热应激对猪肠道结构及功能的影响.pdf

失代偿，从而引起心脏的实质性病变，如心肌炎，心肌肥大等。注意使用抗生素和抗病毒药 物的治疗，减少继发感染的机会，增强机体免疫能力，大剂量使用犬瘟热单克隆抗体、犬瘟 热免疫血清、c 一球蛋白、犬干扰素、胸腺肽等。但是，当疾病发展到后期，出现神经症状时 应用高免血清其效果往往不理想n 引。这样只能从另外的方向更好的治疗犬瘟热，降低犬死亡 率。犬瘟热是一种烈性传染病，我们不仅要关注疾病的治疗，更重要的是要严防此种疾病的 发生，以预防为主，加强免疫注射，目前，国外有7 种疫苗可用于预防本病。其制品有：福尔 马林灭活疫苗、通过雪貂减弱的活毒疫苗、通过鸡胚减弱的活毒疫苗、犬瘟热与犬传染性肝 炎联合疫苗、通过组织培养减弱的活毒疫苗，犬瘟热免疫血清和强毒联合应用、麻疹疫苗。 临床常用的是六联疫苗，能预防犬瘟热、犬细小病毒、副流感、传染性肝炎、腺病毒i 工型和 犬钩端螺旋体病。免疫程序为：5 0 日龄至3 月龄的幼犬，需连续注射3 次，每次间隔3 - - - , 4 周。3 月龄以上的犬，连续注射2 次，每次间隔3 - - - 4 周。以后每年1 次。 参考文献 【l 】卢建远，黄志宏犬温热的病理观察叽西南民族大学学报，2 0 0 5 ，3 ( 2 ) ：2 6 1 2 6 3 【2 】何洪彬，夏成柱犬瘟热的诊断及其预防免疫的研究进展【刀动物医学进展，2 0 0 1 ，( 2 2 ) ：1 2 1 5 3 r o e l k e - p a r k e r , m e l o d ye ；m u n s o n , l i n d a ；p a c k e r , c r a i g ；e ta la c a n i n ed i s t e m p e rv i r u se p i d e m i ci ns c r 矗n g c t i l i o n s j 】( p a n t h e r al e o ) n a t u r e ；f e b1 ，1 9 9 6 ；3 7 9 ，6 5 6 4 【4 】倪耀娣，鲁改儒，弓素梅等犬瘟热的临床调查明。中国兽医杂志，2 0 0 5 ，4 1 ( 1 0 ) ；4 6 【5 】王旭华犬瘟热的防治【j 】云南农业，2 0 0 5 ，2 ：i i 【6 】赵德明兽医病理学【m 1 中国农业大学出版社，北京2 0 0 1 ：1 7 6 阴周庆国，张更利犬瘟热与常见相似疾病临诊特征的比较田畜牧与兽医，2 0 0 0 ，3 2 ( 3 ) ：3 2 3 3 【8 】h i g g i n sr j ，k r a k o w k asqm e t z l c rae ，e ta 1 e x p e r i m e n t a lc a n i n ed i s t e m p e re n c e p h a l o m y e l i t i si n n e o n a t a l g n o t o b i o t i cd o g s ：as e q u e n t i a lu l t r a s t r u c t u r a ls t i l d y 【j 】a c t an e u r o p a t h o l ( b e r l i n ) ，1 9 8 2 a ，( 5 7 ) ：2 8 7 - 2 9 5 【9 】z u r b r i g g e na ，s c h m i di ，g r a b c rhu ，o ta 1 o l i g o d c n d r o g l i a lp a t h o l o g yi nc a n i n ed i s t e m p e r 【j 】a c t a n e u 2 r o p a t h o l ，1 9 9 8 ，( 9 5 ) ：7 1 - 7 7 1 0 1 林金项犬瘟热的诊疗体会 刀福建畜牧兽医2 0 0 5 ，2 7 ( 4 ) ：3 8 - 3 9 【l l 】张兆霞，姜术霞，许剑琴犬温热流行特点和诊疗【j 】中国兽医杂志2 0 0 4 ，4 0 ( 6 ) ：“4 5 1 2 】杨浩冲西医结合治疗犬瘟热叨中兽医医药杂志2 0 0 5 ，6 ：5 6 - 5 7 【1 3 】郑家三，刘云犬瘟热帕临床诊断及防治田瘦病防治2 0 0 5 ，4 ：3 1 - 3 3 【1 4 】t h o m a s c a r l y l ej o n e s , r o n a l d d u c a n h u n t v e t c r i n a r y p a t h o l o g y m 5 t h e d p h i l a d e l p h i a ：l e a & f e b i g c r ，1 9 8 3 4 3 5 4 4 1 热应激对猪肠道结构及功能的影响5 胡艳欣1 余锐萍虬张发明1 肖冲1 郭延军1 刘风华2 ( 1 中国农业大学动物医学院北京海淀，i 0 0 0 9 4 ；2 北京农学院北京，1 0 2 2 0 6 ) 摘要：目的：观察热应激对猪肠道黏膜结构的损伤作用，以揭示热应激降低猪增重率的 机理。方法：1 2 头小型猪随机分成热应激组和常温对照组两组。人工气候室内，热应激组 模拟夏季炎热气候，气温从2 6 - 3 9 2 4 h 循环交温，在3 9 时维持4 h ；常温对照组在2 2 下饲养。试验持续l o d ，分别于热应激前、热应激第5 d 和热应激结束时称重，计算各组的 体重增长率。热应激1 0 d 后3 9 。c 高温持续期结束时剖杀试验猪，取其十二指肠、空肠及回 肠进行固定、石蜡切片、染色，染色和扫描电镜h e 染色切片观察肠黏膜形态变化，并检 测肠绒毛长度、宽度、隐窝深度，绒毛长度隐窝深度：p a s 染色切片检测肠黏膜上皮内杯 状细胞数量的变化；用g o m o r i 氏改良法染色切片观测肠黏膜碱性磷酸酶活性的变化。结果： 与对照组相比较，热应激组猪的体重增长率显著下降( p o 0 5 ) ：热应激后猪肠黏膜结构严 重损伤：各段肠的绒毛长度、宽度、隐窝深度，绒毛长度隐窝深度均出现不同程度的降低， 其中回肠绒毛长度减少较为显著( p o 0 5 ) ，各肠段绒毛宽度的减少均差异显著( p 0 0 5 ) ； 肠黏膜上皮内杯状细胞数量增多，其中回肠差异显著( p o 0 5 ) ；热应激组猪的肠黏膜上皮 细胞表面的碱性磷酸酶活性明显降低。结论：热应激可引起猪肠道黏膜结构严重损伤，以致 小肠的消化吸收功能严重受阻，这是造成猪热应激掉膘减重的主要机制之一。 关键词：猪热应激小肠结构杯状细胞a k p 热应激是影响畜禽夏季生产性能的主要因素，同时也是爆发畜禽各种传染病的诱因。在 5 国家自然科学基金资助项目( 3 0 2 7 0 9 9 5 ，3 0 4 7 1 3 0 1 ) ，北京市自然科学基金( k z 2 0 0 3 1 0 0 2 0 0 0 7 ) 作者简介：胡艳欣( 1 9 8 0 一) ，女，山西太谷人，中国农业大学动物医学院在读博士，主要从事粘膜免疫与 分子病理学研究，e - m a i l ：h u y a n x i n l 9 8 0 s o h u c 0 1 通讯作者：余锐萍，0 1 0 - - 6 2 7 3 3 0 6 0 ，e m a i l ：s h e l 2 s o h u c o m 2 1 3 集约化养殖的今天，随着饲养密度的增大和全球气候变暖的趋势，热应激已成为影响养殖业 发展的重要因素之一。养猪生产中由高温引起的损失更显突出，。产力下降、疾病增多、淘 汰率与死亡率上升，生产成本提高，已成为养猪业，尤其是规模化猪场在夏季面临的巨大难 题。对于商品猪来说，热应激不仅可诱发猪应激综合征( p s s ) 而引起猪只死亡，或产生p s e 肉，更多地是由于热季运输造成的掉膘减重。