（运动人体科学专业论文）葡萄糖与麦芽低聚糖对小鼠运动能力影响的实验研究.pdf

摘要 糖是运动时能量供应的主要物质。随着体育运动竞技水平的提高，教练员与运动员 已开始认识到补糖与提高运动成绩之间关系的重要性。然而通过实验以及大量的实践发 现，盲目或者是不合理的补糖不但不能带来有利的影响，反而会影响运动水平的发挥进 而影响运动成绩，其原因不仅与补糖的运动时间的间隔、运动性质有关，还因为不同种 类的糖各有其不同的理化性质。在机体内所起到的作用也不尽相同有关。因此在运动前 合理的补糖，不仅可以提高运动成绩，而且还可以推延运动性疲劳的出现本研究就是 以糖作为运动能量补剂为基点，以葡萄糖与麦芽低聚糖为实验试剂，以实验用小鼠为实 验对象，将小鼠分为安静对照组( 1 0 只) 与运动实验组( 3 0 只) 。运动组又分为空白运 动组、服用葡萄糖组和服用麦芽低聚糖组小鼠在实验中心购买以后适应性饲养一周开 始给运动组按时按量灌服试剂，在休息5 分钟【1 】之后，把运动组小鼠放入水槽中开始进 彳亍游泳训练一个半小时，如此不间歇的进行四周的训练之后，最后一次把每组运动组及 安静对照组在进行游泳训练一个半小时之后各取5 只，进行断头取血处死，所采集的血 样以测定其血糖、血乳酸、血尿素氦三项指标。其余各组剩余的5 只继续进行游泳训练 直至力竭( 其标准是小鼠沉入水中3 秒其姿势反射消失) ，并记录下各组小鼠力竭的 时间其实验结果如下： ( 1 ) 4 周游泳训练之后，代表运动能力的生化指标中，服用麦芽低聚糖组的血乳酸 值为3 7 5 2 _ + 8 2 1 m g d i , 葡萄糖组的n a s l 酸值为4 2 2 7 - + 7 1 2m g d l ，空白运动组的血乳酸值 为4 7 3 2 4 7 3 m e , d l ，安静对照组的血乳酸值为4 8 5 5 _ + 9 5 3 m g m 。通过结果发现服用麦芽 低聚糖组小鼠的血乳酸值较空白运动组和安静对照组的值要小，t 检验具有非常显著性 差异( p 0 0 1 ) ；服用麦芽低聚糖组小鼠的血乳酸值较服用葡萄糖组小鼠也要小，t 检 验具有显著性差异( p o 0 5 ) 。说明小鼠在服用糖类物质后能缓冲血液中的乳酸值，而 且麦芽低聚糖的作用更加明显 ( 2 ) 4 周游泳训练之后，服用麦芽低聚糖组的尿素氮值为1 7 4 3 4 - 2 6 4m g d l ，葡萄糖 组的尿素氮值为1 9 7 2 _ + 4 3 2m e , d l ，空白运动组的尿素氮值为2 2 2 1 5 4 2m g d l ，安静对 照组的尿素氮值为2 3 1 4 _ + 3 8 9 m g d 1 服用麦芽低聚糖组小鼠与空白运动组和安静对照组 的值要小，通过t 检验具有非常显著性差异( p o 0 1 ) ；与服用葡萄糖组的小鼠相比也 要小，t 检验具有显著性差异( p 0 0 5 ) ；萄糖组、空白运动组与安静对照组小鼠相 比有着非常显著性差异( p 0 0 1 ) ：服麦芽低聚糖组小鼠与服葡萄糖组的小鼠有显著性 差异( p 0 0 5 ) 。说明大负荷游泳训练使得小鼠体重增长缓慢，补糖并不能增加体重；麦 芽低聚糖对大负荷训练小鼠体重无意义 ( 5 ) 4 周游泳训练之后，服用麦芽低聚糖组游泳至力竭时间( 4 3 2 0 1 6 时) 与安静 对照组( 3 1 6 _ - 0 1 7 时) 、空白运动组( 3 2 4 0 1 9 时) ，通过检验有非常显著性差异( p 0 0 1 ) ，与服用葡萄糖组( 3 9 1 _ - 0 1 1 时) 有显著性差异( 艮0 0 5 ) 。说明小鼠在服用麦 芽低聚糖后在运动耐力的时间上起着良好的促进作用。 关键词：葡萄糖麦芽低聚糖运动能力小鼠 a b s t r a c t s u g a ri st h em a i ne n e r g ys u p p l ym a t t e rw h e ne x e r c i s i n g w i t ht h ef a c tt h a ts p o i l sm o v i n g l e v e lr i s i n go fa t h l e t i c s , c o a c ha n da t h l e t eh a v ea l r e a d ys t a r tt or e a l i z et h es i g n i f i c a n c e c o n c e r n i n gb e t w e e nt h es u p p l e m e n t a ls u g a ra n di m p l y i n gm o t i o na tt h em o d e r nt i m e sw h e n b e i n gt om o v e h o w e v e r , d i s c o v e r e dt h r o u g ht h ee x p 胛i m e n ta sw e l la st h em a s s i v ep r a c t i c e s t h a t , i sb l i n do ri su n r e a s o n a