植物乳杆菌发酵转化人参皂苷的研究论文.pdf

第 3 9卷第 8期 2 0 1 4年 4月 中 圈中药杂畚 v o 1 39 issu e 8 a p r i l ，2 01 4 植物乳杆菌发酵转化人参皂苷 的研究 陈呖，王义， 孙亮， 王康宇， 蒋世翠， 孙春玉， 张美萍 ( 吉林农业大学 生命科学学院，吉林 长春 1 3 0 1 1 8 ) 摘要 目的： 探索植物乳杆菌对人参的发酵工艺 ， 将人参中的部分人参总苷转化成活性更强的人参皂苷 r d 。方法： 采 用静止暗培养法进行微生物发酵； 索氏提取法提取人参总苷； 香草醛一 硫酸显色， 紫外 可见分光光度法测定人参总苷含量； h p l c测定供试品中人参皂苷 r d 含量。结果： 植物乳杆菌对人参的发酵工艺为： 发酵培养基为 mr s培养基、 培养温度 3 5 、 培养 p h为5 0 、 发酵时间 2 d ； 发酵后的人参， 其发酵产物中人参总苷含量提高了3 2 ， 单体人参皂苷 r d含量增加 4 8 6 4 m g g 。结论 ： 建立的发酵体系工艺合理 ， 适用于大规模生产 ， 对微生物转化人参皂苷的研究具有重要意义。 关键词 人参 ； 发酵； 植物乳杆菌； 人参皂苷 r d 乳酸菌是公认的人体益生菌 。 j ， 常用于制造酸 奶 、 乳酪 、 啤酒 、 泡菜和其他发酵食品； 在生物工程 、 工农业 、 食品加工等领域具有广泛 的应用前景 。 大量研究表 明， 乳酸菌能够调节 胃肠道正常菌群 ， 从 而改善 胃肠道功能 ； 控制肠道 内腐败菌生长 ； 提高食 物消化率和生物效价 ； 降低血液 中的胆 固醇含量 ， 对 冠心病和脑血管疾病具有很好 的疗效 。而关 于 乳酸菌产胞外 葡萄糖苷 酶的研究 已经引起研 究 人员的广泛关 注 ， 葡萄糖苷酶 广泛存在 于微 生 物中， 其能够水解 多种 葡萄糖苷 ， 如水杨苷 ( s a l i c i n ) 、 纤维二糖 ( c e l l o b i o s e ) 等 j 。通 过对 比人参皂 苷分子结构 ， 可 以得出原 人参二醇型皂苷 ( p p d) 的 化学结构为原人参二醇苷元 +糖苷 ； 原人参三醇型 皂苷 ( p ) 的化学结构为原人参三醇苷元 +糖苷 ； 由于在 c ， ， c 或 c 加 位点处所连接 的糖苷配基不同， 因此会有多种单体人参皂苷。利用 一 葡萄糖苷酶 水解人参皂苷 的葡萄糖苷 ， 从而产生活性更高 、 药效 更强的单体人参皂苷 已成为人参研究的热点 问题 。 药理学研究 表明 ， 人参皂苷 r d具有很好 的药理 活 性 ， r d可 以特异性抑制血管平滑肌细胞 的受体调控 性 ， 从而扩张血管降低血压 ， 对高血脂和动脉硬化具 有 良好的预 防作 用 。 。 ； r d可 以抑制癌细胞增殖 ， 并诱导肿瘤细胞凋亡_ 1 ； r d对 肾脏 的保护及 改善 肾功能损伤 ， 效果 十分显著 j 。本文选取植物乳 收稿 日期 基金项目 通信作者 作者简 介 2 01 3 1 2 1 3 吉林省科技发展计划项 目( 2 0 1 2 0 9 1 7 ) 张美萍 ， 教授 ， e - m a i l ： w a n a 0 s h i0 6 o 6 1 6 3 c o b 陈呖 ， 硕士研究生 ， e ma i l ： 2 8 5 1 7 0 0 9 1 q q c o m 杆菌对人参进行整体发酵 ， 利用 一 葡萄糖苷酶对人 参皂苷葡萄糖苷的水解作用 ， 将部分人参总苷转化 成单 体人参皂苷 r d ， 使发酵后 的人参 中人 参皂苷 r d含量显著提高。 1 材料 a g i l e n t 1 2 0 0高效 液相色谱仪 ( 美 国 a g i l e n t 公 司) ； p h me t e r g l p 2 2( 西班 牙 c r i s o n公 司) ； s p x 型智能生化 培养箱 ( 宁波江南仪器 厂 ) ； 1 0 1 - 1 - s型 电热鼓风干燥箱 ( 上海跃进 医疗器械 厂) ； a u y 2 2 0 型电子分析天平(e t 本岛津公司) ； k q 2 5 0 b型超声 波清洗器 ( 昆山市超声仪器有 限公司 ) ； 7 5 5型分光 光度计 ( 上海圣科仪器设备有限公司) 。 