（运动人体科学专业论文）运动性血红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究.pdf

苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立 进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文 不含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏 少1 1 大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作 出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本 声明的法律责任。 研究生签名：重灶日 学位论文使用授权声明 苏州大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、清华大学论 文合作部、中国社科院文献信息情报中心有权保留本人所送交学位论 文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论 文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的 保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布( 包括刊登) 论文的 全部或部分内容。论文的公布( 包括刊登) 授权苏州大学学位办办理。 研究生签名： 导师签名：近日 期：良硝牛 运动性血红蛋白降低与网织红钏胞参数变化特点的研究 中文摘要 中文摘要 研究目的 在竞技运动训练过程中，常由于运动负荷的过大，造成血红蛋白浓度的下降， 影响运动能力。当血红蛋白下降至贫血数值范围时，不但影响运动能力，可能出 现病理性变化，损害运动员身体健康。 网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，网织红细胞参数可直接反映骨髓造血 功能的盛衰与红细胞的活动度，在判断骨髓增生状况，对贫血的诊断、鉴别以及 疗效观察，判断预后均有重要的参考价值。 本文分析了大鼠在运动训练期发生血红蛋白降低时，网织红细胞参数相应的 变化特点及h b 降低前网织红细胞参数的变化规律，为更好的监测运动性h b 降低 和为预防运动性贫血提供依据。 研究方法 大鼠在可调整流速的流动水槽中进行8 周递增负荷模式运动，运动负荷的模 式为第一周初运动时间2 0 m t n ，流速2 3 3 c m s ，逐渐递增至第八周末力竭，最高 达到流速2 9 6 c m s 。在每个训练周末次日分别抽取安静、运动组大鼠腹主动脉血， 测试、分析红细胞参数及网织红细胞参数的变化。 研究结果与结论 安静对照组大鼠在实验期生活阶段，红细胞参数及网织红细胞参数均在定 范围内呈波动性变化，红细胞参数中m c v 、c h c m 、c h 与网织红细胞参数中m f r 、 m f r 、h f r 、h f r 、c h c m r 、r d w r 的波动幅度较大。 在9 一1 8 周龄生长阶段，测得大鼠网织红细胞参数范围为：r e t i c 1 8 - 3 ，1 ， l f r 4 1 6 6 1 6 ，m f r 3 2 3 - 4 1 8 ，h f r 5 5 - 2 2 6 ， i f r 3 8 4 - 5 8 4 ， c h r l 8 0 - 1 9 3 p g ，c h c m r 2 6 8 - 2 9 3 9 d l ，m c v r 6 2 6 - 7 0 5 f l ，r d w r 9 3 - 1 2 2 ， c h d w r l 9 卜2 2 5 p g ，h d w r 2 2 3 3 0 8 9 d l 。 运动造成h b 降低时，网织红细胞参数中c h r 、m c v r 、c h d w r 显著升高， c h c m r 、h d w r 显著下降。 运动造成h b 降低发生过程中，前一周网织红细胞参数中r e t i c # 、m f r 、h f r 、 运动性缸红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究中文摘要 t f r 与后一周的i l b 呈极显著负相关，相关系数分别为0 5 5 5 、0 6 1 l 、0 5 8 9 、0 6 3 4 ， c h c m r 与之呈显著正相关，相关系数为0 5 1 7 ，其中i f r 与h b 相关系数最高，相关 系数为0 6 3 4 。提示，这些参数的变化可用来预测运动性h b 降低的发生。 关键词：网织红细胞参数红细胞参数血红蛋白大鼠运动训练 作者：谢少云 指导老师：盛蕾 一s t u d yo f d e c r e a s e o f e x e r c i s e - i n d u c e d h e m o 。g 1 o b i n a ，n d c h a r a c t e r i s t i c o f r e t i c u l o c y t e p a r a m e t e r c h a n g e s ，。