肠道杆菌.ppt

肠道杆菌 1 概述 2 肠杆菌科 Enterobacteriaceae 是一群生物学性状相似的G 杆菌 多寄居于人和动物的肠道中 故名 致病性肠道杆菌 沙门菌属 志贺菌属 部分埃希菌属 条件致病性肠道杆菌 部分埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯杆菌属 3 肠杆菌科细菌分类及致病性 4 共同特征 形态和染色 多数有鞭毛 志贺菌无鞭毛 动力 致病菌都有菌毛 5 共同特征 培养特性 S S培养基 埃希菌属 沙门菌属 志贺菌属 6 共同特征 生化反应 生化反应活泼 不同种细菌分解糖类或蛋白质形成不同产物 以此可区分各菌属和菌种 例如 肠杆菌科中的致病菌一般不分解乳糖 而非致病菌多分解乳糖 7 共同特征 抵抗力不强 湿热60 经30min即被杀死 对低温有耐受力 对一般消毒剂如漂白粉 酚 甲醛等均敏感 有些菌 志贺菌和沙门菌 能耐胆盐和在不同程度上抵抗染料的抑菌作用 此特性已被用于制作鉴别培养基或选择培养基 8 共同特征 抗原结构1 O抗原为细胞壁的LPS由3部分构成 脂类A决定内毒素毒性作用 核心多糖 肠道杆菌各属的细菌成分相似 重复寡糖单位LPS分子的最外层 决定O抗原的特异性 O抗原耐热 与相应的抗体 IgM 呈颗粒状凝集 凝块形成慢 不易摇散 2 H抗原与相应的抗体 IgG 呈现疏松絮状凝集 凝块形成迅速 但易摇散 3 K抗原成分以多糖类为主 包绕于O抗原的周围 能阻断O抗原与相应抗体的结合 但加热后可消除K抗原的阻断作用 重要的K抗原和细菌的侵力有关 4 菌毛抗原由多种 菌毛使细菌的粘副结构 并能阻断O抗原与相应抗体结合 5 共同抗原在菌体表面 为氨基糖聚合物 与细菌致病性的关系上不清楚 9 共同特征 致病因子菌毛或菌毛样结构 荚膜或为荚膜 外膜蛋白 内毒素 外毒素及运铁色素 siderochrome 等 10 埃希菌属 Escherichia 11 埃希菌属 Escherichia 临床上以大肠埃希菌 E coli 最为常见 亦是本属的模式种 1 合成维生素B及K供机体利用 2 能抑制腐败菌及病原菌 如金黄色葡萄球菌 志贺菌属 和真菌 如白念珠菌 的过度增殖 3 异位寄居时 能引起化脓性感染 某些菌型为致病性 可引起肠道或尿路感染 4 在分子生物学的研究中 E coli是最常用的实验材料 12 形态染色G 短杆菌 周鞭毛 有动力 周身有菌毛 培养和生化反应在鉴别培养基上因分解乳糖产酸 是指示剂变色 菌落被着色 IMVC 抵抗力胆盐 煌绿染料等对其有明显的抑菌作用 以形成耐药性 R质粒可在肠道菌间传递 对氯霉素 庆大霉素敏感 生物学性状 13 大肠埃希菌鞭毛和菌毛 透射电镜 42500 14 致病因子E coli的菌毛能使细菌粘附在小肠及尿道的粘膜上皮细胞上 外毒素 如肠毒素及溶血毒素 内毒素及K抗原与感染致病的特征和严重程度有关 K抗原有抗吞噬与抗补体的溶菌作用 致病性 15 致病性 所致疾病1 肠道外感染以泌尿道感染最多见 机体抵抗力降低 外伤或Ecoli离开肠道浸入组织器官时 也可引起多种化脓性感染 如烧伤感染 胆囊炎 肺炎 脑膜炎及败血症等 甚至导致内毒素休克 2 肠道感染引起肠道感染的达肠埃希菌分成5组 即肠产毒性E coli 肠致病性E coli 肠侵袭性E coli 肠出血性E coli及肠粘附性E coli 16 E coli引起的人类肠道感染的常见血清型 17 直接涂片染色镜检 粪便标本不做 分离培养 普通琼脂平板 鉴别培养基 典型菌落 直接涂片染色镜检生化反应 初步鉴定 血清学鉴定药敏实验 微生物学检查法 标本 细菌分离和鉴定 必要适应做肠毒素 