为进一步探明热应激对猪的影响机制，本研究 从形态观察入手，采用人工气候室模拟夏季炎热气候，观察研究了热应激猪肠道形态结构的 变化，并采用病理图象分析技术，对猪肠绒毛长度与宽度、上皮内杯状细胞的数量以及和消 化吸收密切相关的结构一碱性磷酸酶的含量进行了定量测定。 1 材料与方法 1 1 试验材料 1 1 1 试验动物： 1 2 头3 月龄中国试验用小型猪，购自中国农业大学昌平实验站。单笼常规饲养管理， 每日清扫后用2 5 0 m g l 的次氯酸钠喷洒消毒。 1 1 2主要设备和仪器： 本实验在中国农业科学院畜牧研究所国家重点开放实验室人工气候室进行。人工气 候仓内温度、湿度、光照均通过电脑编程控制。a 0 8 2 0 型切片机( a m e r s h a mo p t i c a l ) ；b h 2 o l y m p u s 生物显微镜：m o t i c3 1 0 病理图像分析系统。 1 2 试验方法 1 2 1 热应激实验1 2 头猪随机分成两组，热应激组和常温对照组。人工气候仓内，热应激 组模拟夏季炎热气候，气温从2 6 - - 3 9 2 4 h 循环变温，3 9 时维持4 h 。常温对照组在2 2 下饲养。自由饮水、采食。试验共进行1 0 d ，在热应激前、热应激的第5 d 和热应激结束的 时候( 第1 0d ) 称重，计算各组的体重增重率。体重增重率= ( 终体重一初体重) 初体重 x 1 0 0 。 1 2 2 切片制作和肠绒毛长度的测定 在熟应激的第1 0 d ，3 9 高温持续期结束的时刻剖 杀，分别采取十二指肠中段、空肠及回肠中段，用生理盐水冲洗干净，分别置于4 甲醛溶液 和2 5 戊二醛多聚甲醛混合固定液中固定，常规石蜡包埋、切片、腿染色、光镜下详细观 察和比较各试验组猪肠黏膜形态结构的变化情况，并应用m o t i c 照相处理软件和病理图像 分析系统，测量每头猪的十二指肠、空肠和回肠的绒毛长度、宽度、隐窝深度，并计算绒毛 长度隐窝深度，每个肠道组织切片选取5 个最长的肠绒毛长度，进行统计，取其平均值。 1 2 3 扫描电镜样品制作参照余锐萍等( 2 0 0 2 ) 的方法进行扫描电镜样品的制作。取经 2 。5 戊二醛多聚甲醛混合固定液固定的样品，梯度酒精脱水，经醋酸异戊酯处理后，将样 品按正面及侧面定位黏附于样品台架上，经c 0 2 临界点干燥，喷镀，日立$ 5 7 0 扫描电镜观 察，拍照。 1 2 4p a s 染色和上皮内杯状细胞计数采用s c h i f f 氏剂显示法显示肠黏膜上皮内杯状细 胞。染色结果：杯状细胞里粉红色。光镜下详细观察和检测各组的十二指肠中段上皮内杯状 细胞的数量。取每根肠管横切面，计数每1 0 0 个肠黏膜上皮细胞间杯状细胞的数量，每个肠管 统计观察5 根最长且排列整齐的绒毛辣其平均值。 1 2 5 碱性磷酸酶显示方法采用g o m o r i 氏改良法染色，显示肠黏膜上皮中碱性磷酸酶( a k p ) 的活性。染色结果：碱性磷酸酶阳性信号呈黑色沉淀。在显微镜下，观察肠粘膜上皮中a k p 阳性反应物的分布和表达情况。 1 3 试验数据处理方法 应用s p 墨塑2 0 软件对测定的数据进行组间方差分析和差异显著性检验。实验结果用 均数士标准差( x 士s ) 表示。 2 结果 2 1 热应激对猪增重率的影响 各组猪平均体重增重率见表l 。 一 裹1 各组猪平均体重增重率( 1 0 0 ) ( x 士s ，n = 6 ) 一 一一一，! ；掣! 三墅宝翌罂= ：i 业! g 苎i 2 璺垒2 2 12 i g ：i 21 堡! ! ! 坐墨：2 兰2 111 螋堑2f 墨圭墨巴：! ( 表示与对照组比较差异显著( p 0 0 5 ) 。下同) 2 1 4 从表l 可以看出，热应激5 d 后，试验组猪增重率与对照组相比较，稍低于对照组，但 差异不显著；随着试验时间的延长，热应激1 0 d 后，热应激试验组猪体重增长率显著下降， 与对照组相比较，差异显著( p 0 0 5 ) 。 