甘露糖处理对康乃馨切花花瓣衰老的影响.doc

甘露糖处理对康乃馨切花花瓣衰老的影响1 前言鲜切花是花卉产业的重要组成部分，采后保鲜是鲜切花产业发展面临的关键性技术问题。为使鲜花持久展示其诱人的色泽和美丽，必须对其进行保鲜处理。目前鲜花保鲜技术是制约花卉市场发展的瓶颈所在，对其进行研究是提高花卉市场中鲜花的品质和市场竞争力的关键。鲜花保鲜是一个潜在的市场，通过保鲜处理的鲜花，品质也可以得到相应的改善和提高，可以保持长时间的挺直新鲜1。随着花卉市场的不断发展，鲜花保鲜技术必然成为一个长期存在而又必需的部份，同时也将推动中国鲜切花市场的发展。到目前为止，国内外不少学者对鲜切花衰老机理进行了多方面的研究，各种物理、化学、生物等不同的保鲜技术也应用于实际的生产流通贮藏当中。物理保鲜方法主要有低温贮藏、减压贮藏、气调贮藏、辐照处理等。化学保鲜是现代保鲜技术中普遍采用的技术。目前应用的化学保鲜类试剂主要有杀菌剂、无机盐、乙烯抑制剂、植物生长调节剂等。由于化学保鲜法存在重金属和化学污染等问题，因此生物保鲜技术的发展就受到人们的期待。目前主要应用的技术有壳聚糖护色保鲜、糖类保鲜法、竹醋液保鲜法等。生物保鲜法是近年来新发展起来的最具有前景的保鲜方法2。随着生物保鲜法研究的逐渐深入，各类生理物质的保鲜研究不断有报道，而甘露糖切花保鲜的研究报道却甚少。甘露糖能够抑制植物代谢的作用已得到充分证实，并且具有延迟果实后熟等作用34，同时也是某些植物转基因安全筛选体系的筛选剂58，因此推测甘露糖对鲜花应具有保鲜作用，在找出最佳保鲜效果的甘露糖浓度的基础上，本研究跟踪测定在该浓度下鲜切花花瓣的生理生化指标变化，以确定甘露糖预处理在切花衰老过程中是否具有保鲜作用。2 材料与方法2.1 材料大红色康乃馨，统一从广州市岭南花卉批发市场购买，选取含苞待放、花色、大小结实一致的单头花蕾。2.2 试验设计配制浓度各为3%、5%、10%的甘露糖溶液，将康乃馨花枝剪成15cm长，之后插入上述溶液中进行常温脉冲处理，对照为去离子水处理。两处理花朵数为19枝，时间为16h。脉冲处理结束后，切取花茎长度为4cm的康乃馨花枝，置于去离子水中瓶插。从切花瓶插之日起，观察花朵萎蔫情况，并每隔1d定时用游标卡尺记录花朵最大直径（简称花径）。从形态观测结果得出能延缓切花衰老的最适甘露糖溶液浓度。用该浓度的甘露糖溶液对康乃馨切花进行脉冲处理及瓶插试验（两处理花朵数各为63朵），方法同上。观察期内，用温度计分别定时测量室温和水温，保持环境的一致性。每隔2d 进行各生理生化指标的测量，每个处理进行3 次重复即测量3朵花，结果取平均值。2.3 测定指标2.3.1 瓶插寿命计算保鲜天数，从瓶插开始，每天观察外部形态指标，当花失水萎蔫或发生“垂头”现象，即作为瓶插寿命结束的标志。2.3.2 可溶性蛋白含量的测定用考马斯亮蓝G-250法9测定蛋白质含量。称取花瓣0.5g放入研钵中，加入2ml蒸馏水和少许石英砂研磨，磨成匀浆后用6ml蒸馏水分次洗涤研钵，洗涤液收集在同一离心管中，在4000rmin-1下离心10min，弃去沉淀，上清液转入容量瓶，以蒸馏水定容至10ml，摇匀后待测。吸取样品提取液0.1ml，放入具塞刻度试管中（设两个重复管），加入5ml考马斯亮蓝G-520试剂，充分混合，放置2min后，在595nm下比色，记录吸光度值，通过标准曲线查得蛋白质浓度（gml-1），以蒸馏水做空白。结果计算：样品蛋白质含量（gg-1鲜重）= CV/W式中，C为查标准曲线所得每管蛋白质浓度，gml-1；V为提取液总体积，ml；W为样品质量，g。2.3.3 丙二醛含量的测定用硫代巴比妥（TBA）法9。取0.5g花瓣样品，加5TCA（三氯乙酸）5ml，研磨后所得匀浆在3000rmin-1下离心10min，上清液备用。吸取1.5mlMDA提取液于刻度试管中，加入2.5ml 0.5巴比妥酸的5三氯乙酸溶液，于沸水浴上加热1015min，迅速冷却。于1800g离心10min。取上清液于532nm、600nm波长下测定光密度，以蒸馏水调零。结果计算：丙二醛含量（nmolg-1）=（OD532-OD600）AV/a1.5510-1W式中，A为反应液总量，（4ml）；V为提取液总量，（5ml）；a为测定用提取液量，（1.5ml）；W为材料重，g；1.5510-1为丙二醛微摩尔吸光系数。2.3.4 细胞膜透性的测定用电导法9测定花瓣细胞膜透性。用直径1cm打孔器取样，为了减少伤口处物质外流的影响，需将花瓣小圆片用去离子水充分冲洗后再用滤纸吸干外附水备用。