a b s t r a c t s t u d yo f d e c r e a s eo fe x e r c i s e i n d u c e dh e m o g l o b i na n d c h a r a c t e r i s t i co f r e t i c u l o c y t ep a r a m e t e rc h a n g e s a b s t r a c t s t u d yp u r p o s e i nt h ep r o c e s so fs p o r t st r a i n i n g ，t h eo v e r l o a do f t e ni n d u c e st h ed e c r e a s eo f h e m o g l o b i n 、w h i c hi n f l u e n c e st h es p o r t sa b i l i t y w h e nt h eh e m o g l o b i nd r o p st ot h e r a n g eo fa n e m i an u m b e r ，t h es p o r t sa b i l i t yw i l lb ei n f l u e n c e da sw e l la st h ep a t h o l o g i c c h a n g e m e a n w h i l e ，t h eh e a l t ho ft h ea t h l e t e sw i l lb ed a m a g e d t h er e t i c u l o c y t ei st h e i n c o m p l e t e l y m a t u r e de r y t h r o c y t e t h e r e t i c u l o c y t e p a r a m e t e rc a nd i r e c t l yr e f l e c tt h ef o r m a t i o no fm a r r o we r y t h r o c y t ea n dt h ea c t i v i t yo f t h ee r y t h r o c y t e i ti sv e r yi m p o r t a n tt ot h ej u d g e m e n to ft h ea c t i v es t a t u so fm a r r o wa n d i ti sv a l u a b l ef o rt h ep r e d i c t i o n , d i c t g n o s t i c a t i o na n dd i f f e r e n t i a t i o no ft h es p o r t sa n e m i a a sw e l la st h eo b s e r v a t i o no f t h ec u r a t i v ee f 诧c t t h i ss t u d ya n a l y z e st h ec h a r a c t e r i s t i c so ft h er e t i e u l o c y t ep a r a m e t e rc h a n g eb e f o r e a n da f t e rt h ed e c r e a s eo fe x e r c i s e i n d u c e dh e m o g l o b i nw h i c ho c c u r r e di nt h es p o r t s t r a i n i n go ft h er a t s ，s oa st op r o v i d et h ee v i d e n c e sf o rb e t c e rm o n i t o r i n gt h eh e m o g l o b i n d e c r e a s ea n d p r e v e n t i n gt h es p o r t sa n e m i ai nt r a i n i n g s t u d ym e t h o d s l e tt h er a t ss w i mi na na d j u s t a b l es w i m m i n gp o o lw i t hf l o w i n gw a t e r , i nw h i c hr a t s s w i ma t p r o g r e s s i v et r a i n i n gl o a dd u r i n ge i g h tw e e k s e r y t h r o c y t ep a r a m e t e ra n d r e t i c u l o c y t ep a r a m e t e ra r em e a s u r e df r o mr a t s a b d o m e na r t e r ya te v e r yw e e k e n d t h e m o d eo ft r a i n i n