毕业论文-银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡生长性能及血清.doc

金陵科技学院学士学位论文 目 录毕 业 论 文 题 目：银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡生长性能及血清生化指标的影响学生姓名 指导教师 二级学院 动物科学与技术学院 专 业 动物医学 班级07动物医学（M） 学 号 提交日期 2011 年5月日 答辩日期2011年5月21日目 录摘要Abstract前言11 材料与方法21.1 试验区概况21.2 试验动物与试验材料21.3 试验方法21.4 样品采集方法21.5 样品的检测31.5.1 AST活性的测定31.5.2 BUN活性的测定31.5.3 TC活性的测定41.6 数据分析与处理42.结果42.1 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡生长性能变化42.2 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡血清生化指标的变化42.3 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡死亡率的变化53.讨论与分析63.1 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡血清生化指标的影响63.2 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡血清生化指标的影响63.3 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡死亡率的影响74.小结7参考文献8致谢9II金陵科技学院学士学位论文 摘 要银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡生长性能及血清生化指标的影响摘要本试验主要研究银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡部分血清生化指标和生长性能的影响。选用200 只1日龄的草鸡随机分为5个处理组，每组重复40只。对照组饲喂普通饲料，其余各组分别在普通饲料中添加0.1%，0.3%，0.6%银杏叶提取物和0.1%银杏叶提取物加1%蝇蛆。预试期10天，正常饲养至45日龄。结果显示：（1）添加银杏叶加蝇蛆喂鸡对鸡平均日增重提高显著（P0.05），提高饲料转化率效果明显。（2）与对照组相比，添加银杏叶提取物加蝇蛆可以显著降低血清尿素氮水平（P0.05），甘油三脂与总胆固醇含量有所降低，但没达到显著水平。（3）银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡的死亡率也有所降低。结论：银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡可降低鸡的血脂和尿素氮水平，提高生长性能，降低死亡率。关键词：银杏叶提取物；蝇蛆；血清生化；生长性能；草鸡9金陵科技学院学士学位论文 AbstractGinkgo biloba extract together with fly larvae feed the chickens on chicken growth performance and serum biochemical indexesAbstractThe main test of Ginkgo biloba extract plus some fly larvae feed the chickens on the chicken serum biochemical parameters and growth performance. 200 one-day-old chickens were selected and randomly divided into 5 groups, 40 chickens a group. The control group was fed with normal diet only, and the other experiment groups were fed with normal diet, mixed with some different additions, including 0.1%, 0.3%, 0.6% Ginkgo biloba extract or 0.1% Ginkgo biloba together with 1% fly maggots. Pre-trial for 10 days, and All groups were raised to 45 days old before sacrifice. The results showed that: 1) The group fed with Ginkgo biloba extract together with fly maggots has a significant gain of daily body weight (P0.05), feed conversion rate effect is obvious. 