制增强，g p t 相 兰州大学硕士学位论文 对活性最终相对稳定于0 7 6 7 。5 o m g l 和2 0 。o m g l 的p b “在整个实验期间对肝 胰脏g p t 主要表现抑制作用：5 o m g l 浓度组中酶活性在第4 天显著降低 ( p o 。0 5 ) ，此后则极显著降低( p o 0 1 ) ；而2 0 。o m g l 浓度组中，则为第2 天 明显降低( p o 0 5 ) ，第4 天极显著降低( p 0 0 1 ) ，此后随时间越长，降低越明 显。染毒2 1 d 后，三种p b 2 + 浓度组中g p t 活性下降均趋于稳定，保持一种动态平 衡，且高浓度组中酶活性明显低于低浓度组( p o 。0 5 ) 。 c 矿、p b 2 + 联合作用时，在不同的处理时间，两者间的相互作用不同，对泥鳅 肝胰脏g p t 活性的影响亦不同( 图2 e ) 。c d ”+ p b 2 + 处理组中肝胰脏g p t 活性的变 化总趋势为先下降后上升再下降，与c d 2 十、p b ”单独处理不同。0 5 m g l 的c d ”+ p b ” 染毒4 d ，酶活性显著低于对照( p o 0 1 ) ，而同浓度c d 2 + 组和p b ”组中酶活性则 高于对照( p o 0 5 ) ：7 d 2 1 d 范围内，酶活性显著高于对照( p o 0 1 ) ，而此时 p b 2 + 组中酶活性则明显低于对照( p 0 0 1 ) 。5 o m g l 的c d ”+ p b ”处理组中肝胰脏 g p t 活性变化曲缓屯5 m g l 浓度组相似，染毒4 d 内，酶活性明显下降( p o 。0 5 鼓p o 0 1 ) ：继续染毒至第7 天，酶活性明显升高( p 0 。0 5 ) ，并持续到第1 4 天； 染毒2 1 d 后，酶活性极显著下降( p 0 0 1 ) ，且明显低于c d 2 t 、p b 2 + 单独处理时 ( p o 0 5 ) 。高浓度( 2 0 o m g l ) c d 2 + + p b “对肝胰脏g p t 活性的影响与c d 2 + 、p b 2 7 组相似，主要为抑制作用，染毒1 d 始显著抑制( p o 0 5 ) ，2 d 则极显著抑制 ( p o 0 1 ) ，此后时间越长抑制越显著，但染毒2 1 d 后，酶活性变化趋于稳定， 保持一种动态平衡。染毒结束时，各浓度组中酶活性差异显著( p ( o 0 5 ) ，浓度 越高，活性越低。 一 n奇o卜 匿 一 ；qd+3u 。(1山+p。v 善(il+己v卜；d厶o 。立kl巾 ：o乱i寸 。；召i 。吉ofn ；8i【 卜器霉嚣霸雕议惜群”籁一，撼蜒氍：。v“卡。v“丑罂蚓匿靛婶辖求静翅p列燃 t一o。州卜噼甘o 。譬。刊=o tno。刊卜no 乙_【o，。槲吣oo 。=oo刊可卜o 。口一o。刊卜诉o 。8i。州兽o _io。卅。o。 。 ，_【。州。嚣。 。=o。稍。o。 乙_【oo刊。卜o _【。o刊寸卜o_【 _【o。州o_【n一 。=o。州卜。oo ，on。刊卜o 10o科盘。 +【oo州毋卜o -。_l。刊卜曲卜o tnn。，o刊卜。甘_【 t=。o刊一寸_【 譬o。刊n_【 。_【no。刊n卜o =。o刊=。o n一。舢=o，_【 匕_【。o州n。可o 。_【。o书。 t=oo刊no甘o 乞ioo叫oo心o 。=oo刊on卜。 1，noo刊o 【_【oo刊o凸。 =。o州。mo t_io。州卜。，o _【。刊=卜o -一o，。州寸。o 。ono。刊卜卜卜，o ，=。o刊西no =。o叫lo _【_【oo刊口o _【no。叫2。_【 一。刊田。