新药临床前药理学研究ppt课件.pptx

新药临床前药理学评价 1 沈甫明药理学教研室教授博导上海市药理学会副理事长ClinExpPharmacolPhysiol编委 ActaPharmacolSin等审稿人国家自然科学基金 上海市科委基金 北京市自然基金评审专家 2 基金 04 06 08 10分别获得国家自然科学面上项目资助04 08分别获得上海市基础研究重点项目资助10年获得上海市教育委员会科研创新重点项目资助09年获国家重大新药创制 药效学平台 文章 2000年以来发表SCI论文46篇 Hypertension CritCareMed CardiovascDiabetol等 3 主要内容 概述主要药效学研究药理作用机制研究 4 新药研究的基本程序 概述 开始时机 1 2 3 4 概述 6 基本要求 合格的课题负责人和训练有素的研究人员受试药要求 结构清楚 工艺稳定 符合临床研究用药品质量标准符合规定的动物和必要的仪器设备条件良好的实验设计 详实的记录和正确的统计处理 概述 7 研究意义 1 是新药评价的最基本的核心内容之一2 是药监部门批准上临床的主要依据之一3 为新药临床研究提供可靠的实验依据4 有利于培养新药评价人才和学科发展 概述 8 药学评价是基础基础不牢大楼要倒药效评价是前提没有药效进行不了毒性评价是核心安全没保证临床不敢用临床评价是关键临床有效开发成功 概述 9 研究意义 1 是新药评价的最基本的核心内容之一2 是药监部门批准上临床的主要依据之一3 为新药临床研究提供可靠的实验依据4 有利于培养新药评价人才和学科发展 概述 10 附件一 中药 天然药物 附件二 化学药品 附件三 生物制品注册分类及申报资料要求 药理毒理研究资料 药理毒理研究资料综述 中19 化16 生16 主要药效学试验资料及文献资料 20 17 17 一般药理研究的试验资料及文献资料 21 18 18 复方制剂中多种成份药效 毒性 药代动力学相互影响的试验资料及文献资料 无 22 无 动物药代动力学试验资料及文献资料 28 27 21 概述 11 研究意义 1 是新药评价的最基本的核心内容之一2 是药监部门批准上临床的主要依据之一3 为新药临床研究提供可靠的实验依据4 有利于培养新药评价人才和学科发展 概述 12 动物模型的意义 1 避免了人体实验造成的风险和伦理问题2 利于研究发病率低 病程长的疾病3 可严格控制实验条件 排除复杂因素4 样品收集方便 结果分析容易 概述 13 动物模型的意义 1 避免了人体实验造成的风险和伦理问题2 利于研究发病率低 病程长的疾病3 可严格控制实验条件 排除复杂因素4 样品收集方便 结果分析容易 概述 14 主要药效学研究 15 定义 主要药效学primarypharmacodynamics是与防治作用有关的主要药理作用研究 主要药效学 16 目的 作为一个药物 必须是有药效的 发现新药 显露原来作用不明的候选药物的有效药理作用 评选新药 弄清有效药物的优缺点 决定取舍 不致滥竽充数 主要药效学 17 阿片类化合物 镇痛作用 抗感染药 杀 抑菌效果 NSAIDs 抗炎 镇痛 解热 受体阻断药 抗心绞痛 降压 抗肿瘤药 消除 抑制肿瘤 主要药效学 18 总的原则 按 新药药效学研究技术指导原则 进行 主要药效学 总的要求二种模型二种动物量效关系时效关系指标客观各种对照临床途径体外试验至少重复3次 19 新药药效学分类表 主要药效学 新药药效学分类表 主要药效学 新药药效学分类表 主要药效学 研究内容 药物作用的性质 stimulation depression agonism antagonism 和选择性 selectivity 量 效关系 dose responserelationship 时 效关系 time responserelationship 作用机制分析 analysisformechanismofaction 主要药效学 23 研究内容 1 动物选择2 模型建立3 检测指标4 测试方法5 剂量要求6 实验设计7 统计处理8 给药途径9 客观总结10 复方慎重 24 1 动物选择 1 动物选择依据符合要求 品系清楚成年健康 雌雄各半特定模型 特定动物 研究内容 25 昆明种 白化小鼠 封闭群主要生物学特征 繁殖率和存活率高抗病率和适应性强广泛用于药理学和毒理学研究 如镇痛抗炎 学习记忆 神经系统等实验 