gi s2 0m i n u t e s ，v e l o c i t yo ff l o w2 3 3c m sa tt h eb e g i n n i n go ft h ef i r s t w e e ka n di n c r e a s eb yd e g r e e s ，t i l lt h er a t sa r ee x h a u s t e da tt h ee n do f t h el a s tw e e kw i t h t h ev e l o c i t yo f f l o w2 9 6c m s c o n e l u s i o n s i nt h eg r o w t hp e r i o d ，c o m p a r e dt ot h et r a i n i n gg r o u p ，t h ec o l n l t l o ng r o u pr a t s e r y t h r o c y t ep a r a m e t e ra n dr e t i c u l o c y t ep a r a m e t e rf l u c t u a t e di nac e r t a i nr a n g e ，a n dt h e m c v c h c m ，c h ，m f r ，m f r ，h f r ，h f r ，c h c m ra n dr d w r w e r ef l u c t u a t e d g r e a t l y 1 1 i s t u d yo f d e c r e a s eo f e x e r c i s e - l n d u c e dh e m o g l o b i na n dc h a r a c t e r i s t i c o f r e t i c u l o c y t e p a r a m e t e rc h a n g e 5 皇b s a c t w em e a s u r e dt h er e t i e u l o c y t ep a r a m e t e ro ft h er a t si nt h eg r o w t hp e r i o do f9 - 1 8 w e e k s ，t h er e s u l t sa r er e t i c 1 8 - 3 1 ，l f r 41 6 6 1 6 ，m f r 3 2 ，3 - 4 1 8 h f r 5 5 - 2 2 6 ，i f r3 8 4 5 8 4 ，c h r1 8 0 1 9 3 p ，c h c m r2 6 8 2 9 3 9 d l ，m c v r 6 2 6 7 0 5 f l ，r d w r9 3 1 2 2 ，c h d w r1 9 1 2 2 5 p g ，h d w r2 2 3 3 0 8 9 d l w h e nt h eh e m o g l o b i nd e c r e a s e sa st h er e s u l to ft h es p o r t st r a i n i n g ，t h ec h r ，m c v r a n dc h d w ri n c r e a s ed r a m a t i c a l l yw h i l et h ec h c m ra n dh d w rf a l lo b s e r v a b l y d u r i n gt h ed e c r e a s i n go fh e m o g l o b i no w i n gt ot r a i n i n g ，t h e r e i s s i g n i f i c a n t n e g a t i v ec o r r e l a t i o nb e t w e e nr e t i c # ，i f r ，m f r ，h f ro ft h er e t i c u l o c y t ep a r a m e t e ri n t h ee a r l i e rw e e ka n dt h eh e m o g l o b i ni nt h e1 a t e rw e e k ，t h ec o r r e l a t i o nc o e m c i e n t sa r e o 5 5 5 ，o 611 ，o 5 8 9a n do 6 3 4 ，a n dt h e r ew a ss i g n i f i c a n tp o s i t i v ec o r r e l a t i o nb e t w e e n c h c m r a n d t h e h e m o g l o b i n ，t h ec o r r e l a t i o nc o e f f i c i e n t i s0 5 1 7 ，o f w h i c h t h e i f r i s t h e h i g h e s t ( p s t h ec h a n g eo ft h e s ec o e f f i c i e n t sc a nb eu s e dt op r e d i c