植物乳杆菌 l a c t o b a c i l l u s p l a n t a r u m为吉林农业 大学生命科学学院植物细胞工程实验室冻存； 人参 购 自吉林健龙生物科技 有限公 司， 经吉林农业 大学 王义教授鉴定为五年生人参根 ； 人参皂苷对照品 r d ( 批号 1 1 1 8 1 8 - 2 0 1 0 0 1 ) 购 自中国食 品药 品检定研究 院； 乙腈、 甲醇均为色谱纯； 水为超纯水； 其他试剂均 为分析纯。 2 方法与结果 2 1 发酵培养基 的选 取依据 已有文献报道 。 及本实验室前期实验 的论证 ， 发酵培养基选取 mr s 培养基 ： 葡萄糖 2 0 o 0 g 、 蛋 白胨 1 0 o 0 g 、 牛 肉浸 粉 1 0 0 0 g 、 酵母粉 5 0 0 g 、 聚氧 乙烯脱水 山梨醇单 油 酸酯( 吐温 8 0)1 ml 、 醋酸钠 5 0 0 g 、 磷酸氢二钾 2 0 0 g 、 柠檬 酸铵 2 0 0 g 、 硫 酸镁 0 2 0 g 、 硫 酸锰 0 0 5 g ， 加水定 容至 1 l ， 1 1 5 oc高压 蒸气灭菌 30 mi no 1 4 3 5 第 3 9卷第 8期 2 0 1 4年 4月 中圈 ch i n a d o u t n i 中 o f ch n 药 e se a鳃terta edic-、a v ol_39 issue 8 a pril， 2014 2 2 植物乳杆菌生长曲线 的测定 对本文选取 的 植物乳杆菌进行常规 mr s培养基生长曲线的测定 ， 以确定其生长阶段 。 2 3 人参总皂苷含量的测定人参总皂苷 的提取 采用索 氏提取法 ； 采用香草醛一 硫酸显色 ， 紫外 可见 分光光度法测定人参总苷含量 。 2 4 人参供试 品处理人参经灭菌处理后 ， 选取大 小 、 形态、 质量相似的人参 ， 每组 4 0 g 。 2 5 发酵温度 的确定选取经 2 4项下处理的人 参供试 品， 分别加入种子液 2 5 ml 、 mr s培养基 5 0 ml ， p h 自然， 在不 同温度 梯度条 件下 ( 发酵 温度 2 0 ， 2 5， 3 0 ， 3 5， 4 0 ， 4 5 q c) 静止暗培养 4 8 h ； 发酵完成 后 ， 取出人参进行干燥粉碎处理 ， 进行总苷含量的测 定。通过比较不同发酵温度对人参发酵产物中总苷 含量的影响， 见图 1 ， 当发酵温度为 3 5时 ， 发酵人 参总苷含量最高 。 一 - x 洲 ,t $ ! 、 、 r i 2 0 2 5 3 0 3 5 4 0 4 5 t 图 1 植物乳杆菌发酵温度值测定 f i g 1 f e r me n t a t i o n t e mp e r a t u r e o f l a c t o b a c i l l u s p l a n t a r u m 2 6 发酵 p h的确 定 选取经 2 4项下处理 的人 参供试品， 分别加人种子液 2 5 m l、 mr s培养基 5 0 m l， 选取种子液培养温度 3 7 ， 在不同 p h梯度条 件下 ( p h 3 ， 4 ， 5 ， 6 ， 7， 8 ， 9 ) 静止暗培养 4 8 h ； 对样品 进行处理后 ， 测 定人 参 总皂 苷含 量 ， 当 p h 为 5 0 时 ， 发酵人参总苷含量最高 ， 见图 2 。 一样品 刖照品 一 3 4 5 6 7 8 9 d h 图2 植物乳杆菌发酵 p h测定 f i g 2 f e r me n t a t i o n p h v a l u e o f l a c t o b a c i l l u s p l a n t a r u m 1 43 6 2 7 发酵时间的确定选取经 2 4项下处理的人 参供试品， 分别加人种子液 2 5 m l 、 m r s培养基 5 0 m l， 选取种子液培养温度 3 7 ， p h 自然 ， 在不同时 问梯度条件下( 发酵时间 1 ， 2， 3 ， 4， 5 ， 6 ， 7 d ) 静止暗 培养 ； 样品经测定后 ， 发现发酵时间为 2 d时 ， 发酵 人参总苷含量最高 ， 见图 3 。 +样l 1 q煅 ： ， 卜 。 