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第八章球菌Coccus 教学大纲 掌握 葡萄球菌 链球菌 淋病奈瑟菌的生物学性状 金黄色葡萄球菌的主要致病物质 所致疾病 葡萄球菌蛋白A SPA 的主要性质及其应用 链球菌的分类 A族链球菌的主要致病物质及其所致疾病 抗O试验 原理及应用 淋病奈瑟菌的致病性 微生物学检查及防治原则 熟悉 葡萄球菌的分布与分类 葡萄球菌免疫性与防治原则 了解 凝固酶阴性葡萄球菌 B群 D群 甲型链球菌 肺炎链球菌 脑膜炎奈瑟菌 问题 什么是SPA 金黄色葡萄球菌的致病物质及其所致疾病 链球菌的主要分类方法 化脓性链球菌的致病物质及其所致疾病 何谓SLO 抗0实验的临床意义 肺炎链球菌的主要致病物质及所致疾病 淋病奈瑟菌的致病物质及所致疾病 C8 病例讨论题1 20岁男性工人 右手指皮肤碰伤伴有化脓性炎症 破损后第6天出现发热 烦躁 腹痛 四肢厥冷 脉搏细微而扪不清 入院时血压50 30mmHg 皮肤呈猩红热皮疹 间有出血点 当即进行抗休克治疗 抽血做血培养 第10天右膝关节肿痛 抽出黄色脓液 细菌培养与药敏试验 经抗生素治疗后好转 2 9岁男学生 突然发生水肿 血尿 蛋白尿及高血压 追问病史 2周前曾有咽喉肿痛 当时未做任何治疗 体格检查 体温38 5 眼睑水肿 血压150 90mmHg 实验室检查 尿检红细胞 蛋白 外周血白细胞数9 109 L 中性粒细胞0 71 3 34岁男职工 寒战 高热 腹泻3天 发热当天曾就诊 就诊时体温39 7 精神萎靡不振 第2天出现轻咳无痰 第3天因病情加重而入院 自述腹痛腹胀 咳嗽 咯黄痰带血 体格检查 血压50 40mmHg 危重病容 大汗淋漓 唇发紫 心律齐 每分钟116次 两肺干锣音 右肩胛下可闻及水泡音 腹平 压痛 X线透视提示右肺下野大片状阴影 4 13岁女孩 因头痛发热呕吐而就诊 体格检查 颈部有明显抵抗 皮肤有少量瘀斑 呈现脑膜刺激体征 外周血液检查 白细胞数为22 5 109 L 中性粒细胞0 90 脑脊液检查 乳白色 混浊 细菌总数20 96 109 L 脑脊液细菌培养 青霉素 磺胺嘧啶静脉滴注4天后病情好转 最后痊愈出院 5 53岁男性职工 3月5日来院就诊 自述20余日前不明原因尿道胀痛流脓尿痛 给以口服药治疗 症状缓解 一天前再出现尿痛尿频尿道分泌物增多 伴腰痛 体格检查 尿道口红肿 挤压尿道可见少量黄色分泌物流出 实验室检查 黄色分泌物涂片染色镜检 见大量中性粒细胞 内有G 双球菌 经阿奇霉素 大观霉素 头孢曲松钠治疗痊愈 致病性球菌 葡萄球菌属链球菌属肠球菌属奈瑟菌属 G G 第一节葡萄球菌属Staphylococcus 一 生物学性状 1 形态与染色G 单个细菌形态为 镜下观察呈 排列 直径约为1 m 无芽胞 无鞭毛 一般不形成荚膜 一 金黄色葡萄球菌 Staphylococcusaureus S aureus 2 培养特性 需氧或兼性厌氧营养要求不高 普通培养基即可温度 37 可分泌金黄色 白色 柠檬色色素色素为脂溶性 可使菌落着色血平板培养致病菌 会出现完全透明溶血环3 生化反应 了解 致病性菌株能分解甘露醇 产酸 触酶阳性 可与链球菌相区分 1 葡萄球菌A蛋白 staphylococcalproteinA