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第四章糖代谢紊乱的生物化学检验 广东医学院临床生物化学教研室DepartmentofclinicalbiochemistryOfGuangdongmedicalcollege KEYPOINTS Metabolismofcarbohydratesandregulationofbloodglucoseconcentration ClassificationandpathogenesisofDiabetesMellitus TestsforDiabetesMellitusanddiabeticcomplicationsdiagnosis Principleofmethodformeasuringglucose RoleoftheclinicallaboratoryinDiabetesMellitus DiagnosisofMetabolicSyndrome MajorObjectives 了解低血糖症 先天性糖代谢障碍及其生物化学检验 熟悉糖代谢及血糖浓度的调节机制 糖尿病的主要代谢紊乱及并发症 掌握糖尿病的发病机制与分型 糖尿病及其并发症的生物化学检验 重点糖尿病及其并发症的生物化学检验 代谢综合征的定义 诊断标准及其生物化学检验 难点糖尿病及其并发症的发病机制及生化异常 BriefContents 第一节糖代谢及血糖浓度的调节第二节高血糖症与糖尿病第三节代谢综合征的生物化学检验第四节低血糖症及生物化学检验第五节先天性糖代谢障碍及生物化学检验 第一节糖代谢及血糖浓度的调节 糖的基本知识了解糖的分类 生理功能血糖的来源和去路了解糖的来源和去路血糖浓度的调节掌握血糖的定义和参考值掌握激素对血糖的调节作用 本节主要内容和要求 糖类一类多羟基醛或酮 及其衍生物的总称 分类单糖 丙糖 二羟丙酮 二羟丙醛 戊糖 核糖 脱氧核糖 己糖 葡萄糖 果糖 半乳糖 寡糖 乳糖 麦芽糖 蔗糖 多糖 淀粉 糖原 纤维素等 一 糖代谢概述 糖的重要生理功能 1 氧化供能2 人体的主要组成成分之一糖蛋白 糖脂 蛋白多糖 核糖 转化成脂肪和某些非必需氨基酸等 二 血糖及血糖浓度的调节 一 血糖 参考值 血糖浓度恒定的意义 机体组织尤其是脑 肾 红细胞 视网膜等需不断从血液摄取葡萄糖以氧化供能 血糖含量是表示体内糖代谢情况的一项重要指标 定义 血中的单糖 主要是葡萄糖 称血糖 空腹血糖 3 89mmol L 6 11mmol L 二 血糖浓度的调节 方式 1 器官 肝脏 调节2 激素调节3 神经调节 2 神经系统的调节 部位 下丘脑自主神经 交感和副交感神经 方式 直接作用于肝脏 调节激素的分泌而影响血糖 神经调节器官 肝 肌肉等 激素调节血糖浓度 3 激素调节 调节血糖浓度的激素有两类 降低血糖的激素 胰岛素 insulin 升高血糖的激素 胰高血糖素 肾上腺素 糖皮质激素 生长激素 其他影响糖代谢的激素 甲状腺激素 生长抑素 激素对血糖浓度的调节作用 降糖和升糖激素相互作用 维持血糖恒定 3 1 1胰岛素 insulin INS 1 化学性质 多肽激素 含51个aa残基 mW 5808由A B两条链组成 含两个链间二硫键和一个链内二硫键 不同来源的胰岛素在免疫学和生物学活性上有相似性 3 1降低血糖的激素 2 合成 胰岛 细胞前胰岛素原 preproinsulin 100个aa残基 被酶切去信号肽胰岛素原 proinsulin 86个aa残基 蛋白酶作用切掉4个aa残基胰岛素 C 肽 C peptide 51个aa残基31个aa残基 3 释放 基础胰岛素的分泌速率大约为1U h 每日分泌总量约为40U 葡萄糖 AA 胃肠胰激素 胰高血糖素 迷走神经兴奋和 