新生儿代谢病筛查滤纸干血斑标本采集技术和传递常规.doc

新生儿代谢病筛查滤纸干血斑标本采集技术和传递常规 梅州市新生儿疾病筛查中心一、滤纸干血斑标本滤纸干血斑标本（dried blood spots （DBS）on filter paper）是将采集的新生儿血样滴在筛查专用滤纸上而制成的圆形均匀斑状血样，一般用于新生儿疾病筛查实验检测。新生儿干血斑标本采集是新生儿疾病筛查整个过程中最首要、并且是十分关键的环节，滤纸血斑标本质量直接影响实验室检测结果，由于标本质量问题导致的假阴性可引起筛查漏诊，或假阳性过高也给新生儿及其监护人造成不必要的复查和精神负担。新生儿查筛滤纸干血斑标本一般由产科医院婴儿室的医务人员负责，采血人员必须经过专项技术培训后上岗，严格按照采血常规和管理规范进行采血，保证质量。二、采血时间新生儿干血斑标本的采集时间一般依据筛查指标的体内变化规律而决定。我国目前新生儿疾病筛查项目为先天性甲状腺功能低下（CH）和苯丙酮尿症（PKU）；广东省增加G6PD缺乏症，三个项目的筛查指标分别为促甲状腺素（TSH）水平，苯丙氨酸（Phe）浓度和G6PD活性。胎儿体内Phe通过自身肝细胞和母体肝细胞Phe羟化酶的作用而正常代谢，保持血Phe浓度于正常水平，故PKU胎儿体内Phe浓度亦能保持正常水平。PKU患儿出生后经过哺乳摄入蛋白质，由于新生儿肝细胞Phe羟化酶缺陷而Phe不能正常代谢，血Phe浓度将逐渐升高。新生儿出生后由于寒冷刺激及环境的改变，体内TSH呈生理性反应性增高，一般于48小时后回落至与机体病理生理状况一致的真值（true value）水平。G6PD活性一般不受生后日龄等因素的影响。由此可见，新生儿干血斑标本应于新生儿充分哺乳和出生48小时后采集，最佳采血时间为出生72小时（或生后3天），喂奶8次以上。在某些情况下，新生儿可能不能按时采到血样，如新生儿生后出院过早；新生儿因特殊病情需转院诊治；新生儿因出生体重过低、病重、输血或血浆等未符合采血条件者。应在条件满足时尽早采血，最迟不超过生后20天。三、材料和用具1载血滤纸（采血卡） 通常使用物理性状符合美国检测和材料学会（ASTM）标准的型号为S&S903的专用滤纸。国内常将载血滤纸片粘贴在填写新生儿信息的信息卡上，做成大小适中的采血卡。信息卡上应有如下项目可供填写：(1) 母亲姓名（或新生儿姓名）；(2) 出生日期 ；(3) 出生体重；(4) 性别； (5) 喂奶状况;(6) 标本采集日期; (7) 提供血样的单位和地址; (8) 家长住址电话号码；(9) 采血者签名。(10)实验室地址。 2采血针 一次性使用的消过毒的针刺针，针头长度不得超过2mm。限制针头长度目的是避免进针采血时伤及新生儿骨质，对于早产儿、低出生体重儿尤其重要。不推荐毛细管和注射器取血。3消毒用品 用于穿刺部位消毒的75%酒精。消毒干棉球或棉签。无菌手套（无滑石粉）。4热水袋或热敷用毛巾，用于改善采血部位局部微循环。5采血卡支架 用于水平放置采集好血斑的标本。四、采血方法和步骤1填写采血卡和登记采血个案 必须将新生儿及采血信息完整而准确地填在采血卡上，特别是所提供的联系地址和电话必须是有效的。凡采血筛查个案,均须按要求在新生儿代谢病筛查采血登记本登记。2选择穿刺部位 足跟内、外侧缘是最佳的采血部位(图1足跟涂黑部分)，因为该部位血运丰富、皮肤组织较厚、损伤最小，并且容易固定便于取血。内侧缘外侧缘图1.足跟采血部位示意图如下部位不能用于筛查采血：足跟后缘和中心部；足弓；肿胀或水肿部位；手指。