VT DNA片段及侵袭力测定 泌尿道感染患者的尿标本还应作细菌总数测定 每毫升均超过105个有诊断意义 18 微生物学检查 卫生细菌学检查大肠菌群 coliformgroup orcoliform 系指一群需样及兼性厌氧的G 无芽胞杆菌 能在37培养24h内使乳糖发酵产酸产气者 包括埃希菌属 枸橼酸杆菌属 肠杆菌属及克雷伯菌属等4中肠道细菌 1 大肠菌群值和大肠菌群指数大肠菌群值 colititre 是指能检出大肠菌群的最小样品量 ml 大肠菌群指数 coli index 是指1000ml样品的大肠菌群数 卫生部规定的饮水卫生标准是大肠菌群值不小于333ml 大肠菌群指数不得超过3 2 细菌总数测定检测每毫升或每克样品中所含细菌数 卫生部标准是饮用水 饮料中细菌总数 100CFU ml 19 志贺菌属 Shigella 是人类细菌性痢疾的病原菌 本属细菌包括痢疾志贺菌 S dysenteriae模式种 福氏志贺菌 S flexneri 鲍氏志贺菌 S boydii 和宋内志贺菌 S sonnei 4个群 group 在我国菌痢以福氏和宋内志贺菌引起感染较为多见 20 2019 12 29 21 形态 染色 培养及生化反应G 杆菌 无鞭毛 无动力 有些菌体周围有菌毛 在S S培养基上形成无色半透明光滑型菌落 分解葡萄糖产酸不产气 大多数志贺菌不发酵乳糖 抗原构造与分类志贺菌属缺少H抗原 其抗原结构主要由O抗原贺K抗原组成 根据生化反应和O抗原结构的差异 将志贺菌属分为A B C D4个群 抵抗力本属细菌对理化因素抵抗力较弱 对酸性环境也较敏感 对多种抗生素易形成耐药性 主要由R质粒决定 并在菌间传递 生物学性状 22 致病物质1 侵袭力侵袭力是志贺菌的主要致病因素 细菌借菌毛及相关结构的协同粘附在回肠末端和结肠的粘膜上皮细胞表面 继而进入 在上皮细胞内增殖 2 毒素 1 内毒素破坏肠粘膜上皮 粘膜脓血便 作用于肠壁 毒血症的症状 作用于肠壁植物神经 腹痛 腹泻 里急后重 2 外毒素多由痢疾志贺菌产生 又称志贺外毒素 shigelladysenteriaeexotoxin 志贺毒素具有细胞毒素 肠毒素和神经毒素3种生物学活性 致病性与免疫性 23 致病性与免疫性 所致疾病仅人和灵长类动物对志贺菌属易感 传染源 患者和带菌者 恢复期带菌者 慢性带菌者和健康带菌者 传播途径 经口感染 所致疾病 细菌性痢疾 bacterialdysentery 急性典型菌痢 治疗不当 可转为慢性 非典型菌痢 易误诊导致慢性菌痢或成为带菌者 急性中毒性菌痢 多见于小儿 主要为内毒素引起微循环障碍发生DIC所致 24 致病性与免疫性 免疫性免疫期短 也不稳固 抗感染免疫主要依赖肠道局部免疫 包括肠道粘膜细胞吞噬 饮 功能的加强及slgA形成等 25 病原菌的分离和鉴定标本分离培养 S S培养基 可疑菌落涂片染色镜检 初步鉴定 生化反应 血清学鉴定 确定菌群和菌型 药敏实验 诊断法1 荧光菌球检查法2 协同凝集试验 微生物学检查法 26 对患者进行及时诊断 隔离和彻底治疗外 还应切断传染途径 包括加强粪便管理 水源管理及食品卫生监督等 试用的口服菌苗有链霉素依赖的 Sd 株口服重组活菌苗 磺胺药 氯霉素 氨苄青霉素 痢特灵等均有疗效 亦可选用环丙沙星 coprofloxacin 菌必治 安塞隆 等新抗菌药物 本属细菌多重耐药性菌株较多 在治疗时应经药敏试验选用敏感药物 防治原则 27 沙门菌属 Salmomella 种类繁多 主要有引起肠伤寒的病原菌伤寒沙门菌 S typhi 以及甲型副伤寒沙门菌 S paratyphiA 乙型副伤寒沙门菌 S paratyphiB 及丙型副伤寒沙门菌 