血液分析仪临床应用PPT课件.ppt

第一部分血液学基础 1 血液流经全身各脏器 是人体最大的循环系统 2 为全身提供氧气和营养成分 3 带走二氧化碳和代谢产物4 有动脉和静脉之分 1 血液成分 EDTA K2抗凝血血浆55 水90 养分蛋白质激素 细胞45 红细胞白细胞血小板 2 红细胞 1 红细胞为双凹圆盘状 2 内含血红蛋白 3 为机体组织携带氧气和养分 4 正常男性为 4 0 5 5 1012 L女性为 3 5 5 0 1012 L细胞膜有脆性 易破碎 因而溶血剂 表面活性剂 可溶解红细胞 3 血红蛋白 1 血红蛋白为红细胞内部结构 具有携带氧气的位点 2 其功能为携带氧气 3 当红细胞被溶解后 血红蛋白释放出 4 正常人含量为 110 170g L血红蛋白有粘性 容易附着 4 血小板 血小板功能为参与止血正常参考为 100 300 109 L血小板由于本身的功能特性 容易受到刺激后聚集 因而在临床检测中最容易受影响 血小板 5 白细胞 功能为抵抗机体免受感染正常参考为 4 10 109 L可分为5个亚群 各自行使独立的功能具有细胞核 白细胞 6 白细胞亚群 1 中性粒细胞2 淋巴细胞3 单核细胞4 嗜酸细胞5 嗜碱细胞 1 2 3 4 5 7 库尔特原理 负压 血细胞悬液 外电极 内电极 小孔 小孔管 小孔电流 样品杯 小孔近观 库尔特原理三要素 小孔 负压 电极检测 细胞大小和数量 8 第二部分血细胞直方图 在小孔计数时仪器获得细胞的数量和大小 体积 的信息 再进一步分类整理 得到在各种不同体积下相应的数量 反应在坐标上坐标横轴表示细胞大小 以fl 飞升 为单位坐标纵轴表示相应数量 9 三分类之白细胞直方图 10 红细胞直方图 典型的红细胞直方图上 可以看到两个细胞群体 1 细胞主群从50fL开始 两侧对称呈正态分布的曲线 又称 主峰 2 大细胞群在主群右侧 又称 足趾部 是一些红细胞二聚体 三聚体 多聚体的混合物 11 血小板直方图 拟合曲线 在血小板的直方图上可见两条曲线 一条是2fl 20fl的原始数据曲线 另一条是0fl 70fl的拟合曲线 12 拟合曲线 血小板计数的干扰主要来自 2fl以下 噪音 电磁波的干扰20fl以上 裂红细胞 小红细胞 白细胞的干扰 13 拟合曲线作用 仪器根据测量得到的2 20fL范围内血小板分布情况 按照对数正态分布规律得到0 70fL范围血小板分布情况 正常人血小板绝大多数分布在2 20fL范围内 如果拟合成功 血小板数量由拟合曲线下的面积换算得到 即0 70fL范围的血小板数量 如果拟合不成功 没有拟合曲线 血小板结果只报告2 20fL范围的血小板数量 通常情况下是低于实际数量的 14 血小板曲线不拟合的原因 1 血小板原始计数小于20 109 L 2 血小板曲线不呈现对数正态分布 3 血小板曲线的波峰不在3fL 15fL之间 4 血小板PDW大于20 5 三次计数中任何一次没有符合上述4点拟合条件 15 第三部分血细胞五分类 库尔特VCS五分类技术V 体积分析C 细胞核型分析S 细胞内部颗粒分析 16 接近原态的白细胞分析 ScatterPak双试剂系统的作用E lyse 通过低渗作用溶解红细胞 S lyse 终止溶解作用 使白细胞恢复到接近原态 17 接近原态的WBC分析 接近原态的白细胞 进入流式通道 18 逐个 同时 直接的三维检测 19 NEDCMean 细胞的三维定位 NEOPMean NERLSMean 20 细胞的三维定位 21 细胞的三维定位 22 三维空间的多侧面表示 DF1 体积 V 激光散射 S 嗜酸细胞 中性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 