】 2 3 4 5 6 人数 d 图 3 植物乳杆菌发酵时间测定 fi g 3 fe r me n t a t i o n t i me o f la c t o b a c i l l u s pl an t ar u m 2 8 发酵工艺的确定依据 2 5 ， 2 6 ， 2 7项下的 实验结果 ， 可得出植物乳杆菌发酵人参的工艺条件 ： mr s培养基 ， 培养温度 3 5 o c， p h 5 0 ， 培养 2 d ； 依 据此发酵条件对人参进行发酵 ， 人参经植物乳杆菌 发酵后 ， 其发酵产物 中人参总苷含量 为 5 2 1 6 9 mg g ， 与未发酵人参 阴性供试 品总苷含量 3 9 6 5 1 m g g 相 比， 提高 3 2 。 2 9人参皂苷 r d含 量 的 hp l c测定z o r b a x s b - c 1 8 色谱 柱 ( 4 6 m m2 5 0 m m， 5 m) ； 柱温 3 5 o c； 进样量 1 0 i l l ； 流速 l m l mi n ； 流动相水 ( a) 一 乙腈 ( b ) ， 梯 度洗 脱 ， 03 5 mi n ， 1 9 b， 3 55 5 mi n， 1 9 2 8b， 5 5 8 0 mi n， 28 b， 8 0 1 0 5 mi n， 28 40 b， 1 051 1 0 mi n， 4 0b， 1 1 0 1 1 3 m i n ， 4 0 1 9 b， 1 1 31 2 0 m i n ， 1 9 b ； 检测波长 为 2 0 3 n m。对发酵人参供试品、 未发酵人参 阴性供 试品的 r d含量进行 h p l c检测 ， hp l c图谱见图 4， 经植物乳杆菌发酵 2 d的人参发酵产物 中， 人参皂 苷 r d含量比为发酵人参多 4 8 6 4 m g g 。 3 讨论 3 1 发酵处理对人参总苷含量的影响 目前 ， 已报 道的人参皂苷约有 6 01 0 0余种 引， 由于不 同的 提取方法及鉴定手段 ， 导致对单体人参皂苷种类 的 鉴定略有不同； 单体人参皂苷与人参 总苷为量的加 和关 系， 对于总苷含量的表征 ， 采用紫外 可见分光 光度 法进行测定， 符 合 2 0 1 0年版 中国药 典 第 3 9卷 第 8期 2 0 1 4年 4月 誊烹 i中otch a杂terta 畚edica v 0139issue 8 april，2014 = ：=：=：一 0 2 0 6 0 lji 图4 2 0 ( s ) 一 人参皂苷 r d对照品( a) 、 供试 品( b )、 阴性供 试 品( c ) 的 h p l c图 f i g 4 h p l c o f r e f e r e n c e s u b s t a n c e s 2 0 ( s ) 一 r d( a) ， s a m p l e ( b )a n d n e g a t i v e s a m p l e ( c) ( 一部 ) 的规定 j 。在人参的深加工领域 ， 经不同的 炮制方法加工后 的人参 ， 其总苷含量均有明显变化 。 园参经高温蒸气处理后制得红参 j o s e p h h o n等发现 中国人参提取物 中总苷含量 比中国红参根 中的皂苷 含量少 ； 李 向高等发现经加工后 的红参 ， 其 总苷 含量与鲜参 和 白参对 比， 有 明显增加 ； 郑友 兰等 对吉林红参 、 抚松人参及高丽红参 的总苷含量进行 比较分析后 ， 得 出吉林集安产边条红参总苷含量 多 于抚松人 参 ， 而抚 松人参 总苷 含量 多 于北朝 鲜 红 参 _ 2 ； 翟宁等对 红参的炮制工艺进行探讨 ， 发现不 同的炮制工艺导致红参总苷含量不 同_ 2 ； 活性人参 是一种移用晾干技术研制 出来的人参加工新 品种 ， 李新 民等对活性人参及生 晒参 的总苷含 量进行对 比， 发现活性人参总苷含量提高 了 0 6 3 _ 2 ； 徐松 仁等对人参加工方法进行 比较 ， 发现经加工后 的冻 干参总苷含量比生晒参高 出 1 2 以上 ， 综上 ， 不 同炮制方法得到 的加 工人 参 总苷 含 量 略有 提 高。 