2 2 小肠黏膜上皮的形态学变化 光镜下，对照组肠黏膜结构完整，层次分明，肠黏膜上皮细胞的轮廓清晰，染色鲜明， 排列规则( 图1 a ) 。柱状上皮细胞，呈高柱状单层排列，胞浆丰富，胞核椭圆形，位于细胞 基部。杯状细胞散在于柱状上皮细胞之间，呈高脚杯状( 图l c ) 。热应激后，猪十二指肠肠 黏膜上皮脱落固有层裸露( 图1 b ) ，黏膜下水肿，肠腺萎缩，且极度水肿( 图1 d ) 。 扫描电镜下，对照组猪的十二指肠在低倍镜下可见粘膜表面指状或舌片状的绒毛突起呈 丛状或粗状聚集，绒毛排列整齐有序( 图t e ) 。高倍镜下，黏膜表面细胞排列整齐规则，细 胞界限清楚，微绒毛排列致密整齐( 图1 0 ) 。热应激组，十二指肠在低倍镜下可见肠粘膜脱 落，固有层裸露( 图1 f 、图l h ) 。 2 3 热应激对猪各肠段绒毛长度、隐窝深度、绒毛长度隐窝深度比值( v c 值) 及绒毛宽 度的影响 各组猪十二指肠、空肠、回肠的绒毛长度、隐窝深度、v c 值及绒毛宽度定量检测结 果见表2 。 一 衰2 热应激对猪小肠肠绒毛长度、隐窝深度、v c 值及绒毛宽度的影响( x 士s ，n - 3 0 ) d u o d e n u m c o n t r o lg r o u p 试验组3 9 8 6 3 1 5 3 61 0 6 3 2 士2 1 2 23 7 5 4 - _ 0 2 99 9 。7 8 5 6 3 * e x p e r i m e n l c a lg r o u p 空肠 对照组4 6 3 7 4 土3 4 1 2 1 3 4 5 6 士1 4 1 23 4 5 士0 3 51 8 3 8 0 9 7 4 j e j u n u m c o n t r o lg r o u p 7 试验组4 0 4 0 0 士3 1 2 9 1 2 7 0 5 士9 9 8 3 1 8 土0 2 11 3 6 8 7 e x p e r i m e n t a lg r o u p 15 9 8 * 回肠对照组6 3 8 9 9 4 - 3 1 3 21 4 1 5 7 1 6 2 24 5 1 土0 5 32 3 3 7 3 5 9 5 i l e u mc o n t r o lg r o u p 试验组4 6 1 9 9 3 2 o 脾1 3 6 7 3 士2 0 7 73 3 8 士0 3 91 4 0 6 5 4 5 1 量蚤p 鲤巴! ：生型g 翌坚p 由表2 可以看出，热应激1 0 d 后，与其形态学变化相呼应，试验组十二指肠、空肠和回 肠的绒毛长度、宽度、隐窝深度及v c 均发生了变化。与对照组相比较，热应激组猪各肠 段的绒毛长度均明显下降，其中回肠绒毛长度减少最为显著( p 0 0 5 ) ；各肠段隐窝深度及 v c 均出现下降，但差异不显著：热应激组各肠段绒毛宽度均显著比对照组的低( p o 0 5 ) 。 2 3 热应激对猪肠黏膜上皮内杯状细胞数量的影响 热应激对猪十二指肠、空肠、回肠的杯状细胞数量( + t o o 个上皮细胞) 的影响结果 见表3 。 一 表3 各组猪十二指肠、空肠、回肠的杯状细胞数量统计结果( x 土s ，n = 3 0 ) table3q u a n t i t yo fg o b l e te e l ! i np i g sd i f f e r e n ti n t e s t i n e ( x 士s ，n = 3 0 ) 组别十二指肠空肠回肠 壅q 坠p幽垡娶坠强2 i 坚翌坚翌i ! 宝￥坚 对照组 2 0 5 3 02 8 0 4 03 5 5 3 6 c o n t r o lg r o u p 试验组3 2 2 4 - 2 0 3 9 5 士2 5 _ 由表3 可以看出，对照组猪十二指肠( 图2 a ) 、空肠( 图2 c ) 、回肠( 图2 e ) 黏膜上皮内 t 杯状细胞数量呈逐渐增多趋势，热应激1 0 d 后，空肠( 图2 d ) 和回肠( 图2 f ) 内杯状细胞 的数量明显增多，其中回肠显著增多，与正常对照组相比较差异显著( p o 0 5 ) ；由于十二 指肠绒毛脱落较严重，且伴有上皮细胞坏死，所以无法统计杯状细胞的数量( 图2 b ) 。 