23 DF2 体积 V 传导性 C 单核细胞 淋巴细胞 中性粒细胞嗜酸细胞嗜碱细胞 24 网织红细胞的检测 网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的不成熟红细胞 通常较成熟红细胞稍大 其胞质中尚残存部分嗜碱性物质 RNA 核糖体 经碱性染料染色后可见深染的网状结构 故名 右图中标记A B C的细胞分别代表不同成熟度的网织红细胞的 25 新亚甲蓝 VCS检测法 以经典的超活染料新亚甲蓝 NMB 着色网织红细胞内残存的RNA漂洗红细胞内血红蛋白 酸性试剂 用VCS三维技术 检测网织红细胞 26 网织红细胞VCS三维散点图分析 27 网织红细胞检测注意点 使用抗凝血 样本采集后8小时内完成检测加入染液 A液 后室温下作用5 60分钟取2ul 加入2ml漂洗液 B液 后勿混匀 等待30秒钟30秒钟一到 立即进样检测网织红细胞检测的重复性不太理想 半自动 28 第四部分血细胞参数介绍 WBC NE NE LY LY MO MO EO EO BA BA RBC Hgb Hct MCV MCH MCHC RDWPLT MPV PCT PDWRET RET MRV MI 29 白细胞系列参数 WBC 白细胞数量 正常人参考为4 10 109 LNE 中性粒细胞百分比 正常参考为50 75 NE 中性粒细胞绝对值LY 淋巴细胞百分比 正常参考为20 40 LY 淋巴细胞绝对值MO 单核细胞百分比 正常参考为3 10 MO 单核细胞绝对值EO 嗜酸细胞百分比 正常参考为0 5 5 EO 嗜酸细胞绝对值BA 嗜碱细胞百分比 正常参考为0 2 BA 嗜碱细胞绝对值 30 2019 12 31 31 红细胞系列参数 RBC 红细胞数量 正常参考男性为4 0 5 5 1012 L正常参考女性为3 5 5 0 1012 LHgb 外周血中血红蛋白浓度 正常参考为110 160g LHct 血细胞压积 也可指红细胞压积 正常参考为0 35 0 50MCV 平均红细胞体积 正常参考为80 100fLMCH 平均红细胞血红蛋白含量 指平均每个红细胞含的血红蛋白量 正常参考为27 34pgMCHC 平均红细胞血红蛋白浓度 指红细胞中血红蛋白浓度 正常参考为320 360g LRDW 红细胞分布宽度 正常参考为11 5 15 32 血小板系列参数 PLT 血小板数量 正常参考为100 300 109 LMPV 平均血小板体积 正常参考为6 5 12 5fLPct 血小板压积 正常参考为0 108 0 271 PDW 血小板分布宽度 正常参考为11 5 18 33 网织红细胞系列参数 RET 网织红细胞百分比 正常参考为0 5 2 5 RET 网织红细胞绝对值MRV 平均网织红细胞体积 正常参考为100 125fLMI 网织红细胞不成熟度 即不成熟网织红细胞占所有网织红细胞的比率 正常参考为0 2 0 4 34 第五部分HMX常见的旗标和代码 旗标 数值后 R结果需复核 R计数受干扰H结果高于参考范围上限L结果低于参考范围下限 代码 替代数值 三次计数比统一 不完全计算 结果超出操作范围 流式通道堵塞 数据无效 35 白细胞计数值后出现 R的临床意义 说明白细胞在35fl处的检测受到干扰 在白细胞计数孔有35fl大小的颗粒通过并被当作白细胞计数 且超过一定数量 触发报警在白细胞直方图上看 曲线在35fl处上抬 36 正常情况 37 异常情况 38 导致 R出现的可能原因 小白细胞有核红细胞 抗溶红细胞红细胞聚集 大血小板 血小板聚集溶血剂输送系统故障 39 RDW后出现R的临床意义 