屠猪肌旋毛虫检疫鉴定与预防控制研究.doc

屠猪肌旋毛虫检疫鉴定与预防控制研究摘要：本文作者详细介绍了人畜共患肌型旋毛虫病的危害性，世界性分布状况，病原体形态特征、发育史对外界环境抵抗力，我国流行区域、因素分析；感染、途径、发病机制；人、猪临床主要症状；检疫现状及完善对策；检疫鉴定处理方法、程序、技术要点和预防控制措施。关键词：旋毛虫；检疫鉴定；防控引言旋毛虫(Trichinella Spiralis)病，是一种常见的人兽共患寄生虫病。已有野生(狐、狼、野猪、貂、野鼠)、家养猪、牛、羊(山羊)、犬、猫等百余种哺乳动物自然感染。这些动物之间形成的食物链，使之成为人类的自然感染疫源。对人类身体健康和动物养殖业持续发展有较大的危害。严重影响肉类出口贸易。国际动物卫生组织(OIE)定为B类疫病，我国法定二类疫病。自该病发现至今已有200多年历史，呈世界性分布。近20多年来，世界上许多地区相继暴发，呈地方性、散发性流行。亚洲、欧洲、北美洲等国家发病率较高。猪肉、狗肉是人群发生旋毛虫病的主要污染源。旋毛虫病不仅列为我国三大人兽共患寄生虫病(旋毛虫、囊虫、棘球蚴)之首。而且是我国进出口肉类的首检、必检病种。并列入再度肆虐的疫病之一。规范检疫方法可及早发现疫情，并进行有效预防与控制，可保障人民群众食肉安全和生猪养殖业的持续发展。旋毛虫的检疫、鉴定与处理11检疫方法肌旋毛虫检疫方法有多种；目检法、压片镜检法或投影法、肌肉集样消化法、血清学方法、旋毛虫荧光染色法、激光扫描压缩标本等方法。全国生猪屠宰厂(场)大都采用目检法。大型肉联厂采用镜检法，也有采用以上两法相结合的方式，如有疑问再使用肌肉集样消化法。111 目检法1)操作程序：检疫人员首先在屠猪开膛后的横膈肌采取不少于259，作为检疫肉样。先查看膈肌表面的脂肪及肌膜，将肌肉纵向拉平，仔细观察先看后者深层肌纤维，寻找可疑的小白点。同时顺肌纤维方向剖开横膈肌角观察，见有脂肪样小点或露滴状病灶，即做好标记镜检。按不同部位的4个侧面用医用剪刀顺着肌纤维各剪取似米粒状6个小肉粒依次附贴于2块载玻片上，每块12粒，2块合计24粒以供镜检。2)技术要点；在目检中，我们经常发现各种不同形状、色泽的小点病灶；形似卵圆针尖小白点、细长形枣核状小白点者多属典型包囊。钙化的包囊则在小白点中间有色深的小点。圆形者又类似囊虫的钙化小白点，钙化的包囊或虫体呈灰黄色，大小又似微尘状小点等等。因采样面积大，对成熟包囊或钙化虫体检出率高，但对有感染力尚未成熟的包囊的旋毛虫无法检出。112镜检法1)操作程序：将两块各有12粒肉样的载玻片合并为一，稍用力压扁后，置于放大5080倍的显微镜或投影仪下观察；逐个检查24个肉样压片的每个视野。2)技术要点；在镜检中，可见到形状各异的肌旋毛虫形态；外观形似针尖状小白点的，在显微镜下可见到包囊和钙化的虫体或包囊不清楚的旋毛虫。细长形枣核状小点的，镜检时可见细长似枣核状的包囊，囊中有淡黄色的虫体，卷眙螺旋状浮游于透明囊液内，易于同住肉孢子虫混淆。但后者无包囊。外观乳白色椭圆状脂肪样小点，镜检时清晰可见空包囊，双层或多层包囊的旋毛虫。有包囊的虫体，一般呈淡白或灰白色。镜检时可见虫体形态多样；如链条状、螺旋形、单环、双环螺丝形及其他形状。包囊形态不等；有空包囊、单层包囊、双层包囊、多层包囊。也有包囊不清楚的。偶见包囊中的活虫呈伸缩蜷曲状态。钙化的虫体其包囊不变形，一旦用10盐酸溶液滴于肉样玻片上，5rain后镜检即可见到虫体或不完整崩解的虫体。外观圆形类似囊钙的小白点，镜检可见圆形包囊中的虫体。肌旋毛虫钙化的包囊由于病程不同，在镜检中也清楚可见不同状态；初为两端色暗，囊液与虫体可见；继之钙化囊内有石灰沉淀，视野色暗，但仍可见到虫体。最后的钙化则呈乌黑色的棱形或不规则形的钙盐块。仅隐约可见虫体。