肺炎克雷伯菌耐药性分析.doc

doc格式论文，方便您的复制修改删减肺炎克雷伯菌耐药性分析（作者:_单位: _邮编: _） 作者：李红林 卢月梅 吴劲松 吴伟元 刘侠【摘要】 目的 比较产超广谱内酰胺酶(esbls)肺炎克雷伯菌与非产esbls菌株的耐药情况。方法 收集2007年112月深圳市人民医院住院患者分离的肺炎克雷伯菌76株。采用kb法对其进行药敏试验，esbls确证采用clsi(临床实验室标准化委员会)推荐的纸片扩散法表型确证试验。结果 所有分离株均对亚胺培南敏感；产酶株对抗生素的耐药率高于非产酶株；产酶株对哌拉西林和头孢克洛100%耐药。结论 肺炎克雷伯菌的耐药状况严重，内酰胺类抗生素和酶抑制剂联合用药、阿米卡星、头孢西丁和碳氢霉烯类药物可控制产esbls肺炎克雷伯菌感染。 【关键词】 肺炎克雷伯菌； esbls； 耐药性随着抗生素在临床应用的不断增多，细菌的耐药性也日益严重，尤其是革兰阴性杆菌产生的超广谱内酰胺酶(extendedspectrum lactamases，esbls)引起的耐药及其流行成为临床关注的焦点。esbls是由质粒介导并导致细菌对青霉素类，一、二、三、四代头孢菌素以及单环类抗生素耐药的一类酶，这类酶主要由肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae，kp)和大肠埃希菌产生1。产esbls菌株耐药谱广，常表现为多重耐药。因此，了解这些微生物的耐药情况，对制定治疗方案、合理使用抗菌药物具有十分重要的意义。本文对深圳市人民医院住院患 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株来源 收集我院2007年112月临床分离的kp无重复菌株共76株，所有菌株均经vitekams 60全自动微生物分析仪鉴定，kp另加吲哚试验与产酸克雷伯菌进行鉴别。药敏试验质控株为大肠埃希菌atcc 25922和atcc 35218，esbls确证试验质控株为kpatcc 700603和大肠埃希菌atcc 25922，均为本院微生物实验室保存菌株。 1.1.2 仪器与试剂 vitekams 60全自动微生物分析仪购自法国生物梅里埃公司；两对esbls确证试验纸片、mh琼脂平板及药敏纸片均为英国oxoid公司产品，药敏纸片包括：哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦、头孢克洛、氯霉素、庆大霉素、阿米卡星、亚胺培南、美罗培南、环丙沙星、复方新诺明、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟及氨曲南，均在有效期内使用。 1.2 方法 1.2.1 esbls确证试验 采用clsi推荐的表型确证方法(纸片扩散法)：头孢噻肟(30 g)与头孢噻肟/克拉维酸(30 g/10 g)，头孢他啶30 g与头孢他啶/克拉维酸(30 g/10 g)两对纸片中任一对或两对，加克拉维酸者比不加克拉维酸者抑菌圈直径5 mm，则判定为esbls阳性。 1.2.2 药敏试验 采用kb法(即琼脂扩散法)，操作及结果判断严格按2006年clsi标准进行。 1.2.3 统计学方法 应用whonet 5.3、spss 13.0软件进行分析，产酶株与非产酶株耐药性比较采用卡方检验。 2 结果 2.1 esbls的检出率 76株临床分离株共检出产esbls菌35株，阳性率为46.05%。 2.2 kp的科室分布 76株kp主要来源于icu(9株)，其次为呼吸科、肾内科(各8株)、脑外科(7株)、老年病科(6株)、普通外科(5株)、泌尿外科、内分泌科(各4株)、消化科、新生儿科、胸外科、门诊部(各3株)、其他(13株)。 2.3 kp的标本分布 76株kp大多分离自痰液(22株)、尿液(18株)和血液(15株)，其次为腹透液(9株)、脓液(5株)、伤口分泌物(3株)、宫颈分泌物(2株)、胆汁和胸水(各1株)。 2.4 kp产酶株与非产酶株耐药情况比较 kp产酶株与非产酶株之间的耐药性存在较大差异，除对头孢西丁和氯霉素耐药率差异不显著外(p值分别为0.161和0.065)，对其他14种抗生素的耐药率差异均显著(p0.05)。见表1、2。 表1 kp产酶株与非产酶株的药敏试验结果表2 kp产酶株与非产酶株耐药率比较 3 讨论 kp是临床标本中常见的细菌，也是院内感染常见的病原菌之一。该菌在正常人口咽部的带菌率为1%6%，在住院患者中该菌的携带率更高。该菌是重症患者和抵抗力低下患者发生感染的潜在危险因素，所以该菌在icu的检出率最高。本实验痰液标本中该菌的检出率最高，可能与其本身存在于咽喉部有关，在抵抗力低下时容易成为主导菌而引起肺部感染；该菌在尿液和血液中的检出率次之，常引起尿路感染和菌血症。 本研究中kp对抗生素的耐药率低于文献报道2，这可能与不同地区和医院使用的抗生素种类和数量不同有关；亦低于我院先前的报道3，4。本研究结果显示，kp除对亚胺培南和美洛培南的耐药率为0外，对其他抗生素均有不同程度的耐药，产酶与非产酶kp之间的耐药特性存在较大差异。产酶株对哌拉西林耐药率高达100%，哌拉西林加上他唑巴坦之后敏感性大大提高，耐药率只有16.2%，表明他唑巴坦对esbls有明显的抑制作用；在含酶抑制剂的抗生素中，哌拉西林/他唑巴坦(耐药率为16.2%)对esbls产酶株的抑菌作用强于氨苄西林/舒巴坦(耐药率为86.1%)和阿莫西林/克拉维酸(耐药率为44.4%)，临床医生治疗此类细菌引起的感染时可以选用哌拉西林/他唑巴坦，减少对高效广谱抗菌药物(如亚胺培南和美洛培南)的依赖；产酶株对阿米卡星和头孢西丁耐药率也较低(分别为29.7%和32.4%)，临床医生亦可有选择地使用这两种药物。总之，在临床治疗中，根据药敏试验结果选用抗生素，是保证合理、有效使用抗生素的重要依据。 综上所述，kp在icu出现最多；痰液和尿标本中检出率最高；产esbls菌株对大多数抗生素的耐药率远高于非产酶株的耐药率；对于esbls阳性的耐药性菌株，使用添加了酶抑制剂的抗生素可以使治疗效果有比较明显的改善，用阿米卡星、头孢西丁和碳氢霉烯类药物可控制产esbls的kp感染。【参考文献】 1 jacoby ga.genetics of extendedspectrum betalactamases.eur j clin microbiol infect dis,1994,13(suppl 1):s2s11. 2 郑港森，宋秀宇，黄朝阳，等.对肺炎克雷伯菌产内酰胺酶的检测及耐药性分析.检验医学与临床,2008,5(3):14214