2) Compared to the control group, the group fed with Ginkgo biloba extract and fly maggots has a much lower serum urea nitrogen level. (P0.05), while the content of triglyceride and total cholesterol was lower, but not significantly. 3) The chicken death rate was also lowered when the group was fed with Ginkgo biloba extract and fly maggots. Conclusion: Ginkgo biloba extract plus some fly larvae to feed the chickens can reduce blood lipids and blood urea nitrogen level,improve growth index and reduce mortality.Key words: Ginkgo biloba extract, fly maggots, biochemical index of serum, growth index, chicken金陵科技学院学士学位论文 前 言前言银杏（Ginkgo biloba L.）又名白果树、鸭掌树、公孙树、鸭脚子，为落叶高大乔木，最早出现于3.45亿年前的石炭纪，地球生命历经千亿年的变动，银杏扔保持其原有的生物特性。银杏原产于中国，在第四纪大陆冰川覆盖之后，成为我国特有的树种，是世界上最古老的植物之一，在生物进化始上有“活化石”之称1。银杏叶是一种具有很高药用价值的植物，作为药用已经有很久远的历史，银杏叶具有“益心敛肺、化湿止泻、治胸闷心痛、心悸怔忡、止咳祛痰、泻痢”2之功效。目前已经从银杏叶中提取的化学成分大约有200 多种3。其中黄酮类和萜内酯类等是发挥银杏叶药理作用的主要成分，黄酮类是氧自由基清除剂, 与其有关的药理作用如抗炎、抗组胺、抗cAMP 磷酸乙酯酶等。萜内酯类在抗炎、肾病、胃肠道疾病、气管高过敏性疾病、神经系统及免疫系统等方面均具有显著作用4。其他成分主要包括有机酸、单糖类、多糖类、醇类、醛类、酮类、生物碱类、甾醇类、17种氨基酸和25种微量元素, 以及维生素、叶绿素、胡萝卜素等对维持肝功能和促进造血功能具有重要作用。白果内酯（Bilobalide）是目前唯一在银杏叶中发现的一种萜内酯类化合物, 具有独特的药理作用, 该成分为银杏叶所特有, 在其他植物中尚未发现5。苍蝇的幼虫又称为蝇蛆。蝇蛆以畜禽粪便和畜禽腐烂的尸体为食，生长繁殖速度极快，人工养殖不需很多设备，室内室外、城市农村均可养殖，而且具有成本低，周期短的优点。利用蝇蛆做饲料添加剂饲养的鸡，具有高蛋白、低脂肪、无药残、肉质鲜嫩、口感好、营养价值高等的特点。蝇蛆的人工养殖起源于20 世纪70 年代末80年代初。现在美国等发达国家已实现了蝇蛆生产的工厂化。蝇蛆是营养成分非常全面的优质蛋白资源。不管是蝇蛆本身还是由蝇蛆制成的蛆粉，粗蛋白含量等与鱼粉及肉骨粉相近或略高6,7,8,9。贾生福等10的结果表明鲜蛆含蛋白质18. 6%,脂肪5%, 碳水化合物和盐3. 5% , 水分71. 4% 和维生素B。干蝇蛆、蛹和蝇尸的粗蛋白质含量分别为60. 8%、58. 2% 和64. 2%; 粗脂肪为17. 1%、14. 5%和6.5% ; 灰分为9. 2% 、8. 1%和7. 5%; 相当于进口鱼粉蛋白质的含量, 超过国产鱼粉和豆饼的含量。蝇蛆虫体体壁富含几丁质，可用于提取壳聚糖及作为合成其他新型营养物质的原料。蝇蛆提取的甲壳素具有多种利用价值，能够排除人和动物体内蓄积的腐败物质，吸附人体内的有害金属毒素，并能有效的清除沉淀在血管及机体内的胆固醇，甲壳素还具有活化淋巴细胞、神经细胞和生殖细胞等作用。