（环境工程专业论文）盐度和基质对老鼠簕生长及总黄酮含量的影响.pdf

厦门大学硕士论文 摘要 通过设置不同盐度、基质的室外培养实验，研究了老鼠筋( a c a n t h u si l i c i f o # u s l ) 在不同盐度和基质生境条件下的生长，生理特性及体内总黄酮含量的变化。 设计6 个盐度水平：0 、5 、1 0 、1 5 、2 5 和3 5 15 个基质水平：1 0 0 海泥+ 0 砂、 7 0 海泥+ 3 0 砂、5 0 4 海泥+ 5 0 * 4 砂、3 0 海泥+ 7 0 砂( v v ) 、红壤土，均以盐 度5 的人工海水进行培养，分别用0 、3 0 、5 0 、7 0 、r s 表示。培养3 6 5d 。 分析探讨了盐度、基质对老鼠j 5 5 幼苗的生长、生物量分配、光合作用、丙二醛含 量( m d a ) 、游离脯氨酸含量、过氧化氢酶( c a t ) 、过氧化物酶( p o d ) 、超氧 化物歧化酶( s o d ) 、苯丙氨酸解氨酶活性( p a l ) 、体内总黄酮含量的影响，并 且测定了野外老鼠颤植物体内总黄酮含量的月变化情况。结果表明： 老鼠筋幼苗在盐度5 的条件及不含砂的海泥基质条件下茎高生长最佳，较高 盐度和较低营养水平的基质培养下均受到抑制。盐度由o 增加到3 5 后，老鼠蕲 幼苗长叶数和落叶数均分别减少6 2 1 和3 9 6 叶片数减少6 5 5 。单株叶面 积在盐度5 的条件下最大，之后随盐度升高而降低，盐度3 5 的条件下减少了2 2 9 9 c m 2 ；基质中营养水平的降低，使长叶数下降，落叶数增加，含砂7 0 的基质中 植株叶片数量和叶面积分别为不含砂的基质条件下植株的4 3 9 * 4 和5 2 2 。盐度 和基质对老鼠筋植株生物量及其分配有显著影响( p 根中。不同盐度下老鼠筋叶片p a l 活性的随盐度升高而增加，盐度3 5 的条件下p a l 活性比盐度0 下高1 6 9 6 。不同基质下的叶片p a l 活性则先升高 后降低，含砂3 0 的基质下最高( 1 3 3 1 7u g f w m i n ) ，r s 基质下最低( 9 3 1 8 u g f w r a i n ) ，与总黄酮含量的变化趋势相似，说明不同处理条件可能是通过影响 老鼠霸体内的相关酶活性从而影响总黄酮含量。 对野外生长老鼠筋各器官总黄酮含量的监测结果表明，叶片中总黄酮含量在 生殖期较高，生长期较小，夏季较高，秋季较小；茎中总黄酮含量交化趋势与之 相似，但波动较小；花中总黄酮含量蕾期高于盛花期，种子中总黄酮含量高于种 皮。总体看来，各器官总黄酮含量分布为叶中 种子中 花蕾中 花中 茎中 种皮中。 关键词：老鼠筋：盐度：基质；生长；总黄酮 i l l 诸妲：盐度和基质对老鼠筋生长及总黄酮含量的影响 a b s tr a c t a c a n t h u si l i c i f o l i u sl s e e d l i n g sw e r ec u l t i v a t e do u to fd o o r sa n dt r e a t e dw i t h d i f f e r e n tl e v e l so f s a l i n i t ya n ds e d i m e n t s 6l e v e l so f s a l i n i t yw e r e0 ，5 ，1 0 ，1 5 ，2 5 ，3 5 5l e v e l so fs e d i m e n t sw e r e10 0 s e am u d ( 0 s a n d y ) ，7 0 s e am u d + 3 0 s a n d ( 3 0 s a n d y ) ，5 0 s e am u d + 5 0 s a n d ( 5 0 s a n d y ) ，3 0 s e am u d + 7 0 s a n d ( 7 0 s a n d y ) ， r e ds o i l ( r s ) a l ls e e d l i n g si nd i f f e r e n ts e d i m e n t sw e r e 仃e m e dw i t hs a m es a l “哆5 t h ec u l t i v a t i n gp e r i o dl a s t e d3 6 5d a y s s y s t e m i cs t u d yo na c a n t h u si l i c i f o l i u sw e r e c a r r i e do ng r o w t h , b i o m a s sa l l o c a t i o n , c h l o r o p h y l la n dm d aa n df r e ep r o l i n ec o n t e n t , p h o t o s y n t h e t i cp r o p e r t i e s a n dt h ea c t i v i t yo fc a 工p o d ，s o da n dp a l ，t o t a l f l a v o n o i d s t h ec h a n g eo ft o t a lf l a v o n o i d st h r o u g hd i f f e r e n tm o n t h si nw i l da c a n t h u s i l i c i f o l i u sw a sa l s os t u d i e d t h er e s u l t ss h o w e d ： s t e m so fp l a n t su n d e rs a l i n i t y5a n d0 s e d i m e n t sw e r et h eh i g h e s t , t h es t e m h e i g h to fh i g h e rs a l i n i t ya n ds e d i m e n t so fl o w e rn u t r i e n