第四章`食用菌菌种生产第一节`菌种生产流程和设备.ppt

食用真菌学 第四章 食用菌菌种生产 食用真菌学 第一节 菌种生产流程和设备 一 生产流程种菇 种木 选择 种菇 种木 处理 孢子收集 斜面培养基制备 分离培养 母种培养 原种培养基制备 原种培养 栽培种培养基制备 栽培种培养 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 二 生产设备 1接种设备 用于分离和扩大各级菌种的专业设备包括接种室 接种箱 超净工作台 接种工具 食用真菌学 接种室 要求 内外两间 面积适宜 容易搞清洁 能进行灭菌 食用真菌学 内间为接种工作间 5 6平方米 门窗紧密 尽量减少灰尘积累 内置工作台外间为缓冲间 2 3平方米 用于进接种间前换衣 帽 鞋 同时为内间提供与外界相隔环境 食用真菌学 内外间均为拉门 位置相互错开体积应尽量小 利于彻底灭菌装过滤空气的通风设施内外间墙 地板 天花板 室内用具应尽量光滑易擦洗 食用真菌学 接种箱 缩小的接种室双人 单人操作型易消毒 规模受限制 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 超净工作台 局部净化设备空气过滤除菌无论接种箱还是净化工作台 均应放在较干净 空气中尘埃少的环境中 最好置于接种室内 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 接种工具 接种针接种环接种刀接种铲镊子接种器等 食用真菌学 食用真菌学 2菌种培养设备 放置接种后各级菌种 并提供适宜温度和通气条件 使菌丝生长良好的专用设备 食用真菌学 培养室 培养架 以操作方便为宜 宽0 7 1 2米 层间40cm调温 电炉 红外线 暖气管 门窗 抽风机测温 干湿球温度计照明 避免使用蓝光灭菌 紫外灯 食用真菌学 食用真菌学 培养箱 恒温箱 根据需要使温度恒定在一定范围内 一般用于培养斜面试管和少部分原种 食用真菌学 食用真菌学 3 培养基加工设备 木材切片机木片粉碎机搅拌机装瓶装袋机 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 4 灭菌设备 灭菌 将环境中的所有微生物杀死 一般采用热力灭菌设备干热灭菌设备原理 利用干燥热空气进行灭菌灼烧灭菌 酒精灯电热恒温干燥箱 160 1 2小时适宜玻璃器皿 金属用具灭菌 食用真菌学 湿热灭菌设备 利用潮湿热空气进行灭菌高压灭菌手提式高压灭菌锅 9瓶立式高压灭菌锅 45瓶卧室园形高压灭菌锅270瓶卧式方形高压灭菌锅 消毒柜 500瓶121 20 60分钟 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 常压灭菌 砖石油桶蒸笼等105 6 8小时 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 5 制种容器和消毒药品 容器750ml无色 浅色菌种瓶聚丙烯菌种袋消毒药品甲醛75 洒精高锰酸钾漂白粉 来苏儿 食用真菌学 食用真菌学 三 菌种厂选建 交通方便 水电充足地势干燥 环境干净空气清新 30米内没有畜禽圈舍 饲料仓库 排废工厂有堆放 摊晒原料地 食用真菌学 布局 食用真菌学 第二节 母种的分离和培养 一 母种培养基配制1配制原则营养成分含量与比例适合食用菌生长发育pH EV适宜有一定pH缓冲能力 食用真菌学 2配方 PDA 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 适合各种食用菌马铃薯200gG20g琼脂 Agar 20g水1000mlpH自然 食用真菌学 合成培养基 适宜保藏菌种MgSO40 5gK2HPO41gG0 46g蛋白胨20gAgar15g水1000ml 食用真菌学 苹果琼脂培养基 特别适合草菇菌丝生长苹果100g 压碎取汁 蔗糖20g琼脂2g水1000ml 食用真菌学 高梁琼脂培养基 对平菇生长有利高梁粉30g琼脂10g水1000ml 食用真菌学 酱油洋葱琼脂培养基 宜香菇 平菇 金针菇 木耳酱油50ml洋葱煎汁100ml 500g洋葱 水500ml煮沸30分钟后补足水 取滤液琼脂20g水850ml 食用真菌学 3配制 称量调配马铃薯 洋葱 稻草等 水煮30分 双层纱布过滤淀粉 易溶物质 加少量水 调成糊状 避免成团 难溶物质 加水 加热 搅拌 食用真菌学 按食用菌所需试纸测定用INNaOHorINHcL pH测定与调整 食用真菌学 加入琼脂并溶解 预湿加入培养基加热搅溶 食用真菌学 过滤分装 双层纱布过滤1 5试管 5ml 严禁沾试管口 上壁 食用真菌学 食用真菌学 加棉塞 包扎 棉塞过滤空气 防污染松紧适宜内2 3外1 3牛皮纸包扎 食用真菌学 食用真菌学 灭菌 高压蒸汽灭菌锅进行0 05mPa放汽阀打开 00 05Pma放汽阀打开 00 15mPa维持15 20分 0 