医学分子生物学复习要点.doc

羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈蚄羁膃蒇螆螄聿薆蒆罿羅膃薈螂袁膂蚀羈芀膁蒀螀膆膀薂肆肂腿蚅衿羈腿螇蚂芇膈蒇袇膃芇蕿蚀聿芆蚁袅羅芅莁蚈袁芄薃袄艿芃蚆螆膅芃螈羂肁节蒈螅羇芁薀羀袃莀蚂螃膂荿莂罿肈莈蒄螁羄莇蚆肇羀莇蝿袀芈莆蒈蚂膄莅薁袈肀莄蚃蚁羆蒃莃袆袂蒂蒅虿膁蒂薇袅膇蒁螀蚇肃蒀葿羃罿葿薂螆芇蒈 医学分子生物学复习重点 第14章重点复习内容概念：1. 旁侧序列：（flanking sequence，侧翼序列）每个结构基因在第一个和最后一个外显子的外侧有一段不被转录的非编码区。包括：启动子（tata box，caat box，gc box）、增强子、终止子。2. 断裂基因：真核生物的结构基因的dna序列由编码序列和非编码序列两部分组成，编码序列是不连续的，被非编码序列分割开来，称为断裂基因（split gene）。3. 顺式作用元件：是指与靶基因处在同一条染色体（dna）上，起调控作用的dna序列。通常不编码蛋白质，位于基因的旁侧或内含子中。包括启动子、增强子、反应元件和沉默子。4. 反式作用元件：一个基因编码的产物蛋白质或rna（trna、rrna等）调控另一个基因表达，称为反式作用。这些转录因子为反式作用元件，能特异地结合靶基因的顺式调控元件，如启动子等。5. rna剪辑：是一种在mrna前体的碱基序列的改变，由酶中介核苷酸的插入、缺失或单核苷酸替换。多见于线粒体和叶绿体系统。6.表达序列标签：（expressed sequence tags，ests）指从不同组织来源的cdna文库中随机挑选克隆进行5或3端测序后得到的部分cdna序列。一个est代表生物体某种组织某一时期的一个表达基因，在数据库中其长度一般从20 到7000bp 不等,平均长度为360 120bp 。7. cpg岛：(cpg island)是基因组dna序列中富含c、g的dna区域。在大规模的dna测序中，每发现一个cg岛，意味着在此区域有一个基因。 问答：1. 简述dna结构的基本特征和生物学意义。dna结构的基本特征：at、c g互补配对结合。碱基的排列顺序就是dna序列储存遗传密码。双螺旋互补结构是dna复制和修复的基础。双螺旋的沟，尤其是大沟为蛋白质分子结合的场所。双螺旋的互补性是分子识别的原理之一，也是现代分子技术核心技术分子杂交的基础。 dna具有重要的生物学意义：它是遗传信息的载体，贮存并传递支配生命活动的指令。它是构建生物体的蓝图。它是人为操作、研究生命和改造生命特征的元件。它是生命科学技术遵循的原则2. 简述线粒体dna的遗传学特征。mtdna是半自主性，能独立复制、转录和翻译；mt基因组的遗传密码与普通密码不同；mtdna 为母系遗传；mtdna突变率高；mtdna 具有阈值效应的特性；mtdna的进化率极高3. 何为转座子？简述转座子的转座途径？ 转座因子：细胞中能改变自身位置的一段脱氧核糖核酸（ dna）序列或存在于染色体dna 可自主复制和移位的基本单位。 转座因子的转座途径：（1）复制转座(replicative transposition) : 转座因子在转座期间先复制一份拷贝，复制的拷贝转座到新的位置，在原先的位置上仍然保留原来的转座因子。复制转座有转座酶(transposase) 和解离酶(resolvase)的参与。转座酶作用于原来的转座因子的末端，解离酶则作用于复制的拷贝。（2）非复制转座(non-replicative transposition) : 转座因子直接从原来位置上转座插入新的位置，并留在插入位置上，这种转座只需转座酶的作用。非复制转座的结果是在原来的位置上丢失了转座因子，而在插入位置上增加了转座因子。4. 