高中生物第一单元第二章第一节动物细胞培养学案中图版选修3.docx

第一节动物细胞培养1简述动物细胞培养的过程。2描述动物细胞培养的过程。1细胞培养的基本条件（1）无毒、无菌的环境。（2）基本的营养物质和生长因子：如葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸等。（3）人体细胞培养的标准温度：（36.50.5）；大多数细胞的适宜pH：7.27.4。（4）气体环境：95%氧气，5%二氧化碳。思考动物细胞培养液中为什么要加入5%二氧化碳？提示：维持培养液的pH。2细胞培养的过程（1）基本过程：健康动物的组织剪碎，用胰蛋白酶处理单个细胞（分离细胞）加培养液制成细胞悬浮液 培养传代培养 细胞株传代培养遗传物质改变细胞系原代培养：将组织从健康动物体内取出，用浓度与活性适中的胰蛋白酶处理成单个细胞，然后用培养基配成一定浓度的细胞悬浮液，转入培养瓶培养的过程。传代培养：把原代培养的细胞定期用胰蛋白酶将它们从瓶壁上脱离下来，重新分散成细胞悬浮液，分装到多个培养瓶中继续培养的过程。细胞株：传代培养的细胞能传到1050代，这种传代细胞叫做细胞株。细胞系：细胞株传至50代后有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且有癌变的特点，有可能在培养条件下无限地传下去，这种传代细胞叫做细胞系。（2）特点：贴壁生长，接触抑制。（3）冻存及复苏。冻存：长期保存细胞一般采用超低温冻存法。将细胞和保护剂放入196的液氮中进行保存。复苏：将冻存的细胞放在37温水中解冻，细胞逐渐“苏醒”，再经过培养，细胞就能继续生长。思考动物细胞培养需要将组织分散成单细胞，所用的酶是什么？提示：胰蛋白酶。3细胞培养的意义（1）生产酶、生长因子、疫苗、单克隆抗体等生物制品。（2）为皮肤大面积烧伤或烫伤病人培养出人工皮肤，供受伤者移植使用。（3）进行有毒物质和药物的检测。（4）在揭示细胞的全能性、细胞周期及调控，癌变机理与细胞衰老机理等基础研究中发挥了重大作用。1为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。血清中含有胰岛素、生长激素等激素及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，进行细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%20%的血清。2将健康动物的组织块剪碎后用胰蛋白酶处理的目的是什么？不定期用胰蛋白酶把培养细胞从瓶壁上脱离的目的是什么？（1）胰蛋白酶可以分解组织细胞间质中的胶原蛋白，从而使组织分散成单个细胞。（2）细胞在培养瓶中贴壁生长，随着细胞的生长和繁殖，培养瓶中的细胞越来越多，当贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时，就会停止分裂增殖，逐渐走向衰亡，这种现象叫做接触抑制。需要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，传代培养。胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。3幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼龄动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。题型一 动物细胞培养【例1】（2010浙江高考理综改编）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（）A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B原代培养的细胞传至10代左右时，极少数细胞衰老死亡C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D恶性细胞系的细胞可进行传代培养解析：保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上形成单层细胞。原代培养的细胞传至10代左右时，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡，极少数细胞能存活下来并继续传下去。二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的。恶性细胞系的细胞带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传下去，所以可进行传代培养。答案：D反思领悟：细胞株和细胞系都属于传代细胞。能传至1050代的传代细胞为细胞株；当细胞株传至50代以后，不能再传代，只有部分细胞的遗传物质发生改变，从而可能继续传下去，这种传代细胞叫做细胞系。题型二 动物细胞培养的基本条件【例2】一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）无毒的环境无菌的环境合成培养基需加血清温度与动物体温相近需要O2，不需要CO2CO2能维持培养液的pHA BC D解析：动物细胞体外培养要求环境无菌、无毒， 培养液中添加一定量的抗生素，合成培养基中需加血清等天然成分，适宜温度、pH分别为（36.50.5）、7.27.4。O2是细胞代谢所必需的，CO2可维持培养液的pH。答案：D反思领悟：CO2溶于水生成碳酸，解离为H和HCO，从而能够维持溶液的pH。1 为了便于将培养的动物组织细胞分散开来，配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取的动物组织应先用下列哪种物质处理（）A胃蛋白酶 B盐酸C胰淀粉酶 D胰蛋白酶答案：D2 关于动物细胞培养的错误叙述是（）A用于人工培养的动物细胞大都取自胚胎或幼龄动物B将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D人工培养的动物细胞只能传50代左右，之后所培养的细胞会衰老死亡答案：D3 下列有关生物工程技术的说法，肯定正确的是（）A用于人工培养的细胞大多数取自胚胎或幼龄动物，其原因是这些细胞比成年动物的体细胞具有更强的全能性B离体的动物和植物细胞在适当条件下都能发育成完整的个体，所以可以利用动植物细胞培养的方法进行动植物的人工无性生殖C在动物细胞培养过程中，细胞进行的分裂方式是有丝分裂，形成的子细胞的染色体数与体细胞相同D基因工程成功的标志是目的基因可以随受体细胞的繁殖而复制解析：在培养动物细胞时多选取胚胎或幼龄动物的组织、器官，原因是这些细胞的分裂能力强；离体的动物细胞不能发育成完整的个体；基因工程成功的标志是目的基因产生相应的产物；在动物细胞培养过程中，细胞进行的分裂方式是有丝分裂，子细胞的染色体数与体细胞相同。答案：C4 下列属于动物细胞培养技术应用的是（）A生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等B用于检测物质的毒性C用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据D以上三项全是解析：考查动物细胞培养技术的应用