卜o tn_ioo计一。卜0 。【0o刊哼卜d o_【。凸刊。 。n_【o0刊o西o o。刊。舞。一 kn。刊甘己兮一 。_【noo截一_【e_【 t10。州奇。 。noo刊_【曲o _【_ioo刊。甘，。 。=oo刊叫。o 。nho。刊叮n卜o 。=io。刊_【。卜。 。_【oo州o 。=。州寸呻j。 。20。州。 ooo叫譬o 。竹ioo州白o 。兮i。刊釉n一 。on。0叫卜，一 。=。刊n_【 =o，o州一一一 iioo剞ooo n。州。卜。 i。州n甘卜，。 +_【。刊甘n一 on。刊甘n_【 t=。o刊甘心n_【 。=。刊寸寸竹_【 。nio。州_【n_【 。_i。卅曲甘。一 dno鲁苫兽=_曹未暑研霉-p口戛op&呈c!eo弯o暑1；等三苗_【o芷n山iq砖卜 掣蜒靛娶臣。基餐富蓉聪廿崭尉裂雌懈 议岱犁扑_千匿扑k车州 兰州夫学硕士学位论文 ：。 cd ( mg l ) l 至到 j _ 薹运 oo l r _ 1 1 阿_ 一 z 。 卟”m g f l 匡兰j 卜5 1 0 1 5 。 蕊逮三i 裹 _ 、一= o - 。l ，。 ，一 12 47142128 35 2 o 1 5 1o 0 5 0o 124 7142128 35 一 。lexposur e t i me d ) 图2 各处理组对肝胰脏g p t 相对活性的影响 f i g u r e2e f f e c t so fh e a v ym e t a li o n so nr e l a t i v ea c t i v i t i e so fg p ti nh e p a t o p a n c r e a s 3 。1 2 2 c d “、p b ”处理时间对肾脏g p t 活性的影响 c d ”、p b 2 + 作用下，泥鳅肾脏g p t 相对活性与处理时间的效应关系见表4 。处 理组中肾脏g p t 相对活性为0 3 4 7 1 8 0 4 ，在大部分实验期间，重金属离子种 类、浓度以及处理时间对泥鳅肾脏g p t 活性有显著的影响( p o 0 5 ) ( 如图3 ) 。 msc器一日noc c 一 u墨2厶d#j，3一j一1。mflb一璺卜正o u 一害n an一，q!芍m!_8i世iiho 兰州大学硕士学位论文 低浓度c d ”对肾脏g p t 活性的影响为先抑制后激活最终又抑制，低浓度p b “为先 激活后抑制，而高浓度c d 2 + 、p b 2 + 以及c d ”+ p b 2 + 在整个实验期间主要表现抑制作用， 且处理时间越长抑制作用越明显。染毒结束时，各处理组中酶活性均趋于稳定， 处于动态平衡状态。 图3 a 显示，0 。5 m g l 的c d 2 + 组中，肾脏g p t 活性在i d 2 d 内显著降低 ( p o 0 5 ) ，4 d 7 d 内极显著升高( p o 0 1 ) ，染毒1 4 d 后则极显著下降( p o 0 1 ) ， 酶活性最高出现在染毒第4 天。5 。0m g l 的c d ”对肾脏g p t 活性主要表现抑制作 用，只在第7 天促使酶活性升高( p o 。0 5 ) 。高浓度( 2 0 。o m g l ) c d 2 + 组中g p t 活 性在整个实验期间均极显著下降( p o 0 1 ) ，且处理时间越长下降越明显，最终 趋于稳定。染毒后期各浓度c r 组中酶活性变化曲线接近平行，且浓度越高，曲 线越靠近下端，各组之间差异显著( p o 0 5 ) 。 如图3 b 所示，三个p b 浓度组中肾脏g p t 活性均是先上升后下降，但各组 中酶活性达到峰值的时间不同，0 。