反式作用元件通过哪几种常见的基序与顺式作用元件结合来调节基因的表达？（1）亮氨酸拉链基序（leucine zipper）（2）螺旋-环-螺旋基序（helix-loop-helix，hlh）（3）螺旋-转-螺旋（helix-turn-helix，hth）基序（4）锌指（zinc finger）基序5. 为什么有些基因能编码多种蛋白产物，试举出至少3种机制？i转录与选择加工-转录水平（1）选择启动子：人的某些基因含2个或更多的选择启动子，具有细胞的特异表达模式。如人的抗肌营养不良蛋白基因有不同的基因产物，就是不同的选择启动子的作用结果。ii后转录加工形式转录后水平（1）选择剪接和多聚腺苷化人的许多单个基因进行选择剪接产生不同的mrna序列，编码组织特异性的蛋白，并与多聚腺苷化结合产生不同的蛋白。如：降钙素基因，在甲状腺合成降钙素，在下丘脑合成降钙素基因相关肽cgrp。（2）rna剪辑（rna editing）是一种在mrna前体的碱基序列的改变，由酶中介核苷酸的插入、缺失或单核苷酸替换。6. 基因鉴定的常规方法和特异方案有哪些？基因鉴定的常规方法：cdna文库的筛查； rt-pcr检测； northern印迹杂交； 同源序列比对；动物基因组印迹杂交基因鉴定的特异方案：外显子捕获方法；cdna选择方法；cpg岛法；基因差异表达法7. 鉴定新基因结构时，需考虑哪些方面的问题？克隆全长cdna 确定转录起始点 确定外显子 翻译终止信号 第5章重点复习内容概念：1. rna干扰：（rna interference,rnai）是一种由双链rna（double stranded rna,dsrna）始动的序列特异性基因沉默机制。2. 基因打靶：是利用活细胞染色体dna可与外源dna的同源序列发生同源重组的性质, 以定点修饰改造染色体上某一基因的方法。3. 基因组dna文库：将某生物体的全部基因组 dna 用限制性内切酶或机械力量切割成一定长度范围的dna片段，与合适的载体在体外重组并转化相应的宿主细胞, 在培养基上选择性生长的阳性菌落的集合称基因组dna文库,简称g文库。4. cdna文库：以来源于特定（类型或发育阶段）组织的mrna为模板，用逆转录酶合成cdna；与含有某一种限制酶切点的双链寡核苷酸接头连接后，用该酶切割成粘性末端，与载体连接后转化宿主细胞, 由此得到的所有阳性菌落总和,称该组织的cdna文库。 问答：1. 细胞-dna克隆的主要步骤1）分离纯化目的基因2）构建重组dna分子3）宿主细胞的转化4）含重组体的宿主细胞的筛选、扩增5）分离重组dna2. 载体的一般特性以及常用载体的种类 载体的一般特性：分子量小，以容纳较大的外源dna ；有多种限制酶单一识别序列，有助于外源dna片段插入；载体dna被切割并插入外源dna后，不影响其复制能力有标记基因，有利于筛选重组体。克隆载体上要有复制起点，表达载体上还要有启动子。 根据载体用途分为：克隆载体：克隆的外源dna片段在宿主细胞中增殖、扩大数量。克隆载体上需有复制起始点. 表达载体：克隆的外源dna片段或基因在宿主细胞中表达产生rna和/或蛋白质。 表达载体上还需有启动子。 根据克隆片段的大小，分为如下几类：克隆较小片段dna的载体：质粒（plasmid）克隆中等大小片段dna的载体：噬菌体（lambda phage）、粘粒载体克隆大片段dna的载体：细菌人工染色体（bac）载体、噬菌体p1载体克隆巨大片段dna的载体：酵母人工染色体（yac）。3. pcr及pcr-dhplc的基本原理 聚合酶链反应（polymerase chain reaction,pcr）：模拟体：其数量和纯度影响pcr产物。一般反应中的模板数量为102 -105 个拷贝,模板量过多则可能增加非特异性产物.dna中的杂质也会影响pcr的效率。