2 4 热应激对猪肠黏膜上皮中碱性磷酸酶( a l ( p ) 活性的影响 g o m o r i 氏改良法染色结果显示，在对照组猪十二指肠、空肠及回肠黏膜上皮细胞游离缘 ( 纹状缘) 有大量碱性磷酸酶阳性信号分布，( 图3 a 、图3 b 和图3 c ) 。热应激1 0 d 后，试验组猪 肠黏膜上皮的a k p 阳性反应物显著减少，几乎消失己尽。如图3 d 所示，热应激后猪十二指肠 黏膜上皮内几乎看不到a k p 阳性反应物；空肠和回肠内仅可见少量a k p 阳性反应物( 图3 e 、图 3 f ) 。 2 1 5 3 讨论与小结 据报道，热应激抑制猪的生产性能。 s l j u l i el 等人研究发现，3 3 u 条件下，猪的体重从 热应激的第7 d 开始有所下降，到2 8 天与对照组相比极显著下降( p o 0 1 ) 。【6 j 本研究发现 3 9 c 条件下，猪的体重增重率在热应激的第f o d 与对照组相比较，显著下下降( p 0 0 5 ) ， 这一结果也验证了前人的结论。有关热应激造成猪体重下降的原因，家畜的主动采食量( v t i ， v o l u n t a r yf o o di n t a k e ) 下降被认为是最直接最主要的原因。踊。本研究从热应激对机体肠 道结构及功能影响的角度揭示热应激造成猪生产性能下降的另一原因。 图版及说明 瞽版1 a 、b 分别示对照组、热应激组猪十= 指肠( h e ，f o x ) ；c 示对照组猪十二指肠上皮杯状细胞( p a s - 4 3 x ) r 箭头 所指示杯状细胞；d 示热应激组十= 指肠肠腺水肿( i - e ，4 0 x ) 圈版l e 对照组十二指肠黏膜绒毛结构整齐排列紧密s e m ，b a r = 3 0 0 岬；1 f 热应撤组猪十二指肠黏膜上皮脱落固有层棵露 s 蹦b a r ：2 0 0 _ l m ii g 对照组十二指肠黏膜高倍观示上皮细胞排列紧密，徽绒毛密集( f ) s 醐m r = 1 0 0 l t m ；1 1 1 热应激组 猪十： 指肠黏膜商倍观示黏膜上皮脱落后残存有缺损的基底膜结构s e i f ，b a r = 1 0 0 1 s m 图版2 示不同肠段杯状细胞( p a s 染色，1 0 x )a 、c 、e 分别示对照组猪十二指肠、空肠、圆肠枯腰 上皮内杯状细胞；b 、d 、f 分别示热应激组猪十= 指肠、空肠、回肠粘膜上皮内杯状细胞( f ) 小肠是消化道内营养物质吸收和转运的主要部位，肠腺具有分泌能力，所以小肠粘膜结 构的良好状态是营养物质消化吸收和动物正常生长的结构基础。因此，小肠结构与功能的正 常是营养物质被充分消化与吸收的基本保证，特别是小肠的绒毛长度、隐窝深度及绒毛表面 积是衡量小肠消化吸收功能的重要指标。其中，肠绒毛长度、宽度与黏膜上皮细胞的数量 2 1 6 圈版3 示不同肠段a k p 阳性物质( g o m o r i 盱染色，圈a2 0 x ，其余i o x ) a 、b 、c 分别显示对照组十二指肠、空肠、回肠黏膜上皮衰面有丰富的越口阳性信号分布 d 、e 、f 分别示热应激组十二指肠、空肠、回肠黏膜上皮表面a k p 阳性信号残存无几 和吸收面积有直接关系。绒毛越长越宽，吸收面积越大：绒毛短、窄吸收面积则小，对养分 的吸收能力降低“1 。绒毛高度隐窝深度( v c ) 的比值综合反映小肠的功能状态，比值下 降，表明黏膜上皮发育不良或受到损伤，消化吸收功能下降，生长受阻。本研究中试验猪热 应激后，肠黏膜结构受到损伤严重，尤其是十二指肠受损最为显著，表现为黏膜上皮变性、 大面积脱落，固有层裸露( 图版1 b 、i f ) ，肠腺萎缩，显著水肿。