5 m g l 、5 o m g l 、2 0 o m g l 分别为染毒2 1 d 、 4 d 、2 d ，且酶活性均极显著高于对照组( p o 0 5 ) ，活性趋于稳定。 c d 2 + + p b ”主要抑制肾脏g p t 活性，酶相对活性与处理时间的效应关系如图3 c 。 高浓度组( 2 0 o m g l ) 中酶活性曲线靠近底端，低浓度组( 0 5 m g l ) 靠近最上 端三条曲线接近平行。染毒l d ，高浓度组中酶活性极显著降低( p o 0 5 ) 。染毒2 d 后，各浓度组均引起酶活性 极显著下降( p o 0 1 ) ，且处理时间越长抑制作用越显著。染毒结束时，各浓度 组中的g p t 活性均相对稳定下来，处于动态平衡状态，且此时高浓度组中酶活性 明显低于低浓度组( p o 0 5 ) 。 卜n +20。制卜叫o t。一oo刊寸叫o 。_【。o刊。卜甘o 。o【oo刊8i卜o 。=。o州i。 。n_【oo州“n卜o 。n。o刊叫。卜。 k一。刊呻。 t2。刊n叫o -_【。o刊_【no 十n_【。0州。甘o -_【oo州ooo 。=o。州oo卜o 。_【o。州卜o 。_i。州_【oo o_【。刊寸o。 t_loo刊91。 +91。刊曲oo -。一。o刊d心o 。上ioo州ho 。onoo州田。卜o 。o_【。o州。 。10。刊i舳。 霉。o刊。no_ 。n。州nn。 ioo刊_i。 。一。刊可心。 。_【oo州n卜。 。=o。州。h西o 。【。州ni 。lo。州n。_【 k_【。州田竹一 =。o州18o i。o刊o。 t_ioo州8i卜o 。o【oo州卜o 。卜门oo刊掣o一 。n。o剞可o_【 。i一。o州。寸一 。in。州竹i【 nio。州o o_ioo刊甘n。 tio。刊o_【 。o_【oo州卜。吣_【 。【o。刊卜。寸_【 。_【noo州on_【 =o。刊卜o_【 。_foo刊o 10。刊。甘o 。10，o刊卜吲。 十=。刊卜寸，o 。o_【oo刊寸o 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t 活性的影响与c r 相似，染毒1 天时明显抑制( p 0 0 5 ) 酶活性，2 d 时 则极显著抑制( p o 0 1 ) ，处理时间越长抑制越显著。 c d 2 + p b “作用下，鳃g p t 在整个实验期间主要被抑制。低浓度c d “+ p b “染毒 达到2 d 即明显抑制酶活性( p o 0 5 ) ，4 d 则极显著抑制( p o 0 1 ) ：而其它两浓 度的c d + p b 2 + 染毒1 d 便明显抑制酶活性( p o ，0 5 ) ，2 d 则极显著抑制( p i。掌一亘巴卜皿o 5 o 5 0 1 1 o 0 喜9j24a善n) 吾a点七至l。掌=卫巴上do 兰州大学硕士学位论文 最终相对稳定下来，保持一种动态平衡。 3 2 1c d ”、p 矿处理浓度对g o t 活性的影响 在大部分实验期间器官g o t 活性受重金属离子种类和离子浓度影响显著 ( p ( 0 。0 5 ) 。泥鳅暴露于含c 酽+ 、p b ”以及c 酽+ + p b ”的水中，染毒2 d 时取样，肝胰 脏、肾脏以及鳃g o t 活性均发生不同程度的变化，离子种类及离子浓度对泥鳅器 官g o t 活性的影响如图5 。 | k “l r | l p m 口n 幽5c d 2 1 、p b 2 及c d 2 + + p b ”对肝胰脏、肾脏和鳃g o t 活性的影响 f i g u r e5e f f e c t so fc d 2 ，p b 2 a n dc d 2 + p b 2 。