标准解读
《GB/T 38133-2019 转基因苜蓿实时荧光PCR检测方法》是一项国家标准,专门针对转基因苜蓿的检测制定。该标准规定了使用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术来定性和定量分析转基因苜蓿的方法。它适用于转基因苜蓿及其制品中特定目标序列的存在与否及含量测定。
根据此标准,首先需要准备样品DNA提取,采用适合于植物材料的标准程序从待测样本中分离出高质量的DNA。随后,通过设计特异性引物和探针来进行目标序列的扩增与识别。这些引物和探针应能够准确地靶向所关注的转基因成分,并且具有高度的特异性和灵敏度以确保结果的准确性。
在实际操作过程中,将含有目标DNA片段的样品加入到含有适当浓度的dNTPs、Taq DNA聚合酶等反应体系中,在热循环仪上按照设定好的温度曲线进行多次循环扩增。每次循环后都会产生新的双链DNA分子,从而实现目标序列的数量级增长。同时,由于采用了荧光标记技术,可以在每次循环结束时通过监测荧光信号强度变化来间接反映产物累积情况,进而实现对起始模板量的精确定量。
整个过程还需要设立阳性对照、阴性对照以及内参基因等多个控制组别,以确保实验的有效性和可靠性。此外,对于不同批次之间的结果比较,还需注意标准化处理,比如采用相同的标准品作为参考物质,保证数据间的一致性和可比性。
该标准还详细列出了实验所需的具体条件参数设置、仪器设备要求以及质量控制措施等内容,为实验室开展相关检测工作提供了全面指导。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
- 现行
- 正在执行有效
- 2019-10-18 颁布
- 2019-10-18 实施
©正版授权
文档简介
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