肾上腺素能激动剂等药物都可刺激胰岛素分泌 高血糖 生长抑素和 肾上腺素能阻断剂等药物抑制胰岛素的释放 第一时相 iv Glu 后1min 2min内产生 历时10min 分泌峰尖而高 代表储存INS 快速释放 第二时相 接第一时相 持续60min 120min 至血糖回复正常 代表INS 合成和持续释放能力 4 降解 肝脏为主 少量经肾降解 生物半寿期为4min 5min 5 作用机制 靶组织 肝脏 骨骼肌和脂肪组织与胰岛素受体的结合 触发细胞内特异性的信号转导 从而产生相应的生物学效应 促进靶细胞摄取葡萄糖 并转换成糖原或脂肪贮存 促进糖氧化分解利用 促进甘油三酯的合成和储存 抑制肝脏的糖原分解和糖异生 6 胰岛素生物活性的强弱取决于 靶细胞上胰岛素受体的绝对或相对数目 到达靶细胞的胰岛素浓度 胰岛素与受体的亲和力 胰岛素与受体结合后细胞内的代谢变化 细胞对胰岛素的敏感性 多肽类激素 结构似胰岛素 有类似于胰岛素的代谢作用和促生长作用 主要分为IGF 和IGF 主要以结合形式存在 3 1 2胰岛素样生长因子 insulin likegrowthfactors IGF 胰高血糖素 glucagons 肾上腺素 epinephrine EP 生长激素 growthhormone 皮质醇 cortisol 3 2升高血糖的激素 3 2 1胰高血糖素 29aa残基 多肽激素 由胰岛 细胞分泌 主要受血糖浓度的调节 低血糖 低AA诱导其释放 作用机制 促进糖原分解 糖异生 脂肪动员 抑制糖原合成和糖氧化 长期DM患者 细胞对低血糖反应性降低 使低血糖发生率增加 3 2 3糖皮质激素和生长激素主要刺激糖异生 3 2 2肾上腺素 EP 胰高血糖素不足时 EP是上调血糖水平的关键激素 主要促进糖原分解 第二节高血糖症与糖尿病 本节主要内容和要求 糖尿病的发病机制和分型 掌握基本概念 高血糖症 DM GDM 和DM分型 1型和2型DM的主要发病机制和特点 糖尿病相关病理状态IFG和IGT的临床意义 熟悉DM的典型临床表现和并发症糖尿病的主要代谢紊乱及并发症熟悉糖尿病及其并发症时机体的代谢变化 掌握糖尿病及其相关病理状态的实验室诊断 高血糖症 hyperglycemia 定义 糖代谢紊乱导致空腹血浆葡萄糖大于6 11mmol L的异常现象 主要表现 1 空腹血糖损害 impairedfastingglucose IFG 2 糖耐量减退 impairedglucosetolerance IGT 3 糖尿病 IFG 基础状态下糖代谢稳态的轻度异常 IGT 糖负荷状态下机体对葡萄糖处理能力的减弱 定义 由胰岛素绝对不足 分泌不足 和 或相对缺乏 作用低下 引起的以高血糖为主要特征 伴脂类 蛋白质代谢紊乱和水 电解质 酸碱平衡紊乱的综合征 一 糖尿病的发病机制与分型糖尿病 diabetesmellitus DM 糖尿病的分类标准 病因学分类 WHO 2001年 1型糖尿病 type1diabetesmellitus 免疫介导特发性2型糖尿病 type2diabetesmellitus 其他特殊类型的糖尿病 otherspecifictypesofdiabetes 妊娠糖尿病 gestationaldiabetesmellitus GDM 其他特殊类型的糖尿病 胰岛 细胞功能的遗传性缺陷 MODY 胰岛素作用遗传性缺陷胰腺外分泌性疾病内分泌疾病药物或化学品诱导糖尿病感染罕见的免疫介导性糖尿病其他遗传综合症 三 各型糖尿病的发病机制和主要特点1 1型糖尿病 1 免疫介导糖尿病 胰岛素绝对不足 发病机理 主要是胰岛 细胞的破坏包括病因不明但是自身免疫机制引起的 细胞破坏 与遗传因素 环境因素和免疫机制有关 自身免疫标志 主要的自身抗体a 抗胰岛细胞胞质抗体 