（4）热稳定的dna聚合酶：常用taq dna聚合酶。（5）含有mg2反应缓冲液： 影响dna合酶的活性2）pcr的基本反应步骤：（1）变性：93-95， 模板dna完全变性成为单链；（2）复性： 50-70，引物与模板dna退火结合；（3）延伸： 70-75，dna聚合酶以dntp为底物催化dna的合成反应。上述三个步骤为一个循环。每个周期合成的新链可作为下一周期合成dna的模板，循环扩增dna。反复n个周期，可扩增2n倍dna。经2530次循环后，可获得百万倍以上的目的dna。pcr扩增的dna量足以直接通过溴化乙淀染色后紫外灯下观察。 变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography，dhplc）：利用高效液相色谱原理，pcr扩增后的dna片断通过一个dna分离柱进行分离，经过紫外或荧光检测器检测转换成数字信号储存于计算机中，然后进行分析。（1）dna柱分离原理：dna在非变性条件下按照片断长度分离双链dna，因此适合做片断大小分析；部分变性条件下可检测变异(突变或多态)；完全变性条件下用于分离、纯化单链核酸片段。（2）dhplc分析dna变异的原理：工作温度(柱温)是决定dhplc敏感性的最关键因素。在dna部分变性条件下，变异型和野生型dna可形成同源和异源双链其在色谱柱上保留时间存在差异，异源双链因存在错配区而更易变性，在色谱柱保留时间短于同源双链而先被洗脱下来，从而在色谱图中表现为双峰或多峰的洗脱曲线，据此可以分辨出变异型dna.4. 核酸杂交（southern）的基本原理、步骤及应用1) 原理：碱基互补2) 步骤：dna提取：提取组织或细胞的基因组dnadna分离：限制酶消化dna ，凝胶电泳分离大小不同的dna片段dna变性：凝胶中的dna在碱性溶液中变性。转膜：将变性的dna片段从凝胶原位转移印迹在硝酸纤维素膜或尼龙膜上。杂交：将标记的探针变性，同固着的靶dna片段杂交，与靶dna中的互补dna序列 形成异源双链。洗膜：未结合的多余dna探针以及非特异性结合的dna探针通过洗膜去除放射自显影：将杂交的膜进行放射自显影。结果分析：依杂交信号在膜上的位置判定dna大小 、信号强度推测dna拷贝数3）应用：（1）克隆基因的酶切图谱分析（2）基因的定性及定量分析（3）基因突变分析:缺失、插入,影响到酶切位点的点突变（4）rflp连锁分析5. 染色质免疫沉淀技术（chlp)的原理在活细胞状态下固定蛋白质dna复合物，细胞内存在的许多dna与蛋白质间的相互作用被保留下来。细胞裂解后,用超声波或酶将染色质随机切断为一定长度范围的小片段，然后通过免疫学方法沉淀目的蛋白质与dna的复合体，特异性地富集与目的蛋白结合的dna片段，通过对目的dna片断的纯化与检测，获得蛋白质与dna相互作用的信息(in vivo )。6. 影响转基因表达的因素1 ） 表达构件上的序列组成性启动子使转基因在任何时候都能很强地表达,这类启动子一般来源于病毒：如sv40早期启动子和增强子，rous肉瘤病毒长末端重复序列（ltr）启动子和增强子等。将转基因与适当的组织或细胞特异性启动子连接在一起，可获得所期望的空间表达模式。例如，神经特异性烯醇化酶基因只在成熟神经元中表达，其上游1.8kb 长的调节元件可调节转基因小鼠中转基因在神经组织特异性表达.通过诱导型启动子最大限度调控基因时间表达模式，它可通过调控一个特殊化学物质供给而开或关基因。2 ） 宿主基因组内因素转基因整合是随机的,受局部调节元件和染色质结构的影响而产生位置效应。整合到一个增强子附近，其表达可能增强；或者转基因也可整合到异染色质结构域内，则其表达受抑制。 第6章重点复习胰蛋白酶消化多肽 色谱法分离多肽片段氨基酸序列合成寡核苷酸探针筛选基因组文库基因组文库步移法克隆全基因组2.