三节骨髓检查PPT课件.ppt

第二章临床血液学检测第三节骨髓细胞学检验 临检教研室郭素红 1 第三节骨髓细胞学检验 一 骨髓细胞学检测的临床应用二 骨髓细胞学检测的方法和内容三 血细胞发育过程中形态演变的一般规律四 血细胞的正常形态特征五 血细胞的细胞化学染色六 细胞免疫分型七 细胞遗传分型 2 一 骨髓细胞学检查的临床应用 1 确诊造血系统疾病 评价疗效 判断预后 2 协助诊断某些疾病 3 提高某些非造血系统疾病诊断率 白血病 AA MA MM 恶组 骨髓转移瘤等 IDA HA MDS ITP 脾亢等 疟疾 黑热病 Gaucher S病 Niemann Pick S病 转移癌肿等 一 概述 3 一 概述 二 骨髓检查的适应症和禁忌症 1 不明原因的肝 脾 淋巴结肿大 2 不明原因的发热 骨痛 恶病质 3 末梢血细胞过多 过少或幼稚细胞 形态异常 1 骨髓检查的适应症 4 一 概述 2 骨髓检查的禁忌症 1 血友病 严重凝血功能障碍者 2 晚期孕妇 慎作骨髓穿刺 3 小儿及不合作者不易作胸骨穿刺 5 一 概述 1 标本采集的穿刺部位 三 骨髓标本的采集 6 1 穿刺部位 puncturelocation 髂后上棘 骨质薄易穿刺 髓液丰富 很少被血液稀释 5 10mL 培养 首选 髂前上棘 顶端后1 2cm处 胸骨 2 3肋骨间胸骨中线 穿刺针固定在1cm以下 有一定危险性 脊突 腰椎或胸椎下段脊突 或3 4腰椎脊突体 胫骨粗隆 3岁以下小孩 定位穿刺 7 8 一 概述 2 标本采集的注意事项 1 抽取骨髓液的量 0 2mL 2 多项检查先抽形态学检查标本 3 厚薄适宜涂片 张 血片4 6张 4 作好标记 类型 姓名 编号 时间 5 多部位 压痛点或X线检查穿刺 6 干抽时 作骨髓活检 三 骨髓标本的采集 2 多项检查先抽形态学检查标本 5 多部位 压痛点或X线检查穿刺 1 抽取骨髓液的量 0 2mL 2 多项检查先抽形态学检查标本 5 多部位 压痛点或X线检查穿刺 9 一 概述 3 判断骨髓取材质量标准 1 病人有特殊酸痛感 2 骨髓小粒和脂肪滴 3 有骨髓特有细胞 4 杆状核 分叶核比例大于外周血 三 骨髓标本的采集 1 病人有特殊酸痛感 2 骨髓小粒和脂肪滴 3 有骨髓特有细胞 1 病人有特殊酸痛感 2 骨髓小粒和脂肪滴 4 杆状核 分叶核比例大于外周血 3 有骨髓特有细胞 1 病人有特殊酸痛感 2 骨髓小粒和脂肪滴 10 A中间涂片长短 厚薄适宜 片膜居中 符合要求 B下面一张取材好 有较多骨髓小粒 11 二 骨髓细胞学检测的方法和内容 一 肉眼观察 1 了解涂片取材 染色是否满意 2 判断骨髓增生程度 3 观察和计数巨核细胞 4 观察体积较大或成堆的病理细胞 二 骨髓涂片的低倍镜观察 12 增生程度有核细胞 有核细胞 常见原因成熟红高倍镜极度活跃1 1 100白血病 红白血病明显活跃1 1050 100白血病 增生性贫血活跃1 2020 50正常骨髓象 某些贫血减低1 505 10造血功能低 CAA 极度减低1 200 5造血功能衰竭 AAA 判断骨髓增生程度 13 极度活跃 明显活跃 增生活跃 增生减低 极度减低 14 Gaucher细胞 Niemann Pick细胞 15 三 骨髓涂片的油镜观察 1 有核细胞分类计数 2 观察各系统细胞形态 3 观察有无寄生虫和异常病理细胞 四 血涂片观察 1 白细胞分类计数 2 血细胞形态观察 二 骨髓细胞学检测的方法和内容 16 四 总结分析 1 骨髓象特征 2 血象特征 3 特殊检查 4 诊断意见及建议 二 骨髓细胞学检测的方法和内容 17 特殊检查 细胞化学染色 18 五 正常成人骨髓象基本特征 1 增生活跃 G E2 4 1 2 各系统 各阶段比值正常 相互间的比例正常 3 各系统 各阶段细胞形态正常 4 无其他异常细胞和寄生虫 5 有重叠造血细胞组成的造血岛 二 骨髓细胞学检测的方法和内容 1 增生活跃 G E2 4 1 4 无其他异常细胞和寄生虫 19 1 粒系 占50 60 2 红系 占20 3 淋巴系 占20 4 单核系 4 浆细胞系 2 5 巨核系 7 35个 1 5 3cm 产板巨为主 6 其他细胞 少量成骨 破骨 吞噬 组织嗜碱细胞 相互间的比例正常 二 骨髓细胞学检测的方法和内容 20 21 二 血细胞发育过程中形态演变的一般规律 22 全能造血干细胞 骨髓干细胞 淋巴干细胞 红系祖细胞 粒单系祖细胞 嗜酸粒祖细胞 嗜碱粒祖细胞 巨核系祖细胞 