tt h ed e c r e a s eo f e x e r c i s e i n d u c e dh e m o g l o b i n ，) k e yw o r d s ：r e t i c u l o c y t ep a r a m e t e r , e r y t h r o c y t ep a r a m e t e r , h e m o g l o b i n ，r a t ， s p o r t st r a i n i n g w r i t t e nb yx i es h a o y u n s u p e r v i s e db ys h e n g l e i 运动忭血红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究1 序言 1 序言 1 1 选题依据 运动性贫血，是指“由于运动训练或比赛造成单位容积血液中血红蛋白浓度、 红细胞数值低于正常值的现象”。运动性贫血是影响运动员运动能力的重要因素之 一，尤其是对体能类项目运动员的运动能力影响很大。冯连世( 2 0 0 2 ) 研究认为， 当运动员发生运动性贫血，血红蛋白含量显著下降时，有氧代谢和无氧代谢能力 下降，影响运动能力的发挥。在竞技运动训练过程中，常由于运动负荷的过大， 造成血红蛋白浓度的下降，影响运动能力，引起机体产生一系列生理变化，当血 红蛋白下降至贫血数值范围时，不但影响运动能力，可能出现病理性变化，损害 运动员身体健康。因此，如何监控运动训练过程中运动性贫血的发生，提高运动 训练效果、保证运动员身体健康，是当今竞技体育和运动医学界面临的重要问题。 医学上判断贫血时首先进行血液学的检查，检查的指标包括血红蛋自浓度 ( 1 i b ) 、红细胞计数( r b c ) 和红细胞比积( h c t ) ，其中血红蛋白浓度作为判断 贫血的标准，而红细胞计数和红细胞比积通常用于红细胞参数的计算，红细胞参 数主要作为贫血类型以及作为反映机体铁代谢状况的判断依据。我国成年人血红 蛋白正常范围男性为1 2 1 6 9 d l ，女性为1 1 - 1 5 9 d l 。我国普通人群安静时血红蛋白 正常范围和贫血诊断适用于运动员，即男性低于1 2 d l ，女性低于1 1 9 d l ，1 4 岁 以下男女均为1 2 9 d l 。按此标准，樊云彩( 2 0 0 4 ) 在冬训前对江苏省3 4 0 名运动 员( 男2 0 5 名，女1 3 5 名) 进行了血液测试，发现有1 2 的女运动员存在贫血现 象，但是运动员_ 血l 红蛋白低于理想值的却有较大比例p 1 。 血红蛋白是运动训练监控与运动员机能评定中最常用的指标之一，简单易测 并具有直观性，但是因为血红蛋白的变化具有一定的滞后性，一般在监测到血红 蛋白变化时，运动员的运动能力和健康状况已经受到了不同程度的影响，无法做 到对运动性贫血的早期监测与早期预防。郭玉成等人( 2 0 0 2 ) 对利用血红蛋白与 血尿素评定散打运动员身体机能的研究认为，血红蛋白的变化显著依赖于运动量 的变化，而与课的强度相关不很明显，并常常表现出对运动量反应的滞后性( 一般 滞后周期为l 周左右) 。这种情况下，运动员主观感到累，肌肉酸痛，浑身疲乏，而 测试指标却无明显下降迹象f 3 1 。另有资料表明，游泳运动员血红蛋白下降2 0 n ， 运动成绩已经有明显下降，r u s k o h ( 1 9 9 1 ) 将血红蛋白值处于1 3 0 9 l 称为“潜在 运动性血红蛋白降低与阿织红细胞参数变化特点的研究 1 序言 性贫血”【4 j 。因此，单单通过血红蛋白的监测不能及时可靠地反映出运动员是否贫 血的身体机能状态。传统上主要是通过对红细胞代谢参数和铁代谢参数的监测， 对贫血进行评价的。有资料表明，运动员铁状态指标比如血清铁蛋白浓度、转铁 蛋白饱和度可能正常，但血红蛋白浓度或红细胞计数位于一般人群正常范围的偏 低水平口】。此外有报道认为，血红蛋白在用于判定贫血存在与否时具有一定的应用 价值，但对于贫血产生的原因却不能给出任何信息。 缺铁性贫血和溶血性贫血是运动过程中经常发生的贫血类型【6 j 。耐力运动员、 女运动员、青少年运动员因为其自身特点及其项目特点的关系，缺铁状况更为严 重，易出现缺铁性贫血 6 。7 。此外，运动过程中，由于血液循环加快、体温升高、 肌肉或足底的挤压、外伤、血浆口h 下降以及儿茶酚胺浓度升高等原因导致红细胞 脆性增大，破坏加速【8 】，使得红细胞寿命缩短，导致溶血的发生。此时为使血液中 红细胞的数量和血红蛋白含量保持平衡，相应的，骨髓生成和释放红细胞的速度 加快。但是如果红细胞的破坏速度超过了骨髓生成红细胞的代偿能力，则血循环 中红细胞数减少，发生溶血性贫血现象 6 】。此时新生成的红细胞在成熟过程中，血 红蛋白的合成对于铁的需求增加，如果此时体内铁储备不足，或者没有足够的可 利用铁供应也容易产生铁缺乏的现象。因此，溶血性贫血的首要任务也是对铁的 存在形式的有效监测。 