胸腹水脱落细胞学PPT课件.ppt

胸腹水脱落细胞学,浙江大学医学院附属第一医院,1,一、制片,1、取液：轻轻的把送检液体上部倒掉，取下层液体，放入离心管。2、转速3000/分，2分钟。3、看沉淀物的量的多少区别对待：（1）量少：快速倒去液体，将试管竖直倒立于卫生纸上，吸干管口的水分，用吸管吸出沉淀物。如果沉淀物太少，可将液体倒去后再加入送检标本，重复离心，反复多次。,2,（2）量多：用吸管吸掉上清液，然后，用吸管吸取沉淀物上层细胞。（3）血多的标本处理：吸取上层沉淀物，放入25%酒精内，打匀，再离心沉淀。然后，吸取沉淀物。4、涂片：吸取沉淀物后，滴在玻片上，可采用二张玻片对拉法，也可用吸管涂拉，最好是采用玻片推拉法(玻片与玻片之间角度为5度左右。吸取沉淀物涂片的关键：吸取沉淀物内不能带有水分。,3,5、固定：也是制片的关键。当细胞涂片完成后，应立即放入95%酒精液体内固定，至于固定液：如甲醇、酒精乙醚液等效果无明显差异。细胞的褪变主要原因不是固定液的种类，而是在制片过程中空气的氧化过程-干燥。固定时间：5分钟即可。剩下的送检液体不要立即倒去，等阅片完成后，看看需不需要再制片做免疫组化或制成组织块。（可放在冰箱内，也可放在室温状态下24小时以上）,4,干固定,湿固定,5,5X未经处理的胸水,6,5X处理后的胸水,7,细胞团块切片外貌,8,细胞团块切片,9,二、良性的细胞,1、红细胞、白细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性粒细胞、组织细胞等。2、间皮细胞：多角形的扁平细胞，核居中，圆形或椭圆形，核染色质细颗粒状，分布均匀；大小10-15微米左右；细胞散在或成片，成堆。,10,肿胀变性:间皮细胞脱落后，由于细胞膜渗透压的改变，细胞质开始发生液化变性，体积增大，细胞内出现液化空泡，细胞核偏位,这时与组织细胞很难鉴别。一般说来，间皮细胞的核较圆，胞浆较厚实，核仁小而染色质均匀，而组织细胞的核椭圆形或肾形。有人根据电镜下的结构认为间皮细胞来源于组织细胞，我认为可能是把组织细胞误认为间皮细胞。,11,?,干固定的间皮细胞,12,湿固定的间皮细胞,13,14,40XCKpan,15,40XCK18,16,40XCK19,17,40XCalretinin,18,40XCD68,19,EMA阴性CEA阴性CK14阴性AB阴性PAS阴性,20,固缩变性在浆膜腔积液中间皮细胞很少发生固缩变性。间皮细胞在退变时所发生的细胞体积缩小、细胞核变小的现象称“固缩变性”。固缩变性一般表现为梭形的间皮细胞，其核固缩是固缩变性的最重要的表现：核形不规则或畸形，核染质致密浓染。有些细胞的核甚至出现核碎裂或核崩解，在胞浆中出现数个核碎片。,21,间皮增生正常情况下间皮细胞很少脱落，而在炎症、肿瘤等刺激下，细胞呈增生状态，其数量增多，大小不一致，其中还有细胞核增大，但胞浆丰富，核边整齐。这时会伴有幼稚的间皮细胞出现，有的还呈特殊的排列结构：梅花样、腺腔样、乳头状、栅栏状、菊花团样。但这些细胞团细胞核大小较为一致，出现的同时，周围应该有大量散在的间皮细胞存在。,22,鉴别增生的间皮细胞和肿瘤细胞，可采取与涂片中的其他良性间皮细胞相对比，如果是间皮细胞增生，增生的间皮与正常间皮之间就有过渡的形态；而某些不明性质的细胞核，如果明显较周围其它间皮细胞核增大和深染，核染色质颗粒较粗糙、并向核膜处集中，核仁明显和核膜增厚并有轻到中度的畸形，那么这些细胞有可能就是异型增生的间皮细胞或者就是肿瘤细胞。,23,24,25,26,27,核分裂像间皮细胞增生中，可见到许多核分裂象，这些核分裂的细胞一般体积较小。而肿瘤细胞核分裂细胞常常较大、量多和不够清晰。但如果涂片中细胞的异型性不足，不能以单一的核分裂象作为诊断恶性的依据。,28,良性间皮细胞的核分裂像,恶性间皮细胞的核分裂像,29,在电镜下的间皮细胞具有微绒毛，这些微绒毛即光镜下所见的微突起，表现为间皮细胞胞浆边缘毛糙，在正常、炎症、异型增生情况下可见，但在恶性间皮瘤时则少见。因为间皮细胞间有微绒毛，所以在相连的间皮细胞之间产生裂隙，这也是从光镜下判断间皮细胞的一个方法。