二甲基甲酰胺职业接触对作业工人氧化或抗氧化状态的影响论文.pdf

2 8 中华预防医学杂 志 2 0 1 4年 1 月第 4 8卷第 1 期c h i n j p r e v me d ， j a n u a r y 2 0 1 4，v o 1 4 8 ，n o 1 甲基 甲酰胺职业接触对作业工人氧化或 抗氧化状态 的影响 程娟 刘强 徐波 吴智君 叶萌 蒋晓 王春 民 【 摘要】 目的 探讨职业接触二 甲基 甲酰胺 ( d m f ) 对作业工人氧化或抗氧化状态的影响。 方法2 0 1 2 年5月选取某 d m f生产企业 1 0 4名d mf接触工人和1 0 1 名对照作为研究对象， 调查职业 史 、 年龄、 性别 、 吸烟和饮酒等信息。测定车间空气中 d mf浓度。采用血红蛋白 n 一 甲基氨甲酰加合 物( n m hb ) 水平作为内剂量标志物， 结果以 n mh b降解产物 3 一 甲基一 异丙基乙内酸脲( m v h) 水平表 示 ； 测定血清中谷丙转氨酶( a ) 、 谷草转氨酶( a s t ) 水平反映肝功能； 测定血清中超氧化物歧化酶 ( s o d ) 活力、 谷胱甘肽一 s 转移酶( g s t ) 活性、 丙二醛( m d a ) 水平、 3 一 硝基酪氨酸( 3 - n t ) 水平反映机体 氧化或抗氧化状态。结果工作岗位作业场所空气中 d m f浓度在 3 31 2 4 m g i n 范围内， 并未超 过国家标准。接触组 m v h水平为 ( 1 9 ， 6 91 2 5 2 ) m g k g ， 对照组未检出。接触组血清 s o d活力为 ( 1 2 5 3 02 1 2 3 ) u m l ， 高于对照组 ( 1 1 8 3 5-4- 1 8 4 8 ) u m l ， t ：一2 4 7 ， p：0 0 1 4 。s o d活力随 mv h水平的增加， 表现出不同的变化趋势。当 m v h2 4 m g k g时， s o d活力随 mv h水平的增加而 增加( r = 0 3 5 6 ， p= 0 0 0 2 ) ； 而当mv h 2 4 m g k g时， s o d活力随 mv h水平的增加反而出现了降低 的趋势( r =一 0 2 6 0 ， p= 0 1 5 0 ) 。两组人群 m d a、 g s t 、 3 - n t 、 a l t 、 a s t的差异无统计学意义。结论 较低的 d mf暴露浓度对机体的抗氧化系统存在一定程度的刺激作用， 在机体能够代偿防御的范围 内， 并未造成明显的脂质 蛋白的过氧化损伤。 【 关键词】 二甲基甲酰胺； 职业暴露 ； 血红蛋 白n 一 甲基氨甲酰加合物； 氧化损伤； 横断 面研 究 e ffe c t o f n ，n- d i me t h y l f o r m a mi d e o n o x i d a t i o n o r a n t i o x i d a t i o n s t a t u s a m o n g o c c u p a t i o n a l e x p o s e d w o r k e r s c h e n g j u a n ，l i u q i a n g ， 0 ， ij u n ， y e me n g ，d i a n g x i a o ，w a n g c h u n mi m t i o n a l i n s t i t u t e o ，o c c u p a t i o n a f h e a l t h a n d p o i s o n c o n t r o 2 k e y l a b o r a t o r y o f c h e mi c a f s a lt y a n d h e a h h ， i n e s e c e n t e r f o r d is e a s e c o n t r o l a n d p r e v e n t i o n b e i i i n g 1 0 0 0 5 0 i n a c o r r e s p o n d i n g a u t h o r ： c h e n g j u a n ， e m a i z ： c h e n g j u a n 0 6 0 9 1 2 6 c o rn 【 a b s t r a c t 】 ob j e c t i v e t o e x p l o r e t h e e f f e c t o f n， n d i m e t h y l f r m a m i d e ( d mf )o n o x i d a t i o n o r a n t i o x i d a t i o n s t a t u s a mo n g o c c u p a t i o n a l e x p o s e d w o r k e r s m e t h o d s a t o t a l o f 1 0 4 