用天平准确称取0.5 g的花瓣小圆片对应放入已编号的三角瓶中，加入30ml的去离子水，在振荡器上浸泡2 h后，测定电导值。将测过电导率的各三角瓶（浸泡液及材料）放入沸水中煮沸10min，冷却至室温后再测一次总电导率值。相对外渗电导值 = 煮沸后总电导率值煮沸前电导率值3 结果与分析3.1 不同浓度甘露糖溶液处理对康乃馨切花花径的影响表1 不同浓度甘露糖溶液处理对康乃馨切花花径的影响（cm）Table1 Effects of different mannose solution on carnation flower scape瓶插天数（d）2468101214处理3%的甘露糖2.653.424.335.235.495.606.165%的甘露糖2.573.174.004.544.824.764.9910%的甘露糖2.573.183.834.354.554.605.03CK2.754.305.766.376.626.636.74 由表1可知，瓶插康乃馨切花在5%和10%甘露糖溶液中基本不开放，观赏效果不佳。而在浓度为3%时能正常开放。由此可知，3%浓度的甘露糖溶液较适用于瓶插试验。3.2 甘露糖处理对康乃馨切花瓶插寿命的影响用甘露糖溶液处理康乃馨切花瓶插寿命可达30 d，而对照处理的瓶插时间为18d22d，可见甘露糖具有保鲜作用，可延缓康乃馨切花衰老。3.3 甘露糖处理对康乃馨切花花瓣可溶性蛋白含量的影响甘露糖溶液脉冲处理后的康乃馨切花在瓶插过程中花瓣可溶性蛋白的含量呈逐渐上升的趋势（如图1），而对照处理的可溶性蛋白含量却出现波动，且总体含量水平较低。可见，甘露糖在一定程度上延缓了切花花瓣中可溶性蛋白的降解。图1 甘露糖处理对康乃馨切花花瓣可溶性蛋白含量的影响Fig.1 Effects of mannose pretreatment on soluble protein content of carnation petal3.4 甘露糖处理对康乃馨切花花瓣MDA含量的影响由图2可知，甘露糖溶液脉冲和对照处理的康乃馨切花花瓣的MDA含量从瓶插开始含量变化不大，有略微升高的趋势，且甘露糖溶液处理的花瓣MDA含量水平始终低于对照处理。可见，甘露糖溶液在一定程度上延缓了康乃馨切花花瓣的衰老。图2 甘露糖处理对康乃馨切花花瓣MDA含量的影响Fig.2 Effects of mannose pretreatment on the MDA of carnation petal3.5 甘露糖处理对康乃馨切花花瓣细胞膜透性的影响由图3可知，虽然康乃馨切花花瓣在瓶插过程中相对电导率变化不大，但是从第3 d开始，对照及甘露糖溶液脉冲处理的切花花瓣其细胞膜透性呈逐渐上升的趋势。而后者处理的上升趋势较为缓慢，总体水平低于对照。说明甘露糖能维持细胞膜透性系统的稳定性，防止电解质渗漏，具有延缓细胞膜损伤的作用。图3 甘露糖处理对康乃馨切花花瓣细胞膜透性的影响Fig.3 Effects of mannose pretreatment on electronic conduction rate of carnation petal4 结论与讨论康乃馨切花的瓶插寿命观察是最直观反应其衰老快慢的一项指标10，因此，从瓶插寿命来看，浓度为3%的甘露糖溶液具有保鲜作用，可延缓康乃馨切花花瓣的衰老。可溶性蛋白质含量的下降则是花瓣衰老的重要信号11。试验结果表明，对花瓣而言，康乃馨切花经过3%的甘露糖溶液脉冲处理后可延缓可溶性蛋白质含量的下降，这可能是甘露糖能够使切花的花寿命、瓶插寿命延长及观赏品质得以改善的重要原因。膜脂的过氧化是引起花瓣衰老的重要原因。MDA作为膜脂过氧化的主要产物之一，其含量的高低可以反映膜脂过氧化程度12。本试验中，从3%的甘露糖溶液脉冲处理能够减少MDA积累的结果表明，甘露糖可能通过减轻膜脂的过氧化而延缓花瓣的衰老。细胞膜不仅是分隔细胞质和胞外成分的屏障，而且也是细胞与环境发生物质交换的主要通道，是细胞感受环境胁迫最敏感的部位。细胞膜的选择透性是其最重要的功能之一，各种逆境伤害都会造成质膜选择透性的改变或丧失，因此，质膜透性的测定作为植物抗性研究中的一个生理指标13。从实验结果可看出，3%的甘露糖溶液能维持细胞膜透性系统的稳定性，防止电解质渗漏，具有延缓细胞膜损伤的作用。综上所述，浓度为3%的甘露糖溶液脉冲处理对康乃馨切花花瓣衰老具有一定的延缓作用，并能够在一定程度上提高切花的观赏品质。