压片镜检法的缺点是不能检出寄生密度小于3条g的肌旋毛虫病猪，不能检出未形成包囊的旋毛虫。113肌肉集样消化法1)程序：采样(横膈肌25309)一捣碎一消化一集虫镜检一复查处理。2)操作方法：每头猪采肉样不少于259编号(与胴体编为同一号码)送旋毛虫检疫室。检疫员从每头猪肉样上剪取19小样，分别以10、50、100头为一组。肉样捣碎：将一组肉样的检样置于组织捣碎，原则要求是在不绞碎虫体的前提下，尽量使肌肉组织捣碎机捣碎。消化：使用磁力搅拌器在4050C温度中搅拌消化，30min或同温下以80次rain振荡，6070min。集虫：离心沉淀。先在分液漏斗中沉淀30rain，放出40mL于离心管内离心lOmin，弃去30mL上清液，剩下lOmL倒入平皿内，先用50目筛，除去粗渣，再用100目筛过滤。镜检：使用80倍显微镜检查，如发现包囊虫体或钙化虫体，每组每次检出阳性达50以上时，根据编号即固定可疑病猪采肉样，然后再行复查。复查：采取膈肌和肋间肌等肉样，按上述程序方法检查。处理：如确认是肌旋毛虫，即按法定要求作无害化处理。这种方法旋毛虫检出率高，但缺点是不能检出住肉孢子虫。因住肉孢子虫体与肉样肌纤维经消化后就不能检出了。12鉴定肌旋毛虫检疫关键是否能突破检出率，要点是正确的操作方法和鉴定。肌旋毛虫以横膈肌、肋间肌的表面，特别是在近肌腱处检出率高，肌肉表面多、深层少，舌肌、食道肌较少，心肌更少。121包囊形成期虫体形态特征1)幼虫未进入肌纤维，仅在纤维之间或表面者，呈微曲、蜷曲状。2)幼虫已进入肌纤维但尚未形成包囊者有时虫体周围隐约可见包囊液的混浊物质，即因虫体刺激，引起的炎症灶，不见囊壁。3)形成双重包囊者，虫体多屈曲环绕呈盘旋状。多数包囊位于横纹肌之内即肌膜膨胀后呈椭圆、卵圆形及纺锤形。有的包囊呈不标准较小虫体的长棱状；应注意鉴别诊断，即注意同肌肉萎缩形成的小囊相区别。前者可见到虫体，后者无虫体，囊内液无色透明有光泽似甘油状。包囊两端可见向两端延伸的肌纤维。虫体形态多为淡黄色，常蜷曲，呈盘旋状，浮游于无色液体内、形状多样。122包囊钙化期虫体形态特征1)第一期钙化：包囊两端色暗囊液与虫体清晰可见。2)第二期钙化：囊内严重石灰样沉淀致视野色暗但仍可见到虫体。有的囊内显得模糊但隐约可见未死的虫体。3)第三期钙化：包囊全部钙化近似黑色纺锤体，隐约可见虫体，但不易见到囊壁。123死亡虫体的钙化形态特征包囊和包囊液清晰可见。死亡的虫体呈蜷曲盘旋状、暗黑色。压片镜检可见折断的黑色残骸；有的囊液显得混浊似晶体状。有的虫体一端暗黑色，另一端为暗黄色。124多种形态的包囊及虫体特征1)虫体被压片或剪破。明显见到虫体挤出囊外。虫体四周有光泽的无色透明液。2)一头猪肉样中可能同时有活虫体也有钙化虫体。3)囊内虫体典型蜷曲盘旋状，尚有结节状、单环状、S状、8字状、双钩状、单钩状、对折微曲状、螺纹状等等。4)明显的包囊中仅见囊内有暗色和脂肪颗粒样而未见虫体者，系虫体死予幼龄而自行消失所产生的新生组织，也可能是虫体为晶体颗粒所覆盖，如加10盐酸溶液后镜检可见到虫体。5)活虫体无包囊，呈时伸时屈的活动状态，但过后即静止呈蜷曲盘旋状。125虫体感染的肌肉病变1)轻度感染：虫体部位横纹肌肉色泽、硬度与气味无明显变化与正常肌肉近似。2)重度感染：胴体消瘦，虫体密集寄生部位及四周横纹肌肉严重变性、色淡似煮熟肉样，心肌脂肪呈胶样浸润。13无害化处理131 在目检和镜检中发现上述包囊虫体或钙化虫体形态特征的，胴体骨骼肌(横纹肌)、心肌作化制工业油或销毁处理。132对肉样镜检中发现少于5个包囊虫体或钙化虫体的胴体，可采取高温处理作熟肉制品。无高温设施设备的，可采用低温速冻法；经一15快速结冻后，再在-25至一30保持lO12h，即可杀死虫体。2预防与控制针对肌旋毛虫病的流行病学特点采取科学的预防控制措施。