SPA 绝大多数金黄色葡萄球菌细胞壁的一种表面蛋白 SPA可与除IgG3外的IgG分子的Fc段发生非特异性结合 结合后的IgG分子Fab段仍能与抗原结合 可用于协同凝集试验 coagglutination 检测微生物抗原 SPA与IgG结合后复合物具有抗吞噬等多种生物学活性 2 荚膜多糖利于细菌粘附 增强侵袭力 3 多糖抗原位于细胞壁 具有群特异性 4 抗原 葡萄球菌抗原结构模式图 协同凝集试验 含A蛋白的金葡菌结合IgG的金葡菌 IgG Ag 5 分类 1 按分泌的色素分为三种 主要性状比较如下 性状金葡菌表葡菌腐葡菌色素金黄色白色白或柠血浆凝固酶 溶血素 耐热核酸酶 A蛋白 分解甘露醇 致病性强弱弱 2 根据有无凝固酶 凝固酶 凝固酶 菌可根据噬菌体分型 目前国际上将金黄色葡萄球菌分为4个噬菌体群 23个噬菌体型 噬菌体分型可用于流行病学调查 3 根据核酸分析的遗传学分型 了解 6 抵抗力 在无芽胞的细菌中金黄色葡萄球菌抵抗力最强 耐干 耐热 耐盐 对某些染料较敏感 如1 10 20万倍稀释的龙胆紫溶液能抑制其生长 对青霉素 金霉素 红霉素和庆大霉素高度敏感 对链霉素中度敏感 对磺胺 氯霉素敏感性差易产生耐药性 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 methicillin resistantS aureus MRSA 已成为医院内感染最常见的致病菌 二 致病性1 致病物质 凝固酶 coagulase 耐热核酸酶 heat stablenuclease 葡萄球菌溶血素 staphylolysin Beta hemolysis杀白细胞素 leukocidin 肠毒素 enterotoxin 表皮剥脱毒素 epidermolytictoxin exfoliationtoxin 毒性休克综合征毒素 I TSST 1 凝固酶 coagulase 致病性葡萄球菌产生的一种能凝固人和兔血浆的蛋白质 凝固酶的作用类似凝血酶原 可被人或兔血浆中协同因子激活变成凝固酶样物质 使液态的纤维蛋白原变成固态的纤维蛋白 进而使血浆凝固游离血浆凝固酶 结合血浆凝固酶 金黄色葡萄球菌的感染易于局限化和形成血栓亦与凝固酶有关 此酶是鉴定该菌的重要依据 2 所致疾病 败血症皮肤表现 剥脱性皮炎 三 免疫性 成人对金葡菌感染有一定的天然抵抗力 宿主免疫力低下时 易引起金葡菌感染 特异免疫性不强 可再感染 四 微生物学检查法 标本直接涂片镜检 典型葡萄球菌 可做初步诊断分离培养与鉴定 血琼脂平板药敏试验食物中毒的检测 五 防治原则 个人卫生皮肤创伤的及时处理医务人员手部充分消毒治疗时应根据药物敏感性试验结果 选用敏感抗菌药物 对反复发作的顽固性疖疮 采用自身菌苗或用类毒素人工自动免疫疗法 防治原则 防 消毒 注意个人卫生 防止医源性感染 加强食品卫生管理 二 凝固酶阴性葡萄球菌 了解 Coagulasenegativestaphylococcus CNS CNS是人体正常菌群成员 在人群 尤其是在医院内人群带菌率和耐药株比例高 已成为院内感染的重要病原菌 CNS引起的感染 第二节链球菌属Streptococcus G 球菌 排列成双或长短不一的链状 分类 1 根据溶血现象分类甲型溶血性链球菌 