【word】 野生地参多糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响.doc

野生地参多糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响第9卷第6期2011年11月生物加工过程chinesejournalofbioprocessengineeringvo1.9no.6nov.2011doi:10.3969/j.issn.16723678.2011.06.010野生地参多糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响熊伟,陈贵元,谭德勇,左绍远(1.大理学院基础医学院,大理671000;2.云南大学生命科学学院,昆明650031)摘要:为了研究野生地参多糖对四氧嘧啶(alx)致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响,利用四氧嘧啶(alx)建立糖尿病小鼠模型,分别灌胃低(100mg/(kg?d),中(200mg/(kg?d),高(400mg/(kg?d)剂量地参多糖溶液及阳性对照药盐酸苯乙双胍,正常对照组及糖尿病模型对照组则给等体积生理盐水.结果表明:连续给药14d后,地参多糖对正常小鼠血糖无明显影响,100,200和400mg/(kg?d)地参多糖均能明显降低ajjx所致糖尿病小鼠高血糖,与糖尿病模型对照组相比,p<0.01;同时,相同剂量的地参多糖还能极显着降低aljx致糖尿病小鼠血清总胆固醇(tc),甘油三酯(tg),低密度脂蛋白胆固醇(ldlc)(p<0.01).中,高剂量地参多糖使糖尿病小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(hdlc)显着回升(p<0.05),但低剂量地参多糖对糖尿病小鼠血清hdlc则无明显影响(p>0.05).地参多糖能明显降低alx致糖尿病小鼠高血糖及高血脂.关键词:四氧嘧啶;降血糖;降血脂;地参;多糖中图分类号:r587.2文献标志码:a文章编号:16723678(2011)06004504hypoglycemicandhypolipidemiceffectofp0lysaccharidefromwildplantlycopuslucidusturcz.onalloxan-induceddiabeticmicexiongwei,chenguiyuan,tandeyong,zuoshaoyuan(1.collegeofbasicmedicine,daliuniversity,dali671000,china;2.collegeoflifescience,yunnanuniversity,kunming650031,china)abstract:theeffectofpolysaccharidesfromwildplantlycopuslucidusturcz.onhypoglycemiaandhypolipidemiainalloxaninducedmicewasinvestigated.thediabeticmodelmicewereestablishedbyintraabdominalinjectionofalloxan.then,thelivingdiabeticmiceweredividedintosixgroups.threegroupsweretreatedwith100,200and400mg/(kg?d)polysaccharidefroml.1ucidusturcz.,respectivelybyigadministration,andonegroupgivenphenfomide100mg/(kg?d)byigadminstrationasthepositivecon-trol,andanothergroupwasgivennormalsalineasthediabeticmodelcontro1.thenormalcontrolgroupwastestedonthenormalmicebyigsaline.after14daysoftreatment,thebloodglucoseandtheserumlipidcontentofeachgroupweredetected.theresultsindicatedthatpolysaccharidefroml.1ucidusturcz.hasnohyperglycemiaeffectonnormalmice.comparedwiththediabeticmodelcontrolgroup,100,200and4oomg/(kg?d)polysaccharidefroml.1ucidusturczcoulddecreasethebloodglucoseindiabeticmice(p<0.01).meanwhile,theresultsalsoshowedthatpolysaccharidefroml.2ucidusturcz.coulddecreasethe收稿日期:20110504基金项目:大理学院青年科学基金资助项目(2007x26)作者简介:熊伟(1982一),男,湖南株洲人,博士研究生,讲师,研究方向:多糖生物活性,e-mail:xwailp163