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文档简介

食用菌栽培技术 滁州职业技术学院生化工程系汤士勇 tangshiyong tsy 570424862 第二章食用菌菌种生产 菌种生产类型及生产流程菌种生产的基本设备培养基的配制消毒与灭菌接种与培养菌种的分离方法菌种的保藏与复壮液体菌种生产 本章主要内容 一 菌种的生产类型及生产流程 菌种 是指以适宜的营养培养基为载体进行纯培养的菌丝体 也就是培养基质和菌丝体的联合体 或者说是指人工培养 并供进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体 菌种的生产类型 食用菌菌种是通过三级逐步扩大培养的方式来生产的 在生产上通常把菌种分为一级菌种 母种 二级菌种 原种 和三级菌种 栽培种 一 菌种的生产类型及生产流程 菌种 一级菌种 二级菌种 三级菌种 从孢子分离培养或组织分离培养获得的纯菌丝体 由一级菌种扩大繁殖成的菌丝体 由二级菌种扩大繁殖成的菌丝体 是直接用于栽培的菌种 一 菌种的生产类型及生产流程 母种 一 菌种的生产类型及生产流程 原种 一 菌种的生产类型及生产流程 栽培种 一 菌种的生产类型及生产流程 三级菌种之间的关系 一 菌种的生产类型及生产流程 菌种生产流程 种菇 一级菌种 二级菌种 三级菌种 栽培 一 菌种的生产类型及生产流程 菌种生产工艺流程 三级种培养基制备 高压或常压灭菌 接种 三级菌种 栽培 培养 一 菌种的生产类型及生产流程 菌种制作的四个基本环节 配制培养基 灭菌 接种 培养 二 菌种生产的基本设备 菌种厂的布局 二 菌种生产的基本设备 接种设备接种室 二 菌种生产的基本设备 接种设备接种室 二 菌种生产的基本设备 接种设备接种室 二 菌种生产的基本设备 接种箱 观察窗 紫外灯 操作孔 二 菌种生产的基本设备 超净工作台 净化工作台 二 菌种生产的基本设备 超净工作台 净化工作台 二 菌种生产的基本设备 接种工具要求 前端为导热性好的金属材料 二 菌种生产的基本设备 培养设备培养室 培养大量菌种的恒温房 要求 光线暗 密闭好 通风性强 能升温 降温 空调机 有培养架 二 菌种生产的基本设备 培养室 培养大量菌种的恒温房 二 菌种生产的基本设备 培养箱培养少量菌种的恒温电器 20 40 二 菌种生产的基本设备 灭菌设备 手提式高压灭菌锅 三 培养基的配制 培养基概念 采用人工的方法 按照一定比例配制各种营养物质 以供给食用菌生长繁殖的基质 要求 含有该菌生长发育所需要的营养物质 水分 pH适宜 必须经过严格的灭菌 保持无菌状态 三 培养基的配制 培养基种类 类型 三 培养基的配制 培养基成分 水分碳源 单糖 双糖 多糖氮源 有机氮 氨基酸 蛋白质 尿素 铵态氮 硫酸铵 无机盐 磷 钾 钙 镁 硫等 磷酸氢二钾对pH变化具有缓冲作用生长素 B族维生素凝固剂 琼脂 三 培养基的配制 粉状 条状 属天然植物多糖融点96 以上凝点40 以下冷水中不溶透明度好 粘着力强不被微生物分解利用 琼脂 三 培养基的配制 三 培养基的配制 母种培养基PDA培养基和PSA培养基是一级菌种最常用的培养基 适用于大部分食用菌菌种的分离 培养和保藏 既是一种广泛培养基 也是一种基础培养基 三 培养基的配制 母种培养基配制过程 煮沸20min 取定量滤液 制马铃薯滤液 滤液沸时加入 融后加余料 融化琼脂 调节pH值 勿污管口 控制装量 分装试管 准备灭菌 包扎成捆 1 NaOH或HCl 三 培养基的配制 母种培养基配制过程 三 培养基的配制 原种 栽培种培养基 三 培养基的配制 原种 栽培种培养基 调pH与分装 pH 一般为8 0左右原种培养基装大口瓶栽培种培养基装菌种袋 外紧内松 上紧下松 四 消毒与灭菌 基本概念 杀死一切微生物 包括芽孢 灭菌 分为 杀菌 菌体尚存溶菌 菌体消失 消毒 只杀死病原菌 未伤及芽孢防腐 暂时抑制微生物生长除菌 用冲洗 过滤等法 除去微生物 四 消毒与灭菌 物理消毒灭菌法热力灭菌 一 原理 高温 使菌体蛋白质 核酸 酶等凝固或变性失活 四 消毒与灭菌 物理消毒灭菌法热力灭菌 二 方法 湿热灭菌 干热灭菌 四 消毒与灭菌 干热灭菌 四 消毒与灭菌 四 消毒与灭菌 器皿包装 160 170 2h 干燥箱 使用 四 消毒与灭菌 湿热灭菌 方法 高压蒸汽灭菌 常压蒸汽灭菌 巴氏消毒 四 消毒与灭菌 蛋白质凝固点与其含水量的关系 热蒸气穿透力大蛋白质凝固点随其含水量的增加而降低 四 消毒与灭菌 干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较 四 消毒与灭菌 高压蒸气灭菌 四 消毒与灭菌 四 消毒与灭菌 四 消毒与灭菌 排气 四 消毒与灭菌 纯蒸气压力与温度的关系 1kg cm2 0 098Mpa 兆帕 98Kpa 千帕 四 消毒与灭菌 