血涂片制作课件.ppt

实验六血涂片的制作和血细胞的观察,普通生物学,实验目的,掌握血涂片的制作，观察红血球的形态及在不同环境下的反应。,材料和用品,材料人血或鱼血主要用品显微镜酒精棉花5NaCl0.9%NaCl盖玻片蒸馏水载玻片注射针筒针头,实验内容与方法,血涂片的制作和血细胞的观察,1血涂片的制作用酒精棉球擦拭消毒指尖，用采血针刺破指尖，从采血针眼处挤出绿豆大小血滴，用清洁玻片面的一端轻轻接触血滴，使血滴附于玻片面上（注意勿触及皮肤，否则血在玻片上就不能成滴）以左手拿该片的两端，迅速用右手拿住另一载玻片的一端，在左手载玻片上由前向后接触血滴，使两载玻片约成45角，轻轻移动，使血滴成一直线，然后由前向后推为一均匀的薄片涂片在空气中干燥后置于染色架上，滴加瑞氏染色液，使涂片被染色液覆盖染1分钟后，再加等量的缓冲液于染色液上，浸染约58分钟此时涂片表面呈现一层古铜色用蒸馏水迅速冲洗，见涂片呈粉红色后，自然晾干,2019/12/15,7,可编辑,血涂片的制作和血细胞的观察,2血细胞观察制作良好的血涂片厚薄适宜，血膜分布均匀，呈粉红色。选一厚薄适宜部位置显微镜下观察。先用低倍镜观察全片，了解涂片染色、细胞分布情况，再用油镜观察.(1)红细胞数量最多，体积小而圆、均匀分布，呈红色的圆盘状，边缘厚，着色较深，中央薄，着色较浅，无细胞核、细胞器，胞质内充满血红蛋白。(2)白细胞白细胞数量较红细胞数量少，但胞体大，细胞核明显，极易与红细胞区别开。,嗜中性粒细胞是白细胞中较多的一种，约占白细胞总数50-70%。体积比红细胞大，主要的特征是胞质中的特殊颗粒细小，分布均匀，着淡紫红色。胞核着深紫红色，一般分35叶，叶间以染色质丝相连。核分叶的多少与该细胞年龄有关，如核为杆状，则为嗜中性粒细胞的幼稚型。嗜酸性粒细胞比中性粒细胞略大，数量少，约占7%以下。核常分两叶，着紫蓝色。主要特点是胞质内充满粗大、圆形的颗粒，色鲜红或桔红。嗜碱性粒细胞数量很少，约占1%以下。在一般血涂片上不易找到，体积比上述2种白细胞稍小。胞质中分散着许多大小不一的深紫蓝色颗粒。胞核形状不定,圆形或分叶，也染成紫色，但染色略浅，一般都被颗粒遮盖，形状不清。,淋巴细胞数量较多，约占20%-40%，可见中、小型，淋巴细胞。其中小淋巴细胞最多,略大于红细胞。核大而圆,几乎占据整个细胞，染成深蓝紫色。胞质极少，仅在核的一侧出现一线状天蓝色或淡蓝色的胞质。中淋巴细胞比红细胞大，胞质较小淋巴细胞的稍多，着色较浅。核圆形或卵圆形，位于细胞中部，也染成深蓝紫色。单核细胞数量少，约占2%-8%，是细胞中体积最大的一种，胞核呈肾形、马蹄形，常在细胞一侧，着色比淋巴细胞浅。血小板为形状不规则的细胞小体，其周围部分为浅蓝色，中央有细小的紫色颗粒，常聚集成群，分布于红细胞之间。高倍镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒，在油镜下才能看到颗粒周围的浅色胞质部分。,实验步骤,分别在3个玻片上滴上一滴5NaCl、0.9NaCl和蒸馏水。以酒精棉球消毒捐血者的指尖，等酒精自然蒸发后，用采血针在消毒指尖刺一个小口（勿太用力，以免造成大伤口）。将用过的采血针丢弃在指定的烧杯内。将指尖血液各滴一滴至3个玻片上，并盖上盖玻片。捐血者用棉花压住伤口直到血流停止，同时其他组员马上进行下一步骤。5在显微镜下观察红血球的大小，形状以及在不同渗透环境下的反应，並比照附图，有没有观察到溶血現象？有没有观察到皱褶的现