o ng o ta c t i v it i e so f h e p a t o p a n c r e a s ，k i d n e y a n dg i l l 注：经t 检验分丰厅与对照组相比， 差异显蓑。料筹异极显著 兰州大学硕士学位论文 图5 a 表明，低浓度cd 2 + ( 0 5 m g l ) 诱导肝胰脏g o t 活性( p 0 0 1 ) ，而高 浓度c d 2 + ( 5 o m g l 和2 0 o m g l ) 显著抑制其活性( p o 叭) 。随p b ”暴露量增 加，肝胰脏g o t 活性呈明显上升趋势，无论与对照组还是各浓度组间相比，差异 均极显著( p o 0 1 ) 。c d ”+ p b ”作用下，0 5 m g l 和5 o m g l 两浓度组均明显诱 导肝胰脏g o t 活性( p o 0 1 ) ，而2 0 o m g l 组则抑制酶活性( p o 0 1 ) ，且抑 制作用比c d ”更明显( p o 0 5 ) 。 图5 b 显示，随着c d 2 + 、p b ”及c d “+ p b “暴露量增加，肾脏g o t 活性变化趋势 与肝胰脏相似，低浓度c d 2 + ( o 5 m g l ) 作用下酶活性升高( p o 0 5 ) ，而高浓 度处理条件下则明显降低( p 0 0 1 ) ；各浓度p b 2 + 均明显诱导肾脏g o t 活性( p o 0 1 ) ，且剂量效应显著( p o 。0 5 ) ；c d “+ p b 2 + 作用下，0 5 m g t l 和5 o m g l 两 浓度组均明显诱导肾脏g o t 活性( p 0 。0 1 ) ，而2 0 o m g l 组则明显抑制酶活性 ( p 0 0 1 ) 。 图5 c 表明，c 矿、p b ”作用下，鳃g o t 活性随着暴露量增加而先升高后降低。 0 5 m g l 浓度组中鳃g o t 活性显著升高( p 0 0 1 ) ；随着染毒剂量增加，酶活性 下降：处理浓度为5 o m g l 时，酶活性被c 矿抑制( p o 0 5 ) ；处理浓度为2 0 o m g l 时，c d 2 + 、p b ”均明显抑制酶活性( p 分 别为 o 。0 1 ， 0 0 5 ) ，c d “、p b ”差异显著。c d ”+ p b ”作用下，鳃g o t 活性随暴露 量增加呈明显下降趋势，0 5 m g l 时显著降低( p o 0 5 ) ，其余处理浓度组则极 显著降低( p o 0 1 ) ，且各浓度组间差异显著( p o 。0 5 ) 。 3 2 2 d ”、p b ”处理时间对g o t 活性的影响 肝胰脏、肾脏及鳃g o t 活性受c d ”、p b 2 + 及c d ”+ p b 2 + 处理时间的影响十分显 著( p o 0 1 ) ，其活性总体趋势为随处理时间的延长而先升高后降低，最终变化 趋于稳定。低浓度处理组在染毒初期对g o t 活性有诱导作用，高浓度处理组则主 要表现抑制作用；染毒2 1 d 后，大部分处理组中酶活性均受到显著抑制( p o 0 5 ) 。 c d 2 、p b ”联合作用时，在不同的时间两者间相互作用不同，对器官g o t 活性主要 呈协同毒性效应。 3 2 2 1 c d ”、p b ”处理时间对肝胰脏g o t 活性的影响 各处理组中肝胰脏g o t 相对活性时间效应关系见表6 ，g o t 相对活性为 0 4 4 5 1 5 9 8 ，处理时问对肝胰脏g o t 活性的影响十分显著( p 0 0 1 ) 。