血清铁浓度( s e r u mi r o n ，s i ) 、血清转铁蛋白饱和度( s e f i u mt r a n s f e r r i n s a t u r a t i o n ，t s ) 、总铁蛋白结合力( t o t a li r o nb i n d i n gc a p a c i t y ，t i b c ) 、血清铁蛋白 ( s e r u mf e r r i t i n ，s f ) 、红细胞游离原卟啉( f r e ee r y t t t r o c y t ep r o t o p o r p h y r i n ，f e p ) 是判定缺铁性贫血比较常用的指标。当s i 1 0 7 u m o l 1 ( 6 0 u 【g d 1 ) ，t s 6 4 4 4 u m o l 1 ( 3 6 0 u g d 1 ) ，s f 5 0 0 u g 1 ( o 9 u m o l 1 ，正常为 2 0 0 4 0 0 u g 1 ) ，符合其中任意两项可判定为缺铁性贫血。但是，因为受到各种原因 引起的疾病，如慢性疾病引起的贫血、溶血性贫血等影响，在诊断铁缺乏和缺铁 性贫血时的敏感性和特异性受到限制【9 。另有研究报道认为，s i ，t s 、t i b c 在监 测体内铁的存在形式时缺乏敏感性，并且在独立使用时，不具有稳定性“。 因此，找到一个直观、有效，又简单易测的指标，在运动性贫血或运动性血 红蛋白降低前给予提示具有极为重要的意义。网织红细胞参数的研究提出，检测 技术的不断成熟、完善及其在临床的应用，有助于提高贫血诊断的水平。临床上 大量研究已经证实，在红细胞成长的过程中，从早幼红细胞至晚幼红细胞，幼红 细胞在不断的利用骨髓内的储存铁合成血红蛋白。从红细胞的发育过程来看t 在 运动性血红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究 1 序言 各种原因引起的贫血时，网织红细胞参数的变化也早于成熟红细胞，因此，通过 观察运动员网织红细胞参数的变化，可对运动员红细胞的生成与破坏的特点和规 律进行及时的了解，为及时采取预防措施，预防运动性贫血的发生和发展。 1 2 文献综述 1 2 1 网织红细胞概述 红细胞白骨髓中造血干细胞成长至发育为成熟红细胞经历了不同阶段，通常 分为干细胞阶段( 爆式集落形成单位一红系集落形成单位) 、幼稚细胞阶段( 原始 红细胞一早幼红细胞一中幼红细胞一晚幼红细胞) 【l i ”】。从早幼红至晚幼红，幼红细 胞在不断的利用骨髓内的储存铁合成血红蛋白，网织红细胞是晚幼红细胞脱核后 发育为成熟红细胞过程浆内含有残留r n a 的红细胞，是介于晚幼红细胞与成熟红 细胞之间的尚未完全成熟的红细胞，其在骨髓中成熟需持续4 天。成人在正常 情况下，所有红系细胞以网织红细胞形式从骨髓中释放，在外周血中完成最后的 成熟过程，大约2 4 小时内可辨认。 网织红细胞较正常成熟红细胞略大，直径8 - 9 5 u r n ，根据网状结构密度可分为 五型。 0 型：( 有核型) 嗜碱性物质在有核红周围呈较浓的蓝色网织结构，此型存在 于骨髓。 i 型：( 丝球型) 嗜碱性物质位于细胞中央似致密之线团，此型一般存在于骨 髓中，正常人周围血中偶见。 i i 型：( 鱼网状) 网织物由密逐渐变松散为大网眼的鱼网状，此型大量在骨髓 中，周围血中少见。 i i i 型：( 破网状) 网状物减少，形成残破不全的网状，周围血中可见到少量。 型：( 点粒型) 嗜碱性物质呈数量不一的颗粒或丝状体，多位于细胞的边缘， 此型在周围血中常见1 1 4 1 5 1 。 网织红细胞参数中m c v r ( 网织红细胞平均体积) 、c h r ( 网织红细胞血红蛋 白含量) 、c h c m r ( 网织红细胞血红蛋白平均值) 、r d w r ( 网织红细胞血红蛋白分 布宽度) 的变化均与幼红细胞合成血红蛋白的数量有关，而血红蛋白的生成量又 受到体内可利用铁的影响【1 11 m 。临床上网织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统 造血机能，当发生溶血时网织红细胞大量进入血液循环，而贫血时网织红细胞数 升高且随着贫血的发展进一步升高旧1 8 l 。临床上大量的研究表明，网织红细胞参 运动性m 红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究1 序言 数可直接检测红细胞的成长活性，是骨髓活性的重要指标，能对贫血进行分类、 鉴别诊断和指导治疗。临床上，网织红细胞参数的有效性在贫血疾病的治疗与 监测中已经得到广泛的印证。 1 2 2 网织红细胞参数在监测铁缺乏及其铁剂治疗过程中的意义 铁缺乏是常见的营养性缺乏，也是导致儿童和妇女贫血的主要原因。乐家新 等关于新型网织红细胞参数在缺铁性贫血疗效观察中的应用研究表明，缺铁性贫 血患者在铁剂治疗后，网红参数网织红细胞绝对数( r e t i c # ) 、网织红细胞内血红 蛋白量( c h r ) 、平均网织红细胞体积( m c v r ) 于第4 天明显升高，p 0 0 1 ，第 7 天恢复正常；血红蛋白( h b ) 于第1 4 天明显升高，p 0 0 l ，第2 8 天恢复正常； c h 、m c v 、c h c m 于第2 8 天明显升高，p 0 0 l ，第4 9 天后恢复正常；r d w 于 第7 天明显升高，p 0 0 t ，1 4 天后又逐渐降低，第1 2 0 天恢复正常。