dmf e x p o s e d w o r k e r s a n d 1 01 c o n t r o l s we r e r e c r u i t e d i n t h i s s t u d y i u ma y 2 0 1 2 t h e i n f o r n mt i o n o f o c c u p a t i o n a l h i s t o r ya g e g e n d e r s m o k i n g a n d a l c o h o l h a b i t s o f a l i s u b j e e t s w e r e c o l l e c t e d b y q u e s t i o n n a i r e d mf c o n c e n t r a t i o n i n t h e a i r o f wo r k p l a c e w a s t e s t e d n me t h y l c a r b a mo y l a t e d h a e mo g l o b i n a d d n e t f n mhb、i n b l o o d w a s c h o s e n a s a n i n n e r d o s e b i o ma r k e r ，w h i c h w a s e x p r e s s e d a s 3 - me t h y l - 5 一 i s o p r o p y l h y d a n t o i n(mv h ) ，t h e d e g e n e r a t i o n p r o d u c t o f n mhb s e r u m a l a n i n e a mi n o t r a n s f e r a s e ( al t)a s p a r t a t e a mi n o t r a n s f e r a s e ( as t)l e v e l s we r e d e t e c t e d t o r e f l e c t l i v e r f u n c t i o n s e rum s u p e r o x i d e d i s mu t a s e( s 0 d) a c t i v i t yg l u t a t h i o n e s t r a n s f e r a s e ( g s t )a c t i v i t y ，m a l o n d i a l d e h y d e ( md a)l e v e l s ，3 一n i t r o t y r o s i n e( 3 一 n t )l e v e l s w e r e d e t e c t e d t o r e fl e c t o x i d a t i v e a n t i o x i d a t i v e s t a t u s re s u i t s d mf c o n c e n t r a t i o n i n wo r k p l a c e a i r w a s wi t h i n t h e r a n g e o f 3 3 1 2 4 m m ，w h i c h d i d n o t e x c e e d o u r n a t i o n a l s t a n d a r d t h e mvh l e v e l i n e x p o s e d w o r k e r s w a s ( 1 9 6 91 2 5 2)rag k g b u t wa s n o t d e t e c t _a h l e i n c o n t r o l g r o u p t h e a c t i v i t y o f s od i n e x p o s e d w o r k e r s ( ( 1 2 5 3 0 2 1 2 3 ) u m1 )w a s s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h e c o n t r o l g r o u p( ( 1 l1 8 3 51 8 4 8 )i j m l ， t = 一2 4 7 p=0 0 1 4) ho we v e r t h e a c t i v i t y o f s od s h o w e d d i f f e r e n t t r e n d s w i t h t h e i n c r e a s i n g o f mvh doi ：1 0 3 7 6 0 e ma j 1 s s n 0 2 5 3 - 9 6 2 4 2 01 4 o 1 0 0 7 基金项 目： 国家自然科学基金( 8 1 3 7 2 9 6 3 ) 作者单位： 1 0 0 0 5 0北京， 