本研究选 取植 物乳杆 菌对 人参进 行发 酵 ， 发酵 后 人参总苷含量 明显提高 ， 猜测其机制可 能为 ： 植 物乳杆菌产生 的纤维素酶水解 人参木质部 细胞 的 细胞壁 ， 从而提高人参 皂苷 的提取率 ， 导致 总苷含 量增加 ； 菌株产生的连接酶， 把人参中的苷元和 经口 一 葡萄糖苷酶等酶系水解掉的糖苷重新连接成 新的单体人参皂苷 ， 导致总苷含量增加 ； 酶反应 可能导致人 参 中 的糖 类或其 他成 分发 生变 化 ， 通 过一系列 的复杂反应形成 人参皂苷或拟人参皂苷 组分 ， 从而 导致 皂 苷含量 提高 。但 以上机 制还 有 待进一步深入研究 。 3 2 微生物对人参皂苷 r d的转化作用 人参皂 苷 r d结构复杂， 化学合成至今尚未成功， 其在人参 中含量较低 ， 但具有很好 的药理活性 。通过对 比单 体人参皂苷的化学结构 ， 发现 r b 与 r d结构相似 同 为原人参二醇型人参皂苷 ， 差别在于 c 加 位点处所连 接葡萄糖苷的数 目不 同。因此 ， 可 以利用 一 葡萄糖 苷酶水解掉 r b c 位点外侧 的葡萄糖苷就可 以获 得药理活性更高的人参皂苷 r d ， 其转化途径见图 5 。z h a o x等利用 s y n f u l v i a f u l v a菌株将 r b 转化 成 r d ； y a n g z g等利用 t h e r mu s c a l d o p h i l u s 菌株 产生 的 葡萄糖苷酶 ， 将 r b 转化成 r d _ 3 ； k i m等 利用一种好氧菌将 r b 转化成 r d _ 3 。同时 r d的 结构与稀有人参皂苷 r g 3 ， r h 2 ， f ： ， c k相似 ， 而 r d 作为上述稀有人参皂苷转化过程 中的中间产物， 其 作用极为重要， 具有很高的研究价值； 杨元超等利用 f u s a r i u m m o n i l if o r i n e 将 r d转化成 c k_ 3 ； h o n g s h a n y u等利用 a sp e r g il l u s ， 将 r b 转化成 r d后， 进一步 将 r d转 化 成 r g ， ， 其 转 化 机 制 为 ： r b r d r ； 相应 转 化途 径 见 图 6 。本 文 选 取植 物乳 杆菌对人参进行发 酵 ， 利 用菌株 产胞外 葡萄糖 苷酶水解人参皂苷 葡萄糖 苷 的特性 ， 通过 酶解反 应 ， 得到酶解产物 人参皂 苷 r d ， 使发 酵后 的人参 r d含量 显著 提 高 ； 但 对 于该 菌 产 酶 的酶 催化 活 性、 酶的底物特异性及其转化机制还有待进一步 的研究 。 综上所述 ， 本研究选用产 一 葡萄糖苷酶益生菌一 植物乳杆菌为发酵菌株 ， 此类菌株安全 、 可靠 ， 对人 体健康十分有益 ， 在食 品生产加工 、 临床医 疗 等领域 已经得到广泛关 注。而人参被称 为 “ 百草之王” ， 是 闻名遐迩 的“ 东北三宝” 之一， 更是 驰名海内外的名贵药材 ； 其主要活性成分人参 皂苷更是对抗癌、 抗肿瘤 、 提高机体免疫力、 改善记 忆、 延缓衰老等方面具有很好 的疗效 。微生物 转化法制备人参皂苷 ， 由于其具有反应条件温和 、 副 产物少、 后处理简单等诸多传统化学、 物理制备方法 难以比拟的优势， 已成为人参深加工及单体人参皂 苷制备 的主要手段。选取植物乳杆菌对人参进行发 酵 ， 国内外文献 罕有 报道 ； 植 物乳杆菌为人体 益生 菌 ， 人参又是滋补上 品， 本研究本着 “ 1+12 ” 的 1 43 7 第 3 9卷第 8期 2 0 1 4年 4月 中 圈中药杂畚 v 0l 3 9 issu e 8 a p ri l ，2 0 1 4 gi c f 1 - 2 1 - gi c o 图5 人参皂苷 r b 转化成 r d的途径 f i g 5 the t r a n s f o r ma t i o n pa t h wa y s o f rb1 t o rd 、 一 gi c o gl a s e t t o s e _ c k gi n s e n s i d e - r d 图 6 人参皂苷 r d的转化途径 f i g 6 t h e t r a n s f o rm a t i o n p a t h w a y s o f rd 理念 ， 使发酵后的人参 同时兼具发酵菌株与发酵底 物 的生理 活性 与功效 ， 为人 参产 业 的深加 工奠定 基础。 