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体液细胞形态学探讨 二 主要内容 一 脑脊液细胞形态学检查概述二 脑脊液细胞形态学检查方法三 脑脊液细胞形态学检查应用及案例分析 一 脑脊液细胞形态学检查概述 脑脊液概述 脑脊液 cerebrospinalfluid CSF 是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体 主要在脑室脉络丛产生 流经第三 第四脑室 进入脑和脊髓表面的蛛网膜下腔及脑池 通过蛛网膜绒毛吸收回静脉 脑脊液的主要功能是保护脑和脊髓免受震荡损伤 调节颅内压 提供营养物质 运走代谢产物 维持神经系统的弱碱环境 pH7 31 7 34 成人脑脊液总体积约150ml 每天大约产生500ml的脑脊液 0 35ml min 每天更新3到4次 主要通过腰椎穿刺获得 由于脑脊液渗透压及成分的原因 脑脊液中细胞易溶解退化 细胞形态完整性保持时间短 脑脊液标本要求 细胞学检查一般取穿刺第三管 第一管细胞培养 第二管生化或免疫学检查 量 细胞学检查至少需要1ml 3ml或以上更好 试管 采用EDTA抗凝 避免标本凝固 及时送检 应收集新鲜的脑脊液 并尽快送检 2小时内 防止细胞溶解退变 若镜下见溶解细胞 报告时应提示溶解 建议复查 以免误诊或漏诊 如标本不能立即进行制片 应4 短期冷藏 温度越低细胞保存时间越长 影响越小 预计标本储存时间超过48小时 可加入等体积的50 乙醇保存 需特别引起重视的是细胞学标本永远不能冷冻 脑脊液正常细胞 健康成人脑脊液细胞数 0 8 儿童脑脊液细胞数 0 15 仅见淋巴细胞和单核细胞 均来源于外周血 体积稍增大 比例为 7 3 6 4之间 未见红细胞 中性粒细胞偶见脑脊液腔壁细胞 脉络丛 室管膜 蛛网膜细胞 神经元 脑组织 淋巴细胞 脑脊液正常细胞 小淋巴细胞 是正常脑脊液中的主要细胞 约占细胞总数的60 70 当脑脊液细胞总数增多 比例失调 或伴有病理性细胞 如中性粒细胞 激活淋巴细胞 吞噬细胞和浆细胞 时 则有诊断意义 可见于中枢神经系统感染和非特异性脑膜刺激反应 大淋巴细胞 胞体较小淋巴细胞稍大 实际上是一种免疫细胞 原由小淋巴细胞被激活转化而成 大淋巴细胞偶见正常脑脊液中 增多见于中枢神经系统感染和非特异性脑膜反应 脑脊液正常细胞 单核细胞 单核细胞其形态与血中相似 正常情况下 脑脊液中的单核细胞约占细胞总数的30 40 和淋巴细胞的比例约为3 7或4 6 若比例倒错或单核细胞形态异常时则为病理性 可见于由多种原因引起的脑膜非特异性反应和脑组织的破坏性病变 如脑挫伤 缺血 出血 炎症和变性病等 脉络丛 室管膜细胞 约0 5 的腰椎穿刺标本可见 细胞核呈圆形或椭圆形 较规整 偏位 染色质疏松 无核仁 胞浆量丰富 常单个存在或少量细胞聚集 易被误诊为恶性肿瘤细胞 应注意鉴别 常见于婴儿脑积水 脑室穿刺或造影术后 常无诊断价值 脑脊液正常细胞 蛛网膜细胞 细胞常成簇出现 胞浆量多 呈灰蓝色 核卵圆形 可见核仁 常见于气脑造影或腰穿的脑脊液标本中 可能是蛛网膜的机械性损伤引起 脑脊液正常细胞 神经元 细胞形态 多角形 核单个 椭圆形 核仁单个而突出 常无诊断价值 脑脊液正常细胞 脑脊液异常细胞 正常脑脊液标本是不会出现下列细胞的 若出现下列细胞则表明存在病变或污染 1 激活淋巴细胞 转化型淋巴细胞 大淋巴样细胞 脑样淋巴细胞2 浆细胞3 激活单核细胞 吞噬细胞4 