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所 化学污染与健康安全重点实验室 ( 程娟、 吴智君、 叶萌、 蒋晓) ； 苏州市疾病预防控制中心职业卫生科( 刘强、 王春民) ； 太仓市疾病预防控制中心卫生 科 ( 徐波) 通信作者 ： 程娟 ， e m a i l ： c h e n g j u a n 0 6 0 9 1 2 6 c o i n 论著 二 中华预防医学杂志 2 0 1 4年 1月第 4 8卷第 1期c h i n j p r e v me d ， j a n u a r y 2 0 1 4 ，v o 1 4 8 ，n o 1 l e v e 1 wh e n mvh 2 4 m k g ，t h e s o d a c t i v i t y i n c r e a s e d wi t h t h e i n c r e a s i n g o f mvh l e v e l ( r=0 3 5 6 p=0 0 0 2) h o w e v e r ，w h e n m v h 2 4 m k g ，s o d a c t i v i t y e x p r e s s e d d e c r e a s i n g t r e n d w i t h t h e i n c r e a s i n g o f mvh l e v e l( r= 一0 2 6 0p =0 1 5 0)no s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s we r e o b s e r v e d i n gs t md a ，3 一 nt，al t，as t l e v e l s a mo n g t h e t w o g r o u p s co n c l u s i o n dmf e x p o s u r e mi g h t h a v e s t i mu l a t o r v e f f e c t o n a n t i o x i d a t i o n s y s t e m o f t h e b o d y u n d e r l o w c o n c e n t r a t i o n； wi t h i n t h e r a n g e o f c o mp e n s a t o r y d e f e n s e， dmf e x p o s u r e d i d n o t c a u s e o b v i o u s l i p i d a n d o r p r o t e i n p e r o x i d a t i v e d a ma g e 【 ke y w o r d s 】 d i me t h y l f o r ma m i d e ； o c c u p a t i o n a l e x p o s u r e ； n m e t h y l c a r b a mo y l a t e d h a e m o g l o b i n a d d u c t ： o x i d a t i v e d a ma g e ： c r o s s s e c t i o n a l s t u d i e s 二 甲基 甲酰胺 ( n， n d i me t h y l f o r ma mi d e ， d mf) 是一种用途极广的化工原料和优 良溶剂 ， 在有机合 成 、 无机化工 、 合成纤维、 皮革等多个行业广泛应用。 作业环境 中的 d m f可经呼吸道及皮肤进入机体 ， 造 成 以肝脏为主的多器官损害 ， 严重可致死亡。鉴于 其使用的广泛性和危害的严重性 ， 美 国国立 环境卫 生科学研究所 ( n i e h s ) 在 2 0 0 0年将其列为优先进 行人群研究 的化 合物之一 。近年来 ， 国内制衣 、 制鞋 、 皮革 、 聚氨酯行业迅猛发展 ， d mf的使用量和 接触人群剧增 ， 因职业接触所引发 的急、 慢性 中毒也 不断发生 。探讨发病机制 ， 寻找可用于生物监测 的标志物 ， 是职业卫生工作亟须解决的问题。 d mf主要经细胞色素 p 4 5 0 2 e l ( c y l y 2 e 1 ) 代谢 活化 ， 代谢过程除生成活性中间产物外 ， 还可产生大 量超氧阴离子 自由基 和过氧化氢 ， 引发氧化应激 。 而氧化应激是多种外源性化学物致中毒性肝损害的 重要机制之一 。超氧化物歧化酶 ( s o d) 、 谷胱甘 肽 s转移酶( g s t ) 可消除体 内 自由基 ， 在一定程度 上反映了细胞 内的抗氧化能力。丙二醛 ( md a) 是 脂质过氧化损伤 的代表性终产物 ， 而 3 一 硝基酪氨酸 ( 3 一 n t ) 则是蛋 白质硝基化损伤的特异性标志物 ， 后 两者则可用来反映细胞氧化损伤的程度。