生物反馈疗法对银屑病患者外周血t细胞亚群的影响.doc

.生物反馈疗法对银屑病患者外周血t细胞亚群的影响 作者：张力军杨雪琴刘玉峰樊建勇 【关键词】 银屑病 关键词: 生物反馈（心里学）;银屑病;免疫，细胞 摘 要:目的 检测银屑病患者生物反馈治疗前后外周血cd3+ ，cd4+ 及cd8+ 细胞数分数，探讨生物反馈疗法治疗的可能机制. 方法 寻常型银屑病患者30（男17，女13）例，年龄1750岁;对照组20（男9，女11）例，年龄2048岁.于生物反馈治疗（激素或免疫抑制剂）前和治疗后3mo用sp法（全称链菌素亲生物素-过氧化酶连接法）测定外周血t细胞亚群. 结果 与对照比较，进展期银屑病患者细胞分数cd3+ 细胞无明显改变，cd4+ （0.280.06vs0.360.08，p<0.01）明显增高，但cd8+ （0.320.07vs0.240.03，p<0.01）明显低下.经生物反馈治疗后，cd3+ （0.580.09vs0.660.06，p<0.05）和cd4+ （0.280.07vs0.360.07，p<0.01）均有明显升高;而cd8+ 无明显变化（p>0.05）. 结论 生物反馈可能是通过改善患者t细胞免疫而达到治疗银屑病. keywords:biofeedback（psychology）;psoriasis;immunity，cellular abstract:aim to explore the feasibility of biofeedback therapy for psoriasis patients and to determine the number fractions of peripheral blood cd3+ ，cd4+ and cd8+ cells inpsoriasis patients before and after the biofeedback treatment.methods number fractions of peripheral blood cd3+ ，cd4+ and cd8+ cells were determined by the sp（biotin streptavidin peroxides）methods in the biofeedback therapy（pre-therapy and post-therapy）for psoriasis patients（n=30，male17，female13，1750years），and in control（n=20，male9，female11，2048years）.results cd4+ cell number fraction（0.280.06vs0.360.08，p<0.01）was significantly higher and cd8+ （0.320.07vs0.240.03，p<0.01）was lower than those of the controls（p<0.01），but no changes in that of cd3were found.in addition，we had determined the number fractions of peripheral blood cd3，cd4and cd8+ cells of10psoriasis patients out of the30，who received continued biofeedback therapy for more than3months，and their cd3+ （0.580.09vs0.660.06，p<0.05）and cd4+ （0.280.07vs0.360.07，p<0.01）were higher than those of pretreatment，and cd8+ did not change（p>0.05）.conclusion biofeedback therapy may cure psoriasis patients by adjusting the t-cell immunily. 0 引言 银屑病可能是在遗传缺陷的基础上由t淋巴细胞介导的炎症性、增生性皮肤病1-3 .生物反馈放松疗法在银屑病等慢性炎症性皮肤病中的治疗中有良好疗效3 ，但生物反馈对银屑病患者外周血t细胞的影响还未见报道.我们对生物反馈治疗前后银屑病患者外周血t细胞亚群进行研究，以期从该角度探讨生物反馈治疗银屑病的机制，为临床应用提供一定的理论依据. 1 对象和方法 1.1 对象 确诊的寻常型银屑病患者30（男17，女13）例，年龄1750（平均31.7）岁;病程7d21a，平均8.3a，皮损范围2%40%（平均21.8%），全部患者均为进行期，皮损典型，临床诊断明确的门诊患者，并排除其他相关疾病，治疗前3mo未用过激素或免疫抑制剂.正常对照组20（男9，女11）例，年龄2048（平均30.3）岁，均为门诊体检人员.