蝇蛆含有如此丰富的营养成分，使蝇蛆成为当今世界最受关注并大力开发的特种动物养殖品种之一。金陵科技学院学士学位论文 材料与方法我国是蛋白饲料资源十分短缺的国家。因此,利用蝇蛆养殖,开发利用蛋白资源作为饲料添加剂,对我国养殖业的可持续发展具有非常重大的意义。银杏叶加蝇蛆作为饲料添加剂的研究，在国内外文献中还尚未见先例。本试验旨在研究银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡是否具有提高鸡的生长性能，以及对鸡的血清生化有哪些影响, 从而为动物保健工作的研究和新型饲料的研制提供一些借鉴。1.材料与方法1.1 试验区概况 本次试验时间为2011年2月到4月，在南通文圣生态特种养殖有限公司进行，场址位于江苏省南通市海安县墩头镇，本养殖场改变了传统的养殖模式，形成了有自己特色的生态养殖模式。用饲料养猪，畜禽粪便养蛆，再用鲜活蝇蛆喂养畜禽、水产等。以降低饲料成本，提高畜禽、水产的生长速度，同时提高畜禽、水产抗病能力及产品的品质，也更好的解决了家畜、家禽粪便的排放问题，改善了环境。本次试验正是借助于养殖场内的设施，以及专门的养殖人员，科学的饲养管理条件下进行的试验。 1.2 试验动物与试验材料200只1日龄草鸡雏鸡、离心管、高速离心机(sigma 3-18k)、水浴锅(HH-4数显恒温水浴锅)、移液枪（Pipetlite SL-100）、液氮罐（成都液氮容器厂 金凤牌YDS-10）、电子天平（北京赛多利斯天平有限公司产）、分光光度计（UV765 上海精科产）、BUN、TC及AST测定试剂盒（南京建成生物工程研究所产）等。1.3 试验方法将雏鸡随机分成5组，分别为：A.饲喂普通饲料（对照组）B.饲喂普通饲料+0.1%银杏叶提取物 C.饲喂普通饲料+0.3%银杏叶提取物 D.饲喂普通饲料+0.6%银杏叶提取物 E.饲喂普通饲料+1%蝇蛆粉+0.1%银杏叶提取物。在正式试验前，先将小鸡进行3天的适应性饲养，严格按照鸡场日常饲养标准进行。小鸡前22天饲喂全价颗粒饲料，配以不同浓度的蝇蛆和银杏叶提取物，22天之后饲喂的是自配饲料（即：28%豆粕+62%玉米+5%预混料+5%麸皮）。试验期间自由饮水和采食，试验全程24h/d的光照。试验开始后每天早晚各投料一次，并记录投料量以及次日剩余的饲料量，每一周称量一次体重并记录。及时注意观察各组小鸡的死亡数量并记录。整个试验过程采取正常的饲养管理及免疫程序。1.4 样品采集方法在严格按照试验要求和饲养管理程序饲养了45天以后，每组随机取25只鸡，采取心脏采血的方式，每只鸡采血4ml放入离心管，随即放入离心机以3000rpm离心10min，用移液枪取上层血清，放入血清管标号并冷冻保存，用于分析谷草转氨酶（Aspertate aminotransferase，AST）、尿素氮（Urea nitrogen，BUN）、总胆固醇（Total cholesterol ，TC），甘油三酯（Triglyceride，TG）等血清生化指标. 1.5 样品的检测1.5.1 AST活性的测定按照AST活性检测试剂盒提供的操作方法进行检测。取5只干净的试管分别标上0、1、2、3、4号，各管加入0.1mol/L的磷酸缓冲溶液0.1ml，按照管号分别加入2mol/ml丙酮酸标准液0ml，0.05ml，0.1ml，0.15ml，0.20ml；基质缓冲液0.50ml，0.45ml，0.40ml，0.35ml，0.30ml；再加入2,4-二硝基苯肼液。混匀，37水浴锅中加热20min，各管加入0.4mol/L氢氧化钠5ml，室温放置10min，分光光度计OD（505nm）值。测得的各管吸光度值减去0号管吸光度值，所得的差为纵坐标；0-4号管酶活力（卡门式单位）依次为0,24,61,114,190，并以它们作为横坐标，作标准曲线。测定管中加入样品血清0.1ml，测定管和对照管加入基质液0.5ml。混匀，37水浴30min，各管加入2,4-二硝基苯肼液0.5ml，对照管再加入样品血清0.1ml。混匀，37水浴20min，各管加入0.4mol/L氢氧化钠5ml，室温放置10min，分光光度计测OD（505nm）值。查标准曲线，求得AST的活力单位。1.5.2 BUN活性的测定金陵科技学院学士学位论文 结 果按照BUN活性检测试剂盒提供的操作方法进行检测。取8只干净的试管分别标上0,1,2,3,4,5,6,7号，然后在1号管中加入蒸馏水0.02ml，27号管分别加入不同BUN标准液（10mmol/L）0.02ml，浓度分别10mmol/L，8 mmol/L,5 mmol/L,4 mmol/L,2 mmol/L,1 mmol/L,0.5 mmol/L。再在各管中加入1g/ml的肟溶液各1ml和酸应用液各1ml。