b l em a k e su pt h es u g a rn o to n l yb r i n ga b o u tt h ea d v a n t a g e o u s i n f l u e n c e ，b u ta l s oa f f e c tt h em o v e m e n tl e v e lt h ed i s p l a yt h e ni n f l u e n c em o v e m e n tr e s u l t w h i c hc 帅s ci sc o n n e c t e dw i t ht h et i m eb e t w e e nt i m ea n dc a n d ys u p p l i n g , m o t i o nc h a r a c t e r a d d i n gs u p p l e m e n t a ls u g a r e dn o to n l y ，b u ta l s ot h ed i f f e r e n tp h y s i c sa n dc h e m i s t r yc h a r a c t e r o fe v e r yd i f f e r e n tk i n ds u g a r t h e r e f o r er e a s o n a b l es u p p l ys u g a rb e f o r ee x e r c i s i n g , n o to n l y m a ye n h a n c et h em o v e m e n tr e s u l t ，m o t , e o v e rm a ye x t e n dt h es p o r tw t 翘 ya p p e a r a n c e t h i s r e s e a r c hi sb a s i co f ft h es u g a rs u p p l yo ft h em o v e m e n te n e r g y a st e s t st h er e a g e n tt a k et h e g h l c o a n dt h em a l t o - o l i g o s a c c h a r i d e s , t a k et h ee x p e r i m e n t a lm o u s ea st h ee x p e r i m e n t a l o b j e c t ，d i v i d e si n t ot h er a tt h ec o n t r o lg r o u p ( 1 0 ) a n ds p o r te x p e r i m e n tg r o u p ( 3 0 ) t h es p o r t g r o u pd i v i d e s i n t ot h eb l a n km o v e m e n tg r o u p , t a k e st h eg l n c o s eg r o u pa n dt a k e st h e m a l t o - o l l g o s a c c h a r i d e sg r o u p t h em o u s eb o u g h tb o ma n i m a lc e n t e ri sf e do nr e s g a mf o ra w e e kt h e n , a f t e rt h e5m i n u t e sr e s t 【t h ee x e r c i s eg r o u ps m a l lr a tw e r ep u t t e di n s i d ea w a t e rc h a n n e lf o rb e g i n n i n gt oc a r r yo u th a l fa l lh o u rs w i mt r a i n i n g , a f t e rs ot h ei n t e r m i t t e n c e t r a i n i n gl a s tf o rf o u rw e e k s t h el a s tt i m ea f t e rc a r r y i n go ns w i mt r a i n i n gf o ro n ea n dh a l fa n h o u r ，e a c hg r o u po fm o v e m e n t sg r o u pa n dt h ep e a c e f u lc o m p a r i s o ng r o u pt h es w i m m i n g c a p t u r e s5t o g e t h e rw i t ht oc a r r yo nb e h e a d sd r a w sb l o o de x e c u t e s , t h e ng a t h e rt h eb l o o d s a m p l et o d e t e r m i n ei t