参考文献 1 张刚乳 酸细菌 ：基础 、 技术 和应用 m 北京 ：化学 工业 出版社 ， 2 0 0 7 ： 2 1 2 2 n j g a r d n e r ， t s a v a r d ，p o b e r me i e r ， e t a 1 s e l e c t i o n a n d c h a r - a c t e r i z a t i o n o f mix e d s t a r t e r c u l t u r e s f o r l a c t i c a c i d f e r me n t a t i o n o f c a r r o t ，c a b b a g e，b e e t a n d mi c r o bio l o g y o n i n o n v e g e t a bl e mi x t u r e s j i n t j f o o d mi e rob i o l ， 2 0 0 1 ， 6 4 ( 3 ) ： 2 6 1 1 43 8 申彤 ， 徐静 植 物原 料乳酸菌 发酵剂 增菌 培养 的研 究 j 食品科技 ， 2 0 0 6 ( 9 ) ： 4 7 吴祖芳 ， 刘璞 ，翁佩芳传统 榨菜腌制加工应用 乳酸菌技术 的研究 j 食 品与发酵工业 ， 2 0 0 5 ， 3 1 ( 8 ) ： 7 3 d e vr e s e m ma r t e a u p r p r e b i o t i c s ： e f f e c t s o il d i a r r h e a j j j n u t r ， 2 0 0 7， 1 3 7 ( 3 ) ： 8 0 3 ki s s l i n g g，s c h n e i d e r j ，j a h r e i s gl o n g t e r r a c o n s u mp t i o n o f f e rm e n t e d d a i r y p r o d u c t s o v e r 6 mo n t h s i n c r e a s e s hdl c h o l e s t e r o l j e u r j c l i n n u t r ， 2 0 0 2 ， 5 6 ( 9 ) ： 8 4 3 万振堂 ， 杨丽杰产胞外 jb 一 葡萄糖苷酶乳酸菌 的筛选及酶学 _ i j 3 4 5 6 7 rl 第 3 9 卷第 8 期 2 0 1 4年 4月 中 圈中药杂志 v o1 3 9 issu e 8 a p ril ， 2 01 4 8 9 1 o 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 o 2 1 2 2 2 3 2 4 2 5 性质 的初步研究 j 食 品与发酵工业 ， 2 0 0 9， 3 5 ( 4 )： 2 8 s e s t e l o a b f，p o z a m，vi l l a t c口- gl u c o s i d a s e a c t i v i t y i n a l a c t o b a c i l l p l a n t a r u m w in e s t r a i n j wo r l d j mi c r o b i o l b i o t e c h n o l ，2 0 0 4，2 0：63 3 gua n y y，zh o u j g，zh a n g z，e t a 1 gi n s e n o s i d e rd f r o m pa m n o t o gi n s e n g b l o c k s c a 2 i n f l u x t h r o u g h r e c e p t o r a n d s t o r e o p c r a t e d c a 2 c h a n n e l s i n v a s c u l a r s mo o t h mu s c l e