单核靠边期.doc

单核靠边期是组织培养中诱导单倍体植株的最佳接种时期。花粉粒的发育时期是其培养成功的主要因素之一,处于单核靠边期和二核期的花粉诱导效率最高。单核靠边期诱导率最高,单核中央期次之。就多数植物而言,单核中期至晚期的花粉最容易形成花粉胚。具体说是在小孢子发育的单核中期至单核靠边期,在此之前或之后都不易取得成功。被子植物为例，有小孢子四分体时期，单核期，双核期特点:小孢子四分体时期，4个单倍体细胞连在一起 单核期，又分单核居中期和单核靠边期，进入单核期时，四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒，此时的细胞含有浓厚的细胞质，核位于细胞中央，即居中期，随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧，即靠边期 双核期，细胞核移向一边后，分裂成1个生殖细胞核与1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个生殖细胞与一个营养细胞，生殖细胞会再分裂一次形成两个精子 用于花药或花粉培养的供体植株，在生长条件下，从幼年的植株取出花药。由于花粉发育时期和花蕾的某些外部形态特征之间的大致的相关性，因此可以利用这些外部标志，去选择大致处于所需要时期的花蕾。但在实验中必须由每个花蕾取出一个花药，通过镜检确定花粉发育的准确时期。在水稻中，以单核靠边期的花粉对诱导单倍体植株较为适宜，在外部形态上可根据叶枕距为515cm，颖片淡黄绿色、雄蕊长度接近颖片长度的1/2这些条件鉴定。在取穗前先将旗叶鞘用70%酒精擦洗一遍。在超净工作台内剥去旗内鞘，取出稻穗，放入10%漂白粉溶液中消毒10min，换无菌水洗一次。在取花药之前用70%酒精将手擦洗两遍。取花药时左手持穗，右手用镊子从颖壳中取出花药，放在无菌培养皿中，待花药有一定数目时，用接种环将他们接种到培养基上。培养5天后，花药逐渐变为黑褐色，20天左右花药裂开，从中长出淡黄色的花粉愈伤组织，以后先形成芽，后长出根，形成幼苗。 烟草花药培养的最适取样期是花粉为单核期的花蕾，此时花蕾的花冠大约与萼片等长。芦笋花药培养的最适取样期也是单核期的花粉，花蕾长22.5mm，选取一级侧枝的花蕾较为合适，因为在一级侧枝的花蕾发育良好，数量大，发育同步。烟草花药消毒方法基本与水稻花药培养相同。必须注意整个操作过程中不应使花药受到损伤，若受到损伤，则应淘汰，因为损伤常常会刺激花粉壁形成二倍体的愈伤组织。花药培养的条件，一般是光照（1218 h，500010000lx,28C）和黑暗（1216 h,22C）周期交替进行。（P106 L.2P107 L.4） 种子植物特有的结构，相当于一个小孢子和由它发育的前期雄配子体。在被子植物成熟花粉粒中包含2个或3个细胞，即一个营养细胞和一个生殖细胞或由其分裂产生的两个精子。在两个细胞的花粉粒中，两个精子是在传粉后在花粉管中由生殖细胞分裂形成的。在裸子植物的成熟花粉粒中包含的细胞数目变化较大，从15个或更多个细胞，其中有12个原叶细胞，是雄配子体中残留的几个营养细胞，形成后往往随即退化，在被子植物的雄配子体中已完全消失。花粉是由花药发育来的，具体过程可以参考一下 人教版新教材中选修一课本的 37页。未成熟的花粉 要经历 下列过程才能变为成熟花粉：花药中的花粉囊里的 一个小孢子母细胞-减数分裂-4个小孢子（小孢子的四分体时期）-其中的一个小孢子 -单核居中期-单核靠边期-花粉粒（双核期）（双核期是指一个花粉粒细胞中有2个细胞核，分别是花粉管细胞核和生殖细胞核） 花粉粒细胞再经过一次有丝分裂成为 营养