益生菌 酒精性肝损伤.ppt

益生菌对酒精性肝损伤作用机制研究 益生菌对小鼠实验性肝损伤预防作用的初探 指导教师 教授学生姓名 年级专业 实习地点 目的 方法 结果 结论 探究益生菌类制剂对小鼠实验性肝损害有无预防作用 本实验以小鼠为研究对象 共分三组 并设对照组 先期给予一段时间的益生菌制剂灌胃 而后一次性用四氯化碳和豆油溶液对所有小鼠灌胃染毒 与对照组比较 益生菌制剂组肝损害程度较轻 益生菌制剂对小鼠实验性肝损害有预防作用 摘要 1989年 fuller定义 益生菌是通过改善肠道菌群平平衡而对宿主健康产生有益作用的活菌添加剂 havenaar和huisin tveld于1992年扩展为 通过改善内源性性微生物 对动物或人类施加有益影响的单一或混合的活微生物 欧洲权威机构欧洲食品与饲料菌种协会 effca 于2002年给出最新定义益生菌是活的微生物 摄入充足的数量后 对宿主产生一种或多种特殊且经论证的健康益处 1994年德国会议益生菌是含活菌和 或死菌包括其组分和产物的细菌制品 经口或其其他黏膜途径投放 旨在改善黏膜表面微生物或酶的平衡 或者刺激特异性或非特异性免疫机制 2 扩展 4 至今 3 修订 益生菌定义演变 1 首次定义 前言 nanji等曾给肝病患者肠道引入双歧杆菌 结果发现病人的血氨降低 同时食欲增加 有助于肝病的恢复 华方德等曾应用回春生治疗肝硬化 肝炎 结果证明可有效地改善肝脏蛋白质代谢功能 降低血中的内毒素水平 其疗效优于现有的治疗肝炎 肝硬化药物 李春梅的临床动物实验研究结果也证实 经益生菌制剂治疗后 肠道内致病菌数量减少 双歧杆菌数量增加 提示内毒素血症的好转与肠道内致病菌的增殖受到抑制有关 研究进展 王清图的结果证明经双歧杆菌治疗后 可降低血中内毒素和血氨浓度 这些研究结果均证明益生菌制剂可减轻致病因素对肝脏的损伤 并有效地改善肝脏代谢功能 材料与方法 1 1材料1 1 1动物昆明种健康小白鼠 体重18 20g 内蒙古大学动物饲养中心提供 四氯化碳溶液食用鲁花花生油苦味酸发酵乳乳酸菌发酵剂 活菌粉 生理盐水alt试剂盒ast试剂盒sod试剂盒4 的多聚甲醛70 乙醇80 乙醇95 乙醇无水乙醇二甲苯石蜡pbs伊红苏木精 1 1 2主要药品与试剂 1 1 3主要仪器与设备 灌胃针 1ml 5ml注射器 电子秤 显微镜 包埋机 切片机 高速台式离心机 高速冷冻离心机 电子分析天平 电热恒温水浴锅 低温冰箱 4 20 80 1 2方法1 2 1小鼠分组在内大动物饲养中心取健康小白鼠 雄性20只 雌性20只 分组如下 表1 给药方法如下图 表2 小鼠称重眼眶取血离心解剖取肝脏取脾脏多聚 80 多聚 80 甲醛冰箱甲醛冰箱固定保存固定保存脱水透明脱水透明包埋切片保留待用包埋切片保留待用he染色观察he染色观察 1 2 2小鼠处理 肝脏疾病是影响人类健康的最为常见的疾病之一 各种有害因素导致的肝损伤主要有病毒性肝炎 酒精性肝炎和药物性肝炎等类型 其临床表现为肝坏死 脂肪肝 胆汁淤积 肝纤维化 肝硬化和肝癌等 目前 对肝损伤的治疗仍是一个全球性的严峻课题 ccl4肝损伤模型一直是筛选具有保肝降酶作用药物的常用模型之一 其致病机理如下 讨论 损伤细胞膜结构和功能提高肝脏可溶性酶活性肝脏毒物攻击肝细胞膜ccl4ccl3 活泼 脂质过氧化细胞膜损伤坏死p450激活磷脂分子ca2 激活肝细胞膜上磷酸化酶 抑制内质网钙离子泵 与微粒体 脂质 蛋白质发生共价结合 ccl4致肝损伤机理 在对肝脏发病机制的研究中发现 内毒素是肝病发生 发展和恶化的最重要原因 可以直接或间接地造成肝脏的损害 有的学者认为内毒素是各种原因肝损害的共同物质基础 因此 许多研究者试图通过某些改变或降低内毒素的方法来减轻肝损害 传统常用的药物治疗效果并不十分令人满意 近年有人提出用微生态疗法 即补充益生菌或益生元制剂作为肝病的辅助治疗 益生菌是肠道原籍菌和常驻菌 而内毒素大多由革兰阴性菌即腐败菌或过路菌产生 补充原籍菌从而抑制腐败菌生长是降低内毒素的关键 少数优势种群对整个肠道菌群落起决定性作用 