自身抗体风湿病中的应用

自身抗体风湿病中的应用 狼疮细胞 1948 Hargrave 一 概述 自身抗体的定义 以自身组织成分为靶抗原而出现的相应抗体 风湿免疫病自身抗体 抗核抗体谱抗磷脂抗体类风湿关节炎抗体肌炎抗体血管炎抗体自身免疫性肝病抗体 自身抗体在自身免疫病中的意义 1 是自身免疫病的标记2 有助于弥漫性结缔组织病 CTD 的诊断和鉴别诊断3 判断疾病的活动性4 预测疾病的预后 二 自身抗体的检测方法 1 间接免疫荧光法 IFT 2 ELISA3 免疫印迹法4 放射免疫法5 免疫双扩散 抗核抗体 核仁型 Mi 2 PM SCL RNAPolymeraseI 抗核抗体 核膜型 dsDNA 抗核抗体 均质型 Histone DNA 三 常见的自身免疫性疾病的抗体 ANA谱及其临床意义 定义 是一种对细胞内脱氧核糖核酸 DNA 核糖核酸 RNA 蛋白或这些物质的分子复合物的自身抗体 因此ANA应称为抗核抗体谱 间接免疫荧光法 IFT HEp 2细胞灵长类肝脏冰冻组织切片1 完整的抗原谱 细胞核 细胞浆 2 ANA检测的金标准 具有最高的敏感性和特异性3 质量控制容易4 除ANA外 还可获得一些对临床医生有用的其他信息 如ANCA ANA的检测方法 ANA的检测方法 ELISA 用高度纯化的抗原来筛查ANAs1 抗原谱比IIF窄2 对所用的靶抗原具有很高的敏感性和特异性3 操作简便 快速 ANA分类 抗DNA抗体 抗DNA抗体 ssDNA dsDNA抗原 单链DNA 变性的DNA 嘌呤和嘧啶碱基 双链DNA 天然DNA 脱氧核糖核酸骨架 相关疾病 ssDNAdsDNASLE80 8 30 Sj gren s综合征40 0 硬皮病44 0 类风湿性关节炎12 3 健康献血员6 8 ANA分类 抗非组蛋白抗体 抗ENA抗体 此组抗体不含组蛋白 可以溶于盐水而被提取检测方法 免疫印迹法 抗ENA抗体 抗Sm抗体抗原 与U1 U2 U4 U5 或U6 nRNA相关的6种不同的蛋白分子 核心蛋白B B D E F G 相关疾病 SLE 5 30 抗ENA抗体 抗核糖体蛋白抗体靶抗原 由3个蛋白质分子组成的核糖体60S亚单位 P0 P1 P2 38 16 15kD 在碳末端具有相同的免疫反应性表位相关疾病 SLE 5 15 抗ENA抗体 抗SS A抗体靶抗原 与Y1 Y3 Y4或Y5型RNA相关的2种蛋白分子 52kDa和60kDa 相关疾病 干燥综合征 40 95 SLE 34 7 抗ENA抗体 抗SS B抗体靶抗原 与小分子RNA U6 RNA tRNA前体 结合的磷蛋白 48kDa 相关疾病 干燥综合征 40 95 SLE 10 20 抗ENA抗体 抗U1 nRNP抗体靶抗原 三种与U1 nRNA相关的蛋白 70KD A和C蛋白 相关疾病 MCTD 95 100 SLE 15 40 抗ENA抗体 抗Scl 70抗体靶抗原 DNA拓扑异构酶I 100kDa 相关疾病 硬皮病 79 7 25 75 抗ENA抗体 抗J0 1抗体靶抗原 组氨酰 tRNA合成酶 50kDa 细胞浆磷蛋白相关疾病 多肌炎 皮肌炎 25 35 伴有肺间质纤维化的多肌炎 70 ANA分类 抗非组蛋白抗体 2 抗着丝点抗体靶抗原 着丝点中的4种蛋白分子 A 17kDa B 80kDa C 140B 80kDa C 140kDa