浅谈副溶血弧菌PPT课件.ppt

副溶血性弧菌,1,.,2019/11/26,目录,一、发现史二、流行病学三、生物学特性四、副溶血性弧菌检验五、检测技术新进展,2,.,2019/12/18,一、发现,于1950年10月从日本大阪市，发生的一起咸沙丁鱼食物中毒，患者肠道排泄物和食物中首次分离出副溶血性弧菌在日本。副溶血性弧菌食物中毒约占细菌性食物中毒的70%-80%.1958年上海市防疫站也从烤鸭所致食物中毒的患者中分离出此菌。以后再我国、日本、印度、美国等许多国家均陆续有相关报道1966年国际弧菌命名委员会正式命名为副溶血性弧菌中毒食品主要是海产品鱼、虾、蟹、贝类等，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋类。,3,.,2019/12/18,二、流行病学,1、传染源传染源为病人。集体发病时往往仅少数病情严重者住院，而多数未住院者可能成为传染源。2、传播途径经食物传播，主要为海产品或盐腌渍品。进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。3、易感者男女老幼均可患病，但以青壮年居多。多发生于沿海地区，常造成集体发病。4、疾病症状副溶血性弧菌常导致肠胃不适，伴随食物中毒症状。表现为急性肠胃炎，腹痛、吐泻、发烧等症状。少数重症者引起原发性败血症。,4,.,2019/12/18,预防措施,1、动物性食品应煮熟透再食用。2、注意海鲜是否干净、新鲜，食前应用淡水反复冲洗，吃时煮熟煮透，再加适量食醋。3、生熟食品分开存放，装海产品的器具及接触海产品的手应该洗净擦干再接触其他食品。,5,.,2019/12/18,三、生物学特性,革兰氏染色阴性需氧菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、弧形等形态。菌体一端有单鞭毛，运动活泼。无芽孢营养要求不高，在普通培养基中加入适量NaCl即能生长，无盐培养基上不生长，含盐浓度10%以上也无法生长。最适浓度为35g/L。不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂抵抗力弱。,6,.,2019/12/18,四副溶血性弧菌检验程序,7,.,2019/12/18,典型的副溶血性弧菌在TCBS琼脂培养基上呈圆形、表面光滑的绿色菌落，用接种环轻触，有类似口香糖的质感，直径2-3mm,8,.,2019/12/18,生化特性,能分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、淀粉和阿拉伯胶糖，产酸不产气。不发酵乳糖、蔗糖、纤维二糖等从患者样品中分离的致病菌株在人或家兔红细胞的培养基生长，能产生溶血海水中及海产品中分离的菌株不溶血，这个现象称为“神奈川现象”。能在神奈川培养基上产生溶血者，称为神奈川实验阳性。,9,.,2019/12/18,血清学试验,O抗原是耐热的菌体抗原，目前有O1-O13共13种，可用于血清学鉴定K抗原是一种荚膜抗原，现有K1-K71，也用于血清学鉴定中国大陆副溶血弧菌大部分是O3：K6,10,.,2019/12/18,神奈川试验,神奈川试验是在我妻氏琼脂上测试是否存在特定溶血素。神奈川试验阳性结果与副溶血弧菌分离株的致病性显著相关。接种环将测试菌株的3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂18h培养物点种于我妻氏血平板。每个平板可以环状点种几个菌。361培养不超过24h。并立即观察。阳性结果为菌落周围呈半透明环的溶血。神奈川试验阳性菌的感染能力强，多数毒性菌株为神奈川试验阳性（K+），多数非毒性菌株为神奈川试验阴性（K）。引起食物中毒的副溶血性弧菌90%神奈川试验阳性，通常在12h内出现症状。K+菌株能产生一种耐热型直接溶血素，K菌株能产生一种热敏型溶血素，而有些菌株能产生这两种溶血素。,11,.,2019/12/18,副溶血性弧菌致病性,致病因子：1、耐热直接溶血素TDH（主要毒力基因），肠毒素2、耐热相关溶血素TRH，与TDH相似,12,.,2019/12/18,五、检测技术新进展,PCR检测技术聚合酶链式反应(PCR)技术是美国Cetus公司的科学家Mullis于1983年发明的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。其有高度特异性、敏感性及稳定性好、检测耗时短等特点，但其缺点是程序复杂,需要精密仪器设备,价格昂贵,且可能出现非特异性扩增产物,假阳性结果。免疫荧光技术利用某些荧光素通过化学方法与特异性抗体结合制成荧光抗体,荧光抗体与被检抗原特异性结合后,形成的免疫复合物在一定波长光的激发下可产生荧光,借助荧光显微镜可检测或定位被检抗原。优点为特异性强、速度快、灵敏度高。操作程序较繁琐;需要昂贵仪器(荧光显微镜);染色标本不能长期保存等缺点。免疫酶技术将抗原抗体的特异性反应与酶的高效催化反应有机结合起来,通过酶降解底物呈现的颜色反应来指示特异性抗体的存在,根据反应颜色的深浅指示抗原量的多少。具有特异性强、敏感性高、检测时间短、对设备的要求较低等优点,可以在短时间内准确地将副溶血性弧菌检测出来。已有类似报道集中在实验室方法探索上。除了以上方法外,还有研究报道