sb l o o ds u g a r , t h eb l o o dl a c t i ca c i d , t h eb l o o du mn i t r o g e nt h r e e t a r g e t s o t h e re a c hg r o u po fs u r p l u s5c o n t i n u et oc a r r yo nt h es w i m m i n gt r a i n i n gu n t i lt h e s t r e n g t ht ol l 辩u p ( i t ss t a n d a r di s l - n o u s es m k st oi nw a t e r3s e c o n d s , i t sp o s t u r a lr e f l e x v a n i s h e s ) ，a n dt h e nr e c o r de a c hg r o u po fm i c es t r e n g t hu 鼯su pt i m e i t se x p e r i m e n t a lr e s u l ta s f o l l o w s ： ( 1 ) a f t e r4w e e k ss w i m m i n gt r a i n i n g s , r e p r e s e n t st h es p o r ta b i l i t yi nt h eb i o c h e m i s t r yt a r g e t ， t a k e st h em a l t o - o l i g o s a c c h a r i d e sg r o u pt h eb l o o dl a c t i ca c i di s3 7 5 2 8 2 1 m g d l , t h e 如 g r o u p 奢b l o o dl a c t i ca c i d 趣4 2 2 7 7 1 2m g m , t h eb l a n ks p o r tg m u p 留b l o o dl a c t ka c i di s m 4 7 3 2 4 7 3 m g d lt h ec o 删l d lg r o u pb l o o dl a c t i ca c i di s 4 8 5 5 ：9 5 3 m g d 1 t h r o u g ht h er e s u l l d i s c o v e r e dl a k e st h em a i t o - o l i g o s a c c h a r i d e sm a l tg r o u pm a t sb l o o dl a c t i ca c i dt oc o m p a r et h e b l a n ks p o r tg r o u pa n dt h ec o n t r o lg r o u p , si ss m a l l e r , t h ete x a m i n a t i o nh a se x t r e m e l yn o t a b l e d i f f e r e n c e ( p 0 0 1 ) ；t a k e st h em a l t o - o l i g o s a c c h a r i d e sg r o u pm a o sb l o o dl a c t i c a c i d c o m p a r a t i v e l yt ot a k et h eg l n c o s eg r o u pm a ta l s ot oh a v et ob es m a l lt h et e x a m i n a t i o nh a s n o t a b l ed i f f e r e n c e ( p 0 0 s ) e x p l a i n e dt h em a ta f t e rt a k e st h ec a r b o h y d r a t em a t t e rt oh ea b l e i nt h ec u s h i o nb l o o dl a c t i ca c i d ，m o l c o v e rt h em a l tl o wp o l y o s ef u n c t i o ni sm o r eo b v i o u s ( 2 ) a f t e r 4w e e k ss w i m m i n gt r a h a n g , t h eb l o o d 嘲i s1 7 ，4 3 2 6 4i d 徊。