D 蛋白 50kDa 主要的靶抗原是着丝点蛋白B相关疾病 硬皮病 18 局限型 CREST综合征 80 95 ANA分类 抗组蛋白抗体 抗原 组蛋白H1 H2A H2B H3 H4 主要的靶抗原为H1和H2B 相关疾病 药物诱导性LE 100 标志性抗体 SLE 40 80 在其他风湿病中很少见 ANA分类 抗核仁抗体 靶抗原 核仁内的RNA多聚酶 原纤维和To Th抗原相关疾病 SSc4 SLE患者特异性自身抗体 靶抗原阳性率 ssDNA70 95dsDNA30 90组蛋白40 80U1 nRNP15 40Sm5 30SS A20 60SS B10 20核糖体P蛋白5 15增殖性细胞核抗原I PCNA 3心磷脂 2 糖蛋白120 40Ku5 10抗核小体抗体90 多肌炎和皮肌炎抗体谱 靶抗原阳性率 ssDNA40 50Jo 125 35PM Scl 重叠综合征 8Mi 25Ku 与硬皮病的重叠综合征 1 7PL 7 PL 12 OJ EJ KJ2 3 原发性干燥综合征抗体谱 靶抗原阳性率 SS A40 95SS B40 95ssDNA40 95 进行性系统性硬化症抗体谱 靶抗原阳性率 着丝点80 95Scl 7025 75ssDNA30 60原纤维蛋白5 10RNA多聚酶4PM Scl 重叠综合征 3NOR 90 核仁形成区 少见Ku 与多肌炎的重叠综合征 1 7 可出现ANA的感染 药物 疟疾血吸虫结核麻风沙门氏菌克雷伯菌EB病毒HIV 肯定的药物肼苯哒嗪普鲁卡因酰胺异烟肼可能的药物 近80种 米诺环素SASPEtanercept Infliximab 可出现ANA的肝病慢性活动性肝炎原发性胆汁性肝硬化自身免疫肝炎自身免疫胆管炎可出现ANA的肺病特发性肺纤维化石棉导致的纤维化原发性肺动脉高压可出现ANA的肿瘤白血病黑色素瘤实体瘤 卵巢瘤 乳腺癌 肺癌 肾癌 淋巴瘤 可出现ANA的血液病特发性血小板减少性紫癜自身免疫性溶血性贫血可出现ANA的内分泌病1型糖尿病Grave病Hashimoto甲状腺炎 RA自身抗体谱及临床意义 RF60 RA中出现 量与RA活动性及严重性呈正相关 亦在其它CTD出现抗CCP在50 RA中出现 聚角蛋白微丝蛋白 特异性较高AKA 抗角蛋白抗体 在40 RA阳性APF 抗核周因子 在52 RA阳性抗RA33RA阳性率为35 抗Sa在部分RA阳性 类风湿因子 RF 抗原 变性的IgGFc段意义RA阳性率70 阳性预测值24 滴度与疾病活动平行其他风湿病可阳性感染 非感染疾病 正常人可阳性 非风湿病中的RF 抗核周因子 APF 靶抗原位于人颊粘膜细胞的核周颗粒中间接免疫荧光法检测对RA诊断的特异性高达90 以上APF阳性与病情相关 往往提示预后欠佳 尤其对RF阴性的患者 抗角蛋白抗体 AKA 取6周龄雄性Wistar大鼠的中1 3食道切片为底物间接免疫荧光法以典型的角质层板层状 线状沉积的荧光为阳性对RA诊断的敏感性44 13 特异性89 与RA的病情严重程度相关 提示预后不良 抗Sa抗体 新鲜胎盘提取免疫印迹法分子量为50和 或55KD部位出现条带者为阳性敏感性36 7 特异性91 6 HLA DR4相关是慢性 严重RA的早期标记RA的滑液中也有高浓度的抗Sa抗检出 提示在滑膜可能发生原位免疫反应 抗RA33 36抗体 