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文档简介
实验一 用生长谱法测定微生物的碳源要求 1 一 目的要求 学习用生长谱法测定微生物营养需要 碳源 的基本原理和方法 2 二 基本原理 为了使微生物生长 繁殖 必须供给所需要的碳源 氮源 无机盐 生长因子等 如果缺少其中一种 微生物便不能生长 培养基的六大营养因素 碳源氮源能源无机盐生长因子水 3 根据这一特性 可将微生物接种在一种只缺少某种营养物的完全合适的琼脂培养基中 倒成平板 再将所缺的营养物 例如各种碳源 点植于平板上 经适温培养 该营养物便逐渐扩散于植点周围 该微生物若需要此种营养物 便在这种营养物扩散处生长繁殖 微生物繁殖之处便出现圆形落圈 即生长图形 故称此法为生长谱法 这种方法可以定性的测定微生物对各种营养物质的需要 在微生物育种和营养缺陷型的鉴定中也常用此法 4 三 实验材料 1 培养基 基础盐合成培养基 无碳培养基 固体NaCl1gKH2PO40 5gK2HPO40 5gNH4SO42gMgSO4 7H2O0 2g琼脂20gpH7 0 1L2 糖类 10 v v 115oC 30min高压灭菌 木糖 葡萄糖 甘露醇 麦芽糖 蔗糖 乳糖3 实验材料 无菌平板 无菌滤纸片 打孔器等4 实验菌种 大肠杆菌 E coli 5 四 实验内容 1 将无碳培养基溶化后冷却至到50 左右 2 用无菌吸管吸取0 5mlE coli悬液于直径为12 的无菌培养皿中 将上述冷却的培养基倾倒于培养皿中 轻轻在桌面混匀 3 待培养基凝固后 在平板背面用记号笔划分为六个区 在平板背面边缘处标记要点植的各种糖类 4 在桌面酒精灯火焰处用镊子分别加入蘸有不同糖类的滤纸片 5 待平板吸收干燥后 倒置于37 温室培养18 24小时 观察各种糖周围有无生长圈 6 五 实验报
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