在足弓、足跟后缘和中心部采血，容易伤及神经、肌健、韧带和软骨。由于新生儿手指末端皮肤至指骨距离仅1.22.2mm,故手指采血易导致局部感染、指骨坏死。3针刺部位消毒 在准备消毒针刺前,首先须核对采血卡与被采血者姓名是否一致。其次应检查一下新生儿足部是否清洁干净和足够温暖，如局部血循环不够好，可用40-42手巾热敷15分钟，可改善得循环。新生儿取头高脚低位，可使足部静脉压增高，利于取血。用75%酒精棉球或棉签消毒针刺部位，略待数秒后自然干燥，即可操作。 4针刺取血 用采血针在足跟采血部位刺一下,进针约2mm,早产儿进针深度可再浅些。在针刺点周围适当施压，血液即自行流出。使用的针头过粗时，针刺后局部易出现缺血苍白区，提示发生了微小动脉痉挛，此时应略等待十数秒钟，微小动脉痉挛自然解除，缺血区恢复。先行流出的少许血滴往往含有组成碎片，应用棉签拭去。随后血液继续流出，待血滴足够大时，手持采血卡以载血滤纸的一面轻触血滴，血滴即被吸入滤纸并滲透至背面，形成直径约10mm的圆形血斑，依法施之，至少留取三个血斑(图2)。用无菌纱布或棉球轻压针眼止血。应用采血卡支架，水平摆放采血卡，使血斑悬空3小时晾干。晾干后随即寄出或用塑料袋密封存放于28冰箱,按常规寄送至实验室.质量合格的血斑标本应是血斑直径足够大（8mm以上）、血样均匀、透过滤纸背面。顺利采到合格血斑标本的条件可能有：新生儿身体状况良好，无饥饿、低体温、低血糖、低血容量等；局部血运良好；采血技术熟练。各采血单位应建立制度，对所采集的标本进行质控。图2. 合格的滤纸血斑五、注意事项1 按无菌操作常规进行采血操作；2 消毒酒精未干不要进针采血；3 采血时避免过度挤压造成血液被组织液稀释，同一滤纸部位不得重复滴血和两面滴血，已凝固的血样不能用于制备血斑标本；4 不在有油漆气味的环境进行采血操作和晾放血斑标本，血斑标本应避免晾置过久、日晒、紫外线照射、福尔马林气味熏染、接触异物污染等，血斑标本之间避免因互相接触而污染；5 预防血源性污染和感染性疾病，所有血样标本不能直接接触工作台面等环境，母亲患有肝炎、梅毒、爱滋病者，其新生儿血斑标本应单独晾干、用红色笔墨醒目标记疾病名称、单独塑料袋密封包装，非典型肺炎母亲所生新生儿应先行防治、暂缓采血。六、滤纸干血斑标本的递送和验收原则：采血单位应对筛查标本先行质控，质量合格者才予递送。创造条件尽快送往新生儿疾病筛查实验室检测机构（即筛查中心）。最好于标本采集后24小时内送出，规范要求采集后5天内递送，送出后3天内应到达新生儿疾病筛查检测机构。递送方法：挂号信或快件邮寄；人工递送或收取；专收专投系统（绿色通道）。标本叠放的方法：如果堆积放置不可避免的话，可有几种方法：(1)将干血斑旋转180度叠放; (2) 采血卡之间添加一张薄纸。标本验收 各新生儿疾病筛查检测实验室应制定适合本地情况的标本验收制度，对所接收的筛查标本进行验收和质量检查。设筛查标本验收和质控登记本，对质量不合格或认为不可接受者应予登记和退回重采，或直接通知家长重新采血，记录在案备查。有下列情形之一者应视为不合格标本：血斑过小、过少甚至无血样；重复滴血、血样不均、血液凝固及未透滤纸两面；标本受潮、污染或已损坏。标本失去时效性，如用于G6PD缺乏筛查的标本要求于采集后最好于1周内完成检测。不合格标本将造成筛查实验结果失去可信度，实验室使用不合格的标本造成漏诊的风险大大增加。标本保存 如果实验室要保存剩余的干血斑标本到更长的时