1 9 7 2 ：4 3 2j 雌，m ， 2 2 2 1 5 4 2m g m ，2 3 1 4 3 8 9 m d lo ft a k e st h em a l t o - o l i g o s a c c h a r i d e sg r o u p ，t h eg l u c o s e g r o u p ，t h e b l a n k s p o r tg r o u p a n dc o n t r o l g r o u pr e s p e c t i v e l y t a k e s t h e m a l t o - o l i g o s a c c h a r i d e sg r o u pm a tc o m p a r et h eb l a n ks p o r tg r o u pa n dt h ec o n t r o lg r o u p sm u s t h es m a l l e r , h a se x t r e m e l yn o t a b l ed i f f e r e n c et h r o u g ht h ete x a m i n a t i o n ( p 0 0 1 ) ；w i t ht h e m a tw h i c ht a k e st h eg l u c o s eg r o u pc o m p a r e sa l s om u s th es m a l l e r , t h ete x a m i n a t i o nh a s n o t a b l ed i f f e r e n c e ( p 0 0 5 ) ； ( 3 ) a f t e r 4w e e k s s w i m m i n gt r a i n i n g s , t h e g l ui s 1 3 6 3 7 1 6 1 8 删， 1 2 3 2 9 1 8 3 1 m g d l ，1 2 0 1 2 1 1 5 3 m g m 。1 3 9 6 5 1 7 4 4 m g d l t a k e st h em a l tl o wp o l y o s e g r o u pt h e b l o o ds u g a rv a l u ef o r1 3 6 3 7 1 6 1 8m g mo ft a k e st h em a l t o - o l i g o s a c c h a r i d e s g r o u p ，t h eg l u c 0 辩g r o u p ，t h eb l a n ks p o r tg r o u pa n dc o n t r o lg r o u pr e s p e c t i v e l y t h r o u g h t h e te x a m i n a t i o n , t a k e st h em a l t o - o l i g o s a c c h a r i d e sg r o u pm a tg l uc o m p a r et h ec o n t r o lg r o u p h a st h ed i f f e r e n c eb u tr e m a r k a b l yn o tt ob eo b v i o u s ( p o 0 5 ) ；t 1 i cg l t r o s eg r o u pa n dt h e b l a n ks p o r tg r o u pc o m p a r ew i t ht h ec o n t m lg r o u pm a th a se x t r e m e l yn o t a b l ed i f f e r e n c e ( p 0 0 1 ) ；t h et a k em a i t o - o l i g o s a c c h a r i d e sg r o u pc o m p a r et h eg l u g o s 。g r o u ph a sn o t a b l e d i f f e r e n c e ( p 0 0 5 ) a l lt h i s 啪e x p l a i n et h a tm a tc a ni m p r o v et h eg l ud r o pf u n c t i o n w h e ns u p p l ys u g a r , b u tm a l t o - o l i g o s a c c h a r i d e sf u n c t i o ni sm o r eo b v i o u s ( 4 ) a l t e r4w e e k ss w i m m i n gt r a i n i n g s , t a k e st h em a r o - o l i g o s a c c h a r i d e sg r o u pm a t sb o d y w e i g h ti s4 0 2 5 0 4 3 9 , c o m p a r e4 3 6 7 _ + 0 6 3 9w i t ht h ec o n t r o lg r o u p , h a sn o t a b l ed i f f e r e n c e t h r o u g ht h ee x a m i n a t i o n ( p o 0 5 ) t h et a k eg l l i c o 辩g r o u p ( 4 0 5 7 1 0 o d g ) a n dt h eb l a n ks p o r t g r o u p ( 3 9 。