isletcellcytoplasmicantibodies ICA 70 80 病人检出 正常人 0 5 b 抗胰岛素自身抗体 insulinautoantibodies IAA 50 病人检出 正常人 0 5 c 抗谷氨酸脱羧酶自身抗体发病前10年检出 辅助诊断2型发展为1型 d 胰岛瘤相关抗原IA 2和IA 2 遗传易感性 1型DM易感基因认为是位于第6号染色体HLA D位点及其附近 HLA D型 HLA DR3 HLA DR4 HLA DQ多基因遗传 环境因素 病毒感染的机制 直接损伤胰岛组织诱发自身免疫反应其他环境因素 如特殊化学物质 生活方式 精神应激以及营养成分改变均可激活胰岛自身免疫反应 促发糖尿病 病毒感染是最重要的环境因素之一与1型糖尿病发病有关的病毒 免疫介导糖尿病特点 典型病例见于儿童和青少年 起病较急 有 细胞自身免疫损伤 多检出自身抗体血浆胰岛素及C肽含量低 糖耐量曲线低平 治疗依赖胰岛素 有酮症酸中毒倾向 遗传因素在发病中起重要作用 与HLA某些基因型有很强关联 2 特发性1型糖尿病 显著特点 具有很强的遗传性见于非洲及亚洲人明显的胰岛素缺乏容易发生酮症缺乏胰岛 细胞抗体无HLA基因型相关特点 2 2型糖尿病 主要发病机制胰岛素抵抗 insulinresistance IR 和胰岛 细胞的功能减退 IR 靶细胞对胰岛素不敏感 病因多为靶细胞膜上胰岛素受体缺陷 表现为早期胰岛素相对不足和后期伴胰岛素绝对不足 遗传易感性 遗传易感性更强 但与HLA基因型无关单卵双生子中的一人在50岁以后出现糖尿病 另一个人在几年后发生糖尿病的百分率达50 90 且大多数为2型糖尿病 有关机制的研究有待进一步阐明 环境因素 年龄肥胖 重要 慢性炎症缺乏体育锻炼妊娠期糖尿病史高血压血脂紊乱 2型糖尿病的发生与下列环境因素有关 2型糖尿病特点 典型病例常见于肥胖的中老年成人 起病慢 并发症的风险 血浆胰岛素水平正常或稍高 胰岛 细胞负荷较重 糖剌激后延迟释放 自身抗体呈阴性 单用口服降糖药一般可控制血糖 自发性酮症酸中毒少见 可发生应激性酮症酸中毒 有遗传倾向 但与HLA基因型无关 特征1型2型基本病因发病机制占DM 发病年龄身体肥胖起病特点胰岛病理胰岛素和C肽酮症胰岛素治疗 1型和2型糖尿病的特征 特征1型2型基本病因遗传 环境发病机制自身免疫性疾病生物活性降低占DM 5 10 90 95 可发展为1型 发病年龄常 30岁 40岁身体肥胖罕见多见 80 起病急 症状明显较缓 可长时间无症状胰岛病理有胰岛 细胞破坏无胰岛素和C肽 绝对不足 或 相对不足 酮症常见少见 可与感染时发生胰岛素治疗必需饮食 减肥和口服降糖药必要时应用胰岛素 1型和2型糖尿病的特征 3 其他特殊类型的糖尿病 胰岛 细胞功能的遗传性缺陷Maturityonsetdiabetesoftheyoung MODY 青年人成年发病型糖尿病 临床特征与2型糖尿病相同 发病年龄早 一般在25岁以前 常染色体显性遗传 单基因遗传突变糖尿病 其突变基因具有遗传异质性 单基因突变糖尿病 胰岛素基因突变糖尿病胰岛素受体基因突变糖尿病葡萄糖激酶基因突变糖尿病线粒体基因突变糖尿病 定义 妊娠期间 任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作 不包括已确知的糖尿病伴妊娠者 分娩6周后复查血糖并根据DM的诊断标准重新确定 1 DM 2 空腹血糖损害 IFG 3 糖耐量减退 IGT 4 正常血糖 4 妊娠糖尿病 gestationaldiabetesmellitus GDM 糖代谢紊乱 高血糖 糖尿 多尿 脂类代谢障碍 高脂血症 蛋白质代谢障碍 体重减轻 生长迟缓 水 电解质 酸碱平衡紊乱 水盐丢失 酮症酸中毒 高渗透压 