近年来由于我国旋毛虫病死亡病例都发生在西南地区，从卫生部调查疫情资料来看，西部、中部、东北部地区血清阳性率比其他地区高，应把这三个地区列入防控的重点地区。21科技立项、专题研究应由卫生(中国CDC)、商务(屠宰技术鉴定中心)、农业(动物防检部门)专家联合组成课题调研组；对近几年来我国部分地区人、猪旋毛虫病流行现状和生猪、犬等动物屠宰检疫情况开展系统调研，掌握第一手资料，评估目前防控效果与存在问题。为国家制定宏观防控对策提供科学依据，推进我国人兽共患(人、猪、犬)旋毛虫病预防控制上一个新的台阶，确保人畜健康，促进动物养殖业持续发展。22大力开展以肉食品食用安全为主题的科普宣传与健康教育活动提倡熟肉食品，改变居民喜食生皮、半生不熟猪肉和食品安全检测未检动物肉类的习惯，对旋毛虫危害有基本认识，增强消费者自我保护意识和能力。但鉴于西部地区少数民族多，传统肉食习惯历史悠久，要彻底改变比较困难，防控工作任重道远，应作为长期重点目标管理。23推进和发展规模化、标准化生猪养殖场和养殖小区倡导科学养猪，严禁饲喂泔水、垃圾等不洁饲料，严控犬、猫等动物养殖。不让放牧猪在荒山、野地食人家鼠、野鼠，加强生猪养殖、屠宰除害灭鼠工作，是预防控制的重要措施。旋毛虫病是在易感动物之间形成的“食物链”使之成为人类的自然疫源。人群中旋毛虫病的流行与猪的饲养及人食入生或半生猪肉制品方式有更为密切的关系。研究显示，来自规模化养猪场的猪旋毛虫病感染率远低于散养猪，我国猪旋毛虫病的流行主要是通过泔水、垃圾传播。猪肉是我国人群旋毛虫病的主要传染源。在19641999年我国人体旋毛虫病暴发中，因食猪肉引起的占958。2000-2004年的暴发次数中，有76的频次是因食用生的或半生猪肉所致。24建立防检结合、疫情调研信息反馈机制农业畜牧动物防疫部门加强调查研究，掌握各省、市、自治区，尤其是流行区域的生猪养殖方式及生猪收购、屠宰检疫和病猪检出情况，通过互联网及时反馈到动物检疫主管部门，防、检密切配合，无缝衔接。便于突出检疫重点进一步加强和规范检疫，提高阳性检出率，防止病猪肉流入市场，有效控制旋毛虫病疫情。发现“疫情”采取防治控制措施，有力遏制疫情扩散。25制定屠猪肌旋毛虫检疫技术标准、规范选用检疫方法规定检疫设施、设备和人员资质及检疫操作规范。在新的法规、标准尚未出台前，各地不同类型生猪屠宰厂(场)仍应按照现行法规、标准、规定的要求认真履行检疫职责；坚持逐头全数检疫，反对擅自删改、简化甚至取消旋毛虫检疫环节，杜绝不检、漏检现象。为此，笔者建议各省、市、自治区政府定点屠宰厂(场)，根据本地区实际疫情和屠宰量，选用目检法、镜检法，目检与镜检结合法，镜检投影法及肌肉集样消化法加强检疫。251镜检投影法、肌肉集样消化法：适用于多年无旋毛虫疫情的安全区域、生猪屠宰量较大、日宰10005000头的大、中型规模化、机械化屠宰厂(场)、肉联厂、肉类出口注册企业。重疫区采用消化法时，把各个组头数减少到不超过510头一组为妥，宜采取镜检投影法。252 目检与镜检结合的逐头全数流水作业检疫法；适用于日宰5001000头的中、小型生猪屠宰厂(场)。253 目检法：以目检法为主，发现肉样有可疑小白点，即作镜检鉴定的方法，适用于日宰500头以下的小型生猪屠宰厂(场)和屠宰点。26加强检疫员专业技术培训。建设一支高素质的检疫队伍农业部动物卫生监管部门，必须督促驻厂(场)屠宰检疫人员认真贯彻动物防疫法生猪屠宰管理条例生猪屠宰检疫规范：生猪屠宰操作规程等法律、法规、标准。强化检查考核与管理，建立奖励机制，奖励检出旋毛虫等疫病的检疫人员，处罚不检、漏检失责人员。分期、分批举办专项检疫技术培班，经考核合格持证上岗。使在岗人员了解旋毛虫病生长发育史和各种不同类型的虫体形态特征鉴别，掌握操作技术和准确鉴别、鉴定处理方法和技术要点。提高旋毛虫病检出率，确保广大人民食肉安全。参考文献13崔晶，王中全我国旋毛虫病