混匀，置沸水中水浴15min，立即用自来水冷却。分光光度计测OD（520nm）值。测得的各管吸光度值减去0号管吸光度值，所得的差为纵坐标；以不同浓度的BUN标准溶液为横坐标，作标准曲线。测定管中加入待测样本0.02ml，再在管中加入1g/ml的肟溶液各1ml和酸应用液各1ml。混匀，置沸水中水浴15min，立即用自来水冷却。分光光度计测OD（520nm）值。根据测得的OD值，通过计算，求得BUN含量。280.1样本测试前的稀释倍数=尿素氮含量mg/L1.5.3 TC活性的测定按照TC活性检测试剂盒提供的操作方法进行检测。取3只干净的试管分别为空白管（B）、标准管（S）、测定管（T）。再在空白管中加入蒸馏水3l，标准管中加入标准液3l，测定管中加入血清3l。混匀，置37水浴锅中水浴5min，以空白管校零，在546nm波长下比色读取各管OD值，通过计算，求得TC值。总胆固醇含量（mmol/L）=ATCS/AS1.6 数据分析与处理试验结果用平均数（MeanSD）表示，统计分析采用SPSS软件（For Windows Version 17.0）。采用单因子方差（One-Way ANOVA）分析,以P0.05为显著水平。2.结果2.1 银杏叶加蝇蛆喂鸡对鸡生长性能变化试验结果见表1。由表1可见,B组，C组，E组末重分别比对照组提高了2.8%,4.5%,8.1%。平均日增重分别比对照组提高3.12%，7.53%,10.7%。料肉比各组均比对照组有所降低，其中以E组降低最明显。各组料肉比分别比对照组降低5.0%，13.3%，4.7%，13.7%。方差分析结果表明，E组末重和平均日增重与对照组相比均达到差异显著水平（P0.05）。E组相比较于B，D组平均日增重也达到差异显著水平（P0.05）。表1 银杏叶加蝇蛆喂鸡对鸡生长性能的影响项目A组B组C组D组E组11日龄重g80.53.4bc81.34.4c74.72.4a75.73.9a78.63.3b45日龄重g382.544.4ab393.124.2bc399.831.5bc366.225.4a413.526.3c平均日增重g8.630.36ab8.900.48bc9.280.30cd8.300.43a9.560.40d料肉比3.00:12.85:12.60:12.86:12.59:1注:同一行数据间标有字母不相同者，差异显著(P0.05），E组甘油三脂与总胆固醇指标与对照组相比有所降低，但没有达到差异显著水平。E组尿素氮水平与对照组相比明显降低，并达到差异显著水平（P0.05）。B组，C组与对照组相比也达到差异显著水平（P0.05）。表2 银杏叶加蝇蛆喂鸡对鸡血清生化指标的影响项目A组B组C组D组E组谷草转氨酶U/L240.016.4a220.87.1a212.02.5a217.316.0a232.322.6a甘油三脂m mol/L0.630.41a0.550.05a0.610.33a0.520.07a0.590.07a总胆固醇m mol/L3.130.93a2.860.12a2.930.67a2.730.45a2.670.44a尿素氮m mol/L0.960.03c0.760.10a0.790.08ab0.940.09bc0.700.07a注:同一行数据间标有字母不相同者，差异显著(P0.05)。2.3 银杏叶加蝇蛆喂鸡对鸡死亡率的变化试验结果见表3。由表3可见，各组死亡率为12.5%、2.5%、5%、2.5%、2.5%。与对照组相比，死亡率均不同程度降低。 金陵科技学院学士学位论文 讨论与分析3.讨论与分析3.1 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡生长性能的影响本试验中，银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡能显著提高鸡的生长性能，相比单独添加银杏叶提取物的组别对鸡的生长性能的提高效果要好。原因可能是银杏叶提取物中富含黄酮苷类、萜内酯类、有机酸、单糖类、多糖类、有机醇类、氨基酸和多种微量元素,蝇蛆中则富含优质蛋白质和氨基酸等，这些营养物质是机体生长和疾病防治的物质基础，可不同程度地对机体的代谢产生影响。已有研究表明,银杏叶提取物具有促进绍兴鸭生长的作用。主要作用化学物质是黄酮，黄酮可以调节动物的下丘脑垂体靶器官生长轴,提高绍兴鸭体内生长激素(GH)的分泌。生长激素(GH)可以促进机体新陈代谢,调节生理机能，从而促进动物的生长发育11。另外,黄酮还可以影响阿片肽受体的水平,对动物摄食行为也发挥调节作用，从而提高动物的食欲，增加采食量，提高鸡的生长性能。银杏内酯具有抗血小板活化因子的作用，能溶解血栓，降低血液粘稠度，加快血液循环，增加体内物质的转化率，进而提高代谢水平，增加饲料转化率4。