乳酸血症 一 DM的主要代谢紊乱 二 糖尿病的主要代谢紊乱及并发症 二 糖尿病的常见并发症 急性并发症常见类型 1 糖尿病酮症酸中毒昏迷 ketoacidosisdiabeticcoma DKA 2 糖尿病非酮症高渗性昏迷 hyperosmolarnonketoticdiabeticcoma 3 糖尿病乳酸酸中毒昏迷 lactateacidosisdiabeticcoma 1 糖尿病酮症酸中毒昏迷 多见于1型DM 可伴应激时发生 诱发因素 感染 手术 外伤和各种拮抗INS 的激素分泌增多 可致酮症 酮血症酮尿症可致酮症酸中毒 2 糖尿病非酮症高渗性昏迷 部分病人无昏迷而仅表现为较轻的中枢神经功能障碍 故目前称糖尿病非酮症性高渗状态 基本特点 严重高血糖 可达33 33mmol L高渗透压状态 320mOsm L 正常为280mosm L 300mosm L脱水 无明显酮症 慢性并发症 机制 蛋白质非酶促糖基化作用糖基化蛋白质和未糖化分子交联 形成大分子的糖化产物 多发生于半寿期较长的蛋白质分子 胶原蛋白 晶体蛋白 髓鞘蛋白等 血管基底膜增厚 晶状体混浊 神经病变等 大血管病变 AS 高血压 微小血管病变 眼 肾脏 及神经组织等 糖尿病足 三 糖尿病及其相关病理状态的诊断 1 掌握糖尿病的诊断标准 2001年 2 FPG fastingplasmaglucose 定义3 掌握WHO推荐的葡萄糖耐量试验 glucosetolerancetest GTT 曲线的制作 特点和意义 4 熟悉GDM的诊断标准 一 糖尿病及其相关病理状态的诊断 1 DM的诊断标准 2001年 表4 3 1 糖尿病典型症状 随机血糖 11 1mmol L 2 FPG 7 0mmol L 3 OGTT2hr PG 11 1mmol L以上3项均可单独用来诊断DM 但不论用哪一种都须在另一天 采用静脉血 以三种指标中的任何一种进行确诊 以上诊断标准适用于所有人群 但低于上述标准并不能排除糖尿病 如GDM的筛查和诊断 2 GDM的筛查与诊断 筛查对所有24孕周 28孕周 具中高危GDM倾向的妊娠妇女进行筛查 空腹条件下 口服50g葡萄糖 测定1hr PG 若1hr PG 7 8mmol L 则需进行葡萄糖耐量试验 GDM的诊断标准 2001年 表4 4 100g葡萄糖负荷试验FPG浓度 5 3mmol L 1hr血糖浓度 10 0mmol L 2hr血糖浓度 8 6mmol L 3hr血糖浓度 7 8mmol L 75g葡萄糖负荷试验FPG浓度 5 3mmol L1hr血糖浓度 10 0mmol L2hr血糖浓度 8 6mmol LGDM的诊断标准仅限于妊娠期间 且至少要满足2项指标才能诊断 3 相关病理状态的诊断标准 表4 5 空腹血糖损伤 IFG FPG在6 1mmol L 7 0mmol L 2003年ADA推荐 FPG在5 6mmol L 7 0mmol L 糖耐量减退 IGT FPG 7 0mmol L并且OGTT2h PG在7 8mmol L 11 1mmol L 二 空腹血糖 fastingplasmaglucose FPG 定义 至少8hr内不摄入含热量食物后 测定血浆葡萄糖浓度 DM最常用的检测项目FPG不止1次 7 0mmol L可诊断为DM2型DM高血糖出现较晚 仅用FPG标准将延误诊断 并对糖尿病人群的流行估计过低 表4 6 建议进行OGTT或FPG筛查的人群 三 口服葡萄糖耐量试验 oralglucosetolerancetest OGTT WHO推荐的OGTT 掌握 口服一定量葡萄糖后2hr 隔30min取样一次 共4次 必要时达5hr 作系列血糖浓度测定 同时 每隔1hr留取尿液测尿糖 非妊娠成人 推荐葡萄糖负载量75g 小孩按1 