9 2 = o 1 s g ) c o m p a r et h ec o n t r o lg r o u ph a sn o t a b l ed i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) a l lt h i se x p l a i n e dt h eh i g h l 、， s w i m m i n gt r a i n i n gc 3 u s c ：st h em a tb o d yw e i g h tg r o w l ht ob es l o w s u p p l ys u g a rc e r t a i n l yn o t t ob ea b l et op u to nw e i g h t ；t h em a l t o - o i g o s a c c h a r i d e si si n s i g n i f i c a n tt ot h eh i g ht r a i n i n g m o u s e b o d yw e i g h t ( 5 ) a f t e r4w e e k ss w i m m i n gt r a i n i n g s , t a k e st h em a l t o - o f i g o s a c c h a r i d e sg r o u ps w i m m i n g t h et i m et o d e a t h ( 4 3 2 o 1 6 h ) w i t h t h ec o n t r o l g r o u p ( 3 1 6 _ - 0 1 7 h ) , b l a n ks p o r t g r o u 咿2 4 _ + 0 1 9 h ) ，h a se x t r e m e l yn o t a b l ed i f f e r e n c et h r o u g h t h ee x a m i n a t i o n ( p 葡萄糖。根据这些实验结果，说明糖的聚 合度越高，其利用性就越高。麦芽低聚糖可替代蔗糖、葡萄糖和淀粉糖浆，广泛用于营 养保健功能食品1 2 9 l 。其在各种工艺加工品中的应用见表1 表1 麦芽低聚糖在食品中的应用 用途食品名 各种饮料、烧酒、威士忌、鸡尾酒、辣酱油、酱油、番茄酱、果 浓厚感 酱、调味汁 布丁风格面糕、奶油蛋糕、婴儿食品、果冻等 粉末化基剂粉末饮料、粉末汤料、粉末调味料、咖啡伴侣、粉末香料 儿童食品奶油糖果、太妃糖、巧克力等 形成光泽和皮膜米糕、煮豆、紫菜加工、糖果、蜜饯等 调节冻结温度各式雪糕、冰淇淋、制膜剂、冷冻食品等 低醇啤酒酿造低醇啤酒 6 2 文献综述 2 1 3 葡萄糖与麦芽低聚糖理化性质的比较 表2 麦芽低聚糖与葡萄糖理化性质的i 较 特点葡萄糖 甜度 高 吸收速度 最快低，分j 胰岛素反应高，易出现间歇性低血糖 渗透压 高低， 胃肠道反应无 2 2 补糖对运动能力的影响 芽低聚糖 、，口感好 。成葡萄糖再吸收 低 j 肠排空速度快 无 我们知道体内三大营养物质糖，脂肪、蛋白质均是产生a t p 的间接能源。其中 糖和脂肪在能量代谢中占主导地位，蛋白质相对只起辅助作用对于竞技运动来说糖是 最重要的能源，它以有氧方式或无氧方式再合成a t p ，脂肪只能以有氧方式再合成a t p 各种能源物质以不同方式再合成a t p 的速率也不相同，因此在参与能量代谢中所维持的 运动强度也不相同。利用糖作为运动代谢的底物无论是无氧代谢还是有氧代谢的代谢方 式所产生的a t p 或功率输出均高于脂肪。所以竞技运动从短蓬l i l1 0 0 米跑，长跑如马拉 松跑糖的作用比脂肪重要得多刚。人体是一个有生命的机器，人体运动过程也像机器运 转一样需要消耗能量。因此人体摄取贮存足够数量的能源物质并在运动时有效的动员 这些能源物质是取得优异成绩的保证，糖是肌肉活动的重要能源物质之一，许多运动项 目的成绩与肌糖元和肝糖元的贮量，以及血糖的水平有关掘此，有些人错误地认为运 动前补糖就能提高运动成绩，这是不符合实际的1 3 2 1 事实上，补糖的方式、补糖的时间 以及补糖的种类在不同的运动都有不同的影响。如时间在对运动能力的影响就如表3 1 3 3 1 表3 运动前短期补糖对肝糖、血糖、肌糖及运动成绩的影响 注：“t ”增加，“i ”减少，l ”不变 7 l i t t 湖北大学硕士学位论文 2 2 1 补糖对耐力运动的影响 对于耐力运动而言，糖和脂肪是最重要的供能底物，虽然蛋白质在长时间的中后期 对维持运动能力具有一定的作用，但根据近年来的研究证实人后和老鼠实验运动时氨基 酸氧化分解直接提供的能量并不大，约只占工作肌经过氧化代谢途径得到总能量的 2 1 8 1 3 1 1 9 7 1 年卡尔森和萨尔丁研究报道，在3 0 公里跑的越野比赛前的准备阶段 摄入碳水化合物之后，受试者的该项比赛成绩均有所提高，1 9 7 3 年皮尔报道，超长时问 的大强度运动之后，肌糖原恢复到饱和程度可能需要4 6 小时，马拉松跑比赛之后可能 需要更长的恢复时间。