笔者采用 横断面研究设计 ， 通过对 d mf职业接触人群血清中 s o d、 g s t、 md a、 3 一 n t等活性或含量 的变化进行研 究 ， 并分 析其与 内剂 量血红 蛋 白 n 氨 甲酰加 合物 ( n - me t h y l c a r h a m o y l a t e d h a e m o g l o b i n ，n mh b)的关 系， 探讨作业场所 d mf接触对机体氧化或抗氧化状 态的影响。 对象与方法 1 研究对象及样本采集 ： 本研究程序符合伦理 学标准并经中国 c d c职业卫生与 中毒控制所伦理 委员会批准。采用横断面研究设计， 将2 0 1 2 年 5月 太仓市某化工厂接触 d mf的全部在岗工人作为接 触组 ， 共 1 0 4名， 来 自包装 、 投料等 岗位 ， 排除其他有 机溶剂混合接触。接触组工人具备个体防护措施， 包括防毒口罩、 乳胶手套、 帆布手套、 防护油等。对 照组 1 0 1 名 ， 来源于 2 0 1 2年 5月期间当地职业健康 体检 中不接触 d mf及其他 目前 已知明确毒物的工 人 ， 年龄性别与接触组匹配， 排除明确肝病史 。经知 情同意后 ， 收集研 究对象一般情况、 吸烟饮酒状况 、 职业史等信息。抽取肘静脉血， 其中采用肝素抗凝 血样本 5 m l ， 用于血红蛋白 n 甲基氨甲酰加合物测 定 ； 促凝血样本为 3 m l ， 分离血清 ， 用于肝功能及氧 化或抗氧化指标的测定。 2 车 间 空 气 中 d mf浓 度 测 定 ： 根 据 g b z t 1 6 0 6 2 - 2 0 0 4 ( 工作场所空气中酰胺类化合物的测 定方法 - o 进行。 3 血 n mh b测定 ： ( 1 ) 仪器 ：q p 2 0 1 0 p l u s 气相 色谱一 质谱联用仪 (e t 本岛津公司 ) ， d l - 4 0 0 0 b低速 离心机( 上海安亭科学仪器厂 ) ， 超声波细胞破碎仪 ( 南京舜玛仪器设备有限公司) 。( 2 ) 方法： 血样标 本经分离、 洗涤、 破碎 、 干燥等预处理后 ， 获得血红蛋 白， 再通过埃德曼 降解法 ， 将 n mh b降解为 3 甲基 异 丙 基 乙 内 酸 脲 ( 3 - me t h y 1 5 i s 0 p r 0 p y l h y d a n t o i n ， mv h) 进行测定 。过程简述如下 ： 肝素抗凝管收 集血样 5 m l ， 离心弃去血浆 ； 生理盐水洗红细胞两 次 ， 加 入 1 m l 蒸 馏水 超声 裂解红 细胞 ； 缓慢 加入 1 5 m l 预冷 丙酮溶液 ( 含有体 积分 数为 2 的浓盐 酸) ； 1 0 0 0 g离心 5 m i n ， 弃上清， 1 0 m 1 预冷丙酮溶 液洗 3次 ， 加入 1 0 m l 乙酸乙酯洗 1次， 剩余物氮吹 至干。称 取 上 述 干 燥 后 血 红 蛋 白 1 0 0 m g ， 置 于 1 0 ml 的玻璃 瓶 中， 加入 盐酸醋 酸溶液 ( 体积 比为 2 ： 1 ) 5 m l ； 将上述玻璃瓶置于 1 0 0水浴加热 1 h ； 冷却后 ， 将液体移至 2 5 m l 离心管 中， 加入 3 g硫酸 铵和 1滴酚红溶液 ； 用 1 0 m o l l氢氧化钠溶液调节 p h值至7 0 7 5 ， 溶液 由红转黄 ； 加入 1 0 m l 乙酸 乙酯充分混匀 2 m i n ， 封 口后静置过夜 ； 转移有机相 ， 6 0氮吹， 剩余物溶解在 1 m l 乙酸乙酯中， 取 1 l 进样检测。m v h标准品根据 r a m a c h a n d r a n等的方 法制备 。 4 血清 中氧化或抗氧化 指标及 肝功能测 定 ： e l i s a方法测定血清 s o d活力 、 m d a水平 、 g s t活 性、 3 一 n t水平。e l i s a试剂盒购 自北京鑫方程生物 中华预防医学杂 志 2 0 1 4年 1月第 4 8卷第 1 期c h i n j p r e yme d ， j a n u a r y 2 0 1 4 ，v o 1 4 8 ， 0 _ 技术有限公司， 利用 3 5 2型酶标仪( 芬兰 l a b s y s t e m s mu l t i s k a n ms公司 ) 进行样 品测试。血 清中谷 丙转 氨酶( a l t ) 、 谷草转氨酶 ( a s t) 水平采用 7 1 8 0型全 自动生化分析仪(日本 日立公司) 进行分析。 5 统计学分析 ： 采用 s p s s 1 3 0软件进行分析。 经正态性检验 ， m v h、 s o d、 m d a、 3 一 n t、 g s t均符合 正态分布。使用 x 检验 比较接触组和对照组在性 别 、 吸烟 、 饮酒等方面分布 的差异 ； s t u d e n t t 检验 比 较两组人群年龄的差别 以及不 同性 别、 不同吸烟饮 酒状况的工人中各指标 的差异 ； 协方差分析比较接 触和对照组各指标的差异。