何谓定位克隆？以dmd基因克隆为例概述定位克隆过程。定位克隆是先利用连锁分析进行基因定位作图，然后进行基因克隆，进一步明确该基因的功能。 分析患病家系的连锁关系确定致病基因的遗传方式，从染色体畸变引发的疾病入手，将染色体畸变的位置作为疾病基因克隆的一个位点进行分析的一种克隆策略。总体思路是：疾病染色体定位基因序列mrnacdna 蛋白质 (致病基因产物)。dmd基因克隆为例：1）染色体定位：1982年靠通常的连锁分析把dmd基因定位于xp21.2）染色体分析：少见的女性患者（目前国际报道只有20多人女患），其双亲正常、无家族史，经染色体分析发现都有x染色体和常染色体之间的易位，多个女患常染色体的断点不同，而x染色体的断点正好都在xp21,从而进一步将dmd基因进一步定位于xp21。3）通过消减杂交克隆法分离dmd基因4）克隆基因全长 第7章重点复习 受累同胞对法传递一致性（ibd）非参数连锁分析 受累家系成员法状态一致性（ibs）（2） 群体关联：缩小候选基因范围概念：关联 (association) 并不是一种特别的遗传学现象，它只是等位基因和表型共发生的一种统计学表述。如果某些人同时有疾病d和等位基因a的频率常高于（或低于）群体中预计d和a的频率，那么等位基因a与疾病d关联。关联分析方法：1) 候选基因分析2) 传递不平衡试验（tdt）3) 单倍型相对风险（hrr）4) 全基因组关联研究 (gwas) (genome-wide association studies)（3） 定位候选克隆法连锁分析易感基因定位在染色体某区域该区域候选基因鉴定致病基因 第8章重点复习内容概念:1. 肿瘤抑制基因（tsg）：存在于正常细胞中能够抑制细胞恶性转化，对细胞的增殖起负性调节作用的基因，其失活使正常细胞增殖失控，进而转化形成肿瘤细胞。2. 癌基因：（oncogene）： 存在于致癌病毒、人和动物细胞中能导致细胞恶性转化的核酸片段，促进细胞的生长和增殖。3. 微卫星不稳定（mi）：是指t组织和n组织相比，其dna等位结构发生简单重复序列的改变，这种改变表现在肿瘤组织与其对应的正常组织pcr产物经电泳后，电泳带出现增加或减少、位置及带的密度变化。4. 端粒：（telomere）是真核细胞染色体末端的一种特殊结构，由端粒dna和蛋白质组成。其端粒dna是富含g的高度 保守的重复核苷酸序列。对染色体具有保护作用。5. 端粒酶：（telomerase）是一种逆转录酶，能延长端粒末端，由蛋白质和rna 组成，可以其rna为模板指导dna合成，向端粒末端添加（ttaggg）n序列，使端粒延长，延长细胞的寿命甚至使其永生化。 问答：1. 简述肿瘤染色体异常机制.（1）肿瘤染色体数目异常：基因突变-p 53；基因扩增-egfr；基因过表达stk15（2）肿瘤染色体结构异常：结构异常是由于染色体断裂重接，形成特殊结构的染色体，称为标记染色体（marker chromosome）。非特异：只见于某种肿瘤的少数肿瘤细胞中，对该肿瘤不具有代表性特异：经常见于某种肿瘤的大多数或全部细胞，对该肿瘤具有代表性，并以其为特征。2. 简述knudson二次突变学说.恶性肿瘤的发生涉及二次以上的突变，在遗传型的恶性肿瘤中，遗传的是一次生殖细胞的突变，在此基础上再发生一次体细胞突变即可完成始动，从正常细胞转化为恶性细胞。恶性细胞在一定条件下形成增殖优势，既可建立恶性细胞克隆而形成肿瘤。在散发的恶性肿瘤中，二次突变都是体细胞突变，而且同时发生在一个细胞中才能完成始动。这种机会很少，需要漫长过程的积累，所以散发型肿瘤多为单侧发病，发病年龄晚。3. 简述癌基因分类及癌基因激活机制.