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第三节动物的克隆 动物细胞的培养和克隆形成 1 离体的动物细胞能否正常的生活 表现出正常的生命活动 只要条件适合就能表现出正常的生命活动 如细胞的分裂 生长等 2 是不是所有的动物细胞都能在离体的情况下表现出生命活动 不是 越是幼嫩的细胞越容易培养并表现出正常的生命活动 因此在细胞培养时一般选择幼嫩的细胞 3 细胞离体培养时 表现出什么样的生命活动 生长 分裂 繁殖 至接触抑制 4 离体的动物组织能否像离体的动物细胞一样表现出体外培养的特征 动物组织在离体的情况下 也能培养并表现出正常的生命活动 但与细胞培养也有不同的地方 在得到离体的组织后 需要机械处理或胰蛋白酶处理得到分散的细胞再进行细胞培养 同时动物组织培养过程中可以伴随组织分化 5 动物组织培养具体是如何实现的 动物组织培养的发展历史 什么是原代培养 什么是传代培养 动物组织培养时 培养细胞能不能无限制地存活下去 阅读教材 1 过程 一 动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织 器官 胰蛋白酶 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬浮液 细胞系 细胞株 细胞增殖 去掉组织间蛋白 动物细胞培养不能最终培养成生物体 原代培养 传代培养 如何界定原代培养和传代培养 细胞株和细胞系 细胞悬浮液 转入特殊培养液中培养 分瓶培养 原代培养 传代培养 细胞系 可传代的细胞 连续细胞系 有限细胞系 二倍体细胞 发生转化的细胞系 遗传物质发生了改变 具不死性 细胞株 从原代培养物或细胞系中获得用单细胞分离培养或通过筛选的方法 由单细胞增殖形成的细胞群 称细胞株 遗传物质未变 5 如何获得纯系的细胞系 采用细胞克隆 什么是克隆培养法 细胞克隆的最基本要求是什么 什么细胞容易进行克隆培养 阅读教材 如何提高细胞克隆形成率 克隆培养法的主要用途是什么 1 过程 物理法 化学法 生物法 灭活仙台病毒 聚乙二醇 电刺激等 二 动物细胞融合 1 过程 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合 形成杂种细胞 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理 化学方法 同左 灭活的病毒 物理 离心 振荡 电刺激 化学 聚乙二醇 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合的比较 1 其由何种细胞产生 2 主要分布在哪里 3 如何得到抗体 三 单克隆抗体 动物细胞融合的重要应用 抗体 1 抗原动物体内 抗原不纯 抗体不纯 2 特异性差 纯度低 产量低 反应不够灵敏 设计方案 一个B淋巴细胞 只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞 能无限增殖 单克隆抗体的优点 化学性质单一特异性灵敏度高 杂种细胞 2 制备过程 1 给小鼠抗原注射的目的是什么 诱导小鼠体内的特异性免疫应答 分化出浆细胞 2 两次筛选的目的相同吗 不同 第一次筛选是为了筛选杂交瘤细胞 第二次筛选是做抗体检验 筛选产生特异性抗体的细胞 3 最后培养有几种方案 两种 体内培养和体外培养 多莉 克隆猴 四 动物的克隆繁殖 1 动物细胞全能性的表现程度 全能干细胞 多能干细胞 单能干细胞2 动物难以克隆繁殖的根本原因 细胞分化使得细胞发生了基因的差异性表达 有的基因开放 有的基因关闭 体细胞基因组中的基因活动很不完全 不能像受精卵那样发挥细胞的全能性 细胞核移植 多莉羊的培育过程 克隆动物的研究意义 1 用于生物学和医学研究的实验动物2 改良动物品种3 治疗人类疾病4 保护濒危动物 6 世界上第一只克隆绵羊 多莉 的培育等程序如图所示 请仔细看图后回答问题 写出 所指的细胞工程各称 实施细胞工程 时 所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是 多莉面部的毛色是 判断依据 继植物组织培养
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