补充优势菌即可抵制劣势菌的生长 补充的优势菌参与机体的防御屏障 其代谢产物乙酸 乳酸能阻止致病菌在肠内的定植 化学屏障 定植于粘膜或皮肤细胞上皮之间的正常菌群形成生物膜样结构 影响过路菌或外袭菌的定植 占位生长和繁殖 生物屏障 免疫 营养及杀菌 利用对人体无毒 无害 无致病的耗氧性微生物 使肠道局部环境的氧分子浓度降低 造成厌氧菌生长的微环境 促进常驻厌菌的生长 最终恢复正常的微生态平衡 生态平衡理论 生物拮抗理论 其他 生物夺氧 作用机制 实验图片 实验图片 小鼠生活照 实验照片 灌胃 实验图片 眼眶取血 杀鼠 实验图片 组织脱水 实验图片 组织透明 实验图片 包埋腊块 参考文献 1 张平 内毒素与肝脏损害 j 国外医学临床生物化学于与检验分册 1990 11 1 13 16 2 王跃 双歧杆菌及其在体内的作用 j 国外医学临床生物化学与检验学分册 1988 9 3 12 15 3 康白 微生态学 m 大连出版社 1988 4 刘丹卓 赵新广 肝损伤的现代医学研究进展与展望2007 29 3 50 51 5 袁铁铮姚斌分子水平上益生菌研究进展2004 24 10 30 33 6 孙延波 等 双歧杆菌对门静脉血内毒素影响的初步研究 j 中国微生态学杂志 1991 3 1 17 19 7 蒋寒青 等 双歧杆菌与乳杆菌对大鼠肠菌群失调的调整作用的初步研究 j 中国微生态学杂志 1995 7 2 32 34 8 nanjiaa khettry u sadrzadehsmh procsocexpbiolmed 1994 205 3 243 247 9 华方德 等 应用微生态制剂对肝硬化各型肝炎治疗效果的观察 j 中国微生态学杂志 1990 2 1 28 30 10 春梅 等 双歧杆菌制剂对肝硬化患者内毒素血征的治疗作用 j 临床消化杂志 1994 6 1 4 11 王清图 等 双歧杆菌制剂对肝硬化病人血氨和内毒素的影响 j 中国微生态学杂志 1996 8 4 29 30 12 王跃 双歧杆菌及其在体内的作用 j 国外医学临床生物化学与检验学分册 1988 9 3 12 15 13 卜淑蕊 朱菊益生菌制剂治疗内毒素肝损害研究进展2001 18 5 301 302 14 李明华 张大伟 楚杰 郝永任 王少杰益生菌的作用及其在食品中的应用2006 8 8 72 74 15 阂钟熳牛天贵岳喜庆益生菌的研究和发展趋势2007 27 1 55 57 16 王军华 权春善 范圣第 益生素制剂菌种的选择研究及其进展 j 微生物学杂志 2005 25 5 95 98 17 刘一尘 张谦 何明清 益生菌剂存在的问题及研究方向 j 饲料广角 2002 21 23 26 18 高山峨 张志强研究和发展益生菌和益生元的前瞻2006 885 88 19 邓娟红益生菌制剂作为药物的探讨2004 16 6 362 363 20 小儿内科2007 39 8 专辑摘编肠道菌群与益生菌 21 刁复强牛胜田发酵奶和益生菌的保健作用1999 26 1 39 41 22 齐艳萍 李和平急性肝损伤动物模型制备的概述2008 38 2 38 39 23 金伟华 王晓蕙 陈华 谭永红人体益生菌药物临床应用新进展2007 16 4 263 268 24 常玉英欧阳钦微生态失衡与炎症性肠病2008 28 1 34 36 25 王道坤微生态制剂的特点及应用200651 52 26 苏世彦益生菌是否是人体所必需145 147 27 陆扬姚文朱伟云益生菌 新型免疫调节剂2005 32 4 144 148 28 张灼阳 刘畅 郭晓奎益生菌的安全性2008 48 2 257 261 29 胡学智益生菌的免疫调节作用20061 3 30 李妍益生菌的筛选及功能特性研究2006 31 余建新韩春茂益生菌的作用机制及临床应用前景2002 14 6 371 372 32 杨明韩真益生茵对炎症性肠病的治疗作用和机制2007 15 14 1634 163 33 张英春益生菌功能特性及共性的研究 34 陈有容郑小平益生菌的健康功效及其应用2001 10 3 269 276 35 