常压蒸气灭菌 四 消毒与灭菌 常压蒸气灭菌 四 消毒与灭菌 3 巴氏消毒 四 消毒与灭菌 物理消毒灭菌法紫外线灭菌 四 消毒与灭菌 物理消毒灭菌法紫外线灭菌 便携式 四 消毒与灭菌 物理消毒灭菌法紫外线灭菌 四 消毒与灭菌 化学消毒灭菌法 四 消毒与灭菌 气雾消毒灭菌法 四 消毒与灭菌 气雾消毒灭菌法 机理 结合蛋白质氨基 使其变性 甲醛 有刺激性和腐蚀性 四 消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 四 消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 一 氧化剂 四 消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 高锰酸钾 紫色针状结晶0 1 0 2 浸泡手 器具等 四 消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 过氧化氢 无色液体 属环保型消毒剂3 皮肤 伤口消毒6 浸泡器皿30min 四 消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 漂白粉 四 消毒与灭菌 过氧乙酸无色至微黄色液体 有刺激性 腐蚀性 挥发性 四 消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 二 表面活性剂 四 消毒与灭菌 勿与肥皂混用 四 消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 三 重金属盐类1 氯化汞 升汞 常用浓度0 1 0 2 主要用于食用菌菌种分离2 硝酸银 0 1 1 0 3 硫酸铜 常配制波尔多液 五 接种与培养 母种的接种与培养接种 转管 五 接种与培养 培养 接种后的试管放入温箱内 于25 左右的温度条件下培养 3d后检查菌丝生长情况及有无杂菌 培养7 15d母种菌丝即可长好 五 接种与培养 原种的接种与培养接种 五 接种与培养 培养 前3 5d内直立放置 当菌丝吃料后倒卧叠放 并适时转动 这样可以保证水分分布均匀 使菌丝生长一致 定期检查有无杂菌污染 原种应在3个月内使用 五 接种与培养 栽培种的接种与培养接种 过程 用接种匙 镊 铲 取枣大原种放于袋的两端或瓶中料面上 五 接种与培养 培养 30 40d后栽培菌种即可长满菌丝 供栽培使用 五 接种与培养 菌种质量鉴定母种质量鉴定 1 形态 外观 五 接种与培养 好母种 五 接种与培养 2 长势 将菌种接入合适的培养基 在适宜的温度条件下培养 若菌丝生长快而整齐 浓而健壮 则为优良品种 若菌丝生长过快或过慢 菌丝不整齐且凌乱 则为劣质品种 五 接种与培养 3 出菇试验 五 接种与培养 2 温度适应性 五 接种与培养 2 干湿性鉴定 仍正常生长 湿 15g琼脂 1000ml培养基适宜 16 5g琼脂 1000ml培养基干 18g琼脂 1000ml培养基 五 接种与培养 原种与栽培种质量鉴定 具有 菌丝白 符合该菌种的颜色 均匀 粗壮 有菇香味接种后萌发快 菌种种类品种名称菌种级别代时生产厂家接种日期 合格菌种 用于生产 五 接种与培养 原种与栽培种质量鉴定 产生原基 五 接种与培养 原种与栽培种质量鉴定 黄水 污染 六 菌种分离方法 孢子分离法 孢子分离法 概念 特点 操作过程 利用子实体产生的成熟有性孢子分离培养获得纯菌种的方法 属于有性繁殖 后代易发生变异 可用此法培育新品种分离过程较复杂 适用于胶质菌类和小型伞菌 孢子的采集 孢子的分离 孢子的萌发 六 菌种分离方法 孢子分离法 孢子分离法 多个孢子萌发后自由交配获得纯菌种的方法 多孢分离 单孢分离 单个孢子萌发获得纯菌种的方法 整菇插种法钩悬法孢子印法 平板稀释法连续稀释法毛细血管法 六 菌种分离方法 组织分离法 组织分离法 将食用菌的部分组织移接到斜面培养基上获得纯培养的方法 简单易行保持原菌种性状适用于大型肉质子实体重复多易退化 种菇选择 种菇消毒 切取组织块 移接组织块至斜面中央 培养 特点 概念 操作过程 以伞菌为例 六 菌种分离方法 基内菌丝分离法 基内菌丝分离法 概念 特点 适用范围 从生长子实体的培养基中分离菌丝获得纯培养的方法 易感染杂菌 子实体已腐烂 但又必须保留该种菌种子实体小而薄 用组织分离法和孢子分离法较困难混合菌丝培养类型 如银耳 多采用此法 七 菌种的保藏与复壮 菌种的保藏 使菌种不死亡不生长不污染 不降低或不丧失其优良性 以尽量延长使用时间 保藏目的 保藏原理 创造不利于菌种生长的一切条件 使其代谢处于休眠状态 七 菌种的保藏与复壮 菌种的保藏 七 菌种的保藏与复壮 菌种的保藏 特点 简便保藏时间短易污染及退化不适于草

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