75g kg体重计算 总量 75g 用300mL水溶解后5min内口服 不同时间作2次OGTT以作判断 OGTT病人准备 试验前3d 日摄食糖量 150g 3d前停药 包括升降血糖的药物 受试前应空腹10hr 16hr 试验前 中 病人精神和身体处于休息状态 试验期禁食和刺激物 OGTT适应症 诊断GDM 诊断IGT 人群筛查 无法解释的肾病 神经病变或视网膜病变 其随机血糖 7 8mmol L者 OGTT FPG 协助诊断糖尿病及其相关病理状态 表4 7OGTT结合FPG对糖尿病及其相关病理状态的诊断 FPGOGTT 2h PG 诊断结果 6 11mmol L 7 8mmol L正常糖耐量 7 0mmol L7 8 11 1mmol LIGT6 1 7 0mmol L 7 8mmol LIFG 7 0mmol L 11 1mmol LDM性糖耐量 四 静脉葡萄糖耐量试验 intravenousglucosetolerancetest IGTT 适应症与OGTT相同 对某些不宜作OGTT的患者 如不能承受大剂量口服葡萄糖 胃切除后及其他可致口服葡萄糖吸收不良的患者 四 糖尿病及其并发症的生物化学检验 主要内容 一 葡萄糖的检测尿糖 血糖 二 糖化蛋白的检测糖化血红蛋白 果糖胺 三 相关代谢紊乱产物的检测酮体 乳酸 丙酮酸 四 血糖调节物的检测胰岛素及其抗体 胰岛素原 C肽 五 微血管病变的检测尿清蛋白排泄率 六 其他生化检测项目胰淀粉样肽 瘦素 血脂 测定方法分类 按标本类型分类 血糖 尿糖 脑脊液糖等按糖的类型分类 葡萄糖 果糖和其他糖等按测定原理分类 定性 定量 化学法 酶法等 一 葡萄糖测定 各种体液标本均可用于葡萄糖检测 但糖尿病的临床诊断应以血糖标本为准 标本采集 采血时间采血方法标本类型抗凝剂 1 血糖测定 采血时间 空腹 FPG测定 进食1hr随机 餐后的任一时间 服糖5hr内 糖耐量试验 出现低血糖症状时 采血方法 动脉血糖 推荐 不易误诊 毛细血管血糖 浓度 动脉血糖 静脉血糖 较动脉血糖低 空腹 0 1mmol L 0 2mmol L 一般情况 0 5mmol L 1 0mmol L 高糖饮食 3mmol L 标本类型 血浆血清全血脑脊液 可能会含细菌或其他细胞 因此应立即进行测定 否则标本离心后应冷藏于4 或 20 尿标本 易污染 其容器应在24hr尿液收集前加入5ml冰醋酸或5g苯甲酸钾 并应4 贮存 使用不同的标本应采用不同的参考值 抗凝剂 草酸钾和氟化钠2mg ml 3d内可阻止糖酵解 注意 氟离子抑制脲酶活性 因而标本不适宜脲酶法测定尿素 草酸钾会使细胞水分外渗而使血浆稀释 带分离胶真空管 可分离血浆和血细胞 测定方法 无机化学法 氧化还原法试剂价廉 但操作复杂 需制备滤液 特异性差 干扰较大 属不理想方法 有机化学法 缩合法 O T法 生物化学法 酶法己糖激酶法 参考方法具高度特异性 方法灵敏 准确 干扰因素少 昂贵 葡萄糖氧化酶法 常规方法 1 己糖激酶法 HKmethod NADPH在340nm波长处有最大吸收峰 根据NADPH的生成量与标本中葡萄糖含量成正比而定量 原理 方法学评价 葡萄糖测定的参考方法 适用于血清 尿液 脑脊液测定 操作简便 准确度和精密度高 特异性强 干扰少 适用于手工 自动化分析 轻度溶血 脂血 黄疸 氟化钠 肝素 EDTA和草酸盐等对本法无干扰 2 葡萄糖氧化酶 过氧化物酶法GOD PODMethod 原理 Trinder反应 GOD glucoseoxidase 高特异性催化 D 葡萄糖 构型需变旋酶作用 方法学评价 准确度和精密度达到临床要求 操作简便血糖测定的常规方法适于脑脊液标本尿标本需预处理后可用此法测定可制试纸片筛选试验 3 葡萄糖氧化酶 极谱分析法GOD