S paratyphiC 动物沙门菌也可传染给人类 由沙门菌引起的疾病统称沙门菌病 salmonellosis 28 伤寒沙门菌鞭毛 鞭毛染色 1824 29 抗原构造和分类1 O抗原O抗原有许多组成成分 每组细菌带有数种O抗原 不同种的细菌可有共同的O抗原 将具有共同抗原的沙门菌归为一组 group 现有42个O组 引起人类沙门菌病的细菌多属A E组2 H抗原沙门菌属的H抗原有两种 称第1相 特异相 和第2相 非特异相 具有两种相抗原的细菌叫双相菌 仅有其中一相者称单相菌 按O抗原分组后 每一组沙门菌再根据H抗原分成不同的种或血清型 3 Vi抗原Vi抗原有抗吞噬作用 并保护菌体不受抗体和补体的作用 Vi抗原的抗原性弱 刺激机体产生的抗体效价低 细菌在体内不断地刺激机体才有抗体产生 如果细菌消失则抗体也随之消失 生物学性状 30 常见沙门菌的O H及Vi抗原 31 致病因子1 侵袭力细菌能侵入小肠壁上皮细胞 并穿过上皮细胞层侵入固有层 细菌被巨噬细胞吞噬 吞噬后不被消灭 而是在巨噬细胞中繁殖 由巨噬细胞携带至机体的深层部位 这可能与该菌的特异0抗原或Vi抗原有关 已证明鼠伤寒沙门菌失去特异性O抗原后 对小鼠的致病力随之降低 此外 菌毛也与致病有关 2 内毒素引起体温升高 白细胞数下降 大剂量可导致中毒症候和休克 3 肠毒素性质类似大肠埃希菌肠毒素 致病性和免疫性 32 致病性和免疫性 所致疾病人类沙门菌病 salmonellosis 包括 1 肠热症 即伤寒 副伤寒 病原体是伤寒沙门菌 S typhi 或副伤寒沙门菌 S paratyphi 细菌随污染的食物和饮水进入人体 发病与否 取决于侵入的菌量与人体的免疫状况 2 急性胃肠炎或食物中毒最常见的沙门菌病 主要由于摄入被大量 超过107个以上 鼠伤寒沙门菌 肠炎沙门菌 猪霍乱沙门菌等污染的食物而引起 3 沙门菌菌血症多由猪霍乱沙门菌及丙型副伤寒沙门菌引起 儿童或有慢性疾病的成年人多发 33 免疫性肠热症后 能获得牢固免疫 很少发生再感染 即使发生 症状也轻 伤寒沙门菌为细胞内寄生菌 intracellularparasite 在肠热症的恢复中细胞免疫较体液免疫尤为重要 致病性和免疫性 34 病原菌的分离和鉴定标本分离培养 S S培养基 可疑菌落涂片染色镜检 初步鉴定 生化反应 血清学鉴定 确定菌群和菌型 药敏实验 标本菌血症时取血 胃肠炎取粪便 呕吐物或可疑食物 肠热症在病程不同阶段采取不同标奉 第1 2w取血或骨髓 第1w血培养阳性率达80 以上 骨髓培养阳性率可达90 95 以上 第2w以后取粪便 尿 粪便标本应做多次培养 微生物学检查法 35 36 微生物学检查法 血清学诊断常规方法是肥达反应 Widalreaction 即用已知的伤寒沙门菌O H和甲 乙型副伤寒沙门菌H抗原与病人血清做定量凝集试验 一般说 间隔5 7d重复采血 如凝集价随病程延长而升高4倍以上 方有诊断价值 1 正常凝集价一般情况下 伤寒沙门菌O抗体的凝集价应在1 80以上 H抗体凝集价在1 160以上 甲 乙型副伤寒沙门菌H抗体凝集价在1 80以上有诊断意义 2 病程 3 H抗体与O抗体的性质及其消长的意义1 若0与H凝集价均超过正常值 则伤寒的可能性很大 2 若二者均低于正常值 则可能性甚小 3 若O凝集价高而H低于正常值 则可能是感染早期或沙门菌属中其他的细菌感染引起的O凝集的交叉反应 4 若O凝集价低而H高于正常值 则可能是以往预防接种的结果或非特异性回忆反应 37 微生物学检查法 带菌者检查检查带菌者最可靠的方法是分离培养病原菌 取带菌者粪便 肛拭子和胆汁或取尿作培养 带菌者的检出率不高 可用血清学方法检测Vi抗体 如伤寒沙