常用实验动物 C57BL 黑色小鼠 近交系主要生物学特性 乳腺癌自然发病率低对放射线中度抵抗对结核杆菌敏感遗传背景清楚 基因组测序完成常用于转基因小鼠的制备 肿瘤学和遗传学的研究 常用实验动物 裸小鼠 突变系主要生物学特性 先天性胸腺发育缺陷无被毛T细胞功能缺失主要用于免疫学 肿瘤学研究和单克隆抗体的制备 常用实验动物 SD 白化大鼠 封闭群主要生物学特性 对疾病抵抗力较强自发性肿瘤的发病率较低对性激素敏感性高广泛用于药理学和毒理学研究 如高血压 镇痛抗炎 内分泌 药物依赖性等实验 常用实验动物 短毛豚鼠主要生物学特性豚鼠嗅觉 听觉较发达不能合成维生素C豚鼠易引发速发性变态反应呼吸系统和消化系统抗病能力较差应用于过敏反应 皮肤刺激试验 平喘 镇咳 局部麻醉药等研究 常用实验动物 新西兰兔生物学特性听觉和嗅觉灵敏性成熟期因品种而异对致热物质敏感主要用于心血管病 热源 消化道炎症等实验 常用实验动物 比格犬国际上标准实验用犬 性情温顺 易于驯服和抓捕抗病能力强遗传性能稳定 对实验反应一致 常用于高血压 条件反射 消化系统 脑血管病等实验 常用实验动物 猕猴生物学特性大脑发达生理生殖与人非常接近易感某些人类传染病常用于药物依赖性 疫苗 行为科学和神经生理等实验 常用实验动物 1 动物选择 1 动物选择依据符合要求 品系清楚成年健康 雌雄各半特定模型 特定动物 有关问题 34 ICR小鼠生长曲线 Balb c小鼠生长曲线 1 动物选择 有关问题 35 SD大鼠生长曲线 Wistar大鼠生长曲线 1 动物选择 有关问题 36 1 动物选择 有关问题 SHR SpontaneouslyhypertensiveratBP变化特点 37 1 动物选择 2 注意种属异同性人与动物之间不同种属间的同种不同品系 应选择多种动物进行实验多种动物上效应一致 对人的预测价值大 研究内容 38 2 模型建立 三种情况有合适的动物模型 如抗感染 镇痛 移植性肿瘤等无较好的动物模型 如银屑病 晕动病 药物依赖等无恰当的动物模型 如精神病 神经官能症 头痛等 研究内容 39 提倡整体动物 关注动物福利离体实验要特异注意体内体外差别注意致模剂 麻药等选择 2 模型建立 新药的主要药效作用 应当用体内体外两种以上试验方法获得证明 其中一种必须是整体的正常动物或动物病理模型 研究内容 给结核菌染色保罗 艾立希给患结核病兔子耳朵注射亚甲兰只在兔子的神经末梢呈色以为找到了一种止痛药惊人的念头 染料能杀死病菌 不伤害人体苯并红紫可以杀死豚鼠体内锥体虫但豚鼠失明 苯并红紫核心是砷和苯 PaulEhrlich 胂凡纳明 41 合成大量的化合物发现编号为第606的化合物最有效 胂凡纳明拍摄影片 神奇的子弹 梅毒的病原体很象是鞭毛虫似的原生动物在人体上试验获得了奇迹般的效果这个成功使得当时的医学界大为兴奋 胂凡纳明 42 罂粟乳白色果汁暴露于空气后干燥凝结成生鸦片 经提炼生成吗啡 二乙酰吗啡 海洛因 阿片类药物 43 药物依赖的流行情况 我国登记在册的吸毒人数逐年增加 涉毒地区遍布全国2148个县市 实际吸毒人数是登记在册的5 10倍 7万 140万 20倍 44 身体依赖性 一种适应状态耐受性和戒断症状戒断症状使人非常痛苦甚至有生命危险 45 精神依赖性 特殊的精神效应异常强烈渴求感强迫性觅药行为重复体验和享受欣快感避免断药后的身心折磨 一朝吸毒 十年戒毒 终身想毒 强大精神依赖真实写照 47 磺胺药 Areddye Prontosil curedstreptococcalinfectionsinmice 1932 GerhardDomagk 1895 1964 有关问题 当时认为 百浪多息分子结构中的偶氮键是抗菌药效团后来发现 经体内代谢后才转化成具有抑菌作用的磺胺实验证明 磺胺在体内外均有抑菌活性由此确立 磺酰胺类药物的基本结构 1935 磺胺药 有关问题 磺胺结构 偶氮 49 磺胺药 有关问题 1939年 获得诺贝尔医学和生理学奖11月份被迫拒绝接受1947年 接受诺贝尔奖二战后从事结核病和癌症的化学疗法研究 50 3 检测指标 反映主要药效作用的药理本质客观 定量 灵敏 适当 有限度多种指标综合评价 过分灵敏 假阳性 不够灵敏 假阴性 同类药已较多的 应订高一点 尚缺理想药的 可订低一点 研究内容 51 定性 qualitative 性质不同 主观判断兴奋 抑制 激动 拮抗 