.con生物加工过程第9卷levelofselmmtc,tgandldl-cindiabeticmice.inaddition,200and400mg/(kg?d)polysaccharidefroml.1ucidusturcz.couldincreasethesel31mcontentsofhdlcinthemice(p<0.05),but100mg/(kg?d)polysaccharidefroml.1ucidusturcz.hadnoeffectsonselqlmhdl-cindiabeticmice(p>0.05).polysaccharidefroml.1ucidusturcz.hadsignificanteffectsonhypoglycemicandhypolipidemicactionindiabeticmiceinducedbyalloxan.keywords:alloxan;hypoglycemiceffect;hypolipidemiceffect;lycopuslucidusturcz.;polysaccharide地参,又名地瓜儿苗,虫草参,地藕等,是唇形科(labiatae)泽兰属植物地笋lycopuslucidusturcz.的地下根茎部分(人中药名地参),主要分布在云南的昆明,河口,大理,丽江等地区.野生地参是药食兼用的佳品,享有”蔬菜珍品”,”山中之王”的美称,其营养成分中多糖含量最高,每100g干质量中地参总多糖含量为42.53g2j.中华本草详细介绍地参不但能作为蔬菜食用,而且晒干后入药,功能与冬虫夏草相当j.地参含有多种药用成分,全草入药,具有活血,利尿,通经,滋阳,通九窍,利关节,养气血等功能,民间主治腹痛,水肿,产后瘀血,跌打损伤等症.为综合开发利用我国野生地参资源,笔者从云南大理苍山地区野生地参中分离出精制纯多糖(polysaccharidefromlycopuslucidusturcz.),着重考察地参多糖对四氧嘧啶性糖尿病模型小鼠血糖及血脂的影响,旨在为研制降血糖,调血脂功能性食品或开发天然药物提供实验依据.1材料与方法1.1材料与试剂野生地参(产自大理苍山)由大理学院左绍远教授鉴定为lycopuslucidusturcz.的地下根茎部分,采用改良的三氯乙酸脱蛋白法提取地参总多糖,白色粉末状,纯度达95%以上;四氧嘧啶(alloxan,atjx),sigma公司;盐酸苯乙双胍片,江苏常州金远制药厂(批号:h32022165);葡萄糖测定试剂盒,上海荣盛生物技术有限公司;甘油三酯(tg),总胆固醇(tc)测定试剂盒,上海申索佑福医学诊断用品有限公司;低密度脂蛋白胆固醇(ldlc),高密度脂蛋白胆固醇(hdl.c)测定试剂盒,广州万孚生物技术有限公司.1.2仪器与设备uv9100紫外一可见分光光度计,北京瑞利分析仪器公司;bt一224s型电子分析天平,德国sartorius公司;低温高速离心机,beckman公司;onetouchbasic稳捷基础型血糖仪,美国强生集团理康公司;cl一8000型全自动生化分析仪,日本岛津公司.1.3实验动物昆明种小鼠,6并用,体质量1822g,由中国科学院昆明动物研究所养殖场提供,清洁级动物,合格证号为医动字第09065号.1.4实验方法1.4.1实验动物的处理取小鼠70只,适应性喂养5d.20只随机分为正常对照组,正常多糖组,每组10只.正常对照组(1kg)灌胃生理盐水10ml,每天1次;正常多糖组灌胃400mg/(kg?d)地参多糖,灌胃14d.其余50只糖尿病造模组小鼠禁食24h后按75mg/kg剂量,一次性尾静脉注射四氧嘧啶致实验i生糖尿病,正常对照组注射等体积生理盐水.72h后称质量,断尾采血,分离血清采用onetouchbasic稳捷基础型血糖仪测空腹血糖值,以血糖值大于11.1mmol/l作为造模成功标准j.按血糖值均衡原则将造模成功的糖尿病小鼠分成5组,每组10只.分组后次日按要求开始每天灌胃相应浓度的药物或等体积生理盐水,共灌胃14d.灌胃完毕,禁食12h(不禁水),称体质量,眼眶后静脉丛取血,分离血清后处死小鼠.按试剂盒说明书在全自动生化分析仪上分别测定空腹血糖,总胆固醇(tc),甘油三酯(tg),高密度脂蛋白(hdl-c)及低密度脂蛋白(ldlc).1.4.2实验动物的分组将实验小鼠随机分组:a)正常对照组(生理盐水);b)正常多糖组(400me/(kg?d);c)糖尿病模型组(生理盐水);d)盐酸苯乙双胍治疗组(2.5mg/(kg?d);e)多糖低剂量治疗组(100mg/(kg?d);f)多糖中剂量治疗组(200rag/(kg?d);g)多糖高剂量治疗组(400mg/(kg?d).共7组,每组10只.1.4.3统计学分析所有数据以均数标准差(s)表示,实验组与对照组比较,采用单因素方差分析,应用graphpadprism第6期熊伟等:野生地参多糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响474.0统计软件处理,p0.05为差异有统计学意义.2结果与讨论2.1地参多糖体内对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影响2.1.1地参多糖对正常小鼠空腹血糖的影响地参多糖对正常小鼠空腹血糖的影响结果见表1.