c e l l s j e u r j p h a r ma c o l ， 2 0 0 6， 5 4 8 ( 1 3 ) ：1 2 9 ca i b x，l i x y，c h e n j h，e t a 1 gi n s e n o s i d e rd，a n e w v o l t a g e i n d e p e n t ca e n t r y b l o c k e r r e v e r s e b a s i l a r h y p e tr o ph i c r e mo d e l i n g i n s t r o k e p r o n e r e n o v a s c u l a r h y p e r t e n s i v e r a t s j e u r j p h a r ma e o l ， 2 0 0 9， 6 0 6 ( 1 3 ) ：1 4 2 l i j ，xi e z z，ta n g y b，e t a1gi n s e n o s i d e rd，a p u ri fie d c o mp o n e n t f r o m pa n a x n o t o g i n s e n g s a p o n i n s ， p r e v e n t s a t h e r o - s c l e r o s i s i n a p o e k n o c k o u t mi c e j e u r j p h a r ma c o l ，2 0 1 1 ， 6 5 2 ( 1 3 )： 1 04 ya n g z g，s u n h x，ye y pgi n s e n o s i d e rd f r o m pa n a x n o t o 一 n s e n g c y t o t o x i c t o wa r d s he l a c an c e r c e l l s an d i n d u c e s a p o p t o s i s j c h e m b i o d i v e r s ， 2 0 0 6， 3 ( 2 ) ：1 8 7 yo k o z a w a t，wa n om ，do h i k，e ta1i n h i b i t o ry e f f e c t s o f g i n s e n g o n p r o l i f e r a t i o n o f c u l t u r e d m o u s e m e s a n g i a l c e l l s j n i p p o n j i n z o g a k k ai s h i ， 1 9 9 4， 3 6 ( 1 )： 1 3 yo k o z a w a t，liu z w ，do n g ea s t u d y o f g i n s e n o s i d e rd i n a r e n a l i s c h e m i a r e p e r f u s i o n mo d e j n e p h r o n，1 9 9 8 ， 7 8 ( 2 ) ： 2 0 1 刘锐 ， 黄玉开 ， 白卫东 ，等蔬菜汁 的乳 酸菌发酵 j 食 品 与发 酵工业 ，2 0 1 3， 3 9( 4 )： 1 1 4 熊涛， 黄锦卿， 宋苏华， 等 植物乳杆菌发酵培养基的优化及 其 高密度 培养技术 j 食 品科学 ， 2 0 1 1 ，3 2 ( 7 ) ： 2 6 2 刘静 ， 秦雪梅 ， 杨丽杰三株植物乳杆菌降胆固醇机理 的研究 j 食品与发酵工业 ， 2 0 1 1 ， 3 7 ( 8 ) ： 3 7 曲正义，赵景辉 ， 刘宏 群 ，等活性 参 中人 参总皂苷 含量 的 测定 c 长春 ： 吉林 省第七届科学技术学术年会 ， 2 0 1 2 陈英 红， 姜瑞芝 ， 罗浩铭 ， 等人参 总皂苷提 取物指纹 图谱研 究 j 中国实验方剂学杂志 ， 2 0 0 9 ， 1 5 ( 1 1 ) ： 1 2 赵 寿经 ，候春喜 ， 粱 彦龙 ，等人 参皂苷 合成相关 s基 因 的克隆及其 反义植 物表达载体 的建立 j 中 国生物 工程杂 志 ， 2 0 