院感监测项目.doc

_院感监测项目一 空气监测(布点法):室内面积30cm2,设内外中三个点;室内面积30 cm2设5个点用直径9 cm的琼脂平板分别于上述布点位置,采样时将平板打开,扣于平板旁,暴露时间为5分钟,盖好立即送检.平板置35-37度48小时培养计算公式:细菌总数(cfu/m3=50000N/A.T)A为平板面积,T为平板暴露时间,N为平均菌落数即:菌落数/平板数*换算系数换算系数(直径9 cm平板) 5分钟*157; 10分钟*78; 15分钟*52; 30分钟*26手术室报告方式: 个/30min 90二 医务人员手监测手的采样:被检人五指并拢,用生理盐水浸湿棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂面积约为30 cm2),剪去操作者手触部位,将拭子放入10ml洗脱液中细菌总数监测:将采样管用力振打80次,用无菌管吸取1ml于灭菌平皿内,加入5ml营养琼脂,摇均,待琼脂凝固后,于37度48小时培养,计数菌落数.计算:细菌总数(cfu/ cm2)=平板上菌落数*稀释倍数/60 cm2结果判定:环境类别空气cfu/ cm3物表cfu/ cm2医务人员手cfu/ cm2类(层流洁净室)1055类区域(普通手术室产房婴儿室人工肾烧伤科重症监护)20055类(儿科注射室换药室等)5001010类(传染科及病房)-1515注意: 不得检出乙型链球菌金黄色葡萄球菌及其它致病菌母婴同室,婴儿室,新生儿室及儿科病房的工作人员手上不得检出沙门氏菌铜绿金葡.三 物表监测采样:用5*5 cm2的方框取样4个不同位置,其余方法同手表检测细菌总数及其他方法无同手表检测计算: 细菌总数(cfu/cm2)=平板上菌落数*稀释倍数/采样面积(cm2)结果判定:同手表四A一次性物品(无菌):取5-10套样品用洗脱液洗脱后,各吸取1.0ml接种于平板,35-37度培养3-5天,不得检出细菌. B无菌物品:取供试品2个包装,拆开后于不同部位剪取约1cm*3cm的样品放入增菌液,如果有菌生长,转平板.不得检出细菌五 消毒剂:吸取1ml正在使用中的消毒剂加入9ml肉汤中(含有相应中和剂)振80次后吸入1.0ml于灭菌平皿内,加入5ml营养琼脂,摇均,待琼脂凝固后,于37度48小时培养,计数菌落数.报告:cfu/ml结果判定:100 cfu/ml六 透析水:1.取透析水1ml于无菌平皿,加入56度琼脂,冷却后于37度48小时作细菌总数计数.结果判定:出口水200 cfu/ml 入口水200 cfu/ml报告:cfu/ml注:氧气湿化瓶液监测同上, 结果判定:1000 cfu/ml,不得检出致病菌克氏双糖培基配制方法: 取克氏双糖商品化干粉培基 55g，加入装有1000ml蒸溜水的三角烧瓶中，加热溶解, 调PH7.8, 分装小试管(约2.5ml), 12磅 15分钟灭菌。培养基:成份：酵母浸肉膏0.2g, 胰蛋白胨1.4g, 大豆蛋白胨1.0g, 葡萄糖2.0g, NaCl1.0g, 蒸溜水200ml制法： 将上述成份加热溶解, 调PH7.0, 分装小试管, 10P 15高压灭菌。VP试剂:成份：甲液:-奈酚6 g 乙醇100ml 乙液:40%氢氧化钾 靛基质培基:成份：牛肉膏0.6g, 胰蛋白胨6g, 盐酸胱氨酸(L-半胱氨酸)0.04g, 琼脂0.6g,硫代硫酸钠：0.01g 蒸溜水200ml制法： 将上述成份加热溶解, 调PH7.4, 分装小试管, 15磅15分钟高压灭菌。硝酸盐培基成份：硝酸钾(KON3) 0.2g, 优质蛋白胨2.0g, 蒸溜水200ml制法：将上述成份加热溶解, 调PH7.4, 分装小试管, 10P 20高压灭菌。碱性蛋白胨水成份：蛋白胨10 g,氯化钠2.5 g,H2O500ml 混合溶解,调节PH8.4,高压15分钟灭菌血液保养液成份：枸橼酸0.47 g; 枸橼酸钠1.33 g;葡萄糖:1.5克 蒸馏水100ml每25ml可使100ml血