萨尔曼等人( 1 9 8 1 年) 却报道说，虽然受试者比赛前的肌糖原的 浓度都有所提高，但是他们的2 1 公里跑的成绩似乎没有提高萨尔特曼等人( 1 9 8 3 年) 也报道说，7 天时间的恢复之后，马拉松跑运动员肌糖原仍会比赛前低6 0 。1 9 8 7 年布 罗姆等人却报道说，跑步至力竭后增加碳水化合物似乎并不能导致肌糖原的超量补充 他们的研究结果对通过摄入碳水化合物来提高跑步耐力这一方法的效果提出了质疑。为 了解决这一矛盾，英国的布鲁尔【3 5 l 于1 9 8 8 年采用补充单糖和补充复合糖这两种高糖膳 食检验在活动跑以7 0 v 0 2 m a x 的强度跑至力竭后对运动员耐力恢复的影响。结果发现， 补充包括附加单糖和复合糖在内的正常饮食能够提高跑步耐力。耐力提高的表现在跑至 力竭的持续时问的延长，并提出运动前3 天左右增加高糖膳食的饮食量能够促进机体功 能的恢复。在提高肌糖原浓度的方面，摄入单糖与复合糖具有相同的效果我国的陈吉 棣教授【蚓( 1 9 9 0 年) 曾做实验证明，低聚糖饮料可以使血糖维持在较高的水平，并可 稳定血容量、血清胰岛素、血镁、血钾和血乳酸，增加做功和延长运动时间。2 0 0 4 年刘 晓莉l 韧等人在山西大学体育学院对其体育系1 6 名男生在随机分组后服用麦芽低聚糖之 后进行自行车功率实验后发现，大强度运动时补充低聚糖有利于持久维持受试者的血糖 水平，降低血乳酸浓度增加做功量和延长运动时间。美国学者d a v i s j m 经过研究发 现，补糖以后血液中的游离色氨酸的浓度明显下降，有利于疲劳的恢复。 2 2 2 补糖对非耐力运动的影响 长时间以来，人们一直注重于研究补糖与耐力运动( 指持续运动时间超过9 0 分钟， 6 5 - - - - 7 5 v 0 2 m a x 的跑或循环运动) 的关系这可解释有些观点认为糖原的消耗和高糖 饮食仅对持续运动和长时间的运动较为重要这是非常错误的。那些短时间大强度的运 动( 尤其是快肌收缩) 同样有很多的糖原消耗，而且这些运动( 如篮球) 问隔时间短( 常 8 2 文献综述 超过一天，次) ，不利于最佳的糖原储存恢复。因此，要更多的研究糖补充与间歇性高强 度运动之间的关系。然而，并不是所有的运动专项在运动前都需要补充糖的。高强度以 无氧代谢占优势的一些专项，大于8 0 v 0 2 m a x 的以有氧代谢为主的专项一般不主张在 比赛前专门补糖，因为补糖不当反而有损其运动能力。中等强度的耐力运动在比赛前合 理补糖可以改善其耐力，增加肝糖原和肌糖原的储存量，延长运动时间3 0 6 0 分钟 1 9 8 7 年，曾经有一项研究对短时间、间歇性运动补糖与不补糖作了比较受试者以5 5 最大吸氧量骑车1 5 分钟，然后以6 5 最大吸氧量骑车1 5 分钟，休息3 分钟，然后重复 进行6 5 最大吸氧量运动和3 分钟的间歇的过程3 次。结果，在间歇性的重复后的运动 能力测试中，补糖受试者的运动能力比补清水的受试者要高。另有杰克森等人却报道， 运动前和运动中补糖提高了短时间、大强度、问歇性运动的运动能力，延缓了疲劳的出 现。他们认为，这可能与补糖增加外援性的能量供给和促进了间歇运动时的糖原合成有 关。类似的报道证明，补糖增进了5 0 分钟高强度骑车后的运动能力和1 小时的骑车运 动成绩。这可能与运动前和运动中补糖导致较小的功率输出减少有关。或者是摄入的大 部分糖被氧化，在运动中提高了占总能耗的1 6 2 0 的能量。许多研究证明不仅在短时 间、大强度骑车时发现补糖有助于运动能力的提高，而且在间歇跑、举重、摔交以及其 他实际比赛中也是屡见不鲜的。尼克拉斯等人报道，补糖提高了高强度、问歇性穿梭跑 能力。更值得注意的是补糖还趋向于增进象举重这样的对抗性运动的运动能力。现在越 来越多的实际比赛研究结果能够证明补糖的重要性和可行性。有一项有关足球比赛研究 报道，补糖的运动员在下半场比赛中跑动的距离比不补充糖的运动员增加了3 0 。冰球 的研究也有同样的发现，补糖能增加运动员的滑动距离，每次滑动的时间、滑动的次数 和滑速。有趣的是，研究证明补糖还能提高网球运动员的发球和防球能力。但是其机理 还尚未得到进一步的研究。由以上不难看出，补糖不但是长时问、耐力性运动项目所需 要的：而且是短时间、大强度、间歇性运动项目所不可缺少的。 2 2 3 糖影响运动能力的原因 运动时作为能源的糖来自两个方面：一是肌肉本身储存的糖且几糖原；二是肌肉 之外的糖一血糖和肝糖原m l - 在肌糖原与运动能力中，因人体内肌糖原储备约3 0 0 4 0 0 克。肌糖原的储能作用 在绝大多数的运动中都占有极为重要的地位。运动时肌糖原的消耗速率与运动强度密切 相关。一般地说，运动强度越大时，肌糖原的分解量也越多。肌糖原储存量是否可以成 9 湖北大学硕士学位论文 为限制运动能力的因素呢? 不能一概而论。它与运动强度的大小，持续时间的长短有着 密切的关系。在短时间大强度的运动时，肌糖原迅速分解，表现为肌乳酸、血乳酸迅速 增加。但若进行单次运动，运动在总肌糖原或在快肌纤维中的肌糖原排空之前业已因产 生疲劳而结束，因此肌糖原含量的多少不成为这类运动的限制因素。