多个核粒细胞 中性 嗜酸和嗜碱 5 肿瘤细胞 原发或转移 6 病原体 细菌 寄生虫及包涵体等 中性粒细胞 脑脊液异常细胞 中性粒细胞与血中同类细胞相似 正常脑脊液中不应有中性粒细胞 但因腰穿时偶可发生难以避免的穿刺损伤 致使脑脊液中可见中性粒细胞污染 此时脑脊液细胞计数大多正常 仅偶见几个中性粒细胞可资鉴别 中性粒细胞增多提示粒细胞反应 主要见于脑和脑膜的细菌及病毒感染 脑外伤 脑血管病 椎管内药物注射以及某些恶性肿瘤 嗜酸性粒细胞 脑脊液异常细胞 嗜酸性粒细胞与血中同类细胞相似 调节变态反应 释放芳香基硫酸酯酶和组胺酶清除慢反应物质和组胺 正常脑脊液中 嗜酸性粒细胞不超过1 婴幼儿可大于4 嗜酸性粒细胞增多 见于中枢神经系统寄生虫 如囊虫病 结核性脑膜炎 病毒性脑膜炎及少数脑瘤患者 嗜碱性粒细胞 脑脊液异常细胞 嗜碱性粒细胞与血中同类细胞相似 正常脑脊液中很难见到 嗜碱性粒细胞增多 见于炎症 异物反应 慢性粒细胞白血病 转化型淋巴细胞 形态特征 由小淋巴细胞受抗原刺激转化而来 细胞形态不规则 可见伪足形成 包膜粗糙 不完整 直径一般 10um 胞浆嗜碱性 无颗粒 核呈圆形 常有切迹 核膜清楚 染色质较疏松呈网状 可见1 2个核仁 少见有丝分裂 多见于细菌性脑膜炎 特别是恢复期 病毒性脑膜炎 结核性脑膜炎 脑脓肿 多发性硬化 脑梗塞和蛛网膜下腔出血等 脑脊液异常细胞 大淋巴样细胞 形态特征 由抗原激活转化而成 胞体和胞核均比大淋巴细胞大 为小淋巴细胞的2 4倍 胞浆量多 嗜碱性 染色偏蓝 核染色质稍增粗 着色稍深 近核处可见明显的圆形淡染区 大淋巴样细胞增多可见于结核等中枢神经系统感染 以及脊髓造影 蛛网膜下腔出血 脑梗塞和脑肿瘤等情况 并常伴有明显的转化型淋巴细胞反应及浆细胞的存在 脑脊液异常细胞 浆细胞 脑脊液异常细胞 由B淋巴细胞转化而来 正常脑脊液中不存在浆细胞 它的出现必伴有抗原刺激 常见于中枢神经系统感染 尤以结核性脑膜炎 脑囊虫病和病毒性感染更甚 红细胞吞噬细胞 含铁血黄素吞噬细胞 脑脊液异常细胞 主要功能 吞噬清除作用 上述细胞提示出血 肿瘤细胞 脑脊液异常细胞 分为原发和继发 原发以恶性胶质瘤和髓母细胞瘤最易发现瘤细胞 继发分为转移性肿瘤细胞 白血病细胞和淋巴瘤 转移性肿瘤细胞细胞以肺癌脑转移最多见 其次为乳腺癌 胃腺癌 黑色素瘤等 肿瘤细胞 脑脊液异常细胞 颅内肿瘤细胞 细胞较大 核大 形态多变 染色质多 结构与着色不尽相同 偏碱 核仁的体积和数量增加 呈多形性 占据染色质大部分 胞浆深蓝色 脑脊液标本中发现肿瘤细胞 诊断价值极大 特别是对脑膜癌症的诊断更优于其他检查 肿瘤细胞 脑脊液异常细胞 白血病细胞 脑脊液中白血病细胞的形态 结构与周围血液和骨髓中所见大致相同 脑脊液中的白血病细胞是诊断中枢神经系统白血病的重要依据 特别对那些临床上尚未出现中枢神经系统受损症状的患者更为重要 肿瘤细胞 脑脊液异常细胞 淋巴瘤细胞 淋巴瘤分为霍奇金和非霍奇金淋巴瘤两大类 但仅以脑脊液细胞学检查对其进行分类极为困难 须结合临床资料和组织学观察才能做出准确的分类 霍奇金淋巴瘤的细胞体大 两个或数个细胞核紧紧相连 核椭圆 呈对影形或扭曲重叠 染色质疏松 细致 核仁大 色深蓝 胞浆边界不清 非霍奇金淋巴瘤细胞常大量成堆出现 细胞奇形怪状 胞核呈豌豆状或畸形 染色质密集 核仁大而不规则 胞浆和胞核可见空泡 胞浆强嗜碱性 在脑脊液中发现 淋巴瘤细胞是诊断中枢神经系统淋巴瘤的可靠依据 在脑脊液细胞学检查时 