银杏叶提取物还可以影响5-羟色胺、乙酰胆碱等肠神经递质的释放而调节肠道平滑肌的活动，促进血液循环，提高营养物质的吸收，提高生产性能12。另有研究表明蝇蛆能够提高试验鸡的生长性能主要是由其高蛋白质和氨基酸含量、高蛋白质和氨基酸消化率共同作用的结果13。结果表明,单独以蝇蛆和适宜浓度的银杏叶提取物作为饲料添加剂喂鸡，可以有效地提高鸡的生长发育和提高饲料转化率，以适宜浓度的银杏叶提取物混合蝇蛆共同作为饲料添加剂对鸡的效果，比单独添加蝇蛆和银杏叶提取物更好。金陵科技学院学士学位论文 小 结3.2 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡血清生化指标的影响转氨酶的含量是反应肝脏健康状态的重要指标。当转氨酶含量升高时，表明肝脏发生病变或组织受到损伤，解毒能力下降。因此，转氨酶活性维持在一定水平，对发挥肝脏解毒功能，维持机体的代谢平衡具有重要作用。试验中E组与其他各组谷草转氨酶与对照组相比差异均不显著，说明日粮添加银杏叶提取物和蝇蛆没有显著影响鸡只的肝胆和心血管健康,也没有使骨组织和成骨组织的生长发育受到影响。血清总脂由胆固醇、甘油三酯、磷脂类及游离脂肪酸组成，其中甘油三脂与总胆固醇是反映血脂水平的两个重要指标。徐琪等研究表明，蝇蛆喂鸡可以显著降低鸡血脂水平14。国内有研究报道，银杏叶提取物对鸡血脂水平也有很好的降低作用15。其调节血脂作用机制是减少外源性脂质的吸收，促进体内脂质的排泄。和这本试验中E组甘油三酯和总胆固醇的指标比对照组有所降低的结果是一致的。E组尿素氮水平与对照组相比明显降低，并达到差异显著水平。说明银杏叶加蝇蛆喂鸡可以有效降低鸡血清尿素氮指标。一般来说，高蛋白饮食可以引起血清尿素氮含量的增加，若尿素氮含量持续升高,表明体内蛋白质分解代谢增强,氮沉积减少或肾功能不正常16。试验结果表明，银杏叶中配合蝇蛆喂鸡可以有效降低其尿素氮水平，维持肾功能，保持蛋白质代谢稳定，并以添加0.1%银杏叶提取物效果最好。3.3 银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡死亡率的影响有药理试验表明,银杏叶提取物具有清除体内自由基、改变血液化学、降低血液粘度、改善微循环、提高免疫能力、抗菌、消炎、抗过敏、抗病毒等药理作用17。蝇蛆具有高蛋白，低脂肪，多种氨基酸以及铁，锌等微量元素，营养价值非常高。因此,银杏叶提取物加蝇蛆作为生物饲料添加剂对鸡的抵抗力可能会产生一些影响。本试验结果表明，与对照组相比，银杏叶加蝇蛆作为饲料添加剂喂鸡可以降低鸡的死亡率，其它各组也均不同程度地降低了鸡的死亡率。原因可能是由于雏鸡体内免疫系统发育尚未完全，免疫功能还不是很完善，比较容易受到病原微生物的感染，从而引发疾病，导致死亡。因此，在鸡日粮中添加银杏叶加蝇蛆能使其健康生长。4.小结以上研究表明，在鸡饲料中添加适量的银杏叶提取物，对鸡的生长起到积极的作用。而将银杏叶加蝇蛆作为生物饲料添加剂，可以有效提高鸡的生长性能，促进平均日增重，提高饲料转化率，维持蛋白质代谢平衡，减少鸡的死亡率。因此，研究银杏叶加蝇蛆作为新型饲料添加剂，对改善我国蛋白质缺乏的状况和研究中药无残留抗病药物具有重要意义。金陵科技学院学士学位论文 参考文献参考文献1 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志M.北京: 科学出版社,1979.2 江苏新医学院.中药大辞典（上）M.上海: 上海科学技术出版社,1986.3 高锦明, 王 蓝, 张鞍灵, 等. 银杏叶中有效成分的研究 J. 西北林学院学报, 1995, 10(4): 94- 100.4 管孝鞠. 银杏内酯药理作用研究进展J. 国外医学药学分册, 1995, 22(3) : 129- 1325 Chen j,Cheng w,Huang tective effects of ginko biloba extract against lyosopho sphatidy lcholine-in-duced vascular endithelial cell damage J .Acta Pharmacol sin ,1998,19(4) ：359-3646 雷朝亮,钟昌珍.蝇蛆蛋白的开发利用的现状与前景J.湖北渔业,1990(2): 1219.7 李广宏,钟昌珍,宗良炳,等.蝇蛆蛋白粉的营养评价J.昆虫知识, 1997, 34(6): 347350.8 马惠钦.苍蝇的利用J.特种经济动植物, 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