tc d n t e n tw a sr e s t r a i n e d a s t h es a l “t yr o s et o3 5 ，t h en u m b e ro fl e a fp r o d u c t i o na n df a l l e nl e a v e sd e c r e a s e db y 6 2 1 a n d3 9 6 r e s p e c t i v e l y ，n t t m b e ro fl e a v e sd e c r e a s e db y6 5 5 l e a fa r e ap e r p l a n tr e a c h e dm a x i m u m u n d e rs a l i n i t y5 ，t h e nd e c r e a s e da st h es a l i i l i t yw e n tu p t h e l e a fa r e ap e rp l a n tu n d e rs a l i n i t y3 5d e c r e a s e db y2 2 9 9c m 2 u n d e rl o wn u t r i e n t c o n t e n ts e d i m e n t s , b o t ht h en u m b e r so fl e a fp r o d u c t i o na n df a l l e nl e a v e sd e c r e a s e d t h en u m b e ra n da r e ao fl e a v e sp e rp l a n tu n d e r7 0 s a n d ys e d i m e n t sw e r e4 3 9 a n d 5 2 2 o fw h i c hu n d e ro s a n d ys e d i m e n t s r e s p e c t i v e l y b i o m a s s a n d t h e i r d i s t r i b u t i o nu n d e rd i f f e r e n ts a l i n i t ya n ds e d i m e n t sc h a n g e ds i g n i f i c a n t l yq i nr o o t s a c t i v i t yo fl e a fp a li n c r e a s e d 弱t h es a l i n j t yr o s e , w h i c hu n d e r s a l i n i t y5w a s16 9 6 h i g h e rt h a nu n d e rs a l i n i t y0 b u ta st h en u t r i e mc o n t e n to f s e d i m e n t sw e n td o w n , a c t i v i t yo fp a lf i r s ti n c r e a s e dt h a nd e c r e a s e d , w h i c hh a dt h e m a x i m u mu n d e r3 0 s a n d ys e d i m e n t s ( 13 3 17 、l i 母喇m i n ) , w h i l et h em i n i n l u n l u n d e rr ss e d i m e n t s ( 9 3 18u g f w m i 】的1 1 1 i st r e n dw 舔s i m i l a rt ow h i c ho ft o t a l f l a v o n o i d sc o n t e n tc h a n g e t i l i sr e s u l ts h o w e dt h a td i f f e r e n tt r e a t m e n t sm a yi n f l u e n c e t h et o t a lf l a v o n o i d sc o n t e n tb yi n f l u e n c i n ga c t i v i t yo fc e r t a i ne n z y m ew h i c hw a s e s s e n t i a lt ot h es y n t h e s i z i n gp r o c e s s s t u d yo nt o t a lf l a v o n o i d sc o n t e n to fw i l da c a n t h u si l i c i f o l i u ss h o w e d ：t o t a l 厦门大学硕士论文 f l a v o n o i d sc o n t e n ti nl e a v e sr e a c h e dh i g h e s td u r i n gr e p r o d u c t i v ep e r i o d ，a n dw e r e l o w e s ta tv e g e t a t i v ep e r i o d t h a tm e a l l st h et o t a lf l a v o n o i d sc o n t e n ti nl e a v e sw a s h i g h e ri ns u m m e r , l o w e ri na u t u m n t h ec h a n g eo ft o t a lf l a v o n o i d sc o n t e n ti ns t e m s w a ss i m i l a rw i t hw h i c hi nl e a v e s ，b u tt h ef l u c t u a t i o nw a ss m a l l e r t o t a lf l a v o n o i d s c o n t e n ti nb u d w a sh i g