特别要注意脑膜白血病人脑脊液中出现白血病细胞 肿瘤病人或转移癌病人脑脊液中可出现癌细胞 其特点 细胞粒增大 畸形 核仁增多 增大 变形 核分裂相明显增多 胞浆减少 核浆比例增大等 中枢神经系统肿瘤时可出现癌细胞 中枢神经系统炎症中性粒C增加 脑膜白血病出现原始及幼稚的白血病细胞 脑出血可发现吞噬细胞 浆内含红细胞或铁血黄素 二 脑脊液细胞形态学检查方法 细胞玻片离心法 脑脊液约0 5ml 800转 分 10分钟 瑞 姬染色镜检分类细胞学分析报告 脑脊液细胞形态学检查方法 三 脑脊液细胞形态学检查的应用及案例分析 感染性疾病1 化脓性脑膜炎2 病毒性脑炎3 结核性脑膜炎4 隐球菌性脑膜炎脑肿瘤和脑膜癌病出血性疾病免疫性疾病 脑脊液细胞形态学检查的应用 1 白细胞数显著增多 2 以中性粒细胞反应为主 3 白细胞内外常可发现病原菌 4 经有效抗生素治疗 白细胞数短期内下降明显 化脓性脑膜炎细胞学特点 1 患者资料 男 64岁 第四脑室出血 行腰大池引流术2周后突发高热 意识障碍进行加重 2 脑脊液细胞学检查 白细胞计数6080 106 L 细胞学呈中性粒细胞反应型 中性粒细胞内外可见细菌 形似球菌 提示化脑 3 脑脊液生化 葡萄糖1 78mmol L 4 脑脊液细菌培养 表皮葡萄球菌 案例 中性粒细胞内可见球菌 1 无色透明 2 白细胞数轻度升高 3 淋巴细胞反应型 可偶见单核细胞 病毒性脑膜炎细胞学特点 1 患者资料 女性 23岁 因感冒头痛发热6天 呕吐胃内容物多次 精神行为异常4天 2 头颅MRI 左侧颞 岛及额叶及右侧岛叶异常信号影 并左侧额顶岛叶软脑膜异常强化 考虑病毒性脑炎 3 治疗情况 给予抗病毒 降颅压及对症治疗 病情好转 无发热 无头痛 无胡言乱语 案例 1 白细胞数多中度升高 部分轻度或显著升高 2 多呈混合细胞反应 3 中性粒细胞反应型 4 淋巴细胞反应型 结核性脑膜炎细胞学特点 1 患者资料 男 21岁 因 突发头痛发热 视物模糊 行走不稳及发作性肢体抽搐4天 入院 2 影像检查 CT显示 脑积水 MRI示 脑膜及脑干周围明显强化 考虑炎性病变 3 初步诊断 脑积水 案例 细胞学呈淋巴细胞反应型 发现抗酸杆菌 1 多无色透明 2 白细胞数轻中度增高 3 细胞学多呈混合细胞反应 4 镜下发现隐球菌可确诊 隐球菌性脑膜炎细胞学特点 1 患者资料 男性 41岁 头痛 发热2天 精神行为异常10小时入院 2 影像检查 MRI平扫 增强 示膜膜强化 结合病史考虑脑膜炎 3 初步诊断 头痛查因 病毒性脑炎 案例 墨汁染色 荚膜抗原乳胶凝集试验 1 白细胞数正常或轻度增高 2 淋巴 单核细胞反应 3 单核细胞激惹表现 4 发现肿瘤细胞可确诊 脑肿瘤及脑膜癌病细胞学特点 1 患者资料 男 46岁 无明显诱因左侧肢体无力 记忆力下降 反应迟钝3月入院 2 影像检查 外院头颅CT 左侧放射冠区腔隙性脑梗死 脑室轻度扩大 PET CT 右侧大脑半球及左侧部分额叶代谢降低 考虑为良性病变 脑炎可能 双肺炎症 双肺 双肺门及纵隔内未见明显恶性肿瘤征象 胃肠道 胰腺 肝脏及胆囊 胆总管内均未见明显恶性肿瘤征象 3 入院诊断 颅内感染 案例一 1 患者资料 女 19岁 大一学生 一年前突发头痛 呕吐 发热 辗转市内曾多家三甲医院 一直按非特异性脑炎或结核性脑膜炎治疗 经规范抗痨治疗40多天 病情无明显好转 主要表现为头痛 头昏 双

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