参 考 文 献1 孙勇, 曲春民, 孙志利, 等. 鲜花保鲜技术及环境影响因素分析J. 河北建筑程学院学报, 2006,6(02):9-11.2 乔勇进, 徐芹, 王海宏, 等. 鲜切花采后处理及保鲜技术J. 农产品加工, 2007, (11) :7-11.3 张洪路, 周红翠. 自制保鲜剂延长鲜果期J. 果农之友, 2003,(10):43.4 王丽, 谷元昌. 甘露糖延迟梨果实后熟的效应J. 北方果树, 1990,(04):51.5 王韬, 王春霞, 廖玉, 等. 甘露糖对大麦品种不同外植体生长的影响J. 武汉植物学研究, 2007, 25(3): 277-281.6 吴杨, 傅华英, 赵书环, 等. 甘露糖对甘蔗外植体再生的影响J. 福建农林大学学报, 2008,37(03): 225-226.7 彭世清, 陈守才. 甘露糖阳性选择系统的建立及在番茄转化中的应用J. 农业生物技术学报, 2005, 13(2):141-144.8 张慧军, 石跃进, 李燕娥, 等. 甘露糖在棉花基因转化中对愈伤的诱导和分化的影响J. 棉花学报, 2005, 17(5): 316-317.9 郝建军, 康宗利, 于洋, 等. 植物生理学实验技术M. 化学工业出版社, 2006:169-172,107-108,159.10 蔡永萍, 聂凡, 张鹤英, 等. 水杨酸对月季切花的保鲜效果和生理作用J. 园艺学报, 2000, 27(3): 228-230.11 林银凤, 董华强, 汪跃华,等. 1-MCP对月季切花的保鲜作用研究J. 广东农业科学, 2004,3:26-27.12 袁平成, 文凤竹. 采前处理对麝香百合鲜切花贮藏保鲜效果的研究J. 江西农业大学学报, 2006, 28(5) :674-677.13 张林青, 任旭琴, 蒋利强. 壳聚糖对瓶插非洲菊切花寿命的影响J. 江苏农业科学, 2006,6:239- 242.Studies on Effects of Mannose Pretreatment on Fresh Keeping of Carnation Cut Flowers Zhong Guihua（College of Agriculture and Landscape Architecture,Zhongkai University of Agriculture and Engineering,Guangzhou 510225,China）Abstract: Pulse treating with mannose solution of 3% for sixteen hours and culturing with water for carnation and the best preserving effect by observing the vase life of cut carnations and measuring with soluble protein content, malonaldehyde content, and electronic conduction rate of petals were studied in this paper. The results showed that pretreatment with 3% mannose solution can significantly extend the vase life of cut carnations, and postpone the falling process of soluble protein content of petals, reduce malondialdehyde (MDA) content accumulation and to maintain cell membrane permeability system of the petals, to a certain extent improve the viewing quality of carnations cut flowers.Key words: carnation cut flowers; mannose pretreatment; declining of petals; influence袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