0 8， 2 8 ( 4 )： 7 4 杨金玲 ，高丽丽 ， 朱平人参皂苷生物合成研究进展 j 药 学学 报 ， 2 0 1 3， 4 8 ( 2) ： 1 7 0 罗红梅 ，宋经元 ， 李 雪莹 ，等人参 皂苷合 成生物学 关键元 件 h mg r基 因 克隆 与 表达 分析 j 药 学 学 报 ，2 0 1 3 ，4 8 ( 2 ) ： 2 1 9 q i l w，wa n g c z，y u a n c s i s o l a t i o n and ana l y s i s o f g i n s e n g ：a d v a n c e s a n d c h al l e n g e s j n a t p r o d r e p ， 2 0 1 1 ，2 8 ： 4 6 7 中国药典 一部 s 2 0 1 0 j o s e p h ho n， c h i u l u i ，e j o h n s t a b a 各种人参植株及 其选择 制品中的人参皂甙含量 j 王大川译特产研究，1 9 8 1 ( 4) ： 4 5 2 6 2 7 2 8 2 9 3 o 3 1 3 2 3 3 3 4 3 5 3 6 3 7 3 8 3 9 4 0 4 1 4 2 4 3 4 4 4 5 李 向高人参 加工原 理研究 新进展 j 中药材 ，1 9 9 0 ，1 3 ( 4 ) ： 2 2 李 向高 ， 郑友兰 ，贾继红 ，等吉 林红参 与高丽红参 的 比较 研 究 j 吉林农业大学学报 ，1 9 8 5， 7 ( 4 ) ： 5 4 翟宁 ， 贺燕 ，李玉春 ， 等红参 的炮制工 艺与高效液 相色谱 法对比红参与生晒参的研究 j 吉林 医学 ， 2 0 0 7， 2 8 ( 1 7 ) ： 1 8 5 2 李 新民 ， 贾志发 活性 人参加 工新工艺 及质量评 价 j 特 产研究 ， 1 9 9 4 ( 3 ) ： 2 7 徐 松仁浅析人参加工方法及其特点 j 中药 通报 ，1 9 8 6 ， l 1 ( 1 0 ) ： 2 6 zh a o x，wang j，u j，e t a 1 hi g h l y s e l e c t i v e b i o t r a n s f o r ma t i o n o f g i n s e n o s i d e rb 1 t o rd b y t h e p h y t o p a t h o g e n i c f u n g u s c l a d o s p o - r i u m f u l v u m ( s y n f u l v i a f u l v a ) j j i n d ian m i c r o b i o l b i o t e c h n o l ，2 0 0 9， 3 6： 72 1 ya n g z g，s u n h x，ye y pgi n s e n o s i d e r d fr o m p a n a x mo t o g i n s e n g i s c y t o t o x i c t o wa r d s he l a c a n c e r c e l l s a n d i n d u c e s a p o p - t o s i s j c h e m b i o d i v e m， 2 0 0 6， 3： 1 8 7 ki m d h ，mo o n y s，l e e t h ，e t a1 t h e i n h i b i o t o r y e f f e c t o f g i n s e n g s a p o n i n s o n t h e s t r e s s - i n d u c e d p l a s ma i n t e r l e uk i n- 6 l e v e l i n m i c e j n e u r o s c i l e t t ， 2 0 0 3 ， 3 5 3 ： 1 3 杨元 超 ， 王英平 ，闫梅霞 ， 等人参皂苷 c o mp o u n d k转化菌 株的筛选 j 中国 中药杂志 ， 2 0 1 1 ， 3 6 ( 1 2 )： 1 5 9 6 y u