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 二 母种的分离培养 介绍组织分离法种菇选择 个体健壮菇形典形美观无病虫害适度成熟种菇处理 75 酒精擦表面 草菇 食用真菌学 分离操作 菌柄与菌盖交界处取组织块木耳经无菌水冲洗 切成小块放入培养基纯化培养将菌丝块移入PDA平板培养若纯 四周辐射状生长 外缘整齐一致否则 边缘参差不齐 色素分布不均匀将较一致的菌丝的前端 切割 新培养皿 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 培养温度 大部分25 28 草菇30 食用真菌学 第三节 原种 栽培种的生产 一 配方与制配1木屑 竹屑培养基木屑 阔叶树 78 麸皮或米糠20 蔗糖1 石膏粉1 木生类菌 香菇 平菇 木耳 金针 猴头 灵芝 食用真菌学 制配 称料 糖溶于水中混料 加入糖水60 65 pH 食用真菌学 2棉籽壳蔗渣培养基 配方棉籽壳78 麸皮20 蔗糖1 石膏粉1 金针 平菇 风尾菇 草菇 银耳 木耳 猴头 食用真菌学 配方 甘蔗渣75 麸皮或米糠24 石膏粉1 平菇 风尾菇 金针 毛木耳 食用真菌学 制法 称料棉籽壳或甘蔗渣堆12 24小时 均匀吸水 辅料60 65 pH 食用真菌学 3谷粒培养基 以小麦 高梁 玉米等为主料制作的培养为谷粒培养基小麦98 碳酸钙2 银耳外 其它木生型 粪草型均适合 食用真菌学 配方 稻谷50 棉籽壳40 麸皮8 石膏粉2 平菇 风尾菇 食用真菌学 制作 麦粒 清水或0 1 多菌灵水浸泡16 24小时 捞起 摊开 底部无积水时 加辅料 调匀即可 稻谷 冷水浸2 3小时 煮开20 30分 待大部分稍开裂 即可起锅 沥干拌料 食用真菌学 4粪草培养基 以畜粪和稻草为主料的培养基干稻草63 干牛粪25 玉米粉4 过磷酸钙3 大豆粉3 硫酸镁2 蘑菇 草菇 食用真菌学 制法 稻草切成3cm长 浸透捞起 沥干至不滴水混合堆制20天 中间翻3 4次 食用真菌学 5木块木条培养基 以阔叶树毛竹为主料配以辅料制成的培养基 配方枝条1000g麸皮或米糠250g石膏粉10g营养液 蔗糖1 磷酸二氢钾0 1 硫酸镁0 1 食用真菌学 制法 毛竹或枝条 截成10 12cm长 3 4mm宽 一头削尖 晒干浸入0 1 多菌灵或0 1 高锰酸钾液泡30分钟40 50 营养液中泡1小时捞出沥干装瓶 尖头朝下 200支 750ml瓶 上盖1 5cm厚木屑培养基 食用真菌学 二 装瓶装袋 要求松紧适宜 瓶至颈 袋40 洗净瓶口 打园洞 塞棉塞 灭菌 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 食用真菌学 三 接种 无菌条件 每立方米10ml甲醛 5g高锰酸钾 24小时后开紫外灯30分1支母种5 6瓶栽培种1瓶原种50 80瓶栽培种 食用真菌学 食用真菌学 四 培养 平菇25 25 35天草菇32 1周3 5天内直立放置 然后倒卧叠放 适时转动 水分 菌丝生长均匀 定期检查 剔污3个月内必须使用最多不能超过半年 食用真菌学 第四节 食用菌的菌种质量鉴定与保藏 1 母种质量鉴定 形态鉴定 合适培养基 适宜温度培养 菌丝生长快 整齐 浓而健壮 食用真菌学 出菇 耳 检查 菌丝爬料快 满袋快出菇时间适合周期出菇多而整齐菇形美观 食用真菌学 2 原种 栽培种质量鉴定 外观要求菌丝已长满培养基 草菇有少量或没有红褐色厚垣孢子 银耳菌种在培养表面出现子实体或子实体原基菌丝生长健壮 绒状菌丝多 分布均匀 色泽符合 该菌类菌丝的色泽无杂菌污染 无杂色出现 食用真菌学 代数符合要求 母种转管4 5次内 食用真菌学 菌龄适合 常温下 3个月内有效 满瓶后存放时间 草菇 风尾菇最好1个月内使用 食用真菌学 重量和酸碱度符合要求 依不同食用菌重量要求400克 瓶 食用真菌学 3 保藏 斜面低温保藏 4 左右6个月转管草菇 5 死亡 10 12 保存用牛皮纸包扎试管口 再用黑纸密封试管干净 阴凉的环境中保存 10 12 C为宜 3 4月转管一次温度不能低于5 C 培养基中琼脂用量可适当加大 以增加保存期 食用真菌学 液体石蜡保藏 把液体石蜡装入三角瓶内 塞上棉塞 高压蒸汽灭菌1小时 放入30 C左右的温箱内培养24小时 再灭菌1小时 放入40 C环境中 使水份蒸发 至石蜡透明倒入斜面菌种试管内 淹过斜面1cm然后直立于试管架上放在常温条件下保藏 1 2年转管一次 食用真菌学 使用方法 倒去液体石蜡 用无菌水冲洗斜面2 3次 挑取少许菌丝接入斜面培养基上培养 至菌丝长满斜面即可用于生产 不倒去石蜡 直接用接种针从斜面上挑取少量菌丝接入斜面培养基上培养 菌种仍可继续保藏 食用真菌学 麦粒保藏 麦粒泡8 12小时 稍沥干 装入大试管塞好棉塞 灭菌1小时 28 37 置24小时 灭菌1小时接种长满后于干燥器干燥1个月4 或凉爽 干燥 干净处 1年以上使用时 在每支斜面培养基上接入一粒麦粒 培养至菌丝长满斜面即可 食用真菌学 第五节 菌种的衰退与复壮 1衰退优良性状退化 典型症状变异