草绿色链球菌 条件致病菌 乙型溶血性链球菌 溶血性链球菌 致病菌 丙型溶血性链球菌 不溶血性链球菌 非致病菌 2 根据多糖抗原分类 20个群 致病菌主要为A群3 根据生化反应分类 依溶血性分类 一 A群链球菌 StreptococcusGroupA 一 生物学性状1 形态与染色G 单个细菌形态为 镜下观察呈 排列 直径约为0 6 1 m 无芽胞 无鞭毛 新鲜标本中可见荚膜 2 培养特性 多数兼性厌氧营养要求高液体培养基中呈絮状沉淀生长血平板上能形成宽大溶血环 3 生化反应 不分解菊糖 不被胆汁溶解 触酶实验阴性4 抗原构造多糖抗原 C抗原 分群的依据蛋白质抗原 表面抗原 细胞壁蛋白 位于C抗原外层 具有型特异性 与致病性有关的是M抗原核蛋白抗原 P抗原 无特异性 各种链球菌均相同5 抵抗力 弱 链球菌抗原结构模式图 二 致病性1 致病物质 细胞壁成分粘附素脂磷壁酸 LTA F蛋白M蛋白肽聚糖外毒素致热外毒素链球菌溶素 侵袭性酶透明质酸酶链激酶 链道酶 链球菌溶素 streptolysin 链球菌溶素O streptolysinO SLO SLO为含有 SH基的蛋白质 对氧敏感 遇氧时 SH基被氧化成 S S 基 暂时失去溶血能力 若加入还原剂如半胱氨酸等 可逆转 对多种细胞有毒性 SLO抗原性强 其抗体即抗O抗体 ASO 有中和SLO的活性 阻止其溶血作用 85 90 的患者于链球菌感染后2 3w到病愈后数月或一年内可查到这种抗体 抗体效价在1 400以上 可辅助诊断某些疾病 链球菌溶素S streptolysinS SLS SLS是小分子糖肽 无抗原性 对氧稳定 对WBC及多种组织细胞有破坏作用 2 所致疾病 化脓性感染皮肤及皮下组织感染其它系统感染中毒性疾病猩红热链球菌毒性休克综合征变态反应性疾病风湿热急性肾小球肾炎 猩红热 scarletfever 由产生致热外毒素的化脓性链球菌所致 细菌经咽喉粘膜侵入机体 增殖并产生毒素引起高热 全身红疹等症状 病后获得较强的免疫力 急性肾小球肾炎 acuteglomerulonephritis 在咽炎或脓皮病后均可发生 多见于儿童和青少年 发病机理 型超敏反应 型超敏反应 风湿热 rheumatism orrheumatosis 主要在咽炎后有可能发生 临床表现以关节炎 心肌炎为主 发病机理 尚未完全清楚 但本病不是链球菌直接侵袭所致 研究认为与 型超敏反应相关 三 免疫性 化脓性链球菌感染后 机体产生多种抗体 但只有抗M蛋白抗体和抗红疹毒素抗体有免疫作用 四 微生物学检查 标本直接涂片镜检培养血琼脂平板 形成典型的溶血现象抗原的检测血清学试验抗O试验 ASOtext 抗O试验 ASOtext 概念 ASO试验是一种传统的体外毒素抗毒素中和试验 即用SLO检测血清中的ASO 常用于风湿热或肾小球肾炎的辅助诊断 一般ASO效价在1 400以上时有意义 方法 在受检标本中加入适量的SLO 如标本中含有高浓度抗体 中和后则有多余抗体存在 经与SLO致敏的胶乳试剂反应 可出现肉眼可见的凝集即为阳性 出现凝集反应的最高稀释度则为抗体效价 思考 为什么被测血清应先加入适量的SLO 然后再加入SLO胶乳试剂 五 防治原则 化脓性链球菌感染的一般防治与葡萄球菌相同 对急性咽炎和扁桃体炎患者 尤其是儿童 