计算 p e a r s o n相关 系数 以反映 s o d和 m v h 的相关关 系， 绘制简单散点 图 并添加趋势线 。统计学检 验均为双侧 ， 以 p2 4 m g k g 时 ，s o d 活 力 虽 有 所 升 高 f ( 1 3 1 7 7 2 2 0 9 ) u m l ， p= 0 0 3 5 ， 但 随 mv h水 平的增加反而出现 了降低 的趋势( 调查人数 3 2名 ， r =一 0 2 6 0 ， p= 0 1 5 0 ) 。未发现其他因素如年龄、 性别 、 吸烟 、 饮酒 、 工龄等对 s o d活力的影响( 表 3 ) 。 表3 不同特征接触组工人的 s o d活力水平比较( 面 s ) 注： s o d ： 超氧化物歧化酶； m v h： 3 - 甲基一 异丙基乙内酸脲 5 d mf职业接触对肝功能血生化水平 的影 响： 血清 a i j t和( 或 ) a s t超过正常值范围的人数 ， 对照 组为 2 0名 ， 占 1 4 7 ； 接触组为 2 1名 ， 占2 0 2 ， 差异无统计学意义。按此分组， 未发现生化异常与 脂质、 蛋白氧化损伤之间的联系。 中华预防 医学杂志 2 0 1 4年 1月第 4 8卷第 1期c h i n j p r e v m e d ， j a n u a 2 0 1 4 ，v o 1 4 8， n o 1 2 0 0 1 7 5 1 5 0 8 1 2 5 1 0 0 7 5 2 0 0 1 7 5 1 5 0 8 1 2 5 1 0 0 7 5 。 。 。 玉 警 o oo o o o o 0 口 o 。 0 。 0 5 1 0 1 5 2 o 2 5 i w( k g ) o 2 o 2 5 3 0 3 5 4 0 4 5 5 o 5 5 6 o h v h (m g k g ) 0 s o d： 超 氧化物歧化酶 ，mv h： 3 - 甲基 异丙基 乙内酸脲 ； 图 a 为 mv h42 4 mg k g下的 s o d活力与 mv h水平之 间的散点 图 ， 调查人数为 7 2名 ， r =0 3 5 6 ， p=0 0 0 2 ； 图 b为 mv h 2 4 mg k g下的 s o d活力与 mv h水平之 间的散点图 ， 调查人 数为 3 2名 ， r =一0 2 6 0 p=0 1 5 0 图 1 s o d活力与 m vh水平 的散点 图 讨 论 本研究 d mf浓度测定结果并未显示超过 国家 标准 ， 既往 3年的监测资料也提示该厂职工外暴露 水平总体来讲相对较低。因此本研究所考察的是机 体在相对低水平 d m f外暴露情况下 ， 氧化或抗氧化 状态的变化特点。 准确的接触评定是进行职业人群标志物研究的 关键前提。本研究采用 血 n mh b这一指标来 反映 机体 实 际接 触 水 平 ， 该 指 标 较 尿 中其 他 代 谢 产 物 h 具有两方面的突出优势 j 。首先 ， 血 n m hb 是 由 d mf 的 活 性 代 谢 产 物 异 氰 酸 甲 酯 ( m e t h y i i s o c y a n a t e ， mi c) 与血红蛋 白相互作 用形成 的加合物， 是反映生物有效剂量的分子水平标志物， 因此具有更为重要的毒理学意义 ， 能更好的参与作 用机制 的探讨。另外 ， 人体血液红细胞更新时问长 达 4个月 ， n m hb一旦形成 ， 在较长时间内可维持相 对稳定 的水平 ， 因此 ， 血 n mh b更加稳定 ， 能够用来 反映较长时间内 d m f的累积暴露水平 。课题组前 期也进行了该指标作为 d m f接触标志的研究， 发现 n m h b 在反映 d m f职业暴露状况时具有较好的特 异性， 且随着作业场所外暴露水平的增加， n m h b 水 平逐步升高 孓 j ， 因此 ， 本研究继续采用 n mh b作 为 d mf接触内剂量标志物。 c y p 2 e 1 是 d mf代谢过程 中的关键活化酶 ， 由 于该酶蛋 白空间结构具有可变性 ， 不 同构型间互换 速率相对较快 ， 因此底物容易脱离酶的活性位点 ， 出 现大量活性氧逃逸 埔 j ， 生成氧 自由基 ， 损伤细胞 膜脂质和蛋 白质。s o d是细胞 内主要 的抗 氧化酶 之一 ， 可特异性清除细胞内的超氧阴离子 自由基 ， 在 一 定程度上反 映了细胞 内的抗氧化能力。有趣 的 是 ， 本研究 中， 接触组 s o d活力并没有降低 ， 而是 出 现了明显升高。出现这一结果 ， 可 以尝试用毒理学 上的“ 毒物兴奋效应( h o r m e s i s ) ” 来解释 。本研 究 中， 仔细观察散点图会发现 ， s o d随 mv h的变化 趋势并非直线型 ， 而是在 mv h= 2 4 m g k g 处 出现了 明显的拐点 。按此拐点， 将数据分开来分别绘制散 点图并拟合趋势线 ， 则发现 ， 当 m v h2 4 m g k g时 ， s o d活力随 mv h水平 的增加而增加 ， 而当 mv h 2 4 m g k g 时 ， s o d活力 随 mv h水平 的增加反而 出 现了降低的趋势 。