HPV_DNA检测现状及2012最新国际宫颈癌筛查指南.ppt

page0 2010roche hpv dna检测现状及2012最新国际宫颈癌筛查指南 内容 1 hpv介绍2 hpv dna检测产品及各自特点3 2012最新国际宫颈癌筛查指南 hpv介绍 根据感染组织类型分为 皮肤组织粘膜组织 hpv介绍 e 早期基因区编码早期6个蛋白l 晚期基因区编码晚期2个蛋白 感染后的存在状态 状态一 非整合状态状态二 整合到宿主细胞 hpv介绍 hpv dna检测 进口并取得fda注册证 hpvdna检测 国产 hpv dna检测 按不同原理分类 hpvdna检测 qiagenhc2 原理 基于信号放大的酶标板技术的化学发光检测的核酸杂交检测方法 杂交捕获 流程 裂解 杂交 捕获 反应 冲洗 信号收集 判读时间 手工操作3 5小时 仪器操作4 5小时结果 检测13种hpv高危型 不分型主要问题 与个别hpv亚型会发生交叉反应 无内对照 约5 假阳性率 dml2000 hpvdna检测 hologiccervistahrhpv 原理 基于专利invader 酶切信号放大技术流程 磁珠分离核酸提取 酶切信号放大 荧光检测时间 4小时自动化孵育 2小时人工操作 半自动 结果 14种高危型16 31 33 52 58 18 39 45 66 68 51 56 66 不分型主要问题 可能与其它hpv如hpv67和70发生交叉反应 从而产生假阳性结果 hpvdna检测 hologiccervista r hpv16 18 原理 基于专利invader 酶切信号放大技术流程 磁珠分离核酸提取 酶切信号放大 荧光检测时间 4小时自动化孵育 2小时人工操作 半自动 结果 仅对16 18分型主要问题 可与高水平的高危型hpv31发生交叉反应 非常低的hpv感染或样本可能导致假阴性 hpvdna检测 rochepcr 多色荧光探针法 原理 基于pcr反应结合不同荧光染料的探针检测高危型hpv并对16 18分型流程 核酸提取 pcr扩增检测时间 5小时 手工操作时间15分钟 结果 cutoff值 14种高危型 并对16 18分型最新产品 文献见美国athena实验 lancetoncol cobas4800hpv检测系统 gt16 高危型混合 12gt gt18 31 33 35 39 45 51 52 56 58 59 66 68 hpvdna检测 凯普21种人乳头状瘤病毒 hpv 分型检测试剂盒 原理 pcr 基因芯片导流杂交技术流程 核酸提取 pcr扩增 导流杂交 显色时间 3 5 4个小时 手动 结果 21格某格显色即为某hpv亚型阳性 13 5 3 对21种hpv分型 含其它hpv亚型 主要问题 手工操作 易交叉污染 没有经过临床实验 hpvdna检测方法 亚能人乳头瘤病毒基因分型 23型 检测试剂盒 原理 使用自行设计的hpv基因组中的特异性引物 对待测样品中可能存在的hpv基因型进行pcr扩增并进行生物素标记 再将pcr扩增产物与固定在芯片上的23个特异性探针进行特异性的分子杂交 并通过化学显色方式判读结果 pcr 反向点杂交法 流程 核酸提取 pcr扩增 导流杂交 显色结果 膜条显色直接提示感染的hpv亚型 23种亚型 18 5 含其它hpv亚型 主要问题 手工操作 易交叉污染 没有经过临床实验 hpvdna检测 透景luminex 原理 流式荧光技术 pcr产物和微球上交联的探针根据碱基互补配对的原理杂交 加入荧光标记反应 最后在流式荧光检测仪上检测荧光信号 流程 核酸提取 pcr扩增 微球杂交 荧光标记反应 荧光分析结果 26种亚型 19 7 含其它hpv亚型主要问题 没有经过临床实验 hpv dna检测主要产品对比表 2012最新国际宫颈癌筛查指南 2012年刊登在美国癌症学会杂志 acs 和美国阴道镜及宫颈病理学会杂志 asccp 宫颈癌预防及早期诊断指南 2012年 acs asccp ascp最新指南hpv联合细胞学筛查 30 65岁的妇女 pap hpv asc us hpv or lsil nilm hpv repeatco test hpv16orhpv16 18genotyping colposcopy 1year 1year nilm hpv asc us hpv colposcopy 5years 5years saslowd etal amjclinpathol2012 137 516 42 cytologyaloneisnotedasanacceptable butnotpreferred optionforwomen30 65yrsoldevery3years immediately 旧指南与新指南的区别 19 1 asc ustriage 21years 2 adjunctscreening 30years asc us hpvdna colposcopy re screen lbc 1year negativecytology nilm hpvdna hpv16 18 colposcopy re screen lbc1year screen 3year re screen lbc1year re screen lbc 3years acceptableorlbcandhpv 5years preferred re screen 5years co testing 30 65years forwomen 30 65yrs cytologyaloneevery3yearsisnotedasanacceptable butnotpreferred optiononly 联合检测将是未来的筛查方向