微生物学教研室-PowerPointPresentat.ppt

微生物学教研室吕厚东E-mail：lvhoudong,肝炎病毒,第二节乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV）,我国感染现状：,我国是HBV感染的高发区（“国害”）10%HBsAg携带者（1.3亿）3000万慢性肝炎患者30万/年死于肝癌及肝硬化,75150万女性HBsAg携带者通过母婴传播使60100万新生儿被感染。,选择填空题:我国是一个大国（填一疾病名称）,乙型肝炎,1963年Blumberg在多次输血的血友病患者中发现了一种异常的抗原，称为澳抗。1968年才明确这种抗原与乙型肝炎（简称乙肝）有关。1970年Dane在电子显微镜下观察到HBV的形态，并命名为Dane颗粒。1986年将其列入嗜肝DNA病毒科。,Blumberg,一、生物学特性,形态与结构：病人血清中存在着3种形态病毒颗粒,1.大球形颗粒又称Dane颗粒,2.小球形颗粒,3.管形颗粒,HBV基因组:,dsDNA：3.2Kb分为长链L（-）和短链S（+）（约为L链的50%至85%长），组成的不完全双链环状DNA，长链载有病毒蛋白质的全部密码。有4个开放读码框架(ORF)，分别称为S、C、P和X区,2.HBV基因组结构,pre-s1,pre-s2,S,P,C,pre-c,X,HBVDNA3.2kb,pre-S1pre-S1蛋白pre-S2pre-S2蛋白SHBsAgpre-CHBeAgCHBcAgPDNAPXHBxAg,编码,HBsAg,pre-S2,pre-S1,+,-,前基因组,逆转录,HBV的复制方式：吸附、穿入、脱壳，DNA进入肝细胞核以-DNA为模板，修复+DNA的裂隙区-DNA2.1kbRNA外衣壳蛋白3.5kbRNA内衣壳蛋白及HBV-DNA,HBV.swf,HBV:Replication,HBV,3.5KB,Provirus,RT,Replicate,Nuclear,2.1KB,HBV的抗原组成,表面抗原HBsAg核心抗原HBcAge抗原HBeAg,HBcAg,HBsAg,HBeAg,Dane颗粒,-,+,表面抗原HBsAg,存在于三型颗粒中是HBV感染的主要标志分亚型（a,d/y,w/r）:adw、adr、ayw、ayr产生抗-HBsPreS1、PreS2抗原产生抗-PreS1和抗-PreS2,HBV血清型和基因型的地理分布,基因型血清型流行地区Aadw2,ayw1欧洲西北部、美国、非洲中部Badw2,ayw1中国大陆、台湾、日本、印度尼西亚越南Cadw2,adrq+,adrq-,ayr中国大陆、台湾、日本、韩国、越南玻利尼西亚Dayw2,ayw3地中海地区、印度Eayw4非洲西部Fadw4q-,adw2,ayw4非洲中部和南部、玻利尼西亚Gadw2法国、美国,核心抗原HBcAg,仅存在于Dane颗粒中不易在血液中检出可在感染的肝细胞表面存在刺激机体产生抗-HBc（IgG、IgM）表明病毒在复制,e抗原HBeAg,存在于Dane颗粒中游离存在于血液中为病毒复制及强传染性的指标产生抗-HBe,HBeAg可存在于血清中,HBeAg,HBcAg,分泌到细胞外,切割、加工,表达,HBV的其它生物学性状,培养黑猩猩动物模型用分子生物学技术的细胞培养成功抵抗力抵抗力强于HAV对低温、干燥、紫外线耐受不被70乙醇灭活10010min可灭活,HBV与原发性肝癌,流行病学方面:HBsAg携带者发生肝癌的危险性217倍动物模型病毒分子结构：x基因x蛋白反式激活作用,二、致病性与免疫性,传染源主要传染源是患者或无症状HBsAg携带者HBsAg存在于血液、尿液、精液、唾液、乳汁之中传播途径血液、血制品传播母-婴传播其它潜伏期:30160d,HBV的致病机制,1.免疫低下：HBsAg无症状携带者2.病毒变异：逃逸免疫3.细胞介导的免疫损伤：CTL细胞免疫功能正常：急性肝炎细胞免疫功能低下：慢性肝炎（胸腺肽、干扰素）,细胞免疫反应过强：暴发性肝炎(肝萎缩、黄疸、96h内死亡）免疫耐受：HBsAg无症状携带者,4.免疫复合物性的免疫损伤：肝外及肝脏损伤,5.自身免疫反应的免疫损伤：肝特异性脂蛋白(LSP)抗原,三、微生物学检查法,检测HBV抗原、抗体（乙肝五项）HBsAg、抗-HBsHBeAg、抗-HBe(HBcAg)抗-HBc,HBV抗原、抗体检测结果的临床分析,恢复期,急性期,症状,转氨酶异常,潜伏期,HBsAg,HBeAg,抗-HBe,感染后月数,抗-HBc,乙型肝炎病程中各种血清学标志动态变化,HBV标志滴度,0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,抗-HBs,HBVDNA,四、防治原则1.HBV疫苗预防：(血源性、基因工程genetic_engineering.swf、可食用)2.HBIG预防：含高效价抗-HBs的人血清球蛋白,7,20,40,60,80,100,抗-HBs阳性率(%),1,3,6,接种后月数,1针,2针,3针,0,3.