从Hela细胞或Ehrilich瘤细胞核中提取免疫印迹法分子量33或36KD区带出现阳性者为阳性敏感性35 8 特异性99 6 抗环瓜氨酸多肽 CCP 抗体 1998年证实抗filaggrin相关抗体识别的主要抗原决定簇成分是瓜氨酸2000年合成环瓜氨酸肽 CCP 并将抗CCP抗体用于RA检测ELISA法检测对RA诊断高度敏感和特异阳性者骨破坏较阴性者严重对RA的早期诊断和预后评估都很有意义 抗肽酰基精氨酸脱亚氨酶 PADI4 抗体 RA抗PADI4抗体阳性率为47 抗PADI4抗体对RA诊断的敏感性为43 特异性为92 RF阴性患者PADI4抗体阳性50 AKA阴性的患者PADI4抗体阳性43 抗CCP抗体阴性的患者抗PADI4抗体阳性60 抗突变型瓜氨酸化波形蛋白 MCV 抗体 136例RA患者抗MCV抗体敏感性和特异性分别为95 6 和80 8 抗MCV抗体与抗CCP抗体 AKA和RF的重叠阳性率分别为91 9 52 8 和76 5 血管炎相关抗体 cANCA靶抗原 PR 3 蛋白酶3 pANCA靶抗原 MPO 髓过氧化酶 弹性蛋白酶乳铁蛋白 Wegener肉芽肿其量指示病情活动其它血管炎及炎性肠病 抗丝氨酸蛋白酶 PR3 抗体 抗原 丝氨酸蛋白酶 PR3 意义主要出现在Wegner肉芽肿和显微镜下多动脉炎在Wegner肉芽肿 显微镜下多动脉炎cANCA持续高滴度或滴度升高常与疾病复发相关 2 3 针对蛋白酶3的cANCA的意义 抗髓过氧化物酶 MPO 抗体 抗原 髓过氧化物酶 MPO 意义可出现于多种血管炎性疾病 也可见于SLE 药物等 针对MPO的pANCA的意义 cANCA 胞浆型 丝氨酸蛋白酶 pANCA 核周型 1 髓过氧化物酶2 弹力酶3 组织蛋白酶G4 乳铁蛋白5 溶酶体6 细菌增透蛋白7 Azurocidin8 原发性胆汁性肝硬化抗体谱 靶抗原阳性率 AMAM285 95AMAM440 60AMAM935Sp 100 核点 30肌动蛋白10 20 AMAM2 靶抗原 由3种不同的乙酰基转移酶组成的多酶复合物 丙酮酸脱氢酶 74kDa 2 酮酸脱氢酶 50kDa 2 酮戊二酸脱氢酶 50kDa 与丙酮酸脱氢酶复合物相关的蛋白X 52kDa 相关疾病 PBC 85 95 自身免疫性肝炎抗体谱 靶抗原阳性率 肝特异性蛋白 LSP 50 100肝细胞膜抗原 LMA 35 100唾液酸糖蛋白受体80 90肌动蛋白40 90ANA30 40核膜 SLA LP15 30肝肾微粒体 LKM 1 7LC 1 抗磷脂抗体 APA APA定义 是一大类针对各种负电荷磷脂一蛋白复合物的自身或同种抗体 APA的检测方法 ELISA法ACLLAC的检测方法 白陶土凝血时间激活的部分凝血活酶时间复钙凝血时间鲁塞尔蝰蛇毒凝血时间等 所测得时间延长 而不能为正常血浆所纠正时 则提示有LAC存在 LAC和ACL可出现于多种自身免疫病 溶血性贫血ITP 近30 幼年关节炎RA 7 50 银屑病关节炎 28 硬皮病 25 白塞病 20 干燥综合征 25 42 MCTD 22 PM DM风湿性多肌痛 20 慢性盘状狼疮雷诺氏现象 APL也可出现在感染和使用某些药物病人中 甲肝流行性腮腺炎败血症HIV梅毒HTLV 1疟疾卡氏肺囊虫感染性单核细胞增多症风疹 氯苯嗪苯妥英肼苯哒嗪普鲁卡因酰胺奎尼丁奎宁丙戊酸盐阿莫西林普洛奈尔可卡因磺胺嘧啶乙胺嘧啶链霉素 抗