两组一般特征无差异（p>0.05）.试剂盒由北京元康医学技术有限公司提供，内含试剂a（鼠抗人cd3mab）、试剂b（鼠抗人cd4mab）、试剂c（鼠抗人cd8mab）、试剂1（生物素-兔抗鼠igg）、试剂2（链霉亲和素-hrp）、试剂3（底物1）、试剂4（底物2）、试剂5（底物3）及试剂6（复染液）. 1.2 方法 早晨07:00/08:00抽取患者肘静脉血2ml，加肝素抗凝，用pbs稀释一倍，分离淋巴细胞.取细胞悬液涂滴于玻片上，吹干，用pbs洗涤后，分别加入抗t细胞亚群mab a，b，c，约10l，置湿盒中，37培育30min.pbs-tween20洗净，加试剂1，加pbs-tween20培育30min，洗涤，再加试剂2，培育30min，pbs洗涤，用试剂3，4，5临时配成混合液.在涂片上加一滴混合液，515min后用试剂6复染.阳性细胞的细胞表面呈颗粒状红色，细胞核为蓝色;阴性细胞的细胞表面无着色反应，呈淡蓝色，体积略小于阳性细胞.高倍镜下计数200个单个核细胞，计算阳性细胞的比数.采用由北京新兴生物医学工程研究发展中心研制（中国银屑病防治研究基金会监制）的mf-1型生物反馈仪.本仪器为肌电型生物反馈仪.患者心理生理放松的程度通过患者自身肌电信号的强弱显示.在环境安静的生物反馈治疗室中，患者坐在有靠背的沙发上或平躺于床上，将两个肌电接受仪及一个接地电极分别放置并固定于前臂肌，设定时间30min，按压启动键.患者在治疗过程中努力保持安静，不说话，不思考任何问题，缓慢呼吸，尽最大努力在治疗时间内保持全身放松.生物反馈仪显示屏上出现绿色信号显示患者放松程度，一般以35v为理想放松肌电值，每日1次，训练3mo为一个疗程.治疗期间不并用其他药物.痊愈为临床症状消失，皮损完全消退，遗留色素沉着或脱失;显效为临床症状及皮损明显改善或缓解（>60%）;好转为临床症状及皮损有所改善（20%59%），无效为临床症状及皮损无变化或加重. 统计学处理:数据用x s表示，进行2 检验. 2 结果 银屑病患者31例治疗前外周血cd3+ 细胞略低于正常对照组（p>0.05），cd4+ 细胞数及cd4+ /cd8+ 比值均低于正常对照组（p<0.01），cd8+ 细胞明显高于对照（p<0.01，tab1）.坚持用生物反馈治疗3mo的10例患者中痊愈2例，显效3例，有效4例，无效1例.治疗后cd3+ （p<0.05），cd4+ （p<0.01）和cd4+ /cd8+ 比值明显高于治疗前，而cd8+ 细胞略有下降（p>0.05）. 表1 银屑病患者cd3+ ，cd4+ ，cd8+ 细胞略 3 讨论 我们对10例经生物反馈治疗的银屑病患者，进行外周血cd3+ ，cd4+ ，cd8+ 细胞检测，发现cd3+ ，cd4+ 细胞比治疗前提高，差异有显著性.cd8+ 细胞比治疗前略降低，但无统计学意义.本实验提示生物反馈疗法能改善银屑病患者的免疫功能，特别是影响到cd4+ t细胞的功能.银屑病患者进行生物反馈治疗后，其抑郁和焦虑情绪明显好转，治疗中cd4+ 细胞水平明显提高，从而影响患者的免疫功能4，5 .实验证明生物反馈放松疗法可增强淋巴细胞对有丝分裂原的反应性，降低白细胞数6 .研究表明，神经系统和下丘脑-垂体-肾上腺轴可影响免疫功能，它们之间的相互联系，构成了精神因素致病的物质基础，也同时解释了生物反馈等行为疗法治疗银屑病的可能途径3，5，6 ，并通过调整银屑病患者的免疫功能，达到缓解或治愈银屑病的目的. 参考文献: 1sun lc，liu yf，liu yf，gao tw，zhang ts.effect of anti-keratin autoantibody on psoriatic skin grafts on nude mine j.di-si junyi daxue xuebao（j fourth mil med univ），2001;22（24）:2240-2243. 2wang g，liu yf.psoriatic peripheral blood mononuclear cells stimulate the proliferation of epidermal keratinocytes in autolo-gous mixed culture reaction j.di-si junyi daxue xuebao（j fourth mil med univ），2001;22（24）:2297-2299. 3gottlieb ab，psoriasis.immunopathology and immunomodu-lation j.dermatol clin，2001;19（4）:649-657. 4ohshima a，takigawa m，tokura y.cd8+ cell changes in pso-riasis associated with roxithromycin-induced clinical im