治疗：,干扰素:IFN-，500万u/次，3次/周，6月,核苷类似物：,拉米呋啶（lamivudine，3TC）：,终止前基因组的合成，但对肝细胞核内cccDNA的合成无作用,泛昔洛韦（famciclovir）：,阻碍HBVcccDNA的产生，抑制DNA多聚酶，干扰逆转录过程,苏拉明(suramin)：,具有抗逆转录病毒的活性，可抑制HBVDNA的活性，从而抑制HBV的复制,中草药：,黄芪、五味子等提取物,部分双链的DNA,胞浆膜,乙肝病毒的复制拉米夫定的抑制作用,细胞核,细胞浆,内质网,拉米夫定,A(n),有感染性的HBV毒粒,(-)-DNA,mRNA,cccDNA,有感染性的HBV毒粒,有包膜的前基因组,肝细胞,转录,逆转录,HBsAg的囊膜抗原成分,翻译,第三节丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus，HCV）,一、HCV的生物学性状,4060nm球形有包膜+ssRNA,HCV的基因结构：+ssRNA、9.5kb，有9个基因区组成,HCV的基因型有6种：型：欧美流行：亚洲，中国-型,HCV.swf,结合,囊泡融合与病毒释放,RNA复制,正链,负链,翻译与多肽链加工,脱壳,与膜融合,病毒装配与成熟,胞饮作用,DavisGLetal.SeminLiverDis.1999;19(suppl1):103-112.,HCV生活周期,C,NS3,NS4,NS5,E2,NS2,E1,0,10,20,30,40,50,变异率(%),7,15,22,25,26,36,38,丙型肝炎病毒不同基因区的变异率,二、HCV的致病性与免疫性,传播途径似HBV是引起输血后慢性肝炎和肝硬化的主要原因潜伏期：48周无症状HCV携带者和慢性丙肝者多见肝外损伤：肾小球肾炎免疫力不牢固,丙型肝炎的特点,我国丙肝病毒携带者的比例在2%5%随着年龄的增长，丙肝病毒携带率亦增高易感人群感染HCV后，慢性化的比例高达50%以上乙肝患者容易重叠HCV感染,HCV感染的预后,100位HCV急性感染,AdaptedfromAlterHF,SeeffLB.SeminLiverDis.2000;20:17-35.,三、微生物学检查法,检查病毒RNA：PCR检测抗-HCV：ELISA,诊断、监测方法,HCV血清学试验EIA检测抗HCV、Immunoblotassay,HCV-RNA定性试验PCR、TMA,HCV-RNA定量试验PCR、bDNA,ALT,肝纤维化非损伤试验,肝活检,基因分型,诊断丙肝感染者和现患病人的最佳实验室方法,NationalInstituteofHealthConsensusDevelopmentConferenceStatement:ManagementofHepatitisC:2002-June10-12,2002,四、防治原则,预防：由于HCV免疫原性不强且易变异，因此疫苗的研制较为困难治疗：IFN-,第四节丁型肝炎病毒（hepatitisDvirus，HDV）,HDV是一种缺陷病毒由HBsAg构成其外壳HDV定位于肝细胞核内，在血液中由HBsAg包被，形成3537nm颗粒-ssRNA,HDV的结构,Rizzetto于1977年首先发现，又称抗原（HDAg）3537nm球形颗粒；-ssRNA，1.7Kb含9个ORF,35-37nm,丁型肝炎的特点,HDV感染后可表现为急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带者我国HD感染率在1.6%5%，西南地区感染率高,联合感染,重叠感染,慢性、携带者HBV+HDV,HBV+HDV,潜伏期,急性肝炎,肝硬化,暴发性肝炎,慢性丁肝,（coinfection）,（superinfection）,微生物学检查及防治原则,微生物学检查：HDAg、抗-HD及HDV-RNA持续抗-HD(IgG)高滴度是慢性HDV感染的主要血清学标志防治原则：丁型肝炎传播途经与乙型肝炎相似防治原则似HBV,第五节戊型肝炎病毒（hepatitisEvirus，HEV）,一、生物学性状属于杯状病毒科球形，无包膜直径3234nm+ssRNA，3个ORF两个基因型,二、致病性及免疫,主要为粪口途径传播由胆汁经粪便排出体外对肝细胞的直接损伤及免疫病理作用多表现为急性戊型肝炎孕妇感染常致流产或死胎,戊型肝炎的特点,与甲型肝炎相比，患者黄疸前期症状重，病程持续时间较长，病死率较高，特别是孕妇感染HEV后。戊型肝炎分两种：“流行性”多发生在雨季和洪水后“散发性”在秋冬季呈现高峰潜伏末期至发病初期传染性强，患者的隔离期为