虽然由于 mv h2 4 m g k g的例 数相对较少 ， 相关系数无统计学意义 ， 但软件给出的 趋势线明确显示了 s o d活力随 mv h水平增加而降 低的趋势 。以上结果提示 ， 较低的 d mf暴露浓度对 机体的抗氧化系统存在一定程度的刺激作用 ， 机体 通过这种超补偿效应来维持 自稳态 的平衡 ， 因此并 未出现明显的脂质和( 或 ) 蛋 白过氧化损伤 。另外 ， 由于暴露浓度相对较低 ， 接触组 出现肝功能异常的 人数较少 ， 未发现肝功能异常与脂质、 蛋 白氧化损伤 之间的联系。 本研究中的接触人群来 自 d mf生产企业 ， 暴露 水平相对较低， 而在某些 d m f使用企业， 暴露水平 则相对较高 ， 如皮革行业 中的配料 、 涂 台等岗位 ， 作 业环境浓度常可超过国家标准 4 5倍。进一步 ， 应 在更高暴露水平的职业人群 中进行研究 ， 比较不同 接触水平对机体氧化或抗 氧化状态的影 响。此外 ， 本研究未进行尿中接触标志物 的分析 ， 应在后续研 究中全面考察血红蛋白加合物 n mh b 、 尿中 n mf或 a mc c水平 ， 分析几种标志物 的相关关系及与早期 效应 的关系 ， 完善剂量 效应关系曲线 ， 确定 d mf致 机体氧化损伤的阈值和( 或) 作用拐点， 为理解 d m f 作用机制和进行生物监测提供更全面的信息。 参考文献 1 mo o r ma n wj ，a h l e r s h w，c h a p i n r e，e t a 1 p r i o r i t i z a t io n o f n t p r e p r o d u c t i v e t o x i c a n t s f o r fi e l d s t u d i e s j r e p r o d t o x i c o l ， 2 0 0 0， 1 4( 4 ) ： 2 9 3 3 0 1 3 2 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 2 中华预防医学杂志 2 0 1 4年 1 月第 4 8卷第 1 期c h i n j p r e y me d ， j a n u a r y 2 0 1 4 ，v o 1 4 8 ，n o 1 邱少宏 ，张建杰 急性二甲基 甲酰胺 中毒 3 3例分析 j 中国 职业 医学 ， 2 0 0 7 ， 3 4 ( 4 ) ： 3 0 4 - 3 0 5 干超男 某皮革加工厂二 甲基 甲酰胺中毒事件 的调查 j 中 华劳动卫生职业病杂志 ， 2 0 0 8， 2 6 ( 1 0 ) ： 5 8 2 张雪涛，匡兴 亚，冯玉妹 ，等职业性急性二 甲基 甲酰胺 中毒 临床分析 j 中华 劳动卫 生职 业病杂 志 ， 2 0 1 1 ， 2 9( 6) ： 4 4 5 4 4 6 吴娜， 蔡光明， 何群， 等 氧化应激与肝脏损伤 j 世界华人消 化杂志 ， 2 0 0 8 ， 1 6 ： 3 3 1 0 - 3 3 1 5 中华人 民共和 国卫生部g b z t 1 6 0 6 2 2 0 0 4工作场所空气中 酰胺类化合物的测定方法 s 北京 ： 中国标 准出版社 ， 2 0 0 4 ka f f e r l e i n hu 。 f e r s t l c。b u r k h a r t re i c h l a ， e t a 1 t h e u s e o f b i o ma r k e rs o f e x p o s u r e o f n n d i me t h y l f o r ma mi d e i n h e a l t h r i s k a s s e s s me n t a n d o c c u p a t i o n a l h y g i e n e i n t h e p o l y a c r y l i c f i b r e i n d u s t ryl j j o c c u p e n v i r o n me d ， 2 0 0 5 ， 6 2( 5 ) ： 3 3 0 - 3 3 6 mr d z j ，du s k o v d s， gd l o v d e， e t a 1 i mp r o v e d g a s c h r o ma t o g r a p h i c ma s s s p e c t r o me t r i c d e t e r mi n a t i o n o f t h e n me t h y l c a r b a mo y l a d d u c t a t t h e n t e r mi n a l v a l i n e o f g l o b i n。 