因此推断出 r e t # 、c h r 、m c v r 可作为评价缺铁性贫血( i d a ) 患者铁剂治疗后骨髓对治疗反 应最敏感的指标。 m i t t m a nn 等对c h r 低于2 6p g 的患者进行分析，发现功能性缺铁的现象比较 严重，此外，c h r 每月的变化都与r b c 计数，血红蛋白和咀球压积的变化呈直接 显著相关。表明c h r 可反映红细胞生成的变化 2 。b h a n d a r is 等的研究发现在静 脉注射铁剂治疗过程中，红细胞铁蛋白和c h r 的测定可表明供给红细胞生成的铁 增加。这些测定可对功能性铁缺乏进行有效的诊断，并且可精确的监测患者对静 脉注射铁剂治疗过程中的反应。研究认为c h r 在诊断血液透析患者r h u e p o 治疗 时功能性缺铁的发生要比利用转铁蛋白饱和度和铁蛋白等常规参数要敏感多了 2 1 1 。 铁供应不足时，细胞常表现为小细胞低色素性【6 。2 1 1 。s c h a e f e rr m 研究认为低 色素红细胞百分比( h y p o ，即红细胞中血红蛋白浓度低于2 8 9 d 1 ) 和c t l r 是诊 断缺铁性红细胞的两个重要参数，低色素红细胞百分比在诊断骨髓中铁供应不足 时的特异性相当高【”1 。d r j a m e s c o o k 通过测定血清铁蛋白的水平得出铁储各的量， 对传统诊断铁缺乏的参数( 如，血红蛋白、转铁蛋白饱和度，m c h ) 与目前新的 诊断方法( 低色素红细胞百分比和c t t r ) 进行比较【2 4 1 ，得出结果也支持上述理论。 大量的文献资料表明，与传统监测贫血的参数相比，网织红细胞参数c h r 是鉴别 诊断铁缺乏和缺铁性贫血的最有力的参数，其的敏感性和特异性均较高( 见表1 ) 。 运动性【n 红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究i 序言 表卜1常用监测铁缺乏的参数敏感性和特异性比较m 成熟红细胞参数( 如红细胞平均体积m c v 、红细胞平均血红蛋白浓度m c h c 、 红细胞平均血红蛋白含量m c h ) ，因其在血液中循环的时间较长，不能迅速的反 映出红细胞的生成情况。在建立铁缺乏的人实验模型中，要6 1 2 周才能发现m c v 的变化。而网织红细胞因其释放到外周血中的时间较短，大约经过2 4 小时就可以 辨认。利用网织红细胞参数监测静脉放血建立铁缺乏的模型时，可很快观察到巨 幼网织红细胞数( m a c r o ) 增加 1 6 1 。另有学者研究证明在对缺铁性贫血严重的患 者进行铁剂治疗时，m c v r 、网织红细胞血红蛋白浓度的平均值( r e t i c u l o c y t e h e m o g l o b i nc o n c e n t r a t i o nm e a n ，c h c m r ) 、c h r 可迅速作出反应【2 5 j 。而在铁剂补充 过程中，网织红细胞平均体积( r e t i c u l o c y t em e a d _ c o r p u s c u l a r ，m c v r ) 的增加是最 早可以观察到的，其次是网织红细胞计数( r e t i c 和r e t i c # ) 和红细胞平均体积。 在对大细胞贫血的患者，进行叶酸或b 1 2 补充时，同样可以观察到网织红细胞的 平均体积恢复到正常水平要比成熟红细胞平均体积快的多“。 1 2 _ 3 网织红细胞参数在监测溶血性贫血时的意义 溶血性贫血是红细胞寿命大量缩短或大量破坏而产生的一组贫血，在临床上， c h r 对于判断溶血患者体内铁的存在形式具有很高的价值。它可直接对可利用铁 进行测定，并可在测试当天对铁的存在形式进行迅速的反映2 “，p a u lc u l l e n 等 对h c t 、c h r 、铁蛋白、低色素红细胞的百分比等参数，在诊断溶血性贫血患者铁 缺乏情况的研究认为，c h r 2 5 可作为溶血患者缺铁性 红细胞生成的可靠指标 2 ”。t s u c h i y a k 研究认为c h r 和h c t 相结合测定，是诊断 溶血患者体内铁的存储形式的敏感特异性指标2 钔。此外，还有学者研究报道认为 r b c 造影和红细胞碎片增多也是溶血的标志p 。 1 3 网织红细胞参数与运动的关系 临床上有关贫血的发生机制、监测指标等方面的研究已有较大进展，网织红 运动性血红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究 l 、序言 细胞参数在临床上也己得到了广泛的应用，但是有关网织红细胞参数与运动关系 的研究在国内外并不多见。 国内外学者对于不同人群网织红细胞参数的参考范围展开了调查，并且制定 了参考标准，为贫血的临床诊断和治疗提供了一定的参考依据1 5 瑚瑚瑚。3 7 1 。在 运动医学界，d o n & r i og 等人( 1 9 9 5 ) 的研究发现，运动员网织红细胞参数的参 考范围与安静人群相似田 。mja s h e n d e n 等人( 1 9 9 9 ) 的研究显示，男女运动员 之间网织红细胞血红蛋白浓度( c h c m r ) 、网织红细胞血红蛋白含量( c h r ) 及网 织红细胞血红蛋白浓度分布宽度( c h d ，r ) 存在性别差异性，p 值分别为o 0 1 ， o 0 2 ，o 0 2 。