要彻底治疗 以防止发生急性肾炎和风湿热 青霉素G为防治化脓性链球菌感染的首选药物 用长效青霉素预防链球菌感染 对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定的效果 其他抗菌药物包括头孢唑林钠 先锋霉素 头孢拉定 先锋霉素 和头孢哌酮钠 先锋必 可酌情选用 二 肺炎链球菌 S pneamoniae 在自然界广泛分布 常寄居于正常人的鼻咽腔中 形成带菌状态 在机体抵抗力下降时引起疾病 主要引起大叶性肺炎 约占细菌性肺炎的80 此外还是脑膜炎 支气管炎的主要病原菌 一 生物学性状 1 形态与染色革兰阳性双球菌矛头状 宽端相对厚荚膜 鞭毛 芽胞 2 培养特性 营养要求高需氧或兼性厌氧a溶血环在固体培养基上形成 脐状 菌落液体培养基中可出现浑浊生长澄清3 生化反应胆汁溶菌试验 分解菊糖 4 抗原结构与分型 荚膜多糖抗原具有型特异性 可将肺炎链球菌分为84个型别 菌体抗原C多糖 具有种特异性 可被CRP沉淀C反应蛋白 Creactiveprotein CRP CRP不是抗体 但在炎症的活动期含量增多 对活动性风湿热等有一定诊断意义 M蛋白5 抵抗力弱 有荚膜菌株耐干燥 二 致病性与免疫性 致病物质荚膜肺炎链球菌溶血素脂磷壁酸神经氨酸酶所致疾病人类大叶性肺炎支气管炎免疫性牢固的型特异性免疫 同型再次感染少见 四 微生物学检查法 标本 痰液脓液血液脑脊液直接涂片镜检分离培养 血琼脂平板鉴别试验 甲型溶血性链球菌 菊糖发酵试验胆汁溶菌试验奥普托欣试验 optochintest 荚膜肿胀实验动物毒力试验 五 防治原则 据报道用多价肺炎链球菌荚膜多糖菌苗可预防肺炎链球菌所致的肺部感染 对预防儿童中耳炎及一些高危人群感染也有一定的效果 治疗用药同链球菌 首选PG 三 其他医学相关链球菌 B族链球菌D族链球菌甲型溶血性链球菌 草绿色链球菌 龋齿亚急性细菌性心内膜炎 第三节肠球菌属 自学 29个种 粪 屎肠球菌和其他一 生物学特性 1 G 球杆 固 卵圆 液 形 单双或短链状排列 无芽荚个别有稀疏H 2 10 45 可长 菌落灰白不透明 溶血 其他种 溶血 3高 高盐6 5 高碱PH9 6 高胆汁40 培养基可生长 3 氧化酶触酶 血培养基或 多种糖 PYR 胆汁七叶苷 二 致病性1 致病因素 表面黏附素 聚合物因子 细胞溶素 炎症调节因子2 所致疾病 泌尿道感染 多属医院感染 80 90 为粪肠球菌 腹腔 盆腔感染 败血症 心内膜炎 牙髓疾病 伤口等感染 3 耐药性青霉素 氨基糖苷类 万古霉素耐药菌株三 防治原则 第四节奈瑟菌属 Neisseria 一 脑膜炎奈瑟菌流脑 一 生物学性状1 形态与染色G 肾形或豆形 成双排列 凹面相对 病人脑脊液 CSF 中典型多位于中性粒细胞内 无鞭毛和芽胞 新分离株具有荚膜和菌毛 2 培养特性营养要求高 最常用的培养基是巧克力色培养基 专性需氧 3 生化反应可产生自溶酶 人工培养时若不及时移种 数日后菌体自溶4 抗原结构与分类5 抵抗力很弱 抗原结构与分类 LOS 脂寡糖抗原 二 三 致病性与免疫性 致病物质荚膜 菌毛 IgA1蛋白酶 LOS 主要致病物质 所致疾病流行性脑膜炎 简称流脑 普通型 爆发型 慢性败血症型人类是唯一的易感宿主 空气飞沫传播免疫性6月 