按原癌基因的产物将100多种癌基因分为五大类以src为代表的酪氨酸激酶类（ras,abl），信号转导以sis为代表的生长因子类以erb为代表的生长因子受体类以myc为代表的核蛋白类和转录因子以prad1为代表的细胞周期素、cdk网络成分和激酶抑制因子类 癌基因激活机制在正常细胞中存在着与癌基因极为相似，具有转化潜能的一类基因，称为原癌基因(proto-oncogene)。原癌基因在个体发育或细胞分裂的一定阶段十分重要，在成体或平时不表达，或者表达受到严格的控制，当其发生突变或被异常激活时，产生的癌蛋白在性质或数量上区别于正常细胞，就可能导致细胞发生恶性转化。原癌基因 质的变化：突变，重排，产生新的嵌合基因和新的g产物 发生 量的变化：产物增加癌基因(原)癌基因激活方式：基因扩增；突变激活；染色体重排；转座；启动子插入。4. 简述抑癌基因（tsg）存在的证据/研究途径.肿瘤的发生不仅仅涉及显性癌基因激活，而且还涉及其它隐性基因的功能丧失，这其它基因就是抑癌基因。 细胞融合实验：肿瘤的抑制与正常染色体存在着相关性，正常染色体上有抑制肿瘤效应的遗传物质tsg。逆向发生肿瘤现象可能是杂种细胞中携带抑癌基因丢失。 stolet和shimizu微细胞转移实验：证明抑制基因存在于单个染色体上，并将tsg 在染色体上定位。 家族性癌的研究：与knodson二次打击学说是一致的，rb gene缺失或功能丧失，失去对肿瘤细胞的抑制作用，认为rb gene 为tsg。 杂合性丢失：（loss of heterozygosity, loh ）杂合时某一等位基因片段丢失。应用于检测、鉴定tsg 。5. mirna与靶mrna的作用模式？1）二者不完全互补，即二者不完全时配对结合时，主要影响翻译过程而对mrna的稳定性无任何影响。如线虫的lin-42）二者完全互补，即二者完全配对结合后，类似sirna与靶mrna的结合，特异性的切割mrna。如mir39/mir1713）上述两种模式均具备。当其与靶mrna完全互补配对时，直接靶向切割mrna，而不完全互补配对时起调节基因翻译的作用。如let-7 果蝇/线虫。 第9-10章重点复习内容概念:1. 遗传图谱：以遗传标记为路标，以遗传学距离为图距的基因组图。遗传标记：具有遗传多态性，在一个遗传位点上具有一个以上的等位基因，在群体中的出现频率高于1%。2. 遗传学距离：在减数分裂事件中两个位点之间进行交换、重组的百分率，1%重组率为1cm（厘摩）。3. cm：在减数分裂事件中两个位点之间进行交换、重组的百分率，1%重组率为1cm（厘摩）。4. 物理图谱：有关构成基因组的全部基因的排列和间距的信息，是通过对构成基因组的dna分子进行测定而绘制的。 问答：1. 简述人类基因组计划的目标。（1） 绘制人类基因组的遗传图谱（genetic map）（2） 绘制人类基因组的物理图谱（physical map）（3） 绘制人类基因组的序列图谱（4） 绘制人类基因组的基因图谱2. 简述sanger测序原理sanger法：双脱氧核苷酸末端终止法。原理：每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dntp)使之扩增，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddntp)使之终止。由于ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在g、a、t或c处终止，终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dntps和ddntps的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几个至千以上个，相差一个碱基一系列片断。