由表1可知:灌胃14d后正常地参多糖组与正常对照组相比,小鼠空腹血糖值变化差异不显着(p>0.05),表明灌胃地参多糖(400mkg)14d不影响正常小鼠的空腹血糖值.表1地参多糖体内对正常小鼠空腹血糖的影响(s,=10)table1effectsofpolysaccharidefromllucidusturcz.atbloodglucoselevelinnormalmice(xs,n=10)2.1.2地参多糖对糖尿病小鼠空腹血糖的影响小鼠腹腔注射四氧嘧啶14d后,血糖升高到20.26mmol/l,且出现了糖尿病”三多一少”的典型症状,说明实验性糖尿病小鼠造模成功.表2为地参多糖对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠空腹血糖水平的影响.由表2可知:低剂量,中剂量,高剂量的地参多糖均能显着降低四氧嘧啶所致小鼠血糖升高,并呈现一定的量效关系,但最适用量是多少,糖耐量如何仍需做进一步研究.随地参多糖剂量的升高,血糖浓度的降低率逐渐升高,与模型对照组比较差异显着(p<0.01),由于四氧嘧啶能选择性破坏小鼠的胰岛细胞,造成胰岛素分泌低下,地参多糖的降血糖作用可能是通过减轻或抑制四氧嘧啶对胰岛细胞的进一步损害或改善受损伤的胰岛卢细胞的功能而实现的j.实验结果还显示,与盐酸苯乙双胍的降血糖作用相比,同剂量地参多糖明显要弱,400mg/kg地参多糖的降血糖效果接近2.5mg/kg盐酸苯乙双胍的功效.表2地参多糖体内对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠空腹血糖水平的影响(xs,n=10)table2effectsofpolysaccharidefroml.1ucidusturcz.atbloodglucoselevelinalloxaninducedmice(xs,n=10)注:与正常对照组比较1)p<0.01,与模型对照组比较2)p<0.o1.2.2地参多糖体内对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血脂的影响动物机体的糖代谢和脂代谢之问有着密切联系,在糖尿病模型小鼠中,出现原发性高糖血症的同时,也会继发高脂血症,因此纠正糖脂代谢紊乱是治疗糖尿病及其并发症的重要手段.表3为地参多糖对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠空腹血脂的影响.由表3可知:灌胃四氧嘧啶后,造成小鼠血清tc,tg与ldl.c显着升高,hdl-c降低,与正常对照组相比,p<0.01.而灌胃给予地参多糖治疗后,可明显对抗alx所致小鼠血脂代谢紊乱,地参多糖能使糖尿病小鼠血清tc,tg,ldlc明显下降.地参多48生物加工过程第9卷糖400mg/kg能使糖尿病小鼠血清hdl-c显着回升,但地参多糖100mg/kg对此则无明显影响.tc,tg,ldlc均是动脉粥样硬化和冠心病形成的促进因子,hdlc则是冠心病的保护因子,地参多糖能调节血脂的原因可能是多糖能够在不增加糖和淀粉的情况下对肝的功能有很好的促进作用,使肝内生存的酮体和肝外组织所能利用的限度达到很好的一个平衡,从而降低了血脂在血液中的堆积.实验结果表明:地参多糖可能对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的胰岛细胞有一定的修复作用,使胰岛素分泌增多,改善糖代谢和脂代谢,从而降低血糖和血脂水平.降糖类西药如盐酸苯乙双胍有疗效确切,作用强而迅速等特点,但需长期乃至终身服药,对肝肾等有一定毒副作用.地参多糖是是从野生植物中提取的天然化合物,其降糖调脂作用虽弱于盐酸苯乙双胍,但对动物机体无任何毒副作用,值得进一步研究与开发.有关地参多糖降脂作用的确切机制尚需进一步探讨.表3地参多糖体内对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血脂水平的影响(xs,n=10)table3effectsofpolysaccharidefroml.1ucidusturcz.atserumlipidslevelinalloxan-inducedmice(s.n=10)注:与正常对照组比较1)p<0.ol,与模型对照组比较2)p<0.05,3)p<0.01.3结论考察了野生地参多糖对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的降血糖,调血脂作用,体内实验证实地参多糖能显着降低糖尿病小鼠的血糖值,甘油三酯,胆固醇和血清ldl-c.同时,地参多糖还能明显回升糖尿病小鼠血清hdl.c.研究结果表明,地参多糖对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠高血糖及脂代谢紊乱具有一定的治疗作用,并且随剂量增大效果更好.参考文献:1罗孟禹,董开居.浅析名特珍稀野菜地参种植与开发j.中国野生植物资源,2006,25(5):64-65.2许泳吉,钟惠民,杨波,等.野生植物地参中营养成分的测定j.光谱实验室,2003,20(4):528530.3国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草m.上海:上海科学技术出版社,1999:16091612.4刘芳,朱学慧