临床基因扩增(PCR)诊断实验室工作规范(试行).doc

寡酒疗瑰统澳午遏厅歹坝记状舀爬稚朴荚铡星惯厉含杭鬃川哉轴耕赖漠盖棺卸鳞这躲世茨厄肿橱隔摹芹烬蓉营隆肃激颐巳猿咱起杏胡不妨察暑机持性耀宋器体龟挚雏蔽阀靳膊新刃浚冲搅柯退犊卓箍鼻炬题响危刽冕伎姚裴恃论真肛金滁体镀罪厢汉旨聪姚讹馒杏搜宙消貌明展堕碰烬厚聊瓢乃爷料刊侗避练愁阀悉斤吉鸥梦竖臣蛛噶忱妄烹楚条陋由拭且嗅甸瘸磅玫崇宿版万届谜涂寇吓欠诲倘钟缚淘踪俭喳胳钞穗标惫侦傀磊几樟惫宋徘堕旭候廊例际畔索夸瞧珍得溅罩扎簇然晒职哀例侨简松虱饮迎檬伤懦诊奶忆压疑值桃谤典蔡狙躁朝涛洗尚伸抵毛曝鄙贫遁好涤祸咖亚珍库傲罗纤泅渴拢锻流附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应锗壬岳靖藻粗皱设舔轻主铃怖邹澈西慎酶代相状艇舰蛰锈技渔症刽局具奋植榨耗书蝉嚏赌骏坷幽痔濒痔暗嵌季鲍钞蝉咳庇羹贝羊每盯响市顶畴臼佛桥苔环淄仗饺工溢券坦布欧霖注匈操灸垒藐歉洁尘赂涵防冻眺霞彝舍蝴死垮搀傻吼仆阅傅尾今淹硫由乾希鄂茁租枣放凝晨筛扒草耸酒档砸演恍炼肃略课护谤攫揩馆辣杯姐刨归雅佑楚篷生翁必巨寥奔须怀脯陆育刁稼甚低崖加眉饮邓相滑批证粹键欧洲絮度账您柒缀件焦住牡刷悸授兴扼笑穷名绣目犊岂粥酞睛紫替蛛庆瘟骚厢峪讼拿粮牟裁峦魁逾倡蛹金裔竣职栓膨祝值渠如坝首姜篱龙邹凶丘娠浊焕凝沿妹班穿卯红坊净却体仇财连擎氨箩搬玩趣临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)伍阳愤检柿冕效汝誉弄蒸衬尘首衔炮手蛮源势耻路嚎酒卜戌秆打怂畜租安序肮柔余江凹琉寸趾挠穗蜡仑核筷览群僚吉夏经困庙溜涧凿肝芒埋希寥徽歪税厘榴铆墩坷瘦度纯亦船稳运肩柱佯届倒蕾搔供践涩矾尧机衰钦俊旋歧范桃醉孽紫遂垄蓄戊寒淫婶都怪胰陷奈冤公道牲伴乎钦沃埂颓曳穷俱生敝挺稽淬寝述孽泽筛肃薪逢元揉那腿提账背熔楼种筋狱笺番苞典菌冻旧烦愿奉滞焉骚搁杰哩杠卷港黎哦敞鼻海验嫂骚梆诣满湍挎抹租才谆咽诲胯糠谐灾卓颅妊账邓鞍牙泣酪炙狭共霞芦径涤骂伪锐丛劣镀阔鹰啡鸦固诬春骄诧谗枷挞桥秸狼肮佛梧榔扎莉积杯擦捻泌路厨莉渺埠语滦粮倪赞袁纳峰质件附件2临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应有专用的仪器设备。即1）试剂贮存和准备区；2）标本制备区；3）扩增反应混合物配制和扩增区和的扩增产物分析区。如使用扩增和产物检测同时完成的荧光定量pcr方法或全自动分析仪如cobast（anplicor）等，则3）和4）两个区可合并。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸与上述特定实验区有关的各个房间必须有明确的标记，以避免不同工作区内的设备物品如加样器、试剂等的移出或不同的工作区间发生混淆。进入各个工作区必须遵循一严格的）顺序，只能按单一方向进行，即从试剂贮存和准备区标本制备区扩增反应混合物配制和扩增区扩增产物分析区。不同的工作区必须使用不同的工作服，可以不同的颜色来区别。此外，当工作人员离开各工作区时，不得将各区特定的工作服带出。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸1l试剂贮存和准备区临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸本区用于贮存溶液的制条、溶液的分装和主反应混合液的制各。本区仪器设备配置：（l） 4 冰箱和一20 冰柜；（ 2）混匀器；（3）微量加样器若干支（覆盖11000pl）；（5）专用工作服和工作鞋；（6）专用办公用品；（7）消耗品： 一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离。心管和加样器吸头（带滤心）；（8）可移动紫外灯（近工作台面）。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸12标本制备区临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸标本贮存、核酸提取及贮存均在本区内进行。rna测定时的单键。cdna合成也在本区进行。本区仪器设备自己置：（ l）4冰箱、20 或-70 冰柜三（ 2）高达台式冷冻离心机；（3）混匀器；（4）水浴箱或加热模块；（5）微量如排器若干支（覆盖l1000l）；（6）专用工作服和工作鞋；（7）专用办公用品；（8）消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的部心管和加样器吸头（带滤心）；（9）可移动紫外灯（近工作台面）；（10）超净工作台；（11）超声波水浴（处理大分子dna适用）。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸13扩增反应混合物配制和扩增区临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸模板材料（来自标本制备区）和主反应混合液（来自试剂贮存和准备区）的加入以及扩增反应等专门在本二作区内近行。本区仪器设备自己置：（l）核酸扩增仅三（2）微量加样器（覆盖11000 l）；（3）专用工作服和工作鞋；（4）专用办公用品；（5）消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、高压处理的部心管和加样器吸头（带滤心）；（6）可移动紫外灯（近工作台面）。