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用x-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。步骤：4个反应体系分别加入ddatp，ddgtp，ddctp，ddttp，将产生不同长度（在a，g，c，t处随机终止）的dna片段，分别在变性凝胶电泳分离呈梯状带型，自下而上是5 3被合成的dna链顺序。 第11章重点复习内容概念：1. rflp ：第一代遗传标记.由于dna多态性,取代的碱基正好位于某一限制酶切割识别顺序，那么不同个体，不同染色体上的dna用相同酶切割时产生不同长度的dna片段,这种现象叫rflp。2. vntr：数目可变的串联重复-第二代遗传标记，大约几十bp长的碱基顺序在人群中不同染色体上其重复的拷贝数不同所产生的多态,一般在非编码领域中.3. 间接基因诊断：当致病基因虽然已知但其异常尚属未知时，或致病基因本身尚属未知时，也可以通过对受检者及其家系进行连锁分析，以推断前者是否获得了带有致病基因的染色体。4. 基因治疗：应用基因工程技术，将外源正常基因导入病人体内，使其正常表达以替代异常基因或修正异常基因，达到治疗的目的。5. 反义核酸技术：利用人工合成的反义rna或dna导入靶细胞，阻断基因的转录或复制，控制细胞的中间阶段，使编码蛋白的基因不能转录为mrna或阻断翻译相应蛋白。 问答：1. 何谓dna多态性？dna多态的种类及其应用。群体当中不同染色体上的基因每几百个bp中大约有1个的比例存在碱基取代,但对表现型无改变,这种变异的频率在群体中占1%以上,这种现象叫dna多态性,这种变异以孟德尔共显性遗传方式传递。dna多态的种类： rflp ：第一代遗传标记.由于dna多态性，取代的碱基正好位于某一限制酶切割识别顺序,那么不同个体，不同染色体上的dna用相同酶切割时产生不同长度的dna片段，这种现象叫rflp。 vntr：数目可变的串联重复-第二代遗传标记，大约几十bp长的碱基顺序在人群中不同染色体上其重复的拷贝数不同所产生的多态，一般在非编码领域中。应用于亲子鉴定和法医学个体识别。 snps（single nucleotide polymorphism,单核苷酸多态）：第三代遗传标记.基因组中广泛存在的碱基置换。大约几百到一千kb之中有一个的比例。广泛应用于基因定位、关联分析等遗传学研究，也可作为遗传标记进行连锁分析。2.举例说明基因诊断方法。苯丙酮尿症 (phenylketonuria, pku)：由于苯丙氨酸羟化酶（phenylalanin hydroxyrase，pah）遗传性缺陷所致的遗传性氨基酸代谢病,发病率为1/16500，ar遗传。pah基因于1983年定位于12q24，全长85kb，含13个外显子，mrna全长2.4kb,编码451个氨基酸。pah基因缺陷以点突变为主，而且1/3点突变集中于外显子7，另外在外显子6，11，12中也较集中。pku基因诊断策略：1、应用pcrsscp，pcrdgge技术检测外显子第7，6，12的点突变。2、应用内含子3的str多态为遗传标记进行连锁分析。3.以ada缺乏症、黑色素瘤为例简述基因治疗的基本过程。以ada缺乏症为例：ada缺乏症的基因治疗过程为，患儿的外周血中分离t淋巴细胞，在体外培养 正常的ada基因介导逆转录病毒转移到体外培养的t淋巴细胞中 筛选ada基因表达的t淋巴细胞 这些基因表达的t淋巴细胞输回患儿外周血中 反复几次（每隔12个月来一次，治疗8个月） 患儿的免疫缺陷症状得到好转，ada酶水平达到正常值的25%，基因治疗得到成功。以黑色素瘤为例：患者肿瘤组织中分离肿瘤侵润淋巴细胞（til，能在肿瘤部位持续存在而无副作用的淋巴细胞） 在体外培养 介导逆转录病毒载体将tnf（肿瘤坏死因子）基因和il