荷叶提取物降脂机理的研究.doc

荷叶提取物降脂机理的研究 近年来，由高脂造成的多种疾病困扰很多人，人们开始寻求可以缓解高脂膳食。荷叶出现在很多具有减肥降脂功能的中药单复方制剂中，药食同源，那么荷叶能否降脂呢？ 材料与方法 试验原料及处理。荷叶原料，粉碎机粉碎，过80目筛子。 实验方法。 （1）胆酸盐标准曲线 配制0.3 mmol/L的胆酸钠、牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠溶液，做母液备用，取上述各溶液 0、0.1、0.5、1.0、1.5 、2.0和2.5 mL 到 10 mL 的容量瓶中，加入磷酸缓冲溶液至2.5 mL，再加入60%的硫酸溶液至10 mL，在水浴锅中水浴 20 min后冰浴 5 min，在 387 nm 处测定吸光度。以胆酸盐的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制胆酸盐的标准曲线。 （2）荷叶中的黄酮、生物碱与胆酸盐结合能力的比较 体外模拟内环境及与胆酸盐的结合的方法 取一定量的样品，加入1 mL 0.01 mol/L的盐酸溶液，在培养箱中消化1h，用氢氧化钠溶液调节pH到6.3，然后加入 4 mL 10 mg/mL的胰酶，在培养箱中消化 1h。在各个样品中分别加入4 mL 胆酸盐溶液，用培养箱振荡1h。转入离心管中，离心20 min。取上清液胆酸盐进行分析。 PVPP去除荷叶黄酮后与胆酸盐的结合能力 分别称取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 g的PVPP，加入20 mL 荷叶浸提液，培养箱中振荡 30 min，转入离心管中，离心 20 min。取上清液进行体外内环境模拟与胆酸盐的结合。 石油醚去除荷叶生物碱后与胆酸盐的结合能力 在荷叶浸提液中加入等量的石油醚，萃取1 h，收集萃取后的荷叶浸提液，重复三次得到一次、两次和三次处理液。取 1 mL上述处理液进行模拟与胆酸盐的结合。 结果与分析 三种胆酸盐的标准曲线回归方程 胆酸钠：y=11.80x+0.004 R2=0.998 牛磺胆酸钠：y=17.66x+0.007 R2=0.997 甘氨胆酸钠：y=15.62x+0.012 R2=0.997 荷叶中黄酮及生物碱与胆酸盐结合能力比较的结果与分析。 （1）荷叶粉末、荷叶水浸提液与胆酸盐的结合能力比较 荷叶粉末和荷叶水浸提液均能结合三种胆酸钠，但是荷叶水浸提液的结合能力强，荷叶具有一定降脂作用。 （2）PPVP去除荷叶黄酮后与胆酸盐结合能力的影响 荷叶浸提液中黄酮含量越高，其结合胆酸盐的能力越强，黄酮会影响胆酸盐在体内的代谢，从而起到降脂的作用。 （3）石油醚去除荷叶生物碱后与胆酸盐的结合能力 荷叶碱对荷叶浸提液结合胆酸盐的能力具有一定的良性影响，但是没有黄酮显著。 荷叶提取物对脂肪酸合酶抑制率的研究。 （1）脂肪酶活性的测定 加入荷叶提取物的样品耗碱量明显减少，这证明了荷叶提取物对于脂肪酸合酶的活性是具备抑制作用的。 （2）荷叶黄酮与荷叶碱对脂肪酸合酶活性的影响 PPVP去除荷叶黄酮后对脂肪酸合酶活性的影响 氢氧化钠的消耗量随着荷叶黄酮的量减少而增加，荷叶黄酮抑制脂肪酸合酶的活性，荷叶黄酮的量越多，对脂肪酸合酶活性的抑制能力越强。 石油醚去除荷叶碱后对脂肪酸合酶活性的影响 经过石油醚萃取的样品的耗碱量低，可得荷叶生物碱影响脂肪酸合酶的活性。 研究表明荷?黄酮是荷叶提