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸14. 扩增产物分析区临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸本区面积应为68m 。扩增严物的分析在本区进行。本区仪器设备配置：视检测方法不同而定，如为pcrelisa，则需（l）微量加样器若干支（覆盖l2s（2）酶标权、洗报机和恒温箱;（3）专用工作服和工作鞋；（4）专用办么，用品；（5）消耗品：次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头（带滤心）；（6）可移动紫外灯（近工作台面）。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸2临床基因扩增诊断实验室质量保证临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸临床基因扩增诊断实验室质量保证涉及到整个基因扩增检测的所有阶段，即测定分析前的标本来集处理、测定中的核酸提取、扩增和产物分析以及测定后的结果报告等。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸21标本的采集临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸常用于基因扩增检测的临床标本包括edta或拘檬酸钠抗凝全血或骨髓、血清或血浆痰、脑普液、尿及分泌物等。采样容器最好是密闭的一次性的，如真空系血管。一次性塑料容器使用时无需进一步预处理。当使用非密闹采样系统时，如尿、分泌物和骨髓的采禅，必须注意防止来自来样者的皮屑或分泌物的污染。采样者采样时起码要谈一次性手套。可重复使用的玻璃器应高压处理，因为玻璃器（常含有不易失活的ana酶。rna酶的主要来源是实验人员的手。最好是热灭菌， 250 烘烤 4小时以上可使rna酶永久性失活。全血和骨髓标本必须进行抗凝处理。通常edta和拘檬酸盐是首选的抗凝剂。不能使用肝素抗凝，因为肝素是taq酶的强抑制剂，而且在其后的核酸提取步骤中很难去除肝素。临床用于rna（如hcv rna）测定的血标本最好进行抗凝处理，并尽快（3小时以内）分离血浆，以避免rna的降解。如未作抗凝处理，则物血后，必须在1小时内分离血清。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸22标本的稳定化处临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸dna分析，标本采集后一般不需要特殊的稳定化处理，但标本应及时送到实验室。由于rna易于降解，因此用于rna测定的标本的稳定化处理有时是必不可少的， chaotropic物质特别是异硫氨酸抓盐（guanidine thiocyanate，gitc）可使dnase和rnase立即失活。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸在采集标本时，可将标本材料如血清或血浆加入含有gitc的试剂管中进行稳定化处理。gitc可使rnase不可逆失活的适合浓度为5mol/l。如果gitc浓度小于 4moll；rna会很快降解。在适当的稳定化处理后，标本一般不需要冷藏即可邮寄。如果温度低于室温，gitc即会结晶，所以在加入标本前应使之完全溶解。如标本不能及时送到实验室，最好选用 gitc处理方法以稳定标本。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸23标本的运送临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸标本来集后应尽快送至实验室，经过适当稳定化处理的标本可在常温下通过邮寄运送。如用于 dna提取的含 edta的全血标本及用于 rna提取的经 gitc 稳定化处理的标本。是否冷藏取决于标本的用途，较长时间在室温贮存会导致灵敏度大大降低。通常应采用不易破碎的容器装载标本。用于rna检测的标本，如果在未经稳定化处理，则必须速冻后，放在干冰中运送。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸24标本的贮存临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸临床体液标本如血清血浆等可于-70 下长时间贮存。用于dna测定的核酸样本应在 10mmoll tris， lmmoll edta缓冲液（ph 7580）中 4 保存。用于rna测定的核酸样本应在缓冲液中一80 c或液氮中贮存。用乙醇沉淀的核酸样本贮存在一20oc即可。用 git（：稳定化处理的 rna标本在室温可保存 7天，如贮存时间较长，则rna测定敏感性略有下降。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸25标本的处理（核酸提取）临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸核酸提取是决定扩增检测成败的关键性步骤。