T祖细胞 B祖细胞 发育过程 23 二 血细胞发育过程中形态演变的一般规律 1 细胞体积 2 细胞质 量 染色 颗粒 大 小 早幼粒略 原粒 巨核除外 少 多 深蓝 浅蓝 粉红色 无 有 非特异和特异 粒系有三种颗粒 中性 嗜酸 嗜碱 红细胞系无颗粒 24 3 细胞核 圆形 凹陷 分叶 大 小 巨核除外 核染色质 细致 粗糙 疏松 紧块 淡紫红 深紫红 核仁 明显 模糊 消失4 核浆比例 大 小 25 四 血细胞的正常形态学特征 红细胞系形态学特点 26 27 28 29 30 31 32 五 常用血细胞组织化学染色 一 概念 血细胞化学染色是以形态学为基础 运用化学 生物化学 免疫化学等技术对血细胞的化学成分作定性 定位和半定量分析的方法 33 2020 1 3 34 五 常用血细胞组织化学染色 二 过氧化物酶染色 peroxidase POX 粒 单 1 正常细胞染色结果 1 晚期原粒 N和E 早期原粒和B 2 原M 幼M 成M 3 其他系血细胞 35 五 常用血细胞组织化学染色 2 POX临床意义 鉴别急性白血病类型 acuteleukemia AL 1 急粒为强阳性 2 急单 M5 为弱阳性 3 急淋 ALL 为阴性 4 急性巨核白血病 M7 为阴性 36 五 常用血细胞组织化学染色 三 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 neutrophilalkalinephosphatase NAP 1 参考值 阳性率10 40 积分值40 80分平均积分 70 成熟中性粒细胞 杆状 分叶 阳性 其他血细胞皆阴性 37 五 常用血细胞组织化学染色 2 NAP临床意义 1 鉴别感染性质 细菌 病毒 正常 2 鉴别类白和慢粒 前者 后者 3 鉴别AL类型 急淋 急粒 4 鉴别AA和PNH 前者 后者 5 鉴别反应性组织细胞增生和恶性组织细胞病前者 后者 6 鉴别真红和继红 前者 后者 正常 38 四 酸性磷酸酶染色 acidphosphatase ACP 五 常用血细胞组织化学染色 1 结果 results 阳性 胞浆中出现鲜红或深红色颗粒 无色 淡红色颗粒 2 布满鲜红色颗粒 3 充满深红色颗粒 39 40 2 临床意义 clinicalsignificance ACP主要用于鉴别 毛白 强阳性 不被L 酒石酸抑制 淋巴瘤和慢淋 阳性 被L 酒石酸抑制 急单 原幼单强阳性 急淋 原淋弱阳性 急粒 原粒反应不一 T淋巴阳性 B淋巴阴性 戈谢细胞强阳性 尼曼 匹克细胞阴性 六 酸性磷酸酶染色 ACP 41 五 常用血细胞组织化学染色 五 酯酶染色 水解酶 1 特异性酯酶 specificesterase SE 又称粒细胞酯酶 不被NaF抑制 常用氯乙酸AS D奈酚酯酶 AS DNCE 42 五 常用血细胞组织化学染色 五 酯酶染色 水解酶 1 正常细胞染色结果 原粒 或 早 中幼粒 中性分叶减弱 单核 肥大细胞 或 嗜酸 嗜碱和其他细胞 1 特异性酯酶 specificesterase SE AS DNCE 43 五 常用血细胞组织化学染色 2 SE临床意义 鉴别急性白血病类型 急粒 强阳性 急单 阴性 急淋 阴性 急粒 单 阳性和阴性细胞 1 特异性酯酶 specificesterase SE 44 五 常用血细胞组织化学染色 2 非特异性酯酶 nonspecificesterase NSE 又称单核细胞酯酶 被NaF抑制 常用 乙酸奈酚酯酶 NAE 1 正常细胞染色结果 单核均 NaF抑制率 50 粒系 或 不被NaF抑制 淋巴细胞 45 五 常用血细胞组织化学染色 2 NSE临床意义 鉴别急性白血病类型 急单为强阳性 急粒 单为阳性 NaF抑制率 50 急粒为阴性或弱阳性 急淋为阴性 2 非特异性酯酶 nonspecificesterase NSE 46 五 常用血细胞组织化学染色 六 铁染色 1 参考值 1 细胞外铁 2 细胞内铁 铁粒幼红细胞20 90 细胞外铁 铁蛋白和含铁血黄素贮存于骨髓基质或巨噬细胞 细胞内铁 BM中可利用 贮存于幼红细胞 称为铁粒幼红细胞 47 48 49 五 常用血细胞组织化学染色 2 铁染色临床意义 用于贫血的诊断和鉴别诊断 1 IDA 外铁 内铁 15 MDS RAS 血清铁蛋白 体内贮存量 精确 3 非IDA如MA HA AA等 内 外铁均正常或 4 部分继发性贫血 外铁正常 内铁 确证 50 常见急性白血病类型细胞化学反应鉴别 