图6 a 显 兰州大学和 ：学位论文 显示，低浓度c d ”( 0 5 m g l ) 作用下，肝胰脏g 0 1 、活性随时削延长的基本趋势 为先上升后下降；处理2 d 7 d 范围内，g o t 活性被明显诱导( p o 叭) ：继续 染毒至1 4 d ，酶活性被显著抑制( p o 。0 5 ) ，此后处理则被极显著抑制( p o 0 1 ) 。 5 。o m g l 的cd 2 + 浓度组中，g o t 活性随处理时间的延长而先下降后上升再下降； 染毒2 d ，酶活性显著下降( p o ，0 5 ) ；4 d 7 d 范围内，则极显著升高( p o 。0 1 ) ： 染毒达1 4 d ，酶活性又明显下降( p o 0 1 ) 。高浓度c d 2 + 对肝胰脏g o t 活性主要 表现抑制作用，染毒1 d ，酶活性明显降低( p o 0 5 ) ，超过2 d 则极显著降低( p o 0 1 ) ，此后处理时间越长受抑制越明显。染毒2 8 d 后，各浓度组中肝胰脏g o t 活性变化趋于稳定。 p b ”处理时间对肝胰脏g o t 活性的影响如图6 b 。p b ”处理时间对肝胰脏g o t 活性影响显著( p o 0 5 - - - - - 。三个p b 2 + 浓度组中g o t 活性均先上升后下降。但酶 相对活性峰值各不相同，0 5 m g l 组为1 2 8 6 ，5 o m g l 组为1 7 8 7 ，2 0 o m g l 组为l i9 5 9 ；同时，三浓度p b ”诱导酶活性的时间亦不同，0 5 r n g l 和5 。o m g l 组为l d t d ，而2 0 o m g l 组为l d 2 d 。0 5 m g l 和5 o m g l 染毒组在第1 4 天 时明显抑制酶活性( p o 。0 5 ) ，第2 l 天极显著抑制酶活性( p o 0 1 ) ；而2 0 。o m g l 组则在第7 天明显抑制酶活性( p 0 0 5 ) ，第1 4 天卿极显著抑制。染毒结束时， 各浓度组中酶活性差异极显著( p o 0 1 ) ，浓度越高，活性越低。 c h ”+ p b 处理时间对肝胰脏g o t 活性的影响见图6 c 。c d 2 + + p b ”处理时间和处 理浓度对g o t 活性的影响显著。0 5 m g l 和5 o m g l 两浓度组中g o t 活性变化总 趋势为先上升后下降；酶活性上升阶段( 1 d 7 d ) ，5 o m g l 组中酶活性明显高 于0 5 m g l 组( p o 0 5 ) 。染毒1 4 d ，两浓度组中g o t 活性均明显下降( p o 0 5 ) ：染毒达2 1 d ，酶活性均极显著下降( p o 0 1 ) ， 且两组间差异显著( p o 0 5 ) ，5 o m g l 明显低于0 5 m g l 。2 0 o m g l 浓度组中 g o t 活性主要呈下降趋势，染毒i d 明显下降( p o 0 5 ) ，2 d 则极显著下降( p 0 0 1 ) ，此后处理时问越长下降越明显。 =。刊可。 。ni。+。刊。吣。 +卜。刊。卜。 t叫n。+。制。 t=o。州n。 +=。州卜竹。 。_【n。刊n。 =。刊n。 +=。刊导。 。州呻芝。 乙n。刊。 甘。州。卜。 。_i。叫n_【_【 。州高h 。卜n。刊拍卜_i 。_【。刊崎。竹_i t西_【。刊。卜。 t曲。刊nn。 寸n。刊甘。 -_【。州=。 。【。刊吲卜。_【 譬。州nn_【_【 。西n。刊n一_i ii。刊卜。_i =。刊譬曲。 +。n。o刊。甘。 t10。刊寸甘曲。 if。州吲卜。 n。州_【。 宝。刊b。 。卜n。刊凸。【 k。刊。一 。o刊罱。 t。釉。刊n。 +。_【。州可。