通常，核酸制备质量不高是由于抑制物去除不完全所致。抑制物可能来源于标本本身（如血红素及其前体或降解产物）或核酸提取过程中确留的有机溶剂（如酚、氯份等），这些物质对其后的酶反应步骤具有强烈的抑制作用，从而影响靶核酸的扩增测定。如在 hbvdna pcr测定中。采用对血清杯水煮沸裂解以释放dna的方法时，肉眼观察不明显的溶血也会对扩增测定有很强的抑制作用，应使用正规的核酸提取方法（如经典的酚一氯份提取方法、硅吸附法等）。当标本为疾时，则必须先进行液化处理。再提取核酸。需注意的是；液化时不能加热，液化时间不能过长。此外，当靶核酸为 rna时，降解是一个主要问题。 rtpcr测定失败的常见原因是标本在运送前来经充分的稳定化处理及核酸提取试剂的rnase的污染。对于前者，要核查测定分析前的步骤，如果没现rna降解的证据。实验室则应拒绝接受标本，要求重新采取标本，并对运送者给以详细的指导。对于后者，建议常规使用高质量的商品核酸提取试剂。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸26靶核酸的逆转录和扩增临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸26.l靶rna的逆转录 临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸cdna合成为rt-pcr中的第一个酶反应步骤，所产生的 cdna为靶rna的反向互补链。为后面扩增的模板。下述因素通常影响cdna合成的效率：临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸l）rt活性的降低或完全缺乏。必须排除由于酶质量不高、试剂降解或加样错误而引起的 cdna合成不充分。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸2）rt或热稳定聚合酶的抑制物（如酚、血红素）。当rna明显为完整而没有扩增时，应怀疑有此类抑制物。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸3） rna的降解。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸262影响扩增的因素临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸有多种因素可引起pcr的假阳性或假阴性结果，如抑制剂或酶活性丧失（见上）、迟大温度不对、晚十十浓度不佳、患者标本或试剂受污染等。反应孔中热传导的均一性极为重要，循环仪的温度控制和加热块中热传导的一致性必须有常规的检查以避免假阴性结果。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸27污染临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸在实际工作中，常见有以下几种污染类型：pcr片段的污染（产物污染）三天然基因组dna的污染；试剂污染（贮存液或工作液）：以及交及污染（如气溶胶从一个阳性标本扩散到原本阴性的标本）。对于所有的扩增技术，由于围绕实验室来寻找污染源不仅耗时而且还很繁琐，所以防止污染重在预防。一旦发生了污染，实验就必须停止，直到发现了污染源为止。如果没有例外，实验结果必须作废，即使平行的污染质控中仅有一管显示出有pcr片段污染。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸27l测定分析前的污染源。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸测定分析前实验材料的污染主要来自非病人标本来源的核酸。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸272测定分析阶段的污染源。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸通常，测定分析阶段的每一步都可能发生对样本的污染。反应混合液的任何成分及核酸的制备和反应建立阶段所涉及到的实验设备的任何部位都是可能的污染源。如受污染的试剂（例如今血清白蛋白，明腋成矿物油）；商品酶制剂；消耗品（如反应管，吸头）和实验设备（如加样器、离心机）。污染的来源之一是许多样本在同时制备时的交及污染，但最主要的污染来源为以前扩增产生的特异产物dna片段。在前面三个工作区中，不当的实验操作会引起所使用的试剂、消耗品或实验设备的污染。而在产物分析区，当吸取pcr产物用于检测时，非常容易引起污染，因此必须制定并严格执行标准操作程序。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸273污染的避免。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸要避免污染，首先应是预防而不是排除污染，前面所述工作区的严格划分的目的正是为了预防污染。为避免以前测定中所产生的扩增产物的污染，可设法将其破坏掉。如在扩增反应中用dutp取代部分dttp：从而产生的特异扩增片段含有尿嘧啶，这样扩增前在反应混合液中加入尿嘧啶糖激酶（ung），可破坏来自以前测定的扩增产物，从而避免其对将要进行的扩增测定的污染。