急淋白血病急粒白血病急单白血病 POX NSE PAS NAP 分化差的原始细胞 分化好的原始细胞 成块 颗粒状 弥漫性淡红色 弥漫性淡红 颗粒状 NaF抑制不敏感 被NaF抑制 增加 减少 正常 增加 SE NaF抑制不敏感 被NaF抑制 51 六 细胞的免疫分型 细胞免疫分型也称细胞免疫标记 表型 检测 它是用单克隆抗体及免疫学技术对细胞膜表面和 或 细胞质存在的特异性抗原进行检测 借以分析细胞所属系列 分化程度和功能状态的一种方法 检测方法 1 免疫荧光法2 免疫酶染色法 APAAP PAP ABC法 52 六 细胞的免疫分型 一 细胞免疫分型的临床应用 二 急性白血病细胞免疫表型特点 53 六 细胞的免疫分型 一 细胞免疫分型的临床应用1 有助于识别不同系列的细胞2 识别不同的淋巴细胞3 用于检测T淋巴细胞亚群4 用于识别不同分化阶段的细胞5 有助于识别不同功能状态的细胞6 有助于对不同系列和不同分化阶段7 可用于各种白血病细胞的免疫表型分析8 可用于白血病微小残留病的检测 54 六 细胞的免疫分型 一 细胞免疫分型的临床应用1 有助于识别不同系列的细胞髓系细胞标记 CD13 15 CD32 33 CD65 CD91 CD156 CD166淋巴细胞标记 CD1 5 CD7 10 CD19 20 CD52 CD77巨核细胞和血小板 CD41 42 CD61红细胞标记 血型糖蛋白A或B 55 六 细胞的免疫分型 一 细胞免疫分型的临床应用2 识别不同的淋巴细胞成熟T淋巴细胞 CD2 CD3 CD4 CD7 CD8成熟B淋巴细胞 CD19 CD20 CD22NK细胞 CD16 CD56 56 六 细胞的免疫分型 一 细胞免疫分型的临床应用3 用于检测T淋巴细胞亚群TH淋巴细胞 CD4 CD8 TS淋巴细胞 CD4 CD8 TH TS CD4 CD8 判断机体免疫状态 某些疾病诊断 病期分析 检测治疗和判断预后的参数 57 六 细胞的免疫分型 一 细胞免疫分型的临床应用4 识别不同分化阶段的细胞造血干细胞标志 CD34 CD90 Lin 造血干细胞向髄系定向的标志 CD34 CD33 T淋巴细胞系祖细胞的标志 CD34 TDT CD10 CD7 B淋巴细胞系祖细胞的标志 CD34 CD19 58 六 细胞的免疫分型 一 细胞免疫分型的临床应用5 识别不同功能状态的细胞记忆T细胞 高表达CD45RO 不表达CD45RA活化T细胞 不表达CD45RO 强表达CD25 CD2 CD45RO CD54 CD58 6 有助于对不同系列和不同分化阶段7 可用于各种白血病细胞的免疫表型分析8 可用于白血病微小残留病的检测 59 六 细胞的免疫分型 一 细胞免疫分型的临床应用 6 有助于对不同系列和不同分化阶段7 可用于各种白血病细胞的免疫表型分析8 可用于白血病微小残留病的检测诊断依据 在完全缓解的白血病患者骨髓细胞中 出现CD19 CD22 CD10 CD7 CD5 CD13 CD37 CD34等任何一种抗原阳性 60 1 ALL免疫分型 T细胞 20 B细胞 80 2 B细胞系ALL 早期B ALL CD19 普通型ALL CD19 CD10 前B ALL CD19 CD10 CD20 CyIg B ALL CD19 CD20 CyIg SmIg 2 AML的免疫学分型 CD34 造血干细胞的标志 CD33 急性髓系白血病 1 T细胞系ALL 前T ALL CD7 TdT CD2 T ALL CD7 TdT CD2 二 急性白血病免疫学分型 标记 六 细胞的免疫分型 61 急性白血病的免疫学分型CD19CD7CD13CD33HLA DRMPOB系ALL T系ALL AML M0 白血病原始细胞无颗粒 无Auer小体 胞体较大 较小 光镜MPO阴性 极似L2 L1型 但无B T标志 CD33或CD13至少一种阳性 其他髓系标志如CD11b 电镜细胞化学或免疫细胞化学MPO常为阳性 62 九 白血病MICM分型 形态学 morphology 免疫学 immunology 细胞遗传学 cytogenetics 分子生物学 molecularbiology 第五节常见血液病的血液学特征 63 notreported 64 M3 t 15 17 q22 q12 PML RAR 2 分子生物学分型 molecularbiologyclassification 应用分子生物学技术检测与白血病发病机制有关的基因改变 基因重排及各种