a m e t a b o l ic p r o d u c t o f t h e s o l v e n t n， n d i me t h y l forma mi d e j j c h r o ma t o g r b a n a l y t t e c h n o l b i o me d l i f e s c i ， 2 0 0 2 ， 7 7 8 ( 1 2 ) ： 3 5 7 3 6 5 mr d z j ， c i ml o v d j ， s t r d n s k v， e t a 1 n m e t h y l c a r b a m o y l - l y s i n e a d d u c t i n g l o b i n：a n e w me t a b o l ic p r o d u c t a n d p o t e n t i a l b i o ma r k e r 0 f n，n d i me t h y l forma mi d e i n h u ma n s j t o x i c o l l e t t ， 2 0 0 6， 1 6 2 ( 2 3) ： 2 1 1 - 2 1 8 ra ma c h a n d r a n p k ga n d h e br，ve n k a t e s wa r a n kse t a 1 ga s c h r o ma t o g r a p h i c s t u d i e s o f t h e c a r b a my l a t i o n o f h a e mo g l o b i n b y m e t h y l i s o c y a n a t e i n r a t s a n d r a b b i t s j j c h r o ma t o g r ， 1 9 8 8 ， 4 2 6 ( 2 ) ： 2 3 9 - 2 4 7 i mb r i a n i m ， ma e s t r i l， ma r r a c c i n i p e t a 1 ur i n a r y d e t e rm i n a t i o n o f n a c e t y 1 s f n me t h y l c a r b a mo y l c y s t e i n e a n d n me t h y l f o r ma mi d e i n wo r k e r s e x p o s e d t o n n d i me t h y l f o rm a mid e j i n t a r c h o c c u p e n v i r o n h e a h h ， 2 0 0 2 ， 7 5 ( 7 )： 4 4 5 -45 2 o s u n s a n y a t， a d e j o r o b ，k i n g b ，e t a 1 b i o l o g i c a l mo n i t o ri n g o f 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 o 2 1 we r k e rs e x p o s e d t o d i me t h y l f o r ma mi d e i n a t e x t i l e p o l y u r e t h a n e u n i t j o c c u p me d( l e n d ) ， 2 0 0 1 ， 5 1 ( 6 )： 3 7 4 - 3 7 9 ka f f e r l e i n hu，g6 e n t，mt il l e r j，e t a 1 bi o l o g i c a l mo n i t o ri n g o f we r k e rs e x p o s e d t o n， n d i me t h y lform a mi d e i n t h e s y n t h e t i c fi b r e i n d u s t r y j i n t a r c h o c c u p e n v i r o n h e a l t h ， 2 0 0 0 ， 7 3 ( 2 ) ： 1 1 3 - 1 2 0 ka f f e r l e i n hu，mr o z j fe r s t l ce t a 1 an a l y s i s o f me t a b o l i t e s o f n， n d i me t h y l f 0 r m a m i d e i n u r i n e s a mp l e s j i n t a r c h o c c u p e n v i r o n h e a l t h ， 2 0 0 4 ， 7 7( 6 ) ： 4 2 7 -4 3 2 刘强 ， 王春 民，李建，等血液 中 n 甲基氨 甲酰加合 物作 为 二甲基甲酰胺 职业暴露标志物可行性探讨 j 工业卫生与 职 业病 ， 2