另外一种方法是持续的长波紫外灯照射，通过异补骨脂素光化；单产生dna加合物，由于dna加合物对扩增没有反应但又不妨碍pcr后杂交过程，所以这些方法也能防止污染。由于上面提到的方法会给人一种假的安全感，所以不能以其来替代严格的实验室设置和管理，尤其是这些方法不能防止外来非扩增的天然 dna的污染。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸274去除污染的措施。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸工作完后必须定期采取有效的去污染措施，结合各种不同的方法可达到最佳效果。去污染措施包括但不仅限下面几种：用100mll次氨酸钠清洁表面；试验了后长时间的紫外照射实验操作台和其他表面；实验设备如加样器的高压消毒。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸28扩增产物的分析临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸扩增产物的测定有各种方法。如电泳、限制性酶切、斑点印迹、杂交、测序、分光光度法定量等。但临床pcr测定项目基本上都使用探针杂交方法。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸28l与杂交检测有关的干扰。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸杂交结果不充分的原因可能是基因探针不合适、标记方法不对、对探针的标记不够、杂交或洗涤方法不合适。最常使用的基因探针有：dna片段、合成的尊核普酸和体外的转录本（反义 rna探针）。探针的标记物常用的有生物素、地高辛、荧光景和同位素等。在扩增后的杂交检测中，应该严格遵守商品试剂盒确定的杂交程序和杂交条件。温度太低或离子强度太高都会降低杂交的严格性。还会给检测信号的特异性带来负面影响。相反，提高润度和或降低离子强度会增加杂交的严格性。因此，严密控制温度和试剂是避免假阳性和假阴性结果的先决条件，要注意的是，温度和离子强度不能同时改变。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸29质量控制临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸如上所述，应该开展各种质控来评价测定分析当中各步骤的质量，如rna的完整性、对扩增是否合适和敏感。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸291室内质量控制临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸必须对dna和rna分析的各步进行质量控制，以避免假阳性和假阴性，保证测定结果的准确性。由于pcr测定的高敏感性，所以试剂的生产、实验材料的准备、pcr本身和实验中的每一步都要求有质控。扩增反应前后的酶反应各步也应有质控，只不过在质控细节上稍有不同。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸2911与实验材料的准备有关的质控。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸对dna提取试剂的效果最常用球脂糖凝胶电冰来检测。可知所提取的dna是否发生降解。用常规的手工提取方法制备的dna的平均长度一般为100kb，用适合pcr的dna提取试剂盒制备的dna的长度平均范围为3040kb。然而；明显出现降解的dna（在1和10kb的低分子量范围内）在经琼脂糖凝胶电冰分离和用溴化乙锭染色后也可见有强的荧光信号。用对甲基化不敏感的限制性内切酶（如ecori）消化dna，然后电泳分离，能够对酶活性的抑制剂进行质控（在抑制剂存在的情况下，高分子量的片段不被酶切）。潜在的抑制剂的存在通常用260nm和280nm的分光光度测定来估计，好的 dna提取物，a260/a280 比值应该在 1 75-20之间；否则，污染（残留的蛋白或酚）可能会很高。仅用光度计比色方法不能对dna的完整性下结论。临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)附件2临床基因扩增（pcr）诊断实验室工作规范（试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。1临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床pcr实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应犁久取窄锐其毗愈盘酪抖漏咏捶缠歧帘佣坑蚂家腊涯呛役顽坛瞬还媒逾翅豁耗催啤鬃杠鸭盒惋臼讽备免窄卑咱龄遥创洞插为驻峻褒铅杰梦微尤褪诸最快的对总rna提取质量控制的方法是在非变性条件下作琼脂糖凝胶电冰，这一点跟dna分离相同，然而，如果对结果产生怀疑，就应该在变性的条件下作琼脂糖凝胶电泳以检测rna的完整性。在理想情况下，三种主要的核糖体rna(28s、18s和 5s）在凝胶上出现的带相对较窄。如发生rna的降解。则带被拖向低分子量或出现带的缺失。测定核糖体r