h e rt h a ni nb l o s s o m s e e dc o n t a i n e dm o r ef l a v o n o i d st h a n c a p s u l e t h ec o n t e n to ff l a v o n o i d si nd i f f e r e n tp a r t so fa c a n t h u si l i c i f o l i u sw a s i n l e a v e s i ns e e d s i nb u d s ) i nb l o s s o m i ns t e m s i nc a p s u l e s k e yw o r d s ：a c a n t h u si l i c i f o ，f 埘；s a l i n i t ) r ；s e d i m e n t s ；g r o w t h ；t o t a lf l a v o n o i d s v 诸嬗：盐度和基质对老鼠筋生长及总黄酮含量的影响 图索引 图1 一l 黄酮类化合物结构。3 图1 - - 2 苯丙烷代谢途径示意图5 图2 1 盐度对老鼠筋幼苗茎高生长的影响18 图2 2 盐度对老鼠筋幼苗叶片数量变化的影响。2 0 图2 3 盐度对老鼠筋幼苗叶片面积的影响2 l 图2 4 盐度对老鼠筋幼苗单株生物量的影响2 2 图2 5 盐度对老鼠筋幼苗生物量分配的影响2 4 图2 - - 6 盐度对老鼠筋幼苗叶片净光合速率( p n ) 、气孔导度( g s ) 、胞间c 0 2 浓度( c i ) 和蒸腾速率( t r ) 的影响2 8 图2 7 盐度对老鼠筋幼苗根系活力的影响3 0 图2 - - 8 盐度对老鼠筋幼苗叶片丙二醛( m d a ) 和游离脯氨酸含量的影响3l 图2 - - 9 盐度对老鼠筋幼苗叶片过氧化氢酶( c a t ) 、过氧化物酶( p o d ) 3 4 图3 1 基质对老鼠筋幼苗茎高生长的影响。3 9 图3 2 基质对老鼠筋幼苗叶片数量的影响4 l 图3 3 基质对老鼠箭幼苗叶片面积的影响4 2 图3 4 基质对老鼠筋幼苗单株生物量的影响4 4 图3 5 基质对老鼠筋幼苗生物量分配的影响。4 5 图3 - - 6 基质对老鼠筋幼苗叶片净光合速率( p n ) 、气孔导度( g s ) 、4 9 图3 7 基质对老鼠筋幼苗根系活力的影响5 l 图3 - - 8 基质对老鼠筋幼苗叶片丙二醛( m d a ) 和游离脯氨酸含量的影响。5 2 图3 - - 9 基质对老鼠筋幼苗叶片过氧化氢酶( c a t ) 、过氧化物酶( p o d ) 、超氧 化物歧化酶( s o d ) 的影响5 4 图4 - - 1 单因素对老鼠箭总黄酮提取的影响5 9 图4 2 盐度对老鼠筋幼苗体内总黄酮含量的影响6 5 图4 - - 3 基质对老鼠筋幼苗体内总黄酮含量的影响6 6 图4 - - 4 盐度对老鼠筋幼苗叶片苯丙氨酸解氨酶( p a l ) 活性的影响。6 6 图4 - - 5 基质对老鼠筋幼苗叶片苯丙氨酸解氨酶( p a l ) 活性的影响。6 7 厦门大学硕士论文 f i gindelgurei ne x f i g 1 - 1 t h es t r u c t u r eo ff l a v o n o i d sc o m p o u n d 3 f i g 1 - 2p h e n y i p r o p a n em e t a b o l i cp a t h w a y 5 f i g 2 i f i g 2 - 2 f i g 2 3 f i g 2 1 4 f i g 2 - 5 f i g 2 6 f i g 2 - 7 f i g 2 8 f i g 2 9 f i g 3 1 f i g 3 2 f i g 3 - 3 f i g 3 - 4 f i g 3 5 f i g 3 - 6 f i g 3 - 7 f i g 3 - 8 f i g 3 9 f i g 4 1 f i g 4 - 2 f i g 4 3 f i g 4 - 4 f i g 4 5 e f 俺c t so fs a l i n i t yo nh e i g h to fs t e mo f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 18 e f f e c t so fs a l i n i t yo ni e a fn u m b e rc h a n g eo f a c a n t h u si l i c i f o ，磁s 2 0 e f l e e t so f s a l i n i t yo ni e a f a r e ac h a n g eo f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 2 i e f f e c t so fs a l i n i t yo ns e e d l i n gb i o m a s so f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 2 2 e f f e c t so fs a l i n i t yo f fb i o m a s sa l l o c a t i o no f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 2 4 e f f e c t so fs a l i n i t yo nl e a fn e tp h o t o s y n t h e t i cm t e ( p n ) s t o m a t a c o n d u c t a n c e ( g s ) ，i n t e r - c e l l u l a rc c h ( c i ) a n dt r a n s p i r a t i o nr a t e ( t oo f a c a n t h u si l i c i f