ho n g s h a n ，l i u q i n g me i ， z h ang c h u n z h i ， e t a 1 a n e w g i n - s e n o s i d a s e f r o m a s p e r gi l h ts s t r ain h y d r o l y z i n g 2 0 - 0 mu l t i -g l y c o - s i d e o f p p d g i n s e n o s i d e j _p r o c e s s b i och e m， 2 0 0 9 ( 4 4) ： 7 7 2 袁晶 植物乳杆菌作用及其应用初探 d 杭州： 浙江工商 大学 ， 2 0 1 1 钮晓燕 ，陈卫 ，田丰伟 ， 等 植物乳杆菌 z s 2 0 5 8在磷酸盐缓 冲液体系中生 物转化 共轭 亚油 酸 j 微 生 物学报 ，2 0 0 7 ， 4 7 ( 2 ) ： 2 4 4 魏春 ， 刘茂峰 ，宣磊 ，等固态发 酵豆粞 的不 同生产 工艺及 其营养品质比较 j 食品与发酵工业 ， 2 0 1 3， 3 9 ( 5 )： 8 9 汪立平 ， 汪欣 ，艾连中 ， 等 纯种 植物乳杆 菌发酵低 盐萝 泡菜的研究 j 食品科学 ， 2 0 1 3 ， 6 ( 9 ) ： l 4 赵建新 ， 王淼 ，毛丙永 ， 等 接种 乳酸菌 与酵母菌改 善豆酱 品质 j 食品与发酵工业 ， 2 0 1 1 ， 3 7 ( 1 1 ) ： 3 9 潘 海朋 ， 吴慧玲 ，魏鲁宁 ，等共 固定甘 氨酸甜菜碱 与植物 乳杆菌在高盐稀 态酱 油酿 造 中 的应用 j 食 品 与发 酵工 业 ， 2 0 1 3 ， 3 9 ( 6 ) ： 7 郭荣荣 ，鹿茸 ， 李 少英新 分离 的植物乳杆菌应用于发酵香 肠 中的生 物 学特 性 研究 j 食 品 与发 酵工 业 ，2 0 1 0，3 6 ( 6 ) ： 2 0 1 周婉君 ，吴燕燕 ，李来好利用 复合乳酸菌发酵腊罗非鱼 的 工艺研究 j 食品科学 ， 2 0 0 9， 3 0 ( 2 3 )： 2 4 2 刘 西韶 ，宁花兰 ，王佩琼 ， 等 乳酸 菌合 生元 a肠 内营养治 疗重型颅脑外伤患者的疗效观察 j 现代 i临床 护理 ， 2 0 1 0， 9 ( 5 ) ： 4 8 叶胜青 ， 赵志鸿 ，夏阳 ， 等 植物 乳杆菌对 2 ， 4， 6 - 三 硝基苯 磺酸诱导小鼠结肠炎的治疗作用 j 世界华人消化杂志， l 4 39 第 3 9卷第 8期 2 0 1 4年 4月 中 圈中药杂志 c h i n a d o u r n a i o f c h i s e m a t e r l a me d i c a vo l 3 9 i s s u e 8 ap ril ，2 01 4 2 0 1 1 ，1 9 ( 8 ) ： 7 9 4 4 6 王慧晶对酒精性肝损伤具有保护作用的乳酸菌的筛选 d 扬州 ： 扬州大学 ， 2 0 0 8 4 7 石楸 鸣人 参 皂苷 的药 理 作用 研 究 进展 j 中 国药 房 ， 2 0 1 0 ， 3 1 ( 8 ) ： 1 4 4 8 唐斌 ， 程绪菊 ， 刘 江，等人参皂苷药理作 用研究进展 j 4 9 5 o 西南军医 ， 2 0 0 5， 3 ( 7 ) ： 3 3 王海 南人参皂苷药理研 究进展 j 中国临床药 理学 与治 疗学 ， 2 0 0 6，l 1 ( 8 ) ： 1 1 0 何 道同 ， 王兵 ， 陈瑁 明人参皂苷药理作用研究进展 j 辽 宁中医药 大学学报 ， 2 0 1 2 ， 7 ( 1 2 ) ： 1 5 fe r me n t a t i o n t r a n s f o r me d g i n s e n o s i d e b y l a c t o b a c i l ! u s p l a n t a r u m che n ya n g，wang yi ，s un l i a n g，wan g k a n g y u，j i an g s h i c u i ， s un ch u n y u，z han g me i p i n g ( c o l l e