2岁年龄组婴儿免疫力最低 是易感人群体液免疫为主 脑膜炎奈瑟菌 鼻咽腔繁殖 繁殖入血 菌 败血症 中枢神经系统 主要侵犯蛛网膜 暴发型脑膜炎 微循环衰竭 内毒素休克 DIC 脑膜炎症状 四 微生物学检查法 标本直接涂片镜检如镜下见到中性粒细胞内 外有革兰阴性双球菌 即可作出初步诊断分离培养与鉴定巧克力色血琼脂平板快速诊断法对流免疫电泳SPA协同凝集试验 五 防治原则 综合性预防措施隔离病人 检查带菌者 预防性投药 室内通风流脑疫苗 6个月 2岁接种两次 间隔1月A群脑膜炎球菌多糖抗原 制备疫苗青霉素 磺胺大剂量治疗 脑膜炎接种 二 淋病奈瑟菌 Gonococcus 一 生物学性状1 形态与染色 革兰染色阴性 0 6 0 8 m肾形 成双排列有菌毛 无芽胞和鞭毛 新分离株有荚膜 2 培养特性生化反应 培养特性需氧 营养要求高 常用的培养基为巧克力色血液琼脂平板生化反应除葡萄糖外 不分解其它糖类 3 主要菌体表面抗原构造 菌毛与粘附有关 免疫原性不强脂寡糖抗原经常变异 相应抗体不能防止再感染外膜蛋白抗原PI 主要外膜蛋白 将淋病奈瑟菌分为18个血清型PII 吸附易感细菌的蛋白 二 致病性 1 致病物质菌毛外膜蛋白脂寡糖 内毒素 IgA1蛋白酶 2 所致疾病 淋病人类是淋球菌唯一的天然宿主成人淋病绝大多数通过性接触感染 是重要的性传播疾病 sexuallytransmitteddisease STD 新生儿淋球菌性结膜炎 脓漏眼 淋性尿道炎 脓性分泌物 三 免疫性 由于淋病奈瑟菌抗原结构复杂 菌株间有高度特异性 因此病后尽管能查出抗体 甚至有sIgA 但免疫力不持久 淋病奈瑟菌再感染者仍极为常见 四 微生物学检查法 标本 保温 保湿 立即送检直接涂片镜检 N内G 双球菌 有诊断价值 分离培养与鉴定巧克力色 T M培养基快速诊断法ELISA法 核酸杂交 PCR技术 五 防治原则 预防淋病应取缔娼妓 防止不正当的两性关系新生儿氯霉素链霉素合剂或1 硝酸银滴眼 或1 四环素 0 5 红霉素眼膏 对病人早期用药 彻底治疗 青霉素已不是治疗淋病的首选药物 根据疾病预防与控制中心CDC建议 对不伴有并发症的早期淋病应使用头孢曲松 头孢克肟 环丙杀星或氧氟杀星 如合并衣原体感染可联合应用强力霉素 对此病的经验治疗还需参考体外药敏试验 小节 金黄色葡萄球菌SPA致病物质 所致疾病金黄色葡萄球菌鉴定依据血浆凝固酶阴性葡萄球菌致病物质 所致疾病链球菌分类抗原构造致病物质所致疾病ASO及抗O试验肺炎链球菌荚膜致病物质所致疾病与甲型链球菌的鉴别淋病奈瑟菌的生物学性状 致病物质及所致疾病脑膜炎奈瑟菌的生物学性状 致病物质及所致疾病 C8 病例讨论题1 20岁男性工人 右手指皮肤碰伤伴有化脓性炎症 破损后第6天出现发热 烦躁 腹痛 四肢厥冷 脉搏细微而扪不清 入院时血压50 30mmHg 皮肤呈猩红热皮疹 间有出血点 当即进行抗休克治疗 抽血做血培养 金黄色葡萄球菌阳性 第10天右膝关节肿痛 抽出黄色脓液 细菌培养金黄色葡萄球菌阳性 凝固酶试验阳性 经抗生素治疗后好转 A 为何取血做细菌培养 B 试述金黄色葡萄球菌的致病物质与所致疾病 C 如何控制CNS所致的医院内感染 2 9岁男学生 突然发生水肿 血尿 蛋白尿及高血压 追问病史 2周前曾有咽喉肿痛 当时未做任何治疗 体格检查 体温38