o l i u s ：1 8 e f f e c t so fs a l i n i t yo nr o o ta c t i v i t yo f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 3 0 e f f e c t so fs a l i n i t yo nl e a fm d aa n df r e ep r o l i n ec o n t e n to fa c a n t h u s i l 缸i f o l i u s 3l e f f e c t so fs a l i n i t yo i ll e a fc a t , p o da n ds o da c t i v i t yo fa c a n t h u s i l i c i f o l i u s 3 4 e f r e c t so f s e d i m e n t so nh e i g h to f s t e mo f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 3 9 e f f e c t so f s e d i m e n t so ni e a f n u m b e rc h a n g eo f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 4 l e f f e c t so fs e d i m e n t so ni e a f a r e ao f a c a n t h u si l i c i f o 矗t ，4 2 e f f e c t so fs e d i m e n t so ns e e d l i n gb i o m a s so f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 4 4 e f f e c t so fs e d i m e n t so nb i o m a s sa l l o c a t i o no f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 4 5 e f f e c t so fs e d i m e n t so nl e a fn e tp h o t o s y n t h e t i cm t e ( p n ) s t o m a t a c o n d u c t a n e e ( g s ) ，i n t e r - c e l l u l a rc c h ( c i ) a n dt r a n s p i r a t i o nr a t e ( t oo f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 4 9 e f l e e t so fs e d i m e n t so nr o o ta c t i v i t yo f a c a n t h u si l i c 须o l i u s 5l e f f e c t so fs e d i m e n t so nl e a fm d aa n df r e ep r o l i n ec o n t e n to f a c a n t h u s i l i c i f o l i u s 5 2 e f f e c t so fs e d i m e n t so nl e a rc a t , p o da n ds o da c t i v i t yo fa c a n t h u s i l i c i f o l i u s 5 4 e f f e c t so f s i n g l ef a c t o ro ns o x h l e ta n du l t r a s o n i ce x t r a c t i o no f ：。5 9 e f f e c t so f s a l i n i t y0 1 1t o t a lf l a v o i l o i d so f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 6 5 e f f e c t so fs e d i m e n t so nt o t a lf l a v o n o i d so f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 6 6 e f f e c t so f s a l i n i t y0 1 1l e a f p a la c t i v i t yo f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 6 6 e f f e c t so fs e d i m e n t so nl e a fp a la c t i v i t yo f a c a n t h u s c f o u s 6 7 诸短：盐度和基质对老鼠霸生长及总黄酮含量的影响 表索引 表l l 盐度对老鼠扬幼苗各部分生物量的影响2 2 表1 2 盐度对老鼠铴幼苗叶绿素和类胡萝卜素含量的影响。2 6 表2 1 不同基质条件下土壤养分含量3 8 表2 2 基质对老鼠筋幼苗各部分生物量的影响4 3 表2 - - 3 基质对老鼠筋幼苗叶绿素和类胡萝卜素含量的影响4 7 表3 - - i 索氏提取和超声提取的正交试验结果及分析。