各段肠道绒毛长度、隐窝 深度、v c 值及绒毛宽度定量检测结果表明，热应激猪十二指肠、空肠、回肠的绒毛长度、 宽度，隐窝深度及v c 均呈下降趋势，其中绒毛宽度均显著变窄( p o 0 5 ) 。上述诸多情况， 都必然导致试验猪肠道消化吸收面积减少、功能下降，以致猪增重率显著下降。 杯状细胞是一种单细胞腺，其分泌的粘蛋白与水结合成一种润滑液，即粘液，有具有有 。润滑和保护肠粘膜的作用。但如果杯状细胞数量显著增多，粘液分泌过多则会引起腹泻的发“ 生。本研究结果显示，热应激后，猪肠黏膜上皮内杯状细胞数量显著增加，这可能正是本试 验中临床出现腹泻的原因所在。 碱性磷酸酶广泛存在于动物体内，在机体代谢中起着非常重要的作用，血清中的碱性磷 酸酶与脂肪、糖类和蛋白质的吸收与运输密切相关u 。，碱性磷酸酶可促进ca 、p 吸收 3 3 。 在具有明显吸收功能的上皮细胞的微绒毛中，均富含a k p 。正常情况下，在肠道绒毛上皮 细胞表面的纹状缘富含碱性磷酸酶h 1 ，碱性磷酸酶活性的高低在一定程度上可以反映动物 小肠吸收功能的强弱。本研究结果显示，热应激后猪肠黏膜上皮细胞中碱性磷酸酶活性显著 减少甚至消失，这必然导致实验猪小肠消化吸收功能障碍。 结论：热应激造成了实验猪肠黏膜结构的严重损伤，黏膜上皮的碱性磷酸酶急剧减少， 这是引起实验猪消化吸收功能障碍以致增重率降低的形态学基础：而上皮内杯状细胞数量的 增多是引起实验猪腹泻的原因所在。 参考文献： 【1 】李可洲，李宁，黎介寿，等短链脂肪酸对大鼠移植小肠形态及功能的作用研究世界华人杂志，2 0 0 2 ， l o ( 6 ) ：7 2 0 7 2 2 【2 】t o o f a n i a nf ，t a r g o w s k isp f e t a ld e v e l o p m e n ta n dd i s t r i b u t i o no fi n t e s t i n a la l k a l i n ep h o s p h a i a s ci nr a b b i t r e s e a r c hi nv e t e r i n a r ys c i e n c e ，1 9 8 2 ；3 2 ：3 0 3 3 0 5 3 】罗立，李英文，林仕橇等半胱胺对草鱼酮体代谢、转氨酶和碱性磷酸酶活性的影响饲料广氟2 0 0 3 ；1 6 ： 3 3 3 5 4 】余成瑶，何明清，郑德成肉用仔鸡饲喂鸡微生物饲料添加剂8 9 0 1 细胞碱性磷酸酶a k p 定性、定位研究 四川农业大学学报，1 9 9 4 ；1 2 ( 增干幻：5 9 6 6 0 1 【5 l l cb e l l e g o j v a nm i l g e na n dj n o b l e r e f f e c to f h i g ht e m p e r a t u r eo np r o t e i na n dl i p i dd e p o s i t i o na n de n e r g y u t i l i z a t i o ni ng r o w i n gp i g s a n i m a ls c i e n c e 。2 0 0 2 , 7 5 ：8 5 9 6 【6 j u l i el ，m o r r o w - t e s c h , j o h nj m c o l o n e ta lh e a ta n ds o c i a ls t r e s se 债c t so np i gi m m u n em e a s u r e j a n i 】吐s e i 1 9 9 4 ；7 2 ：2 5 9 9 2 6 0 9 e f f e c to fh e a ts t r e s so ns t r u c t u r ea n df u n c t i o no fp i g si n t e s t i n e s h uy a n - x i n ，s h er u i p i n g 。