,30,微绒毛性裂隙,31,肿瘤细胞,1、原发性肿瘤：间皮瘤和恶性间皮瘤2、转移性癌：腺癌（占80-90%以上）、鳞癌、未分化癌3、其它转移性恶性肿瘤：恶性淋巴瘤、恶性黑色素瘤、恶性纤维组织细胞瘤、卵巢无性细胞瘤、精原细胞瘤等等。,32,间皮瘤与间皮肉瘤,间皮瘤：细胞常常排成乳头状、腺样结构，胞核增大，深染。但无恶性特征。从形态学上很难与间皮细胞增生区别，不能单凭细胞形态为依据，必须结合临床病史及检查。恶性间皮瘤：细胞常常散在排列，细胞拉长，核大、奇形怪状，有双向分化的细胞形态。与腺癌或其它类型肉瘤类似。应辅助电镜、免疫组化或特殊染色鉴别。,33,间皮细胞肿瘤常为混合性形态变化，有从间皮细胞过渡的形态。而在癌性积液中，我们看不到不典型增生柱状细胞，见到的全是腺癌细胞。其原因为不典型增生的柱状细胞是正在发生癌变过程中的细胞形态，而是腺癌细胞的有丝分裂，因此不可能出现癌前的增生细胞。这也是两者的鉴别点之一。,34,恶性间皮瘤,增生的间皮细胞,35,CalCalretinin钙视网膜素,免疫组化是鉴别间皮瘤的一个很好的辅助方法,36,腺癌,浆膜腔积液中腺癌占肿瘤细胞的比例最高，基本上保持了原发部位腺癌的特性，但其形态由于在积液中的浸泡、繁殖使其发生了改变，与原发部位的不尽相同。腺癌细胞的特点：核大，大小不一，异形，核膜较厚，核仁明显；胞浆内可见大小不等的粘液空泡，常有核偏位。,37,浆膜腔积液的腺癌细胞形态多样，大小不一，细胞的大小可相差数十倍，有时一个大的癌细胞比数个成团细胞还要大。而小的癌细胞和间皮细胞相似。浆膜腔积液的腺癌细胞绝大部分是以成团结构出现的，少数病例以散在分布为特征。散在分布的腺癌细胞以低分化腺癌多见。,38,浆膜腔积液中胸水的原发灶以肺癌，乳腺癌多见；浆膜腔积液中腹水以卵巢癌，胃癌，肠癌，肝癌，胰腺癌，子宫内膜癌，乳腺癌为主。,39,腺癌,40,腺癌,41,腺癌,42,腺癌,43,腺癌,44,45,46,47,48,腺癌,49,腺癌,50,腺癌,51,腺癌,52,53,54,腺癌,55,鳞癌,积液中鳞癌很少见，仅占2%-3%左右。第一种形态是高分化的鳞癌，胞浆有角化，细胞奇形怪状，细胞核深染，块状，常伴有坏死。第二种形态是癌细胞单个散在，细胞为圆形，胞核居中，深染，胞浆厚实明显。第三种形态癌细胞分化较差，成团或成堆，胞核圆形，核仁明显，核膜较厚，和腺癌很难鉴别。,56,鳞状细胞癌,57,鳞状细胞癌,58,59,小细胞未分化癌,胸水中发现肺小细胞未分化癌比鳞癌细胞癌多，5%左右。细胞呈葡萄状或相嵌状排列，胞浆极少或裸核样，核形不规则，圆形或椭圆形，核染色质粗颗粒或块状，偶有核仁。与痰中见到的小细胞癌非常相似。而淋巴瘤往往细胞分散，无组织结构。有时也需要免疫组化才能区分。,60,小细胞未分化癌,61,小细胞未分化癌,62,小细胞未分化癌,63,小细胞未分化癌,64,可疑癌,65,可疑癌10X,66,可疑癌40X,67,可疑癌40X,68,免疫组化和特殊染色的应用：,69,推断原发部位,70,胸水腺癌,TTF-1,SPA,71,判断类型,72,10X病例一,73,病例一：Calretinin,74,病例一：CK18,75,病例一：EMA,76,病例一：AB,77,病例一：PAS,78,病例一：细胞切片,79,病例一：Cal,80,病例一：CK5/6间皮与鳞癌阳性,81,病例一：CK7,82,病例一：CK18,83,病例一：CKH,84,CK10、CK14、阴性结论：腺癌,85,病例二：10X,86,病例二：40X,87,肿瘤细胞分散，无组织结构，核异型明显，有切迹，裂沟，并有多个突起，核弯曲，脑回样核，核仁大而不规则。胞浆较少。,88,病例二：40X,89,病例二：细胞切片,90,病例二：细胞切片40X,91,病例二：细胞切片LCA,92,病例二：细胞涂片CD3,93,病例二：细胞切片CD3,94,病例二：细胞涂片CD45ROT细胞淋巴瘤,95,病例二：细胞切片CD45RO,96,CK、EMA、Cal阴性Syn、CgA阴性CD20、CD79a阴性结论：T细胞淋巴瘤,97,病例三,98,间皮增生,99,间皮增生：40X,病例三：40X,100,病例三：Calretinin,101,病例三细胞切片：Mes,102,病例三：CEA,103,病例三细胞切片：CEA,104,病例三细胞切片：EMA,10