孙冬岩潘宝海益生菌和合生素的研究现状及进展200764 66 36 宗莉 杨立明 张传卫 康玉茹益生菌及其细胞组分的免疫调节作用2006 26 2 92 95 37 于恒超 杨晓亮 刘芳娥 刘利兵半枝莲提取物对ccl 4致小鼠肝损伤的保护作用2005 26 10 892 893 38 陈冠敏 黄宗锈 郑丽红 黄佳宁 林蔚不同浓度四氯化碳急性染毒致小鼠肝损伤的实验研究2006 12 3 18 20 39 马永贵 罗桂花 陈志 杨海莲常用小鼠四氯化碳急性肝损伤模型稳定性初探2006 0188 91 40 王震侠 张瑞明单乙基甘氨酰二甲苯胺用于检测肝脏储备功能2004 2 16 153 154 41 卢林耿 王中民 张永祥 朱金胜 尤银珍对四氯化碳所致大鼠肝脏损伤机制的研究1996 6 2 24 2 42 王震侠 张瑞明 欧阳晓晖 蔡继峰大鼠肝脏缺血不同时间再灌注时肝细胞凋亡的动态变化及凋亡相关基因bcl 2的表达2004 4 16 250 252 43 魏来 赵春景番茄红素对急性肝损伤模型大鼠的保护作用200718 4 258 260 44 黄佳宁黄宗锈陈冠敏林健肝舒胶囊对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用研究200624 5 121 123 45 黄志强 肝脏外科学 m 北京 人民军医出版社 1996 85 46 董家鸿 肝外科治疗的现状 j 中华创伤杂志 2000 16 2 71 47 张兴聘 朱建东肝损伤28例诊断与治疗200618 2 39 40 48 舒志俊 等 肝炎 号对四氯化碳所致大白鼠肝脏损伤修复作用的形态学研究 中西医结合杂志 1988 8 7 416 48 石爱荣 等 四氯化碳引起肝硬化过程中肝组织的细胞学和组织学变化 解剖学报 1963 9 1 49 边纶沈新生王燕蓉郭凤英张焱枸杞多糖对四氯化碳所致小鼠肝损伤修复作用的形态学研究199618 4 196 198 50 金政王启伟金美善李相伍蓝靛果对四氯化碳所致小鼠肝损伤修复作用的形态学研究20029 1 46 51 王震侠张瑞明严律南王文涛贾乾斌里多卡因代谢试验在肝损害大鼠肝储备功能评估中的应用200614 6 445 448 52 赵德玉浅析中草药所致肝损害200734 1 87 88 53 刘平 唐志鹏 徐列明 中草药及生物碱引起的肝损害药物与中毒性肝病 m 上海 上海科学技术出版社 2002 500 503 54 周华坚 李韶光 药物性肝损害103例临床分析 j 中国临床药学杂志 2001 10 5 291 55 廖莉琴 试析中药所致药物性肝损害 j 中西医结合肝病杂志 2001 11 1 60 56 周世明 贾杰 中草药致药物性肝病96例临床分析 j 中国热带医学 2004 4 5 765 57 lewisjh drug inducedliverdisease j medclinnortham 2000 84 1275 58 徐列明 对中草药引起肝损害的认识及防治 j 现代医药卫生 2005 23 4 378 59 周世明 贾杰 中草药致药物性肝病96例临床分析 j 中国热带医学 2004 4 5 765 60 张赣生 郑松柏 项丹妮 等 老年人药物性肝损害88例临床分析 j 老年医学与保健 2003 9 2 101 61 刘小丽 刘春霞 刘红军 等 小鼠四氯化碳急性中毒性肝损害模型制备方法探讨 j 新乡医学院学报 2001 18 1 30 31 62 王丙云 陈龙 毛鑫智 等 四氯化碳诱导的肝损伤对大鼠免疫机能的影响 j 中国病理生理杂志 2001 16 7 665 666 63 关英民李景舜赵淑华王春华四氯化碳对雄性小鼠肝损害及睾丸酶的影响200420 12 1464 1465 64 赖力英杨旭许向青蒋永芳童敏四氯化碳诱导大鼠急性肝功能衰竭动物模型的建立200515 11 1655 1657 65 许建明徐叔云张运芳梅俏吴继锋四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的建