，z h a n gf a - m i n g1 , x i a nc h o n 9 1 ，g u oy a n - j u n i , l i uf e n g - h u a ( 1c o l l e g eo f v e t e r i n a r ym e d i c i n e ，c h i n aa g r i c u l t u r a lu n i v e r s i t y ，b e i j i n g1 0 0 0 9 4 ；2b e i n g a g r i c u l t u r a lc o l l e g e ，b e i j i n g1 0 2 2 0 6 4 ；) l 9 a b s t r a e t ：t w e l v eh e a l e yt h r e e m o n t h - o l dp i g sw e r ed i v i d e di n t ot w og r o u p sa tr a n d o m ，h e a t s t r e s sg r o u pa n dc o n t r o lg r o u p t h et w og r o u p sw e r ep u ti n t od i f f e r e n ta g c s ，o n eo f w h i c h s i m u l a t e dh i g ht e m p e r a t u r ei ns u m m e r ( t h et e m p e r a t u r ec h a n g e df r o m2 6 t o3 9 a n dl a s t e d f o u rh o u r sw h e n3 9 ) ，廿l eo t h e ra l w a y sk e e p2 2 t h ee x p e r i m e n tl a s t e dt e nd a y sa n di n 吐1 e5 。 a n di 0 。d a y , a l lp i g sb o d yw e i g h t sw e r eo b t a i n e da n da v e r a g ew e i g h tg a i nr a t i o sw e r ec a l c u l a t e d i n t h e1 0 t h d a y ，a l l p i g so f e a c h g r o u p w e r es a c r i f i c e ds o o na f t e r3 9 。ch e a ts t r e s s a n d t h e i r d u o d e n u m ，i c j u n u ma n di l e u m w e r ef i x e db yas o l u t i o nc o n t a i n i n g4 p a r a f o r m a l d e h y d e ，0 1 g l u t a r a l d e h - 。y d e a n do 2 p i c f i ca c i di n0 1mp h o s p h a t eb u f f e r t oo b s e r v et h ec h a n g e so f s t r u c a l r eo fd u o d e n u mt h r o u g hm i c r o - t e l e s c o p ee x a m i n a t i o nb yt h ew a yo fh e s t a i n m ga n d s c a n n i n ge l e c t r o nm i c r o g r a p h t oo b s e r v ev i l l u sl e n g t h 、c r y p td e p t h , v ca n dv i l l u sw