豆腐干中的细菌总数与大肠菌群的测定.doc

豆腐干中细菌总数和大肠菌群的测定Detection of bacteria population and coliforms bacteria in dry tofu不标参考文献摘要：我们用国标GB /T4789. 22008和GB /T4789. 32008法分别测定豆腐干中的细菌总数和大肠菌群，用MPN法1报告大肠菌群的最大可能数。结果表明，豆腐干中含有细菌总数为0.33106cfu/mL，含有大肠菌群24000个。Abstract：This experiment used GB /T4789. 2 2003 and GB /T4789. 3 2003 to deal with the detection of bacteria population and coliforms bacteria in dry tofu（Or Dried Bean Curd?）The results indicated that the detected dry tofu contained 0.33106cfu/mL bacteria, and 24000 coliforms. 关键词：豆腐干 细菌总数 大肠菌群 Key words: Dry tofu Bacterial population Coli group1 前言大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一,目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。2 大肠杆菌是革兰氏阴性菌。本实验采用乳糖胆盐发酵液进行初发酵，用EMB培养基培养。大肠杆菌遇伊红美兰呈深紫色且有金属光泽。选取特征菌落，进行革兰氏染色并观察，找出革兰氏阴性菌，进行复发酵，判断该阴性菌是否为大肠杆菌，用九管法查MPN表查出大肠杆菌个数。通过此实验掌握大肠杆菌的检测方法。在我国正全面实施的食品质量安全市场准入制度中,也把菌落总数和大肠菌群(有微生物检验项目)明确列为企业出厂检验项目和有关行政部门监督检验项目,以便监控生产,保障消费,为社会提供安全的食品 3 2 材料与方法2.1 材料（略）2.2 方法国家标准GB /T4789. 3 2003中大肠菌群的检测方法、国家标准GB /T4789. 2 2003中细菌总数检测方法3 结果与分析（表格均为三线表）3.1 食品中细菌菌落的观察3.1.1 结果表头？样品稀释浓度（营养琼脂）10-510-610-7空白（无菌水）空气1号平板0400152号平板000平均0203.1.2 分析通过以上数据可计算出样品的细菌总数约为0.33106个。由上表可见只有10-6浓度的一个培养基长有菌落，其余样品浓度的培养基都没有菌落；这部分实验的大部分培养基都没有长菌落。分析部分？3.2 乳糖胆盐发酵液3.2.1 结果表头？ 稀释浓度试管号10-110-210-3Ck一号有黄色沉淀物质，有较大气泡有黄色沉淀物质，有较大气泡有黄色沉淀物质，有较大气泡没有明显现象二号有黄色沉淀物质，有较大气泡有黄色沉淀物质，有较大气泡有黄色沉淀物质，有较大气泡三号有黄色沉淀物质，有较大气泡有黄色沉淀物质，有较大气泡有黄色沉淀物质，有较大气泡产酸产气试管总数3330以上三线表3.2.2 分析由上表可见，每个稀释浓度都有较多产酸产气的细菌，有可能存在大肠菌群。3.3 EMB培养基的观察3.3.1 结果浓度10-110-210-31培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，菌落表面都比较湿润培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，黑色菌落较10-1少，菌落表面都比较湿润培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，黑色菌落较10-2少，菌落表面都比较湿润2培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，菌落表面都比较湿润培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，黑色菌落较10-1少，菌落表面都比较湿润培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，黑色菌落较10-2少，菌落表面都比较湿润3培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，菌落表面都比较湿润培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，黑色菌落较10-1少，菌落表面都比较湿润培养基上有金属光泽，有黑色特征菌落，也有白色菌落，黑色菌落较10-2少，菌落表面都比较湿润3.3.2 分析在EMB培养基上，有与粉红色颜色相近的白色菌落，培养基中可能存在芽孢菌；培养基上的黑色金属光泽菌落，培养基上可能存在大肠菌群；黑色菌落随浓度的降低减少。3.4 革兰氏染色3.4.1 结果浓度10-110-210-3革兰氏染色结果红色红色红色3.4.2 分析由上表可知，黑色菌落的菌属于革兰氏阴性菌。3.5乳糖发酵液3.5.1 结果 浓度试管号10-110-210-3空白1有气泡有气泡有气泡没明显现象2有气泡有气泡有气泡3有气泡有气泡有气泡总数33303.5.1分析根据上表得出的结果，查大肠菌群最大可能数（MPN）检索表可知，100mL样品液中含有大肠菌群最大可能数为24000个（1100CFU/g或者1100CFU/ml）4 讨论与结论4.1 细菌总数的测定结果4.1.1讨论实验得到的结果存在不合理性，其中只有10-6浓度的一个培养基长有菌落，而样品浓度较其大的10-5也没有菌落，而且7个培养基中只有2个能培养出菌落。此外，后面的其它检验结果表明，样品中是含有大量大肠菌群和其他细菌的。可见，培养基上的菌落数不能反映出样品中的细菌总数。本小组究其原因，可能有以下几个：第一，培养时间不够，本次实验的培养时间只有24小时，而国标要求48小时；第二，调营养琼脂的pH值时没有充分摇匀，导致不同部分的琼脂出现不同的pH值，而在10-6浓度的平板中的琼脂最适合菌落生长；第三，可能是在营养琼脂皿中残留有防腐剂或抗生素，导致细菌无法生长。4.1.2 结论由实验数据计算得到的细菌总数0.33106cfu不具有参考价值。4.2 大肠菌群的测定结果4.2.1讨论本次实验测得100g样品中大肠菌群24000个。与本小组采同一样品稀释液作检验的小组，同样测得100g样品中大肠菌群24000个；与本小组采同一豆腐干，但不同样品稀释液作检验的小组，测得100g样品中大肠菌群150个；同期实验中，测得100g生菜中含大肠菌群235个，100g牛肉中含大肠菌群30个。理论上，大肠菌群的含量应该是，生菜豆腐干牛肉。可见，本小组测得的大肠菌群含量偏高，而其中原因可能有以下几个：第一，采样时，样品没有从多个部分采出，使得样品不具有代表整体的能力，豆腐干中的部分可能含大肠菌群比较高；第二，稀释后没有摇匀，以致其后的稀释得到的样品液浓度偏高