POD的改良方法 以氧电极进行极谱分析 直接测定GOD法第一步反应消耗的氧来进行定量 结合过氧化氢酶的使用 能有效防止H2O2转变为O2而影响测定结果 可用于血浆 血清 脑脊液及尿液标本的测定 由于血细胞会消耗氧气 故不能用于全血标本 4 葡萄糖脱氢酶法葡萄糖脱氢酶 glucosedehydrogenase GD 该法高度特异 含变旋酶 不受各种抗凝剂和血浆中其他物质的干扰 非侵入性糖尿病筛查仪ScoutDS 通过光来检测患者皮肤里 不论何种肤色 的糖尿病相关生物标记物 晚期糖化终产物 AGEs 的 一分钟实验糖尿病筛查系统 不需要空腹或者采血 对于ScoutDS检测阳性的患者 要确诊还需要进行一项其他的测试 推荐的测试为OGTT 2 尿葡萄糖测定 正常排出量 0 5g 24hr 常规检测 肾糖阈值降低 妊娠妇女 暂时性糖尿 肾糖阈值增高 长期患糖尿病的患者 快速 廉价和无创伤性 主要用于糖尿病初步筛查和疗效观察而不作为诊断指标 早期用氧化还原法 班氏试剂法 目前已被半定量或定量的特异性方法代替 GOD试纸法 糖化蛋白生成量取决于血糖浓度和作用时间 与血糖浓度成正比 醛糖氨基酸 NH2 主要是Hb和Alb 希夫氏碱重排酮胺 二 糖化蛋白 glycatedprotein 测定 测定种类 糖化血红蛋白和果糖胺临床意义 评估血糖控制效果和追踪病情发展 用于血糖和尿糖波动较大的患者 糖化蛋白测定方法 比色法电泳法离子交换层析法 常规方法亲和层析法 常规方法高效液相层析法 参考方法等电聚焦法毛细管电泳法免疫化学法等 测定方法 1 糖化血红蛋白 glycatedhemoglobins GHb Hb由HbA 97 HbA2 2 5 和HbF 0 5 组成 HbA GHb 约占80 GHb反映测定日前6周 8周的平均血糖浓度 反映较远期血糖水平和疗效 主要用于评估血糖控制效果 GHb浓度与RBC寿命和该时期内血糖的平均浓度有关 不受每天葡萄糖波动的影响 也不受运动或食物的影响 影响因素 RBC寿命 失血 离子交换层析法分离测定GHb 细胞溶解 离心取上清液 用弱酸性阳离子交换树脂或带负电荷的羧甲基纤维素进行离子交换层析HbA带正电荷 而糖化HbA1仅带少量正电荷 首先被洗脱 测洗脱液A410nm计算糖化HbA1占总Hb的百分比 原理 2 果糖胺 fructosamine FA 葡萄糖与血红蛋白以外的其他蛋白 主要是Alb 结合形成酮胺即果糖胺 主要是测定糖化清蛋白 反映近2周 3周血糖水平和近期疗效 与GHb联用 对血糖进行检测 GDM或治疗方法改变者更为适用 果糖胺法测定糖化清蛋白 在碱性溶液中 酮胺结构与硝基四唑氮蓝 NBT 发生还原反应 产生紫红色化合物 其生成量与血糖浓度呈正比 原理 正常参考值 P64 简便快速 精密度较高 可用于自动化仪器分析 红细胞寿命和Hb变异体不影响果糖胺结果受清蛋白浓度和半衰期 血浆总蛋白浓度影响 中度溶血 胆红素和VitC会干扰测定 方法学评价 3 晚期糖化终末产物 advancedglycationendproduction AGE 比GHb更长期的糖尿病控制指标 早期糖化产物经一系列分子重排 脱氢和断裂反应 产生不可逆的晚期糖化终末产物 促进微血管病变和大血管并发症的产生 检测方法 相对荧光法 放射受体法 竞争性ELISA法 糖尿病诱发体内多种物质代谢紊乱 酮体 乳酸及丙酮酸的检测有利于糖尿病及其并发症的鉴别诊断 病程监控和指导临床对症治疗 三 相关代谢紊乱产物的测定 1 酮体的检测酮体由乙酰乙酸 羟丁酸和丙酮组成 健康人 羟丁酸和乙酰乙酸为主 摩尔比约为1 1 丙酮是次要成分 严重DM 羟丁酸 丙酮增至6 1 形成酮症 多数试验仅检测乙酰乙酸和丙酮 而不与 羟丁酸反应 导致检测结果与病情不符 