与普通人群相比，运动员网织红细胞血红蛋白含量c h r 和网织红细胞 内血红蛋白浓度( c h c m r ) 均高于普通人，长期剧烈运动后，网织红细胞参数变 化甚微1 2 2 】。 国内外对运动时血红蛋白与网织红细胞参数相关性的研究亦处于起步阶段。 c a r l ob r g u n a r a ( 1 9 9 9 ) 等人认为网织红细胞的相关参数：网织红细胞平均体积 ( m c v r ) 、网织红细胞血红蛋白浓度( c h c m r ) 、网织红细胞血红蛋白含量( c h r ) 、 网织红细胞体积分布宽度( r d w r ) 等数值变化在主要取决于幼红细胞合成血红蛋 白的数量 3 2 1 。d r e s s e n d o r f e r ( 1 9 9 1 ) 在1 5 人进行2 0 天5 0 0 公里长跑训练中发现 有1 2 人血红蛋白明显下降，而无论是否补充铁，网织红细胞计数都逐渐地增加， 最终达到基础值的8 倍。不管运动员血清铁状况如何，或是否补充铁，“跑步运动 员的贫血”发生率为7 3 s 8 1 。 樊云彩( 2 0 0 4 ) 研究中发现，男运动员网织红细胞血红蛋白浓度( c h c m r ) 、 网织红细胞血红蛋白浓度分布宽度( c h d w r ) 、网织红细胞血红蛋白含量分布宽度 ( h d w r ) 、网织红细胞绝对数r e t i c # 、网织红细胞内血红蛋白含量( c h r ) 与血红 蛋白均有高度相关性，p 0 0 1 ：女运动员网织红细胞内血红蛋白含量( c h r ) 、中 荧光素网织红细胞( m f r ) 与血红蛋白有相关性，p 值分别为o 0 0 0 和o 0 3 0 af a l l o n ( 2 0 0 2 ) 对进行6 天超长马拉松运动的运动员的研究发现，虽然红细胞的系列指 标没有显著改变，网织红细胞总数也没有显著改变，但是高r n a 含量的网织红比 例在运动的后几天增加，说明骨髓的红细胞合成在增加】。s p o d a r y k k ( 1 9 8 5 ) 通 过对力量及耐力运动员的对比研究发现，运动员红细胞参数没有显著差异性，但 耐力运动员的网织红计数却有显著地增加1 4 ”。 运动性m 红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究1序占 1 4 本课题研究的意义 贫血是一个相对比较复杂的问题。临床上，网织红细胞参数的有效性在贫虹 疾病的治疗与监测巾已经得到广泛的印证。而在运动性贫血发生和发展、血红蛋 白数值不断下降时，网织红细胞各项参数如何相应变化，其变化规律如何，还有 待进一步深入研究。因此，本文设想通过对w i s t a r 大鼠持续训练至血红蛋白降低 的状态下，网织红细胞参数的变化状况进行系统地跟踪调查，通过分析，总结其 变化规律，旨在为及早预防运动性贫血或运动性血红蛋白降低的发生和运动员的 机能评定提供一些新的实验依据和方法。 运动性血红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究2 实验对象与方法 2 实验对象与方法 要解决运动性血红蛋白降低这一问题的关键是要了解运动训练导致运动性血 红蛋白降低发生的机制，这就要求建立运动性血红蛋白降低的模型，以进一步深 入研究运动训练导致运动性血红蛋白降低的机制。纵观当前医学界研究贫血动物 模型主要是通过放血、药物干预、强制性缺乏某种营养素等方式而建立的，这与 运动实践中运动性贫血的发生机制只是模拟某一方面变化，与运动性贫血难以完 全一致，其模型迄今还处于研究之中。 由此，必须建立单纯由于运动训练所导致的运动性贫血或运动性血红蛋白降 低动物模型，从而使对运动性贫血发生机制的研究成为可能。本研究通过改进大 鼠在流动水槽内运动的模式实验，希望建立更接近运动员递增负荷强度与量度的 运动性血红蛋白降低的运动模型。 2 1 实验对象 健康s p f 级雄性w i s t a r 大鼠2 1 3 只，体重2 5 0 1 2 1 9 ，7 周龄，由上海斯莱 克实验动物有限责任公司提供，动物许可证号：s c x k ( 沪) 2 0 0 3 - 0 0 0 3 ，等级a 级。动物饲料为全价营养颗粒饲料，由江苏省协同医药生物工程责任有限公司提 供 许可证号：苏a 饲生字2 0 0 2 ( 0 0 9 ) ，含铁量3 2 1 m l o o g 。大鼠自由饮食、 饮水。动物房内放置空调、排气扇，温度2 3 2 ，湿度4 0 6 0 。分笼饲养，每 笼不超过5 只，自由饮食，自然昼夜节律变化光照。 2 2 实验方法 2 2 1 动物筛选 所有大鼠正常饲养一周后，淘汰其中体重过重与过轻的大鼠1 9 只，剩余1 9 4 只。之后以1 8 0 c r r g s 的流速在流动水槽内进行4 天的适应性训练，第5 天开始以 2 3 3 c s 的流速再进行2 天的适应性训练，每次训练均持续5 r a i n 。再次淘汰其中 体重过重与过轻及不能完成训练大鼠1 7 只，剩余1 7 7 只。 2 - 2 2 动物分组 筛选剩余的1 7 7 只大鼠随机分作空白、安静、运动三大组，安静、运动组根 据实验需要又各分作八组。