6 2 表3 2 方差分析结果6 2 表3 3 回收实验结果6 3 表4 - - i 老鼠锄地上部各器官中总黄酮含量月变化7 l 厦门大学硕士论文 t a b l ei n d e x t a b 】一】e f f e c t so f s a l n i t yo nb i o m a s so f d i f f e r e n tp a r t so f a c a n t h u si l i e i f o l i u s 2 2 t a b 1 2e f f e c t so fs a l i n i t yo nc h la n d c a rc o n t e n to f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 2 6 t a b 2 in u t r i e n tc o n t e n to f d i f f e r e n ts e d i m e n tt r e a t m e n t s 3 8 t a b 2 - 2 e f f e c t so fs e d i m e n t so nb i o m a s so fd i f f e r e n t p a r t so fa c a n t h u s i l i c i f o l i u s 4 3 t a b 2 - 3e f f e c t so fs e d i m e n t so nc h la n dc a rc o n t e n to f a c a n t h u si l i c i f o l i u s 4 7 t i b 3 1 t a b 3 - 2 t a b 3 3 r e s u l t sa n da n a l y s i so fo r t h o g o n a it e s to fs o x h l e ta n du l t r a s o n i c e x t r a c t i o n 6 2 r e s u l t so fv a r i a n c ea n a l y s i s 6 2 r e s u l t so f r e c o v e r ye x p e r i m e n t s 6 3 t a b 4 - 1t o t a lf l a v o n o i d sc o n t e n to fd i f f e r e n tp a r t so f a c a n t h u si l i c i f o l i u sw i t h i n d i f f e r e n tm o n t h s 71 厦门大学学位论文原创性声明 兹呈交的学位论文，是本人在导师指导下独立完成的研究成 果。本人在论文写作中参考的其他个人或集体的研究成果，均在 文中以明确方式标明。本人依法享有和承担由此论文产生的权利 和责任。 声明人( 签名) ：诜妞 3 年易月re t 厦门大学学位论文著作权使用声明 本人完全了解厦门大学有关保留、使用学位论文的规定。厦门大 学有权保留并向国家主管部门或其指定机构送交论文的纸质版和电 子版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学 校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索， 有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适 用本规定。 本学位论文属于 l 、保密() ，在年解密后适用本授权书。 2 、不保密( ( 请在以上相应括号内打“) 作者签名：褚舾日期：沙名年占月r e 导师签 厦门大学硕士论文 第一章前言 1 1 药用红树植物研究进展 红树植物( m a n g r o v ep l a n t ) 是热带、亚热带海岸潮间带特有高等植物，为 耐盐的常绿乔木或灌木。对于红树植物的资源价值，已有的大量研究多为对其生 态效益和社会效益的探讨。然而，对于红树植物的资源价值，尤其对其作为药用 植物资源价值的研究较少。实际上我国利用红树植物作为药用己有较长的历史， 多为民间用药。 ：v ( 水) ：4 5 ：4 5 ：1 的比例配制而成，样品浸泡时间2 4h 以上( 以叶片全部变白为提取完全) ，样品质量约0 1g 。 2 3 4 根系活力的测定 根系活力的测定采用氯化三苯基四氮唑( n c ) 法( 李合生等，1 9 9 5 ) ，以 单位根鲜重的四氮唑还原强度来表示： 单位鲜重的四氮唑还原强度= 四氮唑还原量( 根重x 时间) 单位：m g ( g h ) 。 2 3 5 粗酶液的制备及酶活性的测定 取老鼠赣幼苗完全展开的成熟叶片( 下同) 0 2 - 0 3g ，加入4m l 预冷的提 1 4 厦门大学硕士论文 取缓冲液在冰浴下研磨匀浆，转移于离心管中在4 1 2 、4 0 0 0r p m 下离心1 5r a i n ， 上清液供过氧化氢酶活性( c a = r ) 的测定。c a t 活性测定采用高锰酸钾滴定法( 李 合生等，1 9 9 5 ) ，酶活性用每克鲜重样品lm i n 内分解h 2 0 2 的毫克数表示，单 位：m g ( g m i n ) 。 取o 3 o 4g ，加入5m l 预冷的提取介质在冰浴下研磨成匀浆，转移于离心 管中在4 1 2 、1 2 0 0 0r p m 下离心2 0m i n ，上清液用于超氧化物歧化酶( s o d ) 和 过氧化物酶( p o d ) 活性的测定。s o d 测定采用氮蓝四唑( n b t ) 还原法( 李 合生等，1 9 9 5 ) ，酶活性以抑制n b t 光化还原的5 0 为1 个酶活性单位( u ) ， s o d 比活力= s o d 活性单位鲜重( u g f w ) 。p o d 测定采用愈创木酚法测定( 李 合生等，1 9 9 5 ) ，以每分钟内a 4 7 0 变化0 0 1 为1 个p o d 酶活性单位( u ) ，单 位：u g f w m i n 。 称取o 2 0 3g 叶片鲜样，加入4m l 提取缓冲液于冰浴下研磨匀浆，转移至 离心管中在4 、1 0 0 0 0r p m 下离心1 5m i n ，上清液为供苯丙氨酸解氨酶( p a l ) 活性的测定。p a l 测定采用张志良和瞿伟菁( 2 0 0 3 ) 的方法，以在波长2 9 0n m 下吸光值增加0 0 l 为1 个酶活性单位( u ) ，单位：u e , f w r a i n 。 2 3 6 叶片