临床意义 指导胰岛素治疗 检测方法 酮体检查片法 Acetest 尿中酮体检查剂法 Ketostix 和Gerhardt s氯化铁试验 均不能检测酮体中的 羟丁酸 羟丁酸的测定原理如下 2 乳酸和丙酮酸监测 自学提纲 乳酸浓度 5mmol L及pH 7 25时提示有明显的乳酸中毒 正常人乳酸 丙酮酸为10 1乳酸 丙酮酸增加见于先天性丙酮酸羧化酶缺陷和氧化磷酸化酶缺陷 乳酸 丙酮酸 25提示糖异生缺陷 乳酸 丙酮酸 35时提示细胞内缺氧 1 乳酸的测定 乳酸脱氢酶法 lactatedehydrogenase LD 以全血为标本 测定原理如下 在340nm波长测定NADH 定量乳酸浓度 特异性高 操作简便 是首选方法 标本采集 保持空腹和完全静息至少2hr 采血时避免手臂活动 静脉采血不用压脉带 血浆标本需加糖酵解抑制剂NaF和草酸钾 2 丙酮酸的测定全血丙酮酸的测定原理如下 pH7 5的溶液中 丙酮酸在乳酸脱氢酶和NADH作用下 生成乳酸和NAD 从NADH吸光度的下降可定量样品中的丙酮酸 四 血糖调节物的检测 有利于糖尿病及其并发症的病因学检测和临床疑似病例的早期诊断 1 胰岛素的检测聚乙二醇 PEG 沉淀内源性抗体 胰岛素 再测定游离胰岛素 盐酸洗脱抗体结合的胰岛素 PEG沉淀抗体 可测定总胰岛素 目前还无高度精确 准确和可靠的方法 可用放射免疫分析 RIA ELISA 化学发光法 1 胰岛素和胰岛素抗体的测定 葡萄糖刺激胰岛素分泌的动态试验有利于糖尿病类型鉴别 见图4 5 2 胰岛素抗体的检测 自学提纲 几乎所有使用动物胰岛素的糖尿病患者都产生胰岛素抗体可对抗胰岛素的作用 不仅使胰岛素的使用剂量增加 也干扰了胰岛素的免疫学检测 可用于指导胰岛素治疗 2 胰岛素原的检测要准确测定胰岛素原的浓度仍然比较困难 血浆中胰岛素原浓度低 不易获得纯品 抗体制备困难 多数抗血清与胰岛素和C 肽有交叉反应 两者浓度都较胰岛素原高许多 胰岛素原转化中间体的干扰 见图4 6 不易获到胰岛素原参考制品 3 C 肽的检测C 肽虽无生物学活性 但对于保证胰岛素的正常结构是必需的 与外周血胰岛素浓度相比 可更好地反映 细胞功能 4 胰高血糖素的检测 自学提纲 免疫法检测协诊胰腺 细胞瘤 胰高血糖素瘤 慢性胰腺炎等疾病 五 微血管病变的检测 糖尿病性肾病变的早期检测 尿清蛋白排泄试验 urinaryalbuminexcretion UAE UAE率持续 20 g min 发展为明显肾疾病的危险 对预报DM患者发生DM肾病 终末期肾病有很大价值 1 胰淀粉样肽 amylin 2 瘦素 leptin 3 血脂 六 其他生物化学检测项目自学 五 实验室检测项目在糖尿病及其并发症诊治中的实际应用自学 第三节代谢综合征的生物化学检验 代谢综合征 metabolicsyndrome MS 又称X综合征 胰岛素抵抗综合征 腹型肥胖综合征 代谢障碍综合征和致死性四重奏等 一 发病机制与危险因素 发病机制 遗传因素 胰岛素抵抗 慢性炎症 促血栓形成和纤溶作用下降等 目前认为MS患病率的增长与现代生活习惯 如长期静坐办公缺乏锻炼 高热量摄入和单一碳水化合物膳食有关 二 诊断标准与生物化学检验 1988年Reaven首先提出X综合征的概念 1998年WHO正式将其命名为代谢综合征 诊断标准 不尽统一腹型肥胖的相关指标血脂异常的相关指标高血压相关指标胰岛素抵抗相关指标其他指标 第四节低血糖症 hypoglycemia 低血糖症 hypoglycemia 低血糖判断标准 FPG 2 8mmol L 定义 血糖浓度低于空腹血糖参考水平下限 临床出现一系列因血糖降低引起的症侯群 低血糖时的主要症状 是交感神经兴奋和脑缺血的症状战栗 多汗 恶心 脉博快 轻度头痛 饥饿和上腹不适 但均是非