如果进行多次间歇 的大强度运动，尽管几乎所有的运动单位都参加收缩，但快肌纤维中的糖原排空可以成 为限制运动能力、产生疲劳的因素。长时间次最大运动强度的运动时，特别是以6 0 8 0 的最大摄氧量运动时，肌糖原是限制运动能力的重要因素，疲劳的发生与肌糖原的排空 有着密切的关系 在肝糖原以及血糖对运动能力中，因血糖是血液中的葡萄糖，人血糖的总量约5 6 克。血糖和细胞外液中的葡萄糖是肌肉唯一可用的外源性糖的来源。血糖也是肝糖原分 解为葡萄糖转运到外周组织的媒介物。血糖主要供中枢神经系统利用，中枢神经系统几 乎没有葡萄糖的储备，它全靠血糖作为能量的来源，所以，血糖下降首先影响中枢神经 的正常活动，是中枢疲劳的重要原因。 3 研究对象与方法 3 1 研究对象 3 研究对象与方法 昆明种小鼠( 由武汉市华中科技大学实验动物中心提供) ，雄性，7 周龄，体重 3 6 1 2 _ - 0 4 4 9 。室温控制在2 3 2 5 c 3 2 研究方法 3 2 1 实验样品 葡萄糖粉，由山东保龄宝生物技术有限公司提供，为白色粉末状。其各项指标见附 录2 麦芽低聚糖由山东保龄宝生物技术有限公司提供为白色粉末状麦芽低聚糖为 9 0 所提供的微生物检验检测所对样品的摩观指标、理化指标及镀生物指标见标见附 录2 3 。2 2 实验分组 4 0 只小鼠分为两大组类一组为安静对照组；另一大组为运动训练组；运动组又分 为空白运动组、服葡萄糖组和服麦芽低聚糖组。 3 2 3 实验方法 3 2 3 1 实验条件 运动组小鼠的游泳训练在实验室进行，利用生理实验室的水池8 0 c m x 7 0 c m x 7 0 c m r 水深6 0 c m ，超过小鼠体长的三倍，水温控制在3 0 3 3 c 3 2 ：3 2 小鼠训练方案 ( 1 ) 安静对照组每天不进行游泳训练，每天自由饮水 ( 2 空白运动组每天上午9 点准时灌服等量的水( 剂量为2 9 k g ) ，在休息5 分钟之后 开始游泳训练游泳时间为一个半小时，水温控制在3 0 3 3 c 在进行训练的第一周小 1 1 湖北大学硕士学位论文 鼠在游泳未结束而就力竭的小g - f 捞起休息几分钟继续游泳使之达到运动时间 ( 3 ) 葡萄糖组小鼠的训练方法同上。但每次服用的补剂为葡萄糖溶液。剂量为2 9 k g 。 ( 4 ) 麦芽低聚糖组的训练方法同上。但每次服用的补剂为麦芽低聚糖溶液。剂量为 2 9 k g 。 3 2 3 3 实验中检测的指标 小鼠的体重、血糖、血尿素氮、血乳酸、游泳运动力竭时问 3 2 3 4 实验仪器 u v 7 5 1 g d 型分光光度计、y s l l 5 0 0s p o r t 乳酸盐分析仪( 美国金泉仪器生命科学公 司生产) 、f a 2 0 0 4 型电子天平、采血针、肝索( 起抗凝作用) 、小刻度试管、试管架、 离心机、吸血管、消毒棉球、0 5 m l 、l m l 和5 m l 移液管、离心管，l o m l 试管，沸水浴 箱、剪刀、手表、游泳池( 超过小鼠体长的三倍) 3 2 3 5 实验试剂 ( 1 ) 1 0 三氯醋酸、 ( 2 ) 二乙酰一肟液( 二乙酰一肟氨基硫服，代号d a m t s c ) ：称取二乙酰一肟 6 0 0 r a g ，氨基硫脲3 0 m g ，加蒸馏水溶解至即成1 0 0 m l 。存入棕色瓶中，此液久置冰箱有 结晶析出，影响显色，最好使用期不超过一个月 ( 3 ) 混合酸液：浓磷m ( s 5 8 7 ) 3 5 m t , 浓硫酸( 9 5 9 8 ) 8 0 m l ，慢慢滴入8 0 0 m l 蒸馏水中，冷 却后加水至1 0 0 0 m l ( 4 ) 1 的氟化钠溶液 ( 5 ) 尿素氮标准应用液( o 0 1 m gj g i n l ) ：吸取尿素氮标准液i m l ，加0 0 1 n 硫酸溶解 稀释至l o o m l ，置冰箱内保存 ( 6 ) 尿素氮标准储存液( 1 m g 氮i r n l ) ，将尿素( a r ) 置硫酸干燥器内4 8 小时，然后精确 称2 1 4 3 9 ，用0 0 1 n 硫酸溶解稀释至1 0 0 0 m l ，置冰箱内保存 ( 7 ) 空白液：1 份1 的氟化钠和3 份1 0 的三氯乙酸混合而成 ( 8 ) 0 1 m o l l 磷酸盐缓冲液( p h 7 0 )称取无水磷酸氢二钠8 6 7 9 及无水磷酸二氢钾 5 3 9 溶于8 0 0 m l 蒸馏水中，用l m o l l 氢氧化钠( 或l m o l l 盐酸) 调节p h 至7 0 ，然后 3 研究对象与方法 用蒸馏水稀释至1 l ( 9 ) 酶试剂称取过氧化物酶1 2 0 0 u ，葡萄糖氧化酶1 2 0 0 u ，4 - 氨基安替比林1 0 r a g 叠氮钠1 0 0 m g ，溶于上述磷酸盐缓冲液8 0 m l 中，用1 m o l ln a o h 调p h 至7 0 ，加磷酸 缓冲液至1 0 0 m 置冰箱保存。4 1 2 可稳定3 个月。 ( 1 0 ) 酚溶液称取重蒸馏酚1 0 0 m g 溶于1 0 0 m l 蒸馏水中( 酚在空气中易氧化成红色， 可先配成5 0 0 9 l 的溶液，贮存于棕色瓶中，用时稀释) ，用棕色瓶贮存。 ( 1 1 ) 酶酚混合试剂取上述酶试剂与酚溶液等量混合，4 c - - j 以存放一个月。 ( 1 2 ) 1 2 m m o f l 苯甲酸溶液溶解苯甲酸1 4 9 于蒸馏水约8 0 0 m 中，加温助溶，冷却 后加蒸馏水至1 l 。 ( 1 3 ) 葡萄糖标准贮存液( 1 0 0 m m o f l )称取己干燥恒重的无水葡萄糖1 8 0 2 9 ，溶于 1 2 m m o l l 苯甲酸溶液约7 0 m l 中，并移入1 0 0 r e 容量瓶内，再以1 2 m m o l l 苯甲酸溶液 加至1 0 0 m 。 ( 1 4 ) 葡萄糖标准应用液( 5 r e t o o l l )吸取葡萄糖标准贮存液5 0 m l 于1 0 0 m 容量瓶 中。加1 2 n m l l 苯甲酸溶液至刻度 3 2 3 6 指标检测的方法 ( 1 ) 小鼠体重的称量 小鼠自动物中心购买后按实验条件进行适应性饲养一周后随机分组，然后称取各组 小鼠体重。以后在每周最后一天再对小鼠灌胃前称量并做以记录。 ( 2 ) 小鼠游泳力竭时间的记录 各组小鼠在游泳至力竭( 力竭标准定为沉入水底3 秒。姿势反射消失) ，记下各组每 只小鼠的时间 ( 3 ) 血尿素氮的检测 检测的方法是二乙酰一肟法。其原理是血液中的尿素在强酸的条馋下与二乙酰一肟 共热反应，生成红色复合物( 1 i p f c a r o n 毛反应) 。和经同样处理的标准液比色，即可求出 血液中尿素氮的含量 湖北大学硕士学位论文 ：z , 1 - - 1 5 + 巨z o芝盟墅- = z 蝴陵 二z 佩素 旷 二嚷衍生物红色) - - - - - - _ 计算公式为 铡定管光密度 标准蕾光密度 其操作过程见表4 1 0 0 x 标准含置( o 0 1 1 q 一l l x 0 5 ) x = i c 屎i 氯) o 0 1 表4 血液尿素氦实验操作步骤 测定管( r n l )标准管( m 1 )空白管( m 1 ) 水0 4 8o 5 0 新鲜血液 o 0 2 1 0 三氯醋酸 o 5 0 离心1 0 分钟3 0 0 0 转分 取上清液 0 5 0 尿素氮标准应用液 0 5 0 二乙酰一肟液 0 5 00 5 00 5 0 混合酸液 4 0 04 o o4 0 0 沸水浴1 0 分钟，冷却，以5 0 0 毫微米或绿色滤光板，以空白板调0 进行光电比色，读出测 定管和标准管光密度 然后运动公式 测定蕾光宅度 标准蕾光雌 求出结果。 l 媾准含量( o o h = h ，i l x o 5 ) x = - 一( 尿i 嘎【) 0 o l ( 4 ) 血糖的检测 检测方法是葡萄糖氧化酶法。其原理是葡萄糖氧化酶( g l u c o s eo x i d a s c ，g o d ) 能将 葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶( p e r o x i d a s c ，p o d ) 惭j - f ，分 解为水和氧的同时将无色的4 氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 t r i n d e r 反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在5 0 5 n m 波长处测定 1 4 3 研究对象与方法 吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下： 葡萄糖+ 0 2 + 2 1 t 2 0 竺葡萄糖酸+ 2 1 1 2 0 2 2 1 1 2 0 2 + 4 一氨基安营比林+ 酚竺) 红色醌类化合物 操作方法是取3 支试管，编号，按表5 操作 表5 血糖检测实验操作步骤 混匀，置3 7 水浴中保温1 5 分钟，在波长5 0 5 r i m 处比色，以空白管调零，读取标准 血清葡萄麓( m o t l ) ：握壅笪堕堂堕一5 管及测定管吸光度。然后运用公式 嗣定管吸光廑 计算得出结 果。 ( 5 ) 血乳酸的检测 运用美国金泉仪器生命科学公司生产y s l l 5 0 0s p o r t 乳酸盐分析仪，在小鼠断头取血 后取血2 5 微升，根据仪器操作步骤自动获得数据。 3 2 4 实验结果分析方法 结果以平均值标准差( x s ) 表示，由s p s s l 0 1 0 软件进行统计分析处理，组问差 异采用t 检验，( p o 0 5 ) 为具有显著性。( p o 0 1 ) 为具有非常显著性差异。 3 2 5 实验的注意事项 3 2 5 1 为了小鼠的习性与卫生。在动物笼下铺由动物中心提供的锯末每天清理一次以 保证卫生 3 2 5 2 小鼠在进行游泳训练的过程中，为了实验的准确性，应保证小鼠在进行训练的时 问内尽可能的处于活动的状态中而又不干涉其活动。所以在小鼠由于疲劳等原因而处于 静止状态时应使用玻璃棒加以拨动。 3 2 5 3 在进行训练的时问完成后应尽可能在短时间内完成运动组实验标本的备制。 湖北大学硕士学位论文 3 2 5 4