活化 抑制死亡 存活 增加 减少 扩大 缩小 定量 quantitative 数量多寡 客观测量绝对量 有度 量 衡单位计量 InternationalSystem 相对量 比率 影象密度 评分量表 score 研究内容 52 4 测试方法 研究方式 体外 invitro 和体内 invivo 研究层次 整体器官细胞分子 研究内容 53 研究层次 整体动物 intactanimals 学习记忆血压呼吸 研究内容 54 学习记忆障碍动物模型学习记忆获得障碍 东莨菪碱学习记忆巩固障碍 环己酰亚胺学习记忆再现障碍 乙醇方法跳台法 Stepdowntest 避暗法 Stepthroughtest 迷宫 maze 促智药 研究内容 55 离体器官 isolatedorgans 豚鼠迴肠大鼠心脏大鼠膈肌 膈神经小鼠输精管兔主动脉条兔子宫蛙心脑片 研究层次 研究内容 56 细胞系 cell lines 脑 海马 垂体 血管 平滑肌 心肌 乳头肌 肝肾脾骨髓淋巴细胞 原代或传代培养 研究层次 研究内容 57 4 测试方法 公认 灵敏 特异 可客观计数二种动物的同一模型或二种动物不同模型 有关问题 58 5 剂量要求 依据 预实验 文献报道 参考同类药要求 做出量 效关系剂量范围半数有效量 medianeffectivedose ED50 整体实验至少有3个剂量半数致死量 medianlethaldose LD50 治疗指数 therapeuticindex TI LD50 ED50体外试验剂量太高无意义 研究内容 59 剂量间等比 0 5 1 2 4 8 mg kg 1 mg kg 浓度1 10 100 mol L 1 mol L 5 剂量要求 研究内容 60 剂量 反应曲线 dose responsecurve 研究内容 61 6 实验设计 随机 randomization 对照 control 重复 replication 研究内容 62 6 实验设计 完全随机设计将受试动物完全随机地分配到n个处理组 各组分别接受不同的处理 试验结束后比较各组均数间的差别有无统计学意义 推论处理作用的效应 研究内容 63 用完全随机设计方法将20只 小鼠等分为4组进行试验 6 实验设计 动物编号取随机数随机数排序分组 研究内容 64 常用获得随机数的方法 计算器SHIFTRAN 查随机数表软件 6 实验设计 研究内容 65 完全随机设计分组结果 01 05分到对照组 06 10分到高剂量11 15分到中剂量 16 20分到低剂量 6 实验设计 研究内容 66 将16条 犬按体重随机区组分4组 4个区组犬按随机区组设计分配结果 6 实验设计 研究内容 7 统计处理 计量资料变量值表现为有数字大小和单位的数据计数资料 eg 翻正反射消失出现动物数 变量表现为按某属性划分的定性类别 称为分类数据 清点各分类的个数后得到的资料称为计数资料等级资料 eg 痊愈 显效 好转 无效 变量按变化程度大小划分得到的分类 清点各分类的个数后得到的资料称为半计量或等级资料 研究内容 68 7 统计处理 计量资料计数资料等级资料 有意义 齐 不齐 F检验 H检验 结束 无意义 无意义 有意义 LSD tDunnett t 非参数Dunnett tNemenyi检验 结束 方差齐性 检验 多重比较 多重比较 2检验 非参数检验Ridit 研究内容 69 灌胃ig po 静脉内iv皮下注射sc腹腔内注射ip侧脑室内注射icv局部用 皮肤 鼻内 直肠内 动物试验须与临床上拟采用的一致 实际操作中如何固定如何给药 8 给药途径 研究内容 70 不同动物不同给药途径常用容量和最大容量 ml 有关问题 71 9 客观总结 对有效性和作用等作出明确的结论正确对待阳性对照药的药效比较统计学意义和实际意义应统筹考虑结论以具体数据说明实际意义 研究内容 72 10 关于复方 研究目的增强疗效降低毒性互补提高顺应性 研究内容 73 组方合理性 药物优选 所选药物在同类药中有优势 最佳配比 合理组方 比例依据 量效关系 有量效关系 确定最佳剂量 时效关系 复方与单药比 起效时间 达峰时间 持续时间等方面有优势 10 关于复方 研究内容 74 组方合理性 拆方分析 所用每一种药的必要性 增效 减毒 互补 其他 药代影响 药动参数及在吸收 分布 排泄 产物和血浆蛋白结合率等的优点 毒性作用 协同 相加 拮抗 无相互