红细胞计数时仪器计数24fl 360fl的颗粒 绘出直方图 正常红细胞直方图应为两端封闭 单峰 呈高斯分布的曲线 RDW反应红细胞大小分布的偏离情况 其意义相当于CV 变异系数 导致的原因 输血红细胞凝集红细胞碎片大血小板血小板凝集成块处理方法 涂片镜检红细胞是否大小不一 40 41 PLT结果后出现R旗标的临床意义 仪器进行血小板计数时 计数2fl 20fl的血小板数量 再拟合出一条0fl 70fl的曲线 目的是为了排除计数干扰 但条件不满足时仪器不能给出拟合曲线 这时候血小板数值后出现R 42 43 导致血小板后出现R的原因 小红细胞或红细胞碎片 白细胞碎片 大血小板 血小板凝集 血小板大小不一 输血后 电磁波或噪音干扰小孔计数 44 处理方法 1 手工涂片镜检 如发现小红细胞 细胞碎片等异常细胞 则手工计数血小板 2 如果大血小板影响到白细胞或红细胞数值 重新复核 3 如果出现卫星血小板 将标本以枸橼酸钠抗凝 检测血小板数值 但最终数值须乘以1 1 10 稀释比例 45 出现的临床意义 代码 结果超出仪器的操作范围对白细胞而言计数值大于99 9 109 L 对红细胞而言计数值大于7 00 1012 L 对血小板而言计数值大于999 109 L 处理方法 用ISOTONIII液稀释标本至线性范围内再测注 1 先做一空白循环以防止携带污染2 不能报告白细胞分类结果检查仪器稀释液和溶血剂输送系统有无故障 46 代码 出现的临床意义 出现代表三次计数不统一可能导致的原因 小孔堵塞或部分堵塞 标本有凝块或丝状纤维蛋白 白细胞聚集 红细胞凝集 大血小板 血小板凝集 标本稀释后未气泡混匀 处理方法 参照维修手册清洗小孔 查看标本有无凝块 涂片镜检有无细胞聚集 检测标本混匀系统 47 48 代码 出现的临床意义 出现表示数据不完整 不完全计数通常当一个参数由于三次计数不统一或超过范围得不到确切数值时 其衍生参数后将出现 如WBC 则其衍生参数NE LY MO EO BA 后将出现 49 50 也可表示吸样错误 出现也可表示吸样错误 当发生吸样错误时 所有参数的结果后都会带有 导致的可能原因有 样本有凝块 堵塞吸样针 样本量不够 样本的RBC和HGB浓度过低 严重贫血病人标本 血样探测器检测失败 仪器吸样系统堵塞 51 发生吸样错误的处理方法 1 查看样本有无凝块 如果有重取标本 没有则重新检测 再出现如上问题则涂片镜检有无凝块或细胞聚集 2 检测标本量是否够 3 对于严重贫血病人样本采用手动进样方式 4 检测仪器吸样系统 如发生堵塞则清洗 52 代码 出现的临床意义 在白细胞五项分类及网织红细胞计数中 当流式通道堵塞产生 代码 在散点分布图上可有三种堵塞报警 FC 流式通道完全堵塞 无检测 PC1 流式通道检测时间延长 PC2 流式通道检测时间缩短 53 54 55 导致PC 的原因 FC 完全堵塞 PC1 流式通道或标本通道部分堵塞导致分类时间延长 PC2 红细胞未完全溶解导致分类时间缩短 或鞘液系统问题 临床上高胆固醇和高甘油三酯血症 血红蛋白病 药物治疗后 进行性肝病等都可导致PC2 56 出现PC 的处理方法 1 手工涂片进行白细胞分类 2 用乳胶和5C质控清洗流式通道 3 查看ScatterPak液有否过期 检查ScatterPak液输送系统有无故障 57 血常规样本的制备抗凝剂的使用问题长期放置对分类的影响样本本身的干扰问题检测温度的影响 第六部分临床应用问题探讨 58 血常规样本的制备 静脉采血 并立即和抗凝剂充分混匀抗凝剂浓度必须适宜试管必须洁净 最好为一次性真空采血管通常样本采集后24小时内完成常规检测做网织红细胞检测必须在8小时内完成样本必须室温下放置 5