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文档简介
微生物学实验教学讨论,在微生物学实验中培养学生创新能力的思考刘胜贵,1培养基的制备及灭菌,2从土壤中分离和纯化微生物,3细菌染色及形态观察,4放线菌、酵母菌和霉菌形态观察,5微生物显微计数和大小测量,6E.coli生长曲线的测定,1科学、合理安排实验教学内容,UVL,7细菌的生理生化反应,8环境因素对微生物生长的影响,9微生物的诱变育种,1培养基的制备及灭菌,2从土壤中分离和纯化微生物,1.2确立了由验证性(2项)、综合性(5项)、创新性实验(2项)组成的实验体系。,1.1按科研和生产工艺流程,将实验项目之间有机衔接,使微生物学实验内容组成互相联系的综合体系。,药敏纸片法,试管二倍稀释法,1.3将科研成果转化为教学内容,增加实验项目的探索性。,8环境因素对微生物生长的影响,1.4教学内容贴近实际,激发学生学习积极性。,实验10选修实验,熟练的实验技能是培养学生创新能力的基础,2.1培养学生养成良好的实验习惯,2.2教师要正确示范操作要领,2.3在学生实验操作过程中,教师要耐心纠正其错误操作,2.4实验技能考核是督促学生提高的重要手段。,3写好“实验设计”,提高学生实验的主动性,写好实验预习报告,可加深对相关理论知识的理解,提高学生实验的兴趣,锻炼学生自学能力。通过才能了解实验目的、原理和方法,在实验过程中才能做到心中有数、思路清晰。,实验设计是学生实验的指南,老师讲解和示范可以帮助学生修正设计方案。,一个“预习报告”就是一个“实验设计”。预习报告重点在“实验方法”部分,可不写完整的语句,而用自己熟练的简略表达方式如流程、作图、列表等,注明操作程序、新器具使用方法、材料的采集培养、新试剂使用方法,有时也包括背景知识,标明设定的参数、观察对象、测量项目、注意事项、学习中的疑问等。创新性实验则要在查阅文献的基础上,在选择适当的材料和研究方法上下功夫。,如何写预习报告?,如何写预习报告,实验一、培养基的制备与灭菌,1实验目的1.1实验室的管理要求1.2培养基成分和配制步骤1.3高压蒸汽灭菌锅的使用方法,一、实验名称,二、实验目的(学生个体通过实验达到的学习目的,而不需要写全体同学的共同目的),三、实验原理(即做实验的科学依据),固体培养基按物理状态半固体培养基液体培养基,合成培养基按成分半合成培养基天然培养基,基础培养基完全培养基按用途鉴别培养基选择培养基富集培养基,3.1了解培养基的概念及其组成的原理由人工配制的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的基质。一般由碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水组成。,3.2了解培养基的分类,3实验原理,3.4实验设计称量溶化调节pH,3.3培养基必须立即灭菌,否则会有杂菌污染.灭菌是通过提高锅内水蒸汽压力,从而提高温度,因而提高灭菌的效果。一般采用0.1013Mp(121.3)、15-30min。,附录牛肉膏蛋白胨培养基配方,牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、琼脂1520g、水1000ml,托盘天平称量。牛肉膏用玻棒挑取、热水溶解;要减少蛋白胨吸潮的时间。,先加少量水溶解,依次加入药品,补足水分到总体1000ml。(琼脂溶化方法:先将水加热沸腾,加入琼脂,边加搅拌。),pH度纸测定酸碱度,记录原始pH,用1mol/LNaOH或1mol/LHCl调节,边滴加边搅拌边测定,至pH7.2-7.6.,4在实验教学中培养学生探究和研究能力,4.1在教学内容中多设置对照实验,“从土壤中分离和纯化微生物”实验项目中,我们采用了涂布平板法、稀释倒平板法和划线分离法三种最重要的实验方法。让学生分析比较不同方法和效果。,“培养基的制备与灭菌”实验项目中分组做了牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、马铃薯培养基,分别为天然培养基和合成培养基。项目中既有固体培养基,又有液体培养基;既有富集培养基,又有选择培养基。,4.2在教学内容中将陈述变成问题,通常“实验原理”由老师进行讲解,基于部分基础知识在理论课中已经涉及,学生通过预习可以理解。我们将这一部分以提问的形式由学生回答,教师补充完整,然后由学生在实验报告中再用重新组织语言。,实验操作中的一些注意事项,也可以通过提问引起学生注意。,2.1观察微生物细胞时,为什么要对微生物进行染色?革兰氏染色与细菌细胞壁的结构与成分有什么关系?芽胞染色的机理是什么?2.2显微镜油镜为什么能增加照明亮度?为什么能增加分辨率?,2实验原理(通过了解下列问题来掌握实验原理),4.2方法,各管4.5mL无菌水,依次0.5mL,为什么要更换枪尖?何时更换?,10-4、10-5、10-6;各平板取0.1mL,3.2.1制备土壤稀释液,振荡20min,三角烧瓶中为什么要加玻璃珠?,取土壤过程中怎样减少杂菌污染?,4.3以合理的方式表达实验结果,表:牛肉膏蛋白胨培养基的结果观察,用表格表达结果,一目了然。表格的名称如何写?怎样设计表格,数据才清晰?包含哪些对象和项目呢?计量单位如何表达?,绘图表示结果,形象直观。绘图更需要说明。图的位置、大小。关键结构是否正确。,制作曲线图描述实验过程动态变化。学习软件的使用方法,美观表现。,制作工艺流程,需要在现有实验基础上,查阅资料,精心设计。,5结果分析,5.1本次结果表明,大肠杆菌与枯草杆菌通过革兰氏染色均呈现红色,表现为G-。这与文献(教材)描述的情况不符,枯草杆菌应被染成蓝紫色,为G+,可能是在涂片时菌体过厚所至,另外,脱色时较紧张,没有控制时间,可能超过了规定的脱色时间。,B.实验操作中存在什么问题,应该如何改进?,A.根据已有知识或常识,分析实验结果与预期是否相符。,4.4在实验报告中引导学生分析实验结果,肯定学生有创意的想法,5.3本次实验中,采用涂布分离法,所有菌落均在表面生长,同种细菌的菌落特征一致,便于计数,比较适合初学者使作;而稀释倒平板法结果表明,培养基表面的菌落较大且规则,但培养基内部不同深度的菌落则较小,且不规则,不便于进行菌落特征比较。,5.4高压蒸汽灭菌法是微生物学、细胞工程、基因工程、发酵工程等课程及今后实践工作中常用的一种方法。通过本次实验的学习,我了解了卧式、立式及手提式灭菌锅的构造,并掌握了立式灭菌锅的操作过程和安全知识,为今后的学习和工作奠定了基础。,C.比较不同实验方法产生的结果。,D.实验研究对科研和生产的意义,结果分析使学生加强理论联系实际,提高分析问题和解决问题的能力。,4.5培养学生团队协作精神,达到互相促进,共同提高,综合性实验需要分组完成。如何调动每个同学的积极性?,微生物学实验都需要多次观察结果,如何吸引学生到实验室来?,实验是每个同学独立完成的,但实验结果必须综合每个小组成员,5培养学生严谨的科学态度,5.1培养学生正确描述“实验方法”。,5.2及时纠正修改数据、抄袭作业等不良行为。,5.3开放实验室给学生反复练习的机会。,5.4考核要重视过程,重在平时表现。,3.2方法,3.2.1称量。根据培养基的配方配制400mL培养基,用托盘天平按比例称取牛肉膏?g,蛋白胨?g,NaCl?g,.。牛肉膏用玻璃棒挑取,放在培养皿中称
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