其中运动组大鼠共1 0 5 只，为保证最终存活量达到基 本统计学要求，后几组数量相应增加。经t 检验，各组间体重均无显著性差异。具 运动性血红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究2 实验对象与方法 2 2 3 正式实验 分组完毕后，运动组在正常饲养一周后开始正式实验，训练在流动水槽中进 行，水温2 6 3 2 。 训练采用递增负荷的方式进行，共进行八周，每周训l 练6 天。前5 周水槽流速 2 3 3 c 州s ，第6 周2 7 7 c r r d s ，最后2 周增加到2 9 6 c r r d s ，并逐渐增# n i t l 练时间( 见表3 ) 。 安静组大鼠于每个训练日，在相同水温状态下自由浸泡1 0 m i n 。 表3 大鼠每周运动负荷梯度 周次强度( c m s ) 周初运动时间( r a i n ) 周末运动时间( r a i n ) 、+一一一 一2 3 3 1 7 2 0 2 4 二2 3 3 1 7 2 4 2 8 三2 3 3 1 7 3 0 3 0 四2 3 3 17 4 0 4 0 五 2 3 3 17 6 0 6 0 六2 7 7 1 5 1 0 0 1 2 0 七 2 9 6 1 6 2 2 0 2 5 0 八2 9 6 1 6 2 5 0力竭 一一一 q 运动性血红蛋白降低与网织红细胞参数变化特点的研究2 实验对蒙j 方法 2 - 3 取样与测试方法 2 3 1 主要仪器设备 每周i j i 练结束后2 4 小时分别宰杀安静组大鼠8 只、运动组大鼠6 - 8 只，取腹 主动脉血1 5 m l ，o 5 2 小时内用b a y e ra d v i a l 2 0 全自动六分类血球分析仪及相应 配套软件、试剂，主要采用激光散射和细胞化学( 过氧化酶和嗜碱细胞染色) 技 术进行测试分析，测定红细胞参数与网织红细胞参数。空白组大鼠于正式实验开 始前一天宰杀测试。 2 3 2 主要试剂名称与批号 c b c t i m e p a c ( 血球计数试剂) ：批号t 0 1 3 6 1 2 5 2 d i f ft i m e p a c ( 白血球分类试剂) ：批号t 0 1 3 6 1 3 5 2 a u t or e t i c ( 网织红细胞试剂) ：批号t 0 1 - 3 6 1 4 - 5 4 d e f o a m e r ( 去泡剂) ：批号t 0 1 3 6 1 5 - 5 4 e zk l e e n ( 去蛋白清洁液) ：批号y o i 一3 6 1 4 0 1 s h e a t h r i n s e ( 冲洗液) ：批号t 0 1 3 6 1 5 - 0 1 2 3 3 质量控制 每次血样测试前用b a y e r 公司提供的全血校正物进行校正。用三种浓度的全血 质控物( c b c d i f f 低、c b c d i f f 正常、c b c d i f f 高) 及两种浓度的网红质控 物( r e t i c 高、r e t i c 低) 监测仪器，所有项目的质控分析结果均在要求范围内 ( 误差 2 s d ) 方可进行样本上机操作。 2 3 4 测试指标 红细胞参数：r b c 、h b 、h c t 、m c v 、r d w 、c h c m 、c h 、h d w 、c h d w ： 网织红细胞参数：r e t i c 、r e t i c # 、l f r 、l f r 、m f r 、m f r 、h f r 、h f r 、 i f r ? c h r 、c h c m r 、m c v r ? r d w r 、c h d w r 、h d w r a 2 4 统计学处理方法 实验数据采用s p s s l l 6 统计学软件包及m i c r o s o f te x c e l 2 0 0 0 进行统计学分析， 实验数据以平均数标准差表示，组间变化显著性采用双侧t 检验，显著水平为p o 0 5 ，影- h i u ij n ”表示，同组间用“、“ ”表示，非常显著性水平为p o 0 1 ， 异组间用一“表示，同组问用洲“”、“ ”表示。 运动性血红蛋白降低与嗣织红细胞参数变化特点的研究3 实验结果 3 实验结果 3 1 大鼠体重、体征、进食量和行为的变化 3 1 1 大鼠体重的变化 表48 周递增负荷运动大鼠体重变化 从表4 与图1 中可以看出，八周内，安静组大鼠体重增长较快，第四周末体 重与第一周末有极显著性差异，p o 0 1 ，第六周末与第四周末体重有显著性差异， p 0 0 5 ，第七、第八周末体重相对于第四周末体重有极显著性升高，p o 0 1 。将 安静组大鼠体重与周龄做相关分析，得出相关系数为0 7 5 2 ，p o 0 l 。说明安静组 运动性血红强白降低与网织红细胞参数变化特点的研究3 实验结果 大鼠在该生长阶段的体重规律地随周龄增长而增长。 运动组大鼠体重增长较慢，并有随着递增负荷训练的持续有逐渐下降的趋势， 其中，在第四周末较第一、第三周末有显著升高，p o 0 5 ，而第七、第八周末的 体重较第四周末有极显著性下降，口 o 0 1 。 运动组大鼠在完成一周运动后体重