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_反射时的测定及反射弧的分析一:实验目的1、 通过不同浓度的硫酸溶液刺激蟾蜍趾引起的屈肌反射,掌握反射时的测定方法,了解刺激强度与反射时的关系。2、 通过脊蟾蜍分析屈肌反射反射弧的组成部分,探讨反射弧的完整性与反射活动的关系。二:实验原理1、反射是指在中枢神经系统的参与下,机体对内外环境刺激的规律性应答。反射活动的基础是反射弧,典型的反射弧包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器五部分。一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏,反射活动就无法实现。从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间为反射时,它是反射通过反射弧所用的时间。在一定范围内,刺激越强,反射时越短;刺激越弱,反射时越长。 本实验中,涉及到的蟾蜍反射弧为: 趾皮肤中的感受器 大腿部的传入神经(混合在坐骨神经中)神经中枢(脊髓)大腿部的传出神经大腿部的肌肉由于脊髓的机能比较简单,所以常选用只毁脑的动物(脊蛙或脊蟾蜍)为实验材料,以利于观察和分析。2、在实验动物的皮肤受到伤害性刺激时,受刺激一侧的肢体出现屈曲,关节的屈肌收缩,伸肌迟缓,称为屈肌反射,具有保护性意义。三:实验材料1、 实验动物 蟾蜍2、 实验器材 常用手术器械、铁架台、蛙嘴夹、蛙板、小烧杯、点滴板、棉花、滤纸片、塑料纸、秒表3、 实验试剂 浓度分别为1%、0.5%、0.2%的硫酸溶液、2%普鲁卡因四:实验步骤1、 脊蟾蜍的制备 用左手持蟾蜍,右手持毁髓针从枕骨大孔插入向前捣毁蟾蜍的脑,并在枕骨大孔出左右划几下,切断脑与脊髓的连接,只保留脊髓制成脊蟾蜍。用蛙嘴夹夹住其下颌皮肤,确定其前肢无抓挠反应。2、 反射时的测定 将蛙嘴夹悬挂于铁架台上,用0.2%硫酸溶液刺激左肢(或者右肢)的中趾趾端(浸没约1mm),同时启动秒表计时,当屈肌反射一出现立即停止计时,记下反射时。并立即用清水清洗蟾蜍的后肢,将硫酸洗净。间隔约35min后继续进行下一次刺激,重复三次,求均值。如果三个值中某个值偏离其它两个较多,应多加一次或者两次刺激,以得到可信数值。然后再依次用0.5%、1.0%浓度的硫酸溶液刺激其中趾,同样得到反射时的均值。在三个浓度中选取某浓度的硫酸溶液,用另一后肢(右肢)的中趾进行反射时的测定。与之前得到的数值做对比,并进行分析。3、 反射弧的组成分析用手术剪将蟾蜍左后脚上的皮肤进行环切,然后用手术镊剥净其脚部的皮肤,用1%硫酸刺激去皮的中趾,进行观察其屈肌反射,观察到其并没有反应;改换其右后肢有皮肤的趾,将其浸入硫酸溶液中,观察到其有屈肌反射。沿蟾蜍右后肢背侧纵行剪开皮肤,在肱二头肌和半膜肌之间的沟内找到坐骨神经干,在其下部将一宽约5mm的塑料纸条穿过,并再将一细棉条从坐骨神经干下、塑料纸条上穿过。用硫酸刺激右后肢的中趾,观察发现其有抓挠反射;在靠近坐骨神经干的细棉条上滴几滴普鲁卡因(不要直接滴在坐骨神经干上),并立即计时,每隔一定时间用硫酸溶液刺激其右后肢中趾,当屈肌反射不再出现时记录时间,并立即将浸有1%硫酸溶液的滤纸片贴于蟾蜍右侧背部,观察其抓或擦反射,每隔一定时间用滤纸片刺激,直到抓或擦反射不再出现,记录时间。将蟾蜍的脊髓毁坏,用滤纸片贴于其左两侧的背部和腹部,观察其反应。五:实验结果及分析1、反射时的测定硫酸浓度c/%左后肢反射时实验值/s平均值t/s0.211.612.713.412.230.53.74.25.64.5012.02.73.12.60硫酸浓度c/%右后肢反射时实验值/s平均值t/s0.53.74.65.34.53由表中数据可以看到,随着硫酸浓度的增高,反射时逐渐减少。因为随着硫酸浓度的增高,刺激强度也随之增大,使得兴奋在反射弧神经元之间的传递(突触传递)速度加快,反射时减少。从数据中还可以发现,在同一浓度的硫酸溶液刺激下,三次反应时呈现依次增加的规律,分析其原因:一是每次刺激前,蟾蜍中趾上的水滴并未完全吸干,使得硫酸的浓度逐渐减小,造成反射时的延长;二是每次刺激后由于未及时并充分洗去蟾蜍中趾上的硫酸,其皮肤上的感受器已经对该刺激有了一定的适应性,所以敏感度下降。2、反射弧的分析:蟾蜍的左后肢中趾去皮后不再对硫酸的刺激产生屈肌反射,而未去皮的右后肢中趾依然对硫酸刺激产生屈肌反射,说明蟾蜍趾部硫酸刺激的感受器位于皮肤内。蟾蜍右后肢坐骨神经干加上麻醉药后,2分49秒后用硫酸溶液刺激其同侧中趾屈肌反射消失,说明传入神经彻底被麻醉;用浸有1%硫酸溶液的滤纸片贴于蟾蜍右侧背部,其后肢仍具有屈肌反射, 5分20秒后贴滤纸片已不会引起反射,说明传出神经彻底被麻醉。将蟾蜍毁髓后,用浸有硫酸的滤纸片刺激皮肤不产生任何反射,说明脊髓是蟾蜍屈肌反射的神经中枢。由以上分析可知,蟾蜍后肢的屈肌反射弧的组成为:皮肤(感受器)坐骨神经(传入神经)脊髓(神经中枢)坐骨神经(传出神经)腿部肌肉(效应器)。反射弧的完整性是反射活动的基础,破坏反射弧的任何一部分均导致反射活动无法实现。实验结果还表明,一侧反射弧的完整性与否不影响对侧屈肌反射的功能。六:注意事项1、 每次用硫酸刺激时,趾进入硫酸中的面积应相同,以保持相同数目的感受器受到刺激,保持实验条件的严谨;2、 每次刺激后,应迅速用清水冲洗蟾蜍的趾部,洗净残余的硫酸,以保持感受器对硫酸刺激的敏感性;3、 每两次刺激之间间隔35min,以使反射弧恢复其灵敏性。4、 在每次刺激开始时,注意用吸水纸将蟾蜍趾部的水轻轻蘸掉,以防趾部残余的水分稀释硫酸溶液,给反射时的测定造成影响。5、 剥掉趾部皮肤时,一定注意趾尖不要残留皮肤,否则刺激仍能引起反射。七:思考题1、 怎样测定反射时才更加准确? 实验刺激时要保证蟾蜍的脑部被破坏完全,确定其前肢无抓挠反应,以免脑部的高级神经结构对脊髓反射造成影响。 保证每次刺激浸入硫酸中的趾尖长度一致,保证每次受到刺激的感受器数目大致相同,且约1mm左右,不要过长,以免感受器太多,屈肌反射太快,计时的误差会比较大。 实验要重复多次,取多个相近数据的均值。 每次刺激前尽量使蟾蜍趾部无水分残留,或者每次刺激前都更换一次相应浓度硫酸溶液,以保证浓度一致。 每次刺激后迅速用

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