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文档简介

.凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。四、测定原理：红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集，凝块就不会散开，试验结果为阳性。五、试剂及材料(一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所)成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：28贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温(二)材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求： (一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息）, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。(二)标本保存：血液样本必须密封，28保存7天。(三)用于交叉配血必须是28保存3天以内的标本。七、操作程序：(一)将受血者红细胞配成3%盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。(二)将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞(PC)或“次侧”。（四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。各加低离子介质溶液0.6 ml，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s。(五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。(七) 最后加入重悬液2滴，轻轻转动试管混合，并同时观察结果，必要时在显微镜下观察结果。八、结果判定：(一)阴性：60秒内凝块散开，代表由聚凝胺溶液引起的非特异性凝集，配血结果相合。(二)阳性：60秒内凝块不散开，代表红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。(三)如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。九、注意事项：(一)若病人血浆（血清）含肝素，须多加双倍量的聚凝胺溶液以中和肝素。(二)冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起的凝集反应，影响结果判断。(三)加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提高离子强度，降低致敏效果。 (四)抗原抗体比例适当。
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