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培训目的 熟知微生物检验基础知识 1 1 课程内容 第一单元微生物学基础知识 第三单元培养基及器皿准备 第二单元消毒 灭菌方式 第四单元微生物检验基本方法 2 2 第一单元微生物学基础知识 3 3 生物分类系统 病毒界 原核生物界 真菌界 真核 真核原生界 动物界 植物界 病毒 细菌 酵母菌 霉菌 藻类 原生动物 微生物 微生物并非生物分类学上的名词 所有个体微小的低等生物通称 微生物在生物界地位 4 4 微生物 小 简 低 微生物定义及特点 个体 结构 进化 5 5 微生物定义及特点 微生物 分布广 种类多 代谢强 繁殖快 体积小 面积大 适应强 易变异 6 6 1974年第8版 2000种 1994年第9版4500种 分类单位 界 门 纲 目 科 属 种 伯杰氏细菌鉴定手册 微生物分类 7 7 微生物分类 8 8 细菌 原核生物 呈单细胞无核膜二分裂方式繁殖 9 9 细菌 呼吸类型分 代谢类型分 细胞结构 染色 分 形态分 球状 杆状 螺旋状 自养型 异养型 需氧 厌氧 兼性厌氧 G G 革兰氏染色是鉴别细菌种类的重要方法 细菌分类 10 10 球状 弧形或螺旋形 杆状 细菌形态 11 11 G G 细菌结构 染色 12 12 单个细菌显微镜观察 细菌 菌落 单个细胞繁殖肉眼可见 细菌与菌落 13 13 a 大小 b 形态 c 隆起度 d 菌落边缘 e 表面性状 f 表面光泽 g 颜色透明度 细菌菌落形态 14 14 同种菌落 特征相似生长环境邻近菌落细胞空间位置不同 影响菌落特征的因素 细菌菌落形态 15 15 基本结构 细胞壁 细胞膜 细胞质 核质 特殊结构 荚膜 鞭毛 菌毛 芽孢 细菌结构 16 16 芽孢 原因 条件恶劣营养损失 过程 17 17 一个细菌一个芽孢一个芽孢一个营养体芽孢特点 壁厚密 折光强 不易着色 耐热 耐杀菌剂 不易杀灭 在高酸中不易萌发 芽孢 18 18 小测试 灭菌是否彻底判定标准 化验室灭菌条件 芽孢是否被杀灭 湿热121 20 30分干热160 2小时 19 19 Nt N0 x2n n 繁殖代数t 培养时间N0 细菌起始数Nt 细菌生长t时间后数量 细菌繁殖 个细菌 分钟繁殖 代 小时后有几个 20 20 微生物数量 时间 衰亡期 稳定期 对数生长期 延缓期 细菌生长周期 细菌能否无限繁殖下去 21 21 霉菌 丝状真菌 一般多细胞 由营养体与繁殖体构成 结构 个体形态 22 细胞质 22 无性繁殖 为主 有性繁殖 厚垣孢子 分生孢子 胞囊孢子 接合孢子 子囊孢子 担孢子 TM 00027 36 霉菌繁殖 23 23 霉菌菌落 菌落形态 大 疏松 绒毛状 絮状 蜘蛛网状 初期无色 后期产生孢子有颜色 24 24 个体形态 多数单细胞 卵圆 球形 椭圆形 酵母菌 25 25 有性繁殖 产生子囊和子囊孢子 无性繁殖 为主 酵母菌繁殖 生长周期同细菌 芽殖 普遍 裂殖 26 26 酵母菌菌落 菌落 大而厚 湿润 粘稠 易被挑起 多呈乳白色 少数为红色 如红酵母 27 27 小结 定义 特点 分类 细菌 微生物 形态 结构 繁殖 28 28 因素 营养 温度 pH 渗透压 其他 水份 影响微生物生长繁殖的因素 29 29 营养 30 30 aw 不腐败 霉菌和酵母 球菌 G G 干燥食品 火腿等熟奶酪酱 牛奶 饮料 浓缩奶蕃茄酱 甜炼乳蕃茄酱 水份 aw 0 9 大部分细菌受到抑制霉菌 酵母菌的孢子和芽孢菌强G G c b 31 31 aw 用来衡量有多少水分可以用来生长 水份 32 32 种类最低 最佳 最高 嗜热菌40 4555 7560 90嗜温菌5 1530 4535 47低温菌 5 525 3030 35嗜冷菌 5 512 1515 20 对温度适应能力分 温度 33 33 酸度 pH值 4 6 pH 02467914 原料奶 纯牛奶 细菌 霉菌 酵母 TM 00027 54 PH 4 6高酸产品 PH 4 6低酸产品 酸性乳饮料 34 34 厌氧菌 好氧菌 兼性厌氧菌 微氧菌 气体 35 35 渗透压 等渗压 高渗压 代谢活动正常进行 代谢活动呈抑制状态甚至死亡 低渗压 细胞吸水过分膨大破裂 36 36 回顾 微生物学基本知识 微生物定义 微生物特点 微生物分类 细菌分类 影响微生物生长繁殖因素 37 37 一 二 第二单元消毒 灭菌方式 38 38 消毒 灭菌概念 概念 杀死所有微生物包括芽孢和繁殖体 杀死病原微生物 阻止或抑制微生物生长繁殖 无活的微生物 灭菌 消毒 防腐 无菌 39 39 灭菌和消毒前提条件 清洗干净 消毒 灭菌 清洗 40 40 热力灭菌 41 41 微生物 蛋白变性 代谢故障 死亡 高温 热力灭菌原理 42 42 湿热灭菌优点 水蒸汽穿透力强 蒸汽凝结成水 放出潜热 提高物体温度 湿热灭菌比干热效果好 菌体蛋白质吸收水分易凝固 43 43 化学消毒 44 44 病原微生物 蛋白 酶类 细胞破裂溶解 变性沉淀 系统破坏 破坏细胞膜 杀死 对非病原微生物不能全部杀死 消毒防腐剂作用原理 45 45 紫外线消毒原理 菌体 吸收紫外线 损坏核酸中DNA 致死 空气 紫外线照射 产生臭氧 杀死菌体 46 46 回顾 消毒 灭菌方式 概念 种类 选用 47 47 玻璃器皿清洗 包扎 培养基分类及制备 一 二 第三单元培养基及器皿准备 48 48 新器皿 未污染 已污染 有油圬 用过的载玻片 玻璃器皿清洗 包扎 清洗 包扎 49 49 培养基 化学成分 用途 物理状态 半固体 液体 固体 增殖 鉴别 选择 半合成 合成 天然 基础 加富 厌氧 特殊 培养基分类及制备 50 50 容器选择状态观察pH验证灭菌存放 注意事项 培养基制备 51 51 回顾 玻璃器皿清洗 培养基分类及制备 培养基及器皿准备 52 52 第四单元微生物检验基本方法 53 53 一个亲代细胞一个菌落 检样培养基 接种和培养 接种 纯培养 分离培养 纯培养过程 54 54 获得单个菌落 倾注 涂布 划线 1 斜线法2 曲线法3 方格法4 放射法5 四格法 55 55 染色 制片 镜检 染色方法 单染法 复染法 